的有机相用无水硫酸钠干燥，然后过滤并浓缩。用柱色谱硅胶柱层析法（己 烷/乙酸乙酯2/1)分离，得产物la(65mg，产率50%);用乙酸乙酯稀释。有机相依此用盐 酸（IN)，饱和碳酸氢钠和食盐水洗。分离后的有机相用无水硫酸钠干燥，然后过滤并浓缩。 得到粗产物溶于甲笨，加入单水合对甲苯磺酸（228mg，1.2mm〇l)。加热回流三小时，冷却至 室温，浓缩后用柱色谱硅胶柱层析法。
[0037] 第二步：la(49mg，0. 12mmol),磷酸（82mg，0. 84mmol), 4 A 活性粉末分子筛 (500mg)混合于 10mT,四氢呋喃，冷却至 0°C，加入N-iodosuccinimide (NIS，41mg，0· 18mmo1) 的四氢呋喃混合液（2mL).反应在室温下搅拌1小时，然后过滤，有机相用硫代硫酸钠（IM) 洗至无色，加入碳酸钠（13mg/3mL水，0. 12mmol)，浓缩，用乙醚洗，水相浓缩后用C-18反向 柱色谱硅胶柱层析法（乙腈和水）分离，得例l(42mg，产率70 % )电喷雾质谱（MS-ESI) (M+l :460)。
[0038] 实施例2
[0039] 本实施例与实施例1有相似的合成步骤，合成如下结构的步骤本领域技术人员可 知道改变起始原料和反应条件合成出下列化合物。
[0040]
[0041] ⑵
[0042] 实施例3
[0043] 本实施例与实施例1有相似的合成步骤，合成如下结构的步骤本领域技术人员可 知道改变起始原料和反应条件合成出下列化合物。
[0044]
[0045] 实施例4
[0046] 本实施例与实施例1有相似的合成步骤，合成如下结构的步骤本领域技术人员可 知道改变起始原料和反应条件合成出下列化合物。
[0047]
[0048] 实施例5
[0049] 本实施例为测试实施例1、2、3产物的溶解性和稳定性，实施例1、2、3的溶解性和 稳定性评估结果如表1所示。在pH=7. 4的条件下，例1溶解度高于65mg/mL，例2, 3溶解度 高于50mg/mL。在室温下，在Tri s buffer和borate buffer两种缓冲液中，例1，2,3 -周 内没有降解。而在碱性磷酸酶缓冲液环境下，例1，2,3迅速降解。碱性磷酸酶是一种水解 酶，负责从许多种分子中去除磷酸基团，大量存在于活体血液，肝脏和骨头中。碱性磷酸酶 溶液配制方法是：lrmM ZnC12, ImM MgC12和0· IM甘氨酸，pH用2N NaOH调至9. 8得到甘 氨酸缓冲溶液，甘氨酸缓冲溶液中加入碱性磷酸酶（2000U/L)得到碱性磷酸酶溶液.测试 时，往120L的例1，2,3溶液（360M，甘氨酸缓冲溶液）加入200L的碱性磷酸酶溶液，摇床， 37°〇。分别在5，10,20,30,60分钟时间点，用乙酸（0.4110(^和乙腈（0.21^)停止反应， HPLC分析得到例1，2, 3降解时效图和tl/2。
[0050] 表1、实施例1、2、3合成产物的溶解性和稳定性
[0051]
[0052] 实施例6
[0053] 本实施例为抗癌细胞活性测定，化合物抑制癌细胞的效果是根据该化合物在不同 浓度下对细胞存活能力的影响来鉴别的。细胞在培养液中孵化24小时，加入样品后继续孵 化72小时。在72小时后，分离剩余样品及培养液，细胞在37摄氏度CellTiter-Blue (从 Promega，WI，USA购买）试剂和培养液中继续孵化1到4小时。然后使用Beckman-Coulter DTX-880微板读数器测量535/590nM的荧光值。IC50 (和空白对照相比，抑制50%细胞生长 所须浓度）由下述方法计算：
[0054] %细胞生长=(F测量值/F空白对照）X 100
[0055] 其中F3w值是样品的荧光值，Fse对照是空白对照（培养液）的荧光值.
[0056] 剂量反应图和IC50值由Prism4软件计算得出。
[0057] 未激活指化合物直接溶于DMSO ;激活指化合物经过碱性磷酸酶溶液（见例5)预 处理。未激活的化合物在细胞中没有活性，而激活后化合物显示和活性化合物相同的活性。
[0058] 表2、抗癌细胞活性测定表
[0059]
[0060] 以上显示和描述了本发明的基本原理和主要特征及本发明的优点，本行业的技术 人员应该了解，本发明不受上述实施例的限制，上述实施例和说明书中描述的只是说明本 发明的原理，在不脱离本发明精神和范围的前提下，本发明还会有各种变化和改进，这些变 化和改进都落入要求保护的本发明范围内，本发明要求保护范围由所附的权利要求书及其 等效物界定。
【主权项】
1. 有抗癌作用的阿比特龙衍生物，其特征在于，其结构通式如下：包括各种盐以及互变异构体，其中： Rl和R2各自独立选自：H，被任选取代的低级烷基，被任选取代的低级烯基，被任选 取代的炔基，被任选取代的环烷基、芳基、杂环，其中芳基或杂环可以被以下基团单取代 或多取代，-〇R，，-SR，，-NHR，，-NR， 2, -CN，-COOR，，-0C(0)R，，N(R，）2, -NHC(0)R，，-C(O) NE(R'）2,-NC(O) 2R'，-OC (O)N(R，）2,-S (O)2R'或-NHS(O) 2R'；以上 R' 选自 H，被任选取代的 低级烷基、被任选取代的低级烯基、被任选取代的炔基，被任选取代的环烷基； Rl和R2也可以形成3到7元的被任选取代的环烷基； η是一选自0，1，2, 3的整数； X选自H或药学上可接受的盐。2. 有抗癌作用的阿比特龙衍生物，其特征在于，其另一结构通式如下：包括各种盐以及互变异构体，其中： Rl和R2各自独立选自：Η，被任选取代的低级烷基，被任选取代的低级烯基，被任选 取代的炔基，被任选取代的环烷基、芳基、杂环，其中芳基或杂环可以被以下基团单取代 或多取代，-OR，，-SR，，-NHR，，-NR， 2, -CN，-C00R，，-OC(O) R，，N(R，）2, -NHC(O) R，，-C(O) NE(R'）2,-NC(O) 2R'，-OC (O)N(R，）2,-S (O)2R'或-NHS(O) 2R'；以上 R' 选自 H，被任选取代的 低级烷基、被任选取代的低级烯基、被任选取代的炔基，被任选取代的环烷基； Rl和R2也可以形成3到7元的被任选取代的环烷基； X选自H或正离子形成药学上可接受的盐。3. 根据权利要求1或者2所述的有抗癌作用的阿比特龙衍生物，其特征在于，X可以是 有机或无机正离子，包括但不限于含苯乍生（benzathine)、氯普鲁卡因（chloroprocaine)、 胆碱（choline)、二乙醇胺、乙醇胺、叔丁乙酸盐、氨茶碱、葡甲胺、普鲁卡因、铝、钙、锂、镁、 钾、钠、铵、烷基胺和锌的正离子。4. 根据权利要求2所述的有抗癌作用的阿比特龙衍生物，其特征在于，所述结构通式 (IV)的合成包括以下步骤：5. 根据权利要求1或者2所述的有抗癌作用的阿比特龙衍生物，其特征在于，其中X是 Li+, Na+，K+,和 Ca2+。6. 根据权利要求1或者2所述的有抗癌作用的阿比特龙衍生物，其特征在于，其中Rl 和R2可以是H。7. 根据权利要求1或者2所述的有抗癌作用的阿比特龙衍生物，其特征在于，所述有抗 癌作用的阿比特龙衍生物具体表现但不局限为 下列结构：8.根据权利要求1或者2所述的有抗癌作用的阿比特龙衍生物，其特征在于，所述有抗 癌作用的阿比特龙衍生物用于治疗前列腺癌。
【专利摘要】有抗癌作用的阿比特龙衍生物，其结构通式如下：。本发明能保证提高阿比特龙溶解性，生物可利用度等生物物理属性；在制剂和给药时保持很好的稳定性；在给药后能降解并释放活性化合物；低毒性等特点。
【IPC分类】C07J43/00, A61P35/00
【公开号】CN104974212
【申请号】CN201410129202
【发明人】丁炬平
【申请人】北京朗瑞邦科技有限公司
【公开日】2015年10月14日
【申请日】2014年4月2日