本披露属于生物医学，具体涉及一种人乳腺癌耐药细胞株及其应用。
背景技术：
1、her2又称erbb2，是表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor，egfr)的家族成员之一，它是由her2基因编码的具有受体酪氨酸激酶活性的跨膜糖蛋白。her2作为一个重要的肿瘤标志物分子，其在乳腺癌、胃癌、卵巢癌、肺癌、前列腺癌等多种恶性肿瘤中都存在基因扩增或蛋白过度表达的现象，临床上称为her2阳性肿瘤。经统计，乳腺癌病人中her2过表达的比例高达20～30％，her2阳性肿瘤临床表现为恶性程度高、对放疗和化疗不敏感、治疗后易复发和转移。另外已有研究发现，肺癌中存在her2过表达，与肺癌的类型、细胞分化程度、放化疗耐药及预后不良有关。
2、由于her2在正常细胞和肿瘤细胞中的表达水平具有显著的差异，因而成为生物治疗的理想靶点。对于靶向her2抗肿瘤药物的研究，1998年美国fda批准了第一个针对her2人源化单克隆抗体的药物曲妥珠单抗(trastuzumab，商品名赫赛汀)上市，如今采用曲妥珠单抗联合化疗药物已成为国际公认的治疗her2阳性晚期转移性乳腺癌的标准治疗方案，与传统化疗方法相比，采用该联合化疗方案可以明显提高乳腺肿瘤的治疗效果，2010年美国fda又批准曲妥珠单抗用于her2阳性晚期胃癌的治疗。
3、enhertu，中文名为优赫得，通用名为德曲妥珠单抗，是一款靶向her2的抗体-药物偶联物(adc)。enhertu已被批准用于治疗无法切除或转移性her2阳性乳腺癌和具有激活突变的转移性非小细胞肺癌，由阿斯利康和第一三共株式会社联合开发并商业化。
4、目前，大量临床应用发现，很多her2阳性肿瘤病人对德曲妥珠单抗治疗产生了原发性和继发性的耐药现象。因此需要深入研究药物耐药机理，以更好地进行肿瘤个体化治疗。肿瘤或癌症耐药细胞株是解析肿瘤或癌症细胞的耐药机制和开发可对抗肿瘤或抗癌耐药性新型药物的重要研究工具。虽然国内外已经建立了多种肿瘤或癌症的耐药细胞株，但是关于enhertu的人乳腺癌耐药细胞株还鲜有报道。
技术实现思路
1、本披露的目的是提供一种人乳腺癌耐药细胞株及其应用。
2、在第一个方面，提供一种耐药细胞株，所述耐药细胞株命名为人乳腺癌耐药细胞株hcc1954/enhertu-r，其保藏编号为cctcc no：c2025225。
3、在一些实施方案中，其中所述耐药细胞株对her2拮抗剂或拓扑异构酶i抑制剂耐药。
4、在一些实施方案中，所述的her2拮抗剂为抗her2抗体或抗her2抗体-药物偶联物。
5、在一些实施方案中，所述拓扑异构酶i抑制剂包括但不限于dxd(exatecanderivative，依沙替康衍生物)或其衍生物、sn-38或其衍生物、依沙替康(exatecan)或其衍生物、鲁比替康(rubitecan)或其衍生物、拓扑替康(topotecan)或其衍生物、伊立替康(topotecan)或其衍生物、和喜树碱(camptothecin)或其衍生物。
6、在一些实施方案中，其中所述的拓扑异构酶i抑制剂为依沙替康衍生物(dxd)。
7、在一些实施方案中，所述的her2拮抗剂为抗her2抗体。在一些实施方案中，所述的抗her2抗体选自曲妥珠单抗、帕妥珠单抗、泽尼达妥单抗(zanidatamab)、泽妥珠单抗(zenocutuzumab)、伊尼妥单抗(inetetamab)、马吉妥昔单抗(margetuximab)、hlx22、iah0968、bat1006、b002t、hk001、trasgex(timigutuzumab)和fs102。上述抗her2抗体包含其各自的生物相似产品。
8、在一些实施方案中，所述的抗her2抗体-药物偶联物选自德曲妥珠单抗(trastuzumabderuxtecan，ds-8201)、维迪西单抗(vedicitumab)、瑞康曲妥珠单抗(trastuzumab rezetecan)、syd985(trastuzumab duocarmazine)、博度曲妥珠单抗(trastuzumab botidotin)、bat8001、taa013、mrg002、(trastuzumab vedotin)、lcb14-0110、sya1501、db-1303、jskn-003(anbenitamab repodatecan)、bl-m07d1、tqb2102、gq1005、ibi354、ncb001(anvatabart opadotin)、mm-302、dx126-262或其组合。上述抗her2抗体-药物偶联物包含其各自的生物相似产品。
9、在一些实施方案中，所述耐药细胞株对德曲妥珠单抗和dxd耐药。
10、在一些实施方案中，所述耐药细胞株对德曲妥珠单抗耐药。
11、在一些实施方案中，所述耐药细胞株对dxd耐药。
12、在一些实施方案中，所述耐药细胞株对德曲妥珠单抗的耐药浓度至少为0.27nm，例如0.27nm～3nm、3nm～5nm、5nm～6.5nm；非限制性的实施例包含约0.44nm，约3nm，约5nm，约6.5nm或任意两数值间任意值。在一些实施方案中，所述耐药细胞株对德曲妥珠单抗的耐药浓度约为6.5nm。在一些实施方案中，所述耐药细胞株对德曲妥珠单抗的耐药浓度为6.5nm。
13、在第二个方面，提供了所述的耐药细胞株在筛选抗肿瘤或抗癌症药物中的应用。在一些实施方案中，提供了所述的耐药细胞株在筛选对her2拮抗剂耐药的肿瘤或癌症的药物中的应用。在一些实施方案中，提供了所述的耐药细胞株在筛选对抗her2抗体耐药的肿瘤或癌症的药物中的应用。在一些实施方案中，提供了所述的耐药细胞株在筛选对抗her2抗体-药物偶联物耐药的肿瘤或癌症的药物中的应用。在一些实施方案中，提供了所述的耐药细胞株在筛选对德曲妥珠单抗耐药的肿瘤或癌症的药物中的应用。
14、在第三个方面，提供了所述的耐药细胞株在开发肿瘤耐药逆转药物中的应用。在一些实施方案中，提供了所述的耐药细胞株在体外开发肿瘤耐药逆转药物中的应用。
15、在第四个方面，提供了所述的耐药细胞株在研究肿瘤或癌症耐药机制中的应用。在一些实施方案中，所述肿瘤或癌症选自：乳腺癌、肺癌、尿道癌、大肠癌、前列腺癌、卵巢癌、胰腺癌、膀胱癌、胃癌、胃肠道间质瘤、宫颈癌、食道癌、鳞状细胞癌、腹膜癌、肝癌、结肠癌、直肠癌、结肠直肠癌、子宫内膜癌、唾液腺癌、肾癌、外阴癌、甲状腺癌、阴茎癌、白血病、恶性淋巴瘤、浆细胞瘤、骨髓瘤、食管胃结合部癌和肉瘤。在一些实施方案中，提供了所述的耐药细胞株在体外研究肿瘤或癌症耐药机制中的应用。
16、在一些实施方案中，所述癌症为乳腺癌、胃癌、肺癌、子宫内膜癌和食管胃结合部癌。在一些实施方案中，所述肿瘤为晚期实体瘤。
17、在一些实施方案中，所述胃癌为转移性胃癌，所述乳腺癌为转移性乳腺癌、her2阳性乳腺癌或三阴性乳腺癌。在一些实施方案中，所述肺癌为转移性非小细胞肺癌。
18、在第五个方面，提供了所述的耐药细胞株在建立耐药动物模型应用；在一些实施方案中，所述动物模型为乳腺癌模型。在一些实施方案中，动物模型可通过皮下接瘤或尾静脉注射建模的方法建立。
19、在第六个方面，提供了所述的耐药细胞株在体外分析抗癌药物敏感性的应用。
20、在第七个方面，提供了所述的耐药细胞株的子代细胞。
21、在第八个方面，提供了所述耐药细胞株的构建方法。
22、在一些实施方案中，本披露采用人乳腺癌细胞hcc1954为诱导对象，检测ic50，确定初始耐药诱导范围，后续不断增加药物浓度，连续培养6个月以上，直至筛选得到在enhertu为6.5nm时仍能正常生长的hcc1954细胞，即hcc1954/enhertu-r细胞，并且hcc1954/enhertu-r细胞在经过连续传代、冻存复苏之后依然能保持耐药性状。
23、本披露采用低浓度持续诱导并逐步增加德曲妥单抗浓度的方法，有效诱导了人乳腺癌耐药细胞株，本披露的构建方法操作简单，可有效弥补现有方法的不足。
24、本披露首次构建了一种人乳腺癌细胞耐药细胞株，可用于分析人乳腺癌细胞耐药后的形态学及生物学表型的变化；研究肿瘤对德曲妥珠单抗耐药的分子机制和逆转肿瘤耐药的方法及筛选其他抗肿瘤药物；发现肿瘤耐药标志物以及筛选和评估新型抗肿瘤药物等，具有较高的科研和生产应用价值。
25、本披露在研究肿瘤或癌症耐药机制、逆转肿瘤或癌症细胞耐药性、指导病人用药、建立耐药动物模型方面都具有重要的应用前景。
26、本披露获得的人乳腺癌细胞耐药细胞株命名为hcc1954/enhertu-r，保藏单位为中国典型培养物保藏中心，保藏编号为cctcc no：c2025225，保藏日期为2025年8月5日，分类命名为homo sapiens。