一种小球藻的除腥方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及微藻加工处理技术领域，特别涉及一种小球藻的除腥方法。
【背景技术】
[0002] 随着社会经济的不断发展，人们生活水平的不断提高，人们的健康生活意识也在 不断的增强，对于身体健康也越来越引起人们的高度关注。因此近几年各种各样的保健 品以及具有保健功能的食品也越来越多的映入人们的眼帘，当然，具有高营养，无污染绿色 食品的小球藻保健品以及含有小球藻成分食品当之无愧成为人们首选的营养食品。小球 藻（Chlorella)为绿藻门（Chlorophyta)/绿藻纲、绿球藻目、小球藻属的一种普生性的单 细胞绿藻。生长在良好环境中的小球藻藻粉蛋白质含量可达63. 60%，18种氨基酸总量为 55. 95%，其中8种必需氨基酸含量为23. 35%，且含有二十二碳六烯酸（DHA)。联合国卫生 组织和粮农组织曾称誉其为"二十一世纪理想食品"与"二十一世纪最佳食品"。但是市场 上小球藻产品主要有小球藻片，产品品种单一，又因为存在较重的藻腥味口感较差而没有 得到大范围的推广。如专利CN103519035B公开了"一种小球藻发酵型果冻的制备方法" 该发明以羟丙基0 _环糊精为破壁材料，将包埋工艺与超声工艺结合起来，掩盖小球藻藻 腥味。羟丙基0 _环糊精是环状低聚糖同系物，由7个葡萄糖单体经a-1. 4糖苷键结合生 成的环状物。其分子间存在〇. 7-0. 8nm的含有CH和糖苷结合的含有-〇-原子的环状空穴， 可以将腥味包埋起来，起到脱腥的作用。由于小球藻的腥味物质主要由藻蓝蛋白产生，由于 其分子较大，环状糊精对其包埋效果不理想，脱腥效果受到限制。虽然和食用酒精联用效果 会比较理想，但是会存在酒精残留的问题。
【发明内容】
[0003] 本发明的目的对于现有技术存在的不足，提出了一种小球藻的除腥方法。
[0004] 为了实现本发明的目的，其具体的技术方法包括如下步骤：
[0005] 1、小球藻破壁：取小球藻干粉，加磷酸缓冲液调PH至6. 0,置于1-3°冰水浴中 采用超声波破碎仪对小球藻细胞壁进行破壁处理，超声振幅1〇〇%，料液比为7 :1时间为 lmin〇
[0006] 2、离心：将步骤1中所得的细胞液放入离心机中，转速1200r/min，离心15min,取 上清液。
[0007] 3、小球藻除腥：将上清液用柠檬酸缓冲液调PH至7. 0,后加入混合蛋白酶，并不停 搅拌，酶解30min，后再与5-8g芦荟凝胶汁混合均匀于30-50kHZ超声波中、30-40°C超声处 理5-10min，即得小球藻除腥藻液。
[0008] 所述的步骤3中混合酶优选为中性蛋白酶与木瓜蛋白酶（0.6万单位/I万单 位）3-5ml，温度恒温在55°C。
[0009] 与现有的小球藻除腥方法相比，本发明的突出优点是采用了混合酶酶解_芦荟凝 胶包埋的方法来去除小球藻的藻腥味。且所用的掩盖剂芦荟凝胶汁是从多年生百合科芦荟 叶的肉汁部分所得的液汁（经提纯加工），主要有芦荟大黄素，芦荟蒽酮，多种糖类、酶、氨 基酸等组成。广泛应用于医药和食品工业中。并且含的环糊精复合物，能够有效的包埋小 球藻中的腥味来源-藻蓝蛋白，从而可以有效的去除小球藻中的藻腥味的同时也增加了芦 荟淡淡的清香，，从而改善了小球藻应用了食品和医药工业中的口感，并保持了小球藻固有 的颜色。
【具体实施方式】
[0010] 实施例1
[0011] 1、小球藻破壁：称取小球藻干粉50g，加水配制成5%的小球藻溶液，加磷酸缓冲 液调PH至6. 0,置于1°冰水浴中超声波破碎仪进行细胞壁破壁处理，超声振幅100%，料液 比为7 :1时间为lmin。
[0012] 2、离心：将步骤1中所得的滤液放入离心机中，转速1200r/min，离心15min,取上 清液。
[0013] 3、小球藻除腥：将上清液用柠檬酸缓冲液调PH至7. 0,后加入混合蛋白酶（中性 蛋白酶与木瓜蛋白酶（〇. 6万单位/I万单位）3ml，并不停搅拌，酶解30min，后再与5g芦荟 凝胶汁混合均匀于30kHZ超声波中、30°C超声处理5min，即得小球藻除腥藻液。
[0014] 取10ml配制浓度为5%的小球藻溶液，混合酶（中性蛋白酶与木瓜蛋白酶（0. 6万 单位/I万单位）与芦荟凝胶不同比例加入，经超声处理后，小球藻去腥效果如表1
[0015]
[0016] 由表1可知，随着混合酶与芦荟凝胶加入的比例不断增加，则小球藻的去腥效果 越理想，混合酶加入5ml后芦荟凝胶加入5g，在此条件下小球藻的藻腥味已经完全除去，并 且具有淡淡的芦荟清香，小球藻也保持固有的颜色。
[0017] 实施例2
[0018] 与实施例1类似，其区别在于加入混合蛋白酶（中性蛋白酶与木瓜蛋白酶（0. 6万 单位/I万单位）3ml，并不停搅拌，酶解30min，后再与8g芦荟凝胶汁混合均匀于40kHZ超 声波中、30°C超声处理8min，即得小球藻除腥藻液。
[0019] 实施例3
[0020] 与实施例1类似，其区别在于加入混合蛋白酶（中性蛋白酶与木瓜蛋白酶（0. 6万 单位/I万单位）4ml，并不停搅拌，酶解30min，后再与5g芦荟凝胶汁混合均匀于40kHZ超 声波中、30°C超声处理6min，即得小球藻除腥藻液。
[0021] 实施例4
[0022] 与实施例1类似，其区别在于加入混合蛋白酶（中性蛋白酶与木瓜蛋白酶（0. 6万 单位/I万单位）5ml，并不停搅拌，酶解30min，后再与5g芦荟凝胶汁混合均匀于45kHZ超 声波中、35°C超声处理7min，即得小球藻除腥藻液。
[0023] 实施例5
[0024] 与实施例1类似，其区别在于加入混合蛋白酶（中性蛋白酶与木瓜蛋白酶（0. 6万 单位/I万单位）5ml，并不停搅拌，酶解30min，后再与8g芦荟凝胶汁混合均匀于50kHZ超 声波中、40°C超声处理lOmin，即得小球藻除腥藻液。
[0025] 比较例1
[0026] 0 -环糊精包埋法
[0027] 配制5%的小球藻溶液，加入不同浓度的0 _环糊精，考察小球藻脱腥效果的影响 如表2所示。
[0028]
[0029] 由表2可知，随着0 -环糊精浓度不断增大，对小球藻的去腥效果并不是很明显， 主要可能由于小球藻中的藻蓝蛋白分子过大，包埋效果不理想，所以除腥效果受到限制。
[0030] 中性蛋白酶酶解法
[0031] 配制5%的小球藻溶液，调节ph为6. 0-7. 0分别加入不同浓度的中性蛋白酶，在 55保温2h并不断搅拌，考察小球藻脱腥效果如表。
[0032]
[0033] 由表3所示，随着中性蛋白酶浓度过高则去腥效果更加不理想，这是由于中性蛋 白酶浓度过高导致了酶解过渡，使得藻蓝蛋白内部的疏水性氨基酸暴露出来被酶水解产生 异味，在中性蛋白酶浓度为3%时55°C下酶解2小时去腥效果最理想。
[0034] 本发明的除腥效果因没有具体量化标准因此采用评分的方式进行评价。5分表示 腥味较重；〇分表不已完全没有腥味。
【主权项】
1. 一种小球藻的除腥方法，其特征在于包括以下步骤：（1)小球藻破壁：取小球藻干 粉，加磷酸缓冲液调PH至6. 0,置于1-3°冰水浴中采用超声波破碎仪对小球藻细胞壁进行 破壁处理，超声振幅100%，料液比为7 :1时间为Imin ; (2)离心：将步骤1中所得的细胞液 放入离心机中，转速为1200r/min，离心15min,取上清液；（3)小球藻除腥：将上清液用梓 檬酸缓冲液调PH至7. 0,后加入混合蛋白酶，并不停搅拌，酶解30min，后与5-8g芦荟凝胶 汁混合均匀于30-50kHZ超声波中、温度30-40°C超声处理5-10min，即得小球藻除腥藻液。2. 根据权利要求1所述的一种小球藻的除腥方法，其特征在于步骤（3)中混合酶为中 性蛋白酶与木瓜蛋白酶两种酶混合。3. 根据权利要求2所述的一种小球藻的除腥方法，其特征在于中性蛋白酶与木瓜蛋白 酶加入比例为0. 6万单位：1万单位。4. 根据权利要求2所述的一种小球藻的除腥方法，其特征在于混合酶量为3-5ml。5. 根据权利要求1所述的一种小球藻的除腥方法，其特征在于步骤（3)中酶解温度恒 定为55°C。
【专利摘要】本发明涉及一种小球藻的除腥方法，采用先进的超声波破碎仪对小球藻进行破壁处理，然后采用混合酶酶解-芦荟凝胶包埋法除去小球藻的藻腥味。在混合酶与芦荟凝胶加入比例增大时，小球藻的除腥效果也逐步达到最佳，在达到一定比例时，小球藻的藻腥味完全除去，并且具有芦荟淡淡的清香味，并且小球藻保持固有的颜色。
【IPC分类】C12N1/06, C12N1/12
【公开号】CN105039161
【申请号】CN201510409032
【发明人】赵景歧
【申请人】赵景歧
【公开日】2015年11月11日
【申请日】2015年7月13日