靶向胰腺多肽的纳米抗体、编码序列及其应用的制作方法

本发明涉及生物工程，特别是涉及靶向胰腺多肽的纳米抗体、编码序列及其应用。

背景技术：

1、骆驼科动物(羊驼、骆驼)和软骨鱼体内的一种天然缺失重链且具有生物活性的特异性抗体称为单域抗体，单域抗体的抗原结合位点(vhh)具有独立的抗原识别能力，独立表达的vhh又被称为纳米抗体。与传统的四联体抗体相比，单域抗体的主要特点有：分子量小，结构简单，理化性质稳定等。纳米抗体得优良特性使其在多种方面具有优势：在抗体进入机体方面纳米抗体能够穿过动物机体内的一些保护性的屏障进入发病部位发挥作用，如血脑屏障、血睾屏障等；在抗原抗体结合方面能够结合一些隐蔽的抗原表位，特别适用于比较难得到抗体的靶点，如gpcr、离子通道和酶活中心等；在降低生产成本方面纳米抗体结构简单易于体外表达，同时体外表达不易产生包涵体，生产工艺简单；同时纳米抗体的分子量小，结构简单，更有利于进行基因改造，纳米抗体人源化修饰等特性。

2、胰腺多肽(pancreatic polypeptide，pp)是从胰腺中纯化胰岛素时发现的副产品，哺乳动物的胰腺多肽功能区是由36个氨基酸组成的线性肽，其结构保守，在哺乳动物中只有1～2个氨基酸的差异。在正常胰腺中，外于其外围区的郞格罕斯岛的f细胞分泌胰腺多肽，是神经肽y(npy)家族成员。胰腺多肽作为生物标记物之一，对辅助性诊断胰腺神经内分泌肿瘤具有重要意义。但目前缺乏对胰腺多肽特异性好的单域抗体。

技术实现思路

1、为了解决上述问题，本发明提供了靶向胰腺多肽的纳米抗体、编码序列及其应用。本发明提供的纳米抗体是一种利用羊驼筛选得到的单域抗体对胰腺多肽抗原具有较好的特异性。

2、为了实现上述目的，本发明提供如下技术方案：

3、本发明提供了靶向胰腺多肽的纳米抗体，氨基酸序列如seq id no.5所示。

4、本发明提供了上述技术方案所述纳米抗体的编码序列，所述编码序列的核苷酸序列如seq id no.14所示。

5、本发明提供了一种含有上述技术方案所述编码序列的表达载体。

6、优选的，所述表达载体的原始载体包括pet28a载体。

7、本发明提供了一种含有上述技术方案所述表达载体的工程菌。

8、优选的，所述工程菌的原始菌株包括大肠杆菌(escherichia coli)。

9、优选的，所述大肠杆菌包括大肠杆菌bl21(de3)。

10、本发明提供了上述技术方案所述的纳米抗体或上述技术方案所述的编码序列或上述技术方案所述的表达载体或上述技术方案所述的工程菌在制备检测胰腺多肽的产品中的应用。

11、优选的，所述产品包括利用elisa法检测的试剂或试剂盒。

12、有益效果：

13、本发明提供了靶向胰腺多肽的纳米抗体，氨基酸序列如seq id no.5所示。本发明提供的纳米抗体是以胰腺多肽为免疫抗原对羊驼进行免疫后，通过建库淘选得到的单域抗体，能够特异性结合血清中胰腺多肽，能以elisa的方法检测鸡、羊和人血清中的胰腺多肽。

技术特征：

1.靶向胰腺多肽的纳米抗体，其特征在于，氨基酸序列如seq id no.5所示。

2.权利要求1所述纳米抗体的编码序列，其特征在于，所述编码序列的核苷酸序列如seq id no.14所示。

3.一种含有权利要求2所述编码序列的表达载体。

4.根据权利要求3所述的表达载体，其特征在于，所述表达载体的原始载体包括pet28a载体。

5.一种含有权利要求3或4所述表达载体的工程菌。

6.根据权利要求5所述的工程菌，其特征在于，所述工程菌的原始菌株包括大肠杆菌(escherichia coli)。

7.根据权利要求6所述的工程菌，其特征在于，所述大肠杆菌包括大肠杆菌bl21(de3)。

8.权利要求1所述的纳米抗体或权利要求2所述的编码序列或权利要求3或4所述的表达载体或权利要求5～7任一项所述的工程菌在制备检测胰腺多肽的产品中的应用。

9.根据权利要求8所述的应用，其特征在于，所述产品包括利用elisa法检测的试剂或试剂盒。

技术总结
本发明涉及生物工程技术领域，特别是涉及靶向胰腺多肽的纳米抗体、编码序列及其应用。本发明提供的纳米抗体是以胰腺多肽为免疫抗原对羊驼进行免疫后，通过建库淘选得到的单域抗体，能够特异性结合血清中胰腺多肽，能以ELISA的方法检测鸡、羊和人血清中的胰腺多肽。

技术研发人员：渠志灿,范瑞文,贾琼,王家庆,郝花花,李建丽,赵邑,杨欣,潘薇薇,张全爱,梁欣欣,郭向荣
受保护的技术使用者：山西纳安生物科技股份有限公司
技术研发日：
技术公布日：2024/3/31