核酸提取用设备的制造方法_4

文档序号:8333837阅读:来源:国知局
[0103] 图7是表示本实施方式的核酸提取用试剂盒的一个例子的示意图。图7例示的核 酸提取用试剂盒2000包括构成上述核酸提取用设备的主要部位的部件。对与"1.核酸提 取用设备"的项目中说明的构成同样的构成标注相同的符号并省略详细的说明。
[0104] 本实施方式的核酸提取用试剂盒2000包括管200和使内部与管200的第1塞子 10侧的端连通而连接的容器120,上述管200在内部依次配置有由蜡或油构成的第1塞子 10、由不与蜡或油混合的第1清洗液构成的第2塞子20、由蜡构成的第3塞子30、由不与蜡 或油混合的溶出液构成的第4塞子40以及由蜡或油构成的第5塞子50。
[0105] 管200是核酸提取用设备1000的管部100的两端开放的方式,在内部具有空洞, 且具有能够使液体在该空洞内沿长边方向流通的筒状的形状。管200的内部形状、外形形 状、大小、性质、材质等与核酸提取用设备1000的管部100同样。被配置于管200的内部的 塞子与被配置于核酸提取用设备1000的管部100的塞子同样。另外,管200的两端可以被 可自由拆卸的栓110密封。管200的两端被栓110密封时,例如核酸提取用试剂盒2000的 保存、移送变得更容易。此外,在使用管200时,如果为栓110密封管200的第5塞子50侧 的端部的状态,则使粒子等在管200的内部移动时,能够抑制各塞子在管200内的移动,因 此能够使清洗、提取更容易。在此基础上,由于该栓110是可自由拆卸的,所以能够将管200 的第5塞子50侧的端部开放,容易将溶出有核酸的第4塞子40的溶出液从管200的第5 塞子50侧的端部排出。
[0106] 容器120与核酸提取用设备1000的项目中说明的容器120同样。
[0107] 在图7的例子中,管200的两端被可自由拆卸的栓110密封。另外,核酸提取用试 剂盒2000可以包含可自由拆卸地密封容器120的开口 121的盖122,容器120的开口 121 可以被可自由拆卸的盖122密封。此外,在核酸提取用试剂盒2000中,吸附液的成分的一 部分或全部可以被收容在容器120中。
[0108] 另外,在核酸提取用试剂盒2000中,容器120可以收容吸附液和磁性粒子。由此, 将检体导入容器120中时,能够在容器120中进行使检体所含的核酸吸附于磁性粒子的工 序。由此,不需要准备其它的容器,能够更迅速地进行PCR的前处理。另外,这种情况下,容 器120的开口 121根据需要可以被可自由拆卸的盖122密封。对于磁性粒子,后面详述。
[0109] 另外,如果使容器120如上所述成为具有挠性的材质,则在将容器120与管200连 接的状态下,通过使容器120变形,能够对管200的内部加压。由此,在将溶出有核酸的第4 塞子40的溶出液从管200的第5塞子50侧的端部排出时,能够容易地从管200的第1塞 子10侧施加压力。由此,能够将溶出液容易地分注到例如用于PCR的反应容器等。
[0110] 核酸提取用试剂盒2000除包含管200和容器120之外,例如还可以包含栓、盖、操 作说明书、试剂、箱体等其它的构成。另外,在此示出了管200内配置有5个塞子的例子,但 容易理解的是,与"1.6.核酸提取用设备"的项目中说明的同样地在管200(管部100)内可 以根据需要配置第6塞子60、第7塞子70等其它的塞子。
[0111] 本实施方式的核酸提取用试剂盒2000由于具有能够使内部与管200的第1塞子 10侧的端部连通而连接的容器120,所以只要容器120内收容粒子等和检体,就能够将核酸 吸附于粒子等,只要将容器120与管200的第1塞子10侧的端部连接,就能够将该粒子等 容易地从管200的第1塞子侧导入管200内。另外,本实施方式的核酸提取用试剂盒2000 由于具有容器120,所以可以振摇容器120,能够将容器120内的液体充分搅拌。由此能够 使核酸迅速吸附于粒子等。
[0112] 另外,通过将容器120与管200连接,容易将吸附有核酸的粒子等从管200的第1 塞子10侧的端导入,使之移动至第4塞子40。由此,能够在极短时间内容易地进行核酸的 提取。核酸提取用试剂盒2000通过使吸附有核酸的粒子等在管200内移动,从而能够得到 以高纯度含有核酸的溶出液。因此,根据核酸提取用试剂盒2000,能够大幅减少用于PCR 的前处理所需的时间和精力。
[0113] 3.核酸提取方法
[0114] 上述核酸提取用设备、核酸提取用试剂盒及它们的变型方式以及后述的核酸提取 用装置均适用于本实施方式的核酸提取方法。以下,作为本实施方式的核酸提取方法的一 个例子,叙述采用上述的核酸提取用试剂盒2000的方法。
[0115] 本实施方式的核酸提取方法包括如下工序:向收容有磁性粒子M和吸附液的具有 挠性的容器120导入含有核酸的检体的工序,摇动容器120而使核酸吸附于磁性粒子M的 工序,在管200的第1塞子10侧的端使容器120内部与管200内部连通而连接容器120的 工序,施加磁力而使磁性粒子M从容器120内部通过管200内部移动至第5塞子50的位 置的工序,以及使核酸从磁性粒子M溶出到第4塞子40的溶出液的工序,该管200在内部 依次配置有由蜡或油构成的第1塞子10、由不与蜡或油混合的第1清洗液构成的第2塞子 20、由蜡构成的第3塞子30、由不与蜡或油混合的溶出液构成的第4塞子40以及由蜡或油 构成的第5塞子50。
[0116] 在本实施方式的核酸提取方法中,只要是能够用吸附液吸附核酸且能够在管200 内移动的粒子,就可以使用各种(例如二氧化硅粒子、聚合物粒子、磁性粒子等)粒子,在以 下说明的核酸提取方法的一个实施方式中,使用含有磁性体且在粒子表面能够吸附核酸的 磁性粒子M。应予说明,使磁性粒子M以外的粒子等在管内移动时,例如可以利用重力、电位 差来执行此动作。
[0117] 在本实施方式的核酸提取方法中,对于容器120和管200选择透过磁力的材质,通 过从容器120和管200的外部施加磁力使磁性粒子M在容器120和管200的内部移动。
[0118] 检体中含有成为靶的核酸。以下,有时将其简称为靶核酸。靶核酸例如可以是DNA、 RNA(DNA :Deoxyribonucleic Acid 和 / 或 RNA :Ribonucleic Acid)。革巴核酸利用本实施方 式的核酸提取方法从检体提取,被溶出到溶出液后,被用作例如PCR的模板。作为检体,可 举出血液、鼻腔粘液、口腔粘膜、其他各种生物体试料等。
[0119] 3. 1.向容器导入检体的工序
[0120] 向容器120导入检体的工序可以通过例如使检体附着于棉棒,从容器120的开口 121插入该棉棒,将其浸渍在吸附液中来进行。另外,检体可以利用移液管等从容器120的 开口 121导入。另外如果检体为糊状、固体状,则例如可以从容器120的开口 121利用匙、 镊子等使其在容器120的内壁附着等而投入。
[0121] 3. 2.使核酸吸附于磁性粒子的工序
[0122] 使核酸吸附的工序通过使容器120摇动而进行。如果有密封容器120的开口 121 的盖122,则使用盖122密封容器120来进行该工序时,能够更有效率地执行。通过该工序, 靶核酸因促溶剂的作用而被吸附于磁性粒子M的表面。该工序中,除靶核酸之外,靶核酸以 外的核酸、蛋白质也可以吸附在磁性粒子M的表面。
[0123] 作为摇动容器120的方法,可以使用旋涡式振动筛等装置,也可以用操作者的手 振摇混合。另外,可以利用磁性粒子M的磁性,边从外部赋予磁场边摇动容器120。摇动容 器120的时间可适当地设定,例如容器120的大致形状是直径为20mm且高度为30mm左右 的圆筒状时,用手将容器120振摇10秒钟的程度便充分搅拌,核酸吸附于磁性粒子M的表 面。
[0124] 3. 3?将容器与管连接的工序
[0125] 接下来如图8所示,将容器120与管200的第1塞子10侧的端部连接。即使取下 第1塞子10侧的栓110,由于设有第7塞子70侧的栓110,所以管200内的各塞子也难以 在管200内移动。在管200的第1塞子10侧的端部安装栓110时,取下该栓110来进行该 工序。而且,容器120和管200以内容物不漏出的方式连接,以内容物能够在容器120内部 与管200的内部之间流通的方式连通。
[0126] 3.4.使磁性粒子移动的工序
[0127] 经过上述工序后,成为容器120内的吸附有核酸的磁性粒子M能够流通到管200 的状态。作为将吸附有核酸的磁性粒子M导入管200的方法,可以采用利用重力、离心力的 方法,没有特别限制,但是在本实施方式中从容器120和管200的外部施加磁力来进行。磁 力可以利用例如永磁铁、电磁铁等施加,但是从不产生发热等这点考虑,更优选使用永磁铁 来施加。另外,使用永磁铁时,可以用操作者的手移动磁铁来进行,也可以利用机械装置等 进行。由于磁性粒子M具有受磁力吸引的性质,所以利用该性质,使容器120和管200与永 磁铁的相对配置变化,从容器120内移动至管200。由此,磁性粒子M从第1塞子10依次通 过各塞子移动至第4塞子40。磁性粒子M通过各塞子时在各塞子的滞留时间没有特别限 定,也可以按在相同塞子内沿管200的长边方向往返的方式移动。
[0128] 3. 5.使核酸溶出的工序
[0129] 如果磁性粒子M到达第4塞子40,则因溶出液的作用,被吸附于磁性粒子M的核酸 溶出到第4塞子40的溶出液。经过本工序后,成为核酸从检体向溶出液中溶出,从检体中 提取出核酸的状态。
[0130] 3. 6.作用效果
[0131] 根据本实施方式的核酸提取方法,能够在极短时间内容易地进行核酸的提取。本 实施方式的核酸提取方法通过使吸附有核酸的磁性粒子M在管200内移动,能够得到以高 纯度含有核酸的溶出液。根据本实施方式的核酸提取方法,能够大幅减少用于PCR的前处 理所需的时间和精力。
[0132] 3. 7.从管排出第4塞子的工序
[0133] 本实施方式的核酸提取方法可以包括使容器120变形而将第5塞子50和第4塞 子40从管200的与连接有容器120的一端相反侧的端部排出的工序。
[0134] 本工序可以在"3. 5.使核酸溶出的工序"后,通过使容器120变形来进行。排出第 4塞子40时,先排出第5塞子50。应予说明,密封管200的第5塞子50侧的栓110在本工 序之前除去,预先使管200的第5塞子50侧的端部开放。
[0135] 如果对容器120施加外力,以提高内压的方式使其变形,则因压力而使各塞子从 管200的第1塞子10侧向第5塞子50侧移动。由此,第5塞子50和第4塞子40从管200 的第5塞子50侧的端部依次排出。第3塞子30 (或第7塞子70)可以被排出,但第2塞子 20 (或第6塞子60)不被排出。
当前第4页1 2 3 4 5 6 
网友询问留言 已有0条留言
  • 还没有人留言评论。精彩留言会获得点赞!
1