一种酵母酶解物在制备饲料添加剂中的应用的制作方法

本发明属于饲料制备，尤其涉及一种酵母酶解物在制备饲料添加剂中的应用。

背景技术：

1、酵母细胞壁是一种绿色添加剂，富含β-葡聚糖和甘露聚糖等多种生物活性物质，具有吸附病原菌、吸附霉菌毒素、增强免疫、促进生长、缓解应激、补充营养等多种生理功能。甘露聚糖约占酵母细胞壁干重的30%，β-葡聚糖约占30%，葡聚糖和甘露聚糖的交联在酵母细胞壁的合成中具有重要作用。传统方法制备酵母多糖需要经过酵母高温自溶、机械破碎处理、添加细胞壁降解酶降解细胞壁等步骤，裂解细胞壁耗时长，且需要用到高压均质机、玻璃珠研磨破碎机等昂贵设备，存在能耗高、细胞壁破碎效率低、水溶性多糖提取效率低的问题。

2、酵母高温自溶或者机械破碎过程产热均会导致部分热不稳定成分生物活性下降。简单自溶或机械破碎的酵母细胞壁破碎不充分，葡聚糖和甘露聚糖交联构成的细胞壁主体仍然以水不溶的形式存在于沉淀物中。这些水不溶成分饲喂动物消化利用度低，生物活性低下。只有将细胞壁中水不溶的葡聚糖和甘露聚糖充分酶解成水溶性寡糖，才能充分发挥其生物活性，避免有用资源浪费。现有技术通过添加细胞壁降解酶降解酵母细胞壁，需要严格调控温度、ph、盐离子浓度等反应条件，且存在酶活性低的问题。因此，需要开发在酵母生理条件下能够简单、高效降解酵母细胞壁的酶，用于制备含有酵母酶解物的饲料添加剂。

技术实现思路

1、本发明的目的在于提供一种酵母酶解物在制备饲料添加剂中的应用，属于饲料制备技术领域。

2、为实现上述目的，本发明提供了如下技术方案：

3、其一，本发明提供了一组酵母细胞壁降解酶，所述酵母细胞壁降解酶包括一种β-葡聚糖酶突变体和一种β-甘露聚糖酶突变体两种酶。

4、进一步地，所述β-葡聚糖酶突变体的氨基酸序列为seq id no.1，所述β-甘露聚糖酶突变体的氨基酸序列为seq id no.2。

5、其二，本发明提供了一种含有酵母酶解物的饲料添加剂，所述酵母酶解物为通过重组毕赤酵母菌表达β-葡聚糖酶和β-甘露聚糖酶协同酶解自体细胞壁所制成的酵母酶解物。

6、进一步地，所述β-葡聚糖酶的氨基酸序列为seq id no.1，所述β-甘露聚糖酶的氨基酸序列为seq id no.2。

7、进一步地，所述β-葡聚糖酶的氨基酸序列176位和183位的trp突变为ala；所述β-甘露聚糖酶的氨基酸序列196位、198位和199位的trp突变为ala。

8、进一步地，所述饲料添加剂在饲料中的添加量的质量比为1:1000。

9、进一步地，所述饲料添加剂能够用于改善雏鸡拉稀症状、降低肉鸡料肉比、提高疫苗免疫抗体效价。

10、本发明的有益效果在于，构建同时表达β-葡聚糖酶和β-甘露聚糖酶突变体的重组毕赤酵母菌株，β-葡聚糖酶和β-甘露聚糖酶由严谨诱导型醇氧化酶启动子控制，增菌发酵阶段不表达酶，高密度发酵后经甲醇诱导启动酶表达。两种酶突变体在酵母最适生长温度下比未突变的酶活性更高，适用于工业发酵条件下酶解酵母细胞壁。本发明减少了额外添加酵母细胞壁降解酶的过程，简化了额外添加酵母细胞壁降解酶对温度、ph、盐离子浓度的调控过程。细胞壁从内到外酶解自溶，两种酶联用起到了功能协同促进作用，将水不溶性葡聚糖和甘露聚糖酶解成具有更高生物活性的葡聚糖寡糖和低聚甘露糖。酵母酶解物制备饲料添加剂能够改善动物腹泻拉稀症状、提高疫苗免疫抗体效价、延长疫苗免疫期。

技术特征：

1.一组酵母细胞壁降解酶，其特征在于，所述酵母细胞壁降解酶包括一种β-葡聚糖酶突变体和一种β-甘露聚糖酶突变体两种酶，所述β-葡聚糖酶突变体的氨基酸序列为seq idno.1，所述β-甘露聚糖酶突变体的氨基酸序列为seq id no.2。

2.一种含有酵母酶解物的饲料添加剂，其特征在于，所述酵母酶解物为通过重组毕赤酵母菌表达β-葡聚糖酶和β-甘露聚糖酶协同酶解自体细胞壁所制成的酵母酶解物；所述β-葡聚糖酶的氨基酸序列为seq id no.1，所述β-甘露聚糖酶的氨基酸序列为seq id no.2；所述β-葡聚糖酶的氨基酸序列176位和183位的trp突变为ala；所述β-甘露聚糖酶的氨基酸序列196位、198位和199位的trp突变为ala；所述饲料添加剂在饲料中的添加量的质量比为1:1000；所述饲料添加剂能够用于改善雏鸡拉稀症状、降低肉鸡料肉比、提高疫苗免疫抗体效价。

技术总结
本发明提供了一种酵母酶解物在制备饲料添加剂中的应用，属于饲料制备技术领域。通过构建同时表达β‑葡聚糖酶和β‑甘露聚糖酶突变体的重组毕赤酵母菌株，两种酶协同酶解自体细胞壁，酶解液喷雾干燥制成饲料添加剂。本发明提供了一组酵母细胞壁降解酶，包括一种β‑葡聚糖酶突变体和一种β‑甘露聚糖酶突变体两种酶。两种酶突变体在酵母最适生长温度酶活性高，联用起到了功能协同促进作用，能将酵母细胞壁中水不溶的葡聚糖和甘露聚糖充分酶解成水溶性寡糖，释放酵母活性成分。本发明酵母酶解物制备饲料添加剂具有改善雏鸡拉稀症状、降低肉鸡料肉比、提高疫苗免疫抗体效价的有益效果。

技术研发人员：姜明君,许明礼,宋群青,贾友刚,孙维才,王向荣,刘宗强,燕磊,李勇,李鑫
受保护的技术使用者：潍坊新希望六和饲料科技有限公司
技术研发日：
技术公布日：2024/2/1