SVF细胞分离装置及方法与流程

本发明属于医疗器械，尤其是涉及一种svf细胞分离装置及方法。

背景技术：

1、svf（stromal vascular fraction），学名“血管基质组分”，是从人体抽取的脂肪组织中提取的，含有多种具有修复功能的细胞以及细胞因子混合物形成的异质细胞群。

2、svf 富集了特定种群的间充质干细胞; 造血、脂肪和内皮祖细胞; 以及免疫细胞、成纤维细胞、周细胞、内皮细胞和其他未表征的细胞。由于其强大的治疗潜力，较为简便的分离过程，较高的产量和临床使用上较小的伦理风险，svf 已迅速获得全球关注，并在糖尿病、骨关节炎、外周动脉病等疾病的治疗以及脂肪填充、器官移植等领域中展示了强大的作用。

3、svf细胞的制备工艺主要分为酶消化法和机械乳化法，许多使用酶或非酶脂肪组织来源的细胞分离的可用系统已经上市。其中酶消化法能够收获得更多数量和更高活性，是当前临床研究中普遍使用的方法。具体可参考现有专利cn108004207b，名称为“从脂肪中获取大量脂肪间充质干细胞的方法”，简而言之，酶消化法即是对抽脂所得的，经过清洗的脂肪组织进行消化酶处理，在37°c孵育一段时间后通过离心等方法收获其中的细胞组分。传统的酶消化法主要由人工操作完成，在开放式环境下通过离心管及移液设备进行。操作步骤繁琐且复杂，对操作人员资质要求高，操作过程细胞损耗较大，有污染风险并且人工操作带来的批次差异大。

4、为解决上述问题，现有专利cn218755728u，名称为“一种脂肪组织消化提取svf细胞装置”提出了通过装置提高svf细胞的分离率和培养效率，且相对人工操作而言，该现有专利对脂肪净化程度更高且操作更简单快捷。该现有技术是通过向分离器中注入脂肪组织和生理盐水，且在脂肪组织混合物在注入过程中由钢条筛网进行初步分离；分离液在自重作用下进入消化器中，并在该过程中再次经过筛网过滤出细小杂质，并将废液自与消化器连通的废液排出管排出；再将过滤后的油脂和细胞悬液与消化酶混合溶液接触进行消化，并在消化结束后再与生理盐水接触；消化液进入与消化器连通的分离纯化器中进行离心分离操作。根据该现有技术揭示的内容，先发现如下不足点：1、由于该装置具有垂直设置的分离器和消化器及分离纯化器，所以其体积较大，操作不方便。2、脂肪组织与生理盐水混合后出现的小凝血块、脂肪碎片、纤维组织块等杂质，这些杂质可能会堵塞钢条筛网的网孔，影响分离液进入消化器中的细胞量，存在较多细胞损失的情况，进而影响提取到的svf细胞的分离得率。3、经过初步分离操作后，废液和有效分离液均存在于消化器中，直接打开废液排出管排液过程中存在将有效分离液排出的风险，进一步影响svf细胞的提取率。

5、所以，设计一种小体积高提取率的svf细胞分离装置及方法是目前本领域技术人员所要解决的重要技术问题。

技术实现思路

1、本发明的目的就是为了解决现有技术中存在的上述问题，提供一种svf细胞分离装置及方法。

2、本发明的目的通过以下技术方案来实现：

3、svf细胞分离装置，包括管体，所述管体由三部分组成，位于中间段的收集管以及分别位于所述收集管两端的支撑部，两个所述支撑部内分别设置有可相对其旋转的消化管和分离管；所述消化管包括设置在其顶部的便于脂肪组织进入其管体内的入口和与其旋转轴线偏置的出口，所述消化管的管体内设有消化珠；所述分离管包括设置在其底部的出液口和设置在其顶部并与所述分离管旋转轴线偏置的进液口；所述收集管包括收容腔及位于所述收容腔两端并与其连通的第一开口和第二开口；所述消化管和/或所述分离管相对所述收集管旋转，使所述出口与所述第一开口和/或所述进液口与所述第二开口连通或错位设置，实现所述消化管和/或所述分离管与所述收集管连通或隔断；所述收集管的侧壁上设置有肝素帽，svf细胞自所述肝素帽的穿刺口被提取。

4、优选的，所述收集管的内径小于所述消化管和所述分离管的半径；且所述收集管的轴线与所述管体的轴线偏置。

5、优选的，所述第一开口与所述出口之间设置有过滤组件；所述过滤组件包括粗过滤网和细过滤网。

6、优选的，所述消化管与所述管体之间、所述分离管与所述管体之间均设置有硅胶垫，所述硅胶垫上设置有与所述出口对应的通孔。

7、优选的，所述消化管与所述分离管上均形成有锥形圆周面，所述锥形圆周面的端部与所述出口或进液口连通；所述锥形圆周面端部的外周设置有密封面，且所述密封面与所述硅胶垫平行设置。

8、优选的，所述消化管与所述管体，及所述分离管与所述管体之间设置有限定其旋转幅度的限位组件；使所述消化管和/或所述分离管与所述收集管完全连通或完全封闭。

9、优选的，所述消化管与所述分离管远离所述收集管的一端均设置有端盖，所述端盖上设置有排气孔和盖帽；所述排气孔内设置有透气膜；所述盖帽与所述入口或所述出液口对应。

10、优选的，所述肝素帽的外端不超过所述管体的外壁。

11、svf细胞分离方法，包括上述任一所述的svf细胞分离装置，及如下步骤，

12、s1，旋转所述消化管，使其和所述收集管隔离；

13、s2，将脂肪组织样本和消化酶混合溶液自所述入口进入所述消化管中，并将所述管体放入恒温摇床中进行消化操作；

14、s3，旋转所述消化管，使其和所述收集管及分离管连通，并将所述管体放入离心机中进行离心操作，此时所述消化管位于所述分离管的上方；

15、s4，油脂和细胞悬液经过所述过滤组件进入所述分离管中；

16、s5，旋转所述消化管，使其和所述收集管隔离；

17、s6，将所述管体旋转180°置于离心机中进行离心操作，使得油脂和细胞悬液实现分层，且位于上层的油脂层存储于所述分离管中；

18、s7，旋转所述分离管，使其和所述收集管隔离，自所述出液口处排出所述分离管内的油脂层；

19、s8，自所述肝素帽的穿刺口提取所述收集管内的svf细胞层。

20、优选的，所述步骤s7至s8之间可选择地进行以下步骤：

21、s7.1，向所述分离管内注入50±5ml的洗涤液；

22、s7.2，旋转所述分离管，使其和所述收集管连通；

23、s7.3，翻转摇晃所述管体，使洗涤液与svf细胞充分混合；

24、s7.4，将所述收集管在上的所述管体放入离心机进行离心操作；

25、s7.5，旋转所述分离管，使其和所述收集管隔离，自所述出液口处排出所述分离管内的废液。

26、s7.6，重复上述步骤s7.1至步骤s7.5，直至洗涤结束。

27、本发明技术方案的优点主要体现在：

28、svf细胞提取率高，提取操作在同一轴线方向实现，分别通过固液分离，液体分离将不同的固液杂质分别存储于消化管和分离罐内，保证脂肪组织样本内的svf细胞均可有效且快速进入收集管内，并从收集管上提取所需所有干细胞，提高干细胞的提取率以及干细胞纯度；

29、svf细胞提取效率高，在消化管内设置有消化珠，在消化过程中，脂肪组织样本与消化酶混合溶液和消化珠接触可加快脂肪组织样本中的小凝血块、脂肪碎片、纤维组织块等固体杂质与油脂和细胞悬液的分离，在消化管中形成固液混合样本，提高提取效率；在固液分离时通过离心机可有效防止固体杂质和消化珠阻塞出口，保证所有分离液均可快速且有效地进入分离管中；

30、通过过滤组件可将脂肪组织样本中的固体杂质与油脂和细胞悬液分离，保证进入分离管中的油脂和细胞悬液的纯度；

31、装置整体体积小，消化管、分离管和收集管整体处于同一轴线上，使得装置整体占地面积小，同时方便操作，一定程度上提高了提取效率；

32、通过硅胶垫及密封面可有效地将消化管与收集管或分离管与收集管分离，并保证管体之间的密封性，进而提高svf细胞的提取纯度和体量。