一种矮小伞霉及其在促进铁皮石斛生长中的应用
【技术领域】
[0001] 本发明属于微生物技术领域，具体涉及一种矮小伞霉及其在促进铁皮石斛生长中 的应用。
【背景技术】
[0002] 铁皮石斛是兰科石斛属多年生附生草本植物，研究表明，从其种子萌发到植株的 健康生长，无不需要共生真菌的参与。由于野生铁皮石斛资源濒临枯竭，目前，铁皮石斛的 市场需求主要靠人工栽培，但人工种植铁皮石斛生长速度慢，平均产量低。菌根是土壤中菌 根真菌与植物根系形成的具有特定形态结构和功能的共生体，是自然界中普遍存在的一种 共生现象。兰科植物对菌根的依赖性较强，菌根真菌与植物根系互为条件形成共生体，在生 理上是一个相互协调的整体，并在共同进化的过程中，形成特定的形态特征。菌根真菌与宿 主植物的相互关系多数情况下是互利的，菌根真菌从植物体内获取生长必需的营养物质， 而植物通过与共生真菌结合，也能更好的从土壤中得到所需的养分及水分等。合理利用菌 根资源，提高铁皮石斛的抗病能力，在一定程度上减少化学农药的施用量，这也符合农业的 可持续发展战略。因此，菌根菌剂相关研究已成为铁皮石斛产业的一个重要方向。
【发明内容】
[0003] 本发明所要解决的技术问题是提供一种对铁皮石斛促生长作用效果显著的菌根 真菌--接合菌亚门毛霉目伞形霉属矮小伞霉（Umbelopsisnana)。
[0004] 本发明还要解决的技术问题是提供上述真菌在促进铁皮石斛生长中的应用。
[0005] 为解决上述技术问题，本发明采用的技术方案如下：
[0006] -种矮小伞霉，其分类命名为接合菌亚门毛霉目伞形霉属矮小伞霉（Umbelopsis nana)，菌株号为JSNL001-4,现已保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心 (CGMCC)，保藏编号为CGMCCNo. 11308,保藏日期为2015年9月11日，保藏地址为北京市朝 阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所，邮编100101。
[0007] 上述菌株JSNL001-4是2011年8月在江苏省句容市铁皮石斛栽植区内生长状况 较好的植株上分尚获得的，该菌株对铁皮石斛促生长作用显著。
[0008] 矮小伞霉（Umbelopsisnana)JSNL001-4的菌落特征如下：
[0009] 形态学特征观察表明：在PDA平板上培养，菌丝致密，附于基物表面；正面为白色 菌落边缘全缘；反面白色至淡黄色，略有色素沉积（图1)。扩增ITS区全序列并进行测序，PCR扩增得到的16sRNA全序列如SEQIDNo:1所示。
[0010] 上述矮小伞霉在促进铁皮石斛生长中的应用也在本发明的保护范围之内。
[0011] 具体的应用方法是：将矮小伞霉（Umbelopsisnana)JSNL001-4制备成固体菌剂， 置于铁皮石斛幼苗栽培基质表面，每丛铁皮石斛幼苗的固体菌剂接种量为5g，施用菌剂后， 基质相对含水量维持在60%以上10天，以确保菌丝在基质内成活。
[0012] 其中，所述的固体菌剂按如下方法制备得到：以棉籽壳菌渣为培养基质、硝酸铵为 外源氮源、鹿糖为外源碳源，制备成固体培养基，灭菌，接种矮小伞霉（Umbelopsisnana)JSNL001-4,在26°C、12h光照+12h黑暗、pH6. 5条件下培养25~30天，将培养好的菌剂切 割成lcm3大小的块状物，用于铁皮石斛植株菌根菌剂的接种。
[0013] 有益效果：与现有技术相比，本发明的优点是：
[0014] (1)矮小伞霉（Umbelopsisnana)JSNL001-4对铁皮石斛促生作用效果较为显著， 对减少化学肥料的使用有一定作用，也是保证食用安全的重要手段。
[0015] (2)矮小伞霉（Umbelopsisnana)JSNL001-4培养条件简单、容易保存，易于工业 化生产，具有良好的开发应用前景。
【附图说明】
[0016] 图1为JSNL001-4菌落培养照片。
[0017]图2为JSNL001-4菌菌根化铁皮石斛的促生能力分析。
【具体实施方式】
[0018] 根据下述实施例，可以更好地理解本发明。然而，本领域的技术人员容易理解，实 施例所描述的内容仅用于说明本发明，而不应当也不会限制权利要求书中所详细描述的本 发明。
[0019] 实施例1:
[0020] 将菌根真菌矮小伞霉（Umbelopsisnana)JSNL001-4制备成固体菌剂。具体制备方 式为：以棉籽壳菌渣为培养基质、硝酸铵为外源氮源、蔗糖为外源碳源，制备成固体培养基 质装入高压灭菌袋内，于121°c和101. 3千帕的高压条件下灭菌20分钟。待培养基质冷却 后在无菌条件下接种菌根真菌JSNL001-4,然后进行人工培养。具体培养条件为26°C、12h 光照+12h黑暗、pH6. 5,培养25~30天。将培养好的菌剂加工成lcm3大小的块状物，放置 于当年栽种的铁皮石斛幼苗栽培基质表面。栽培铁皮石斛选用口径15cm的营养钵，每个营 养钵栽培1丛（5株）铁皮石斛。接种时选择长势基本一致的铁皮石斛植株，并进行苗高和 地径的测定。每丛铁皮石斛种苗的固体菌剂接种量为5g。施用菌剂后，基质相对含水量维 持在60%以上10天，确保菌丝在基质内成活。接种后6个月，进行铁皮石斛根系的菌根化 程度检测，确保接种的菌根真菌二型伞霉（Umbelopsisdimorpha)JSNL001-4已与铁皮石斛 根部结合，形成了菌根。接种后12个月，进行铁皮石斛菌根化植株的促生效果分析（表1， 图2)。以未接种菌根菌剂，仅接种等量棉籽壳菌渣的铁皮石斛植株为对照植株（CK)。
[0021] 表1JSNL001-4对铁皮石斛植株的促生效果
[0022]
【主权项】
1. 一种矮小伞霉，其分类命名为接合菌亚门毛霉目伞形霉属矮小伞霉（Umbelopsis nana)，菌株号为JSNL001-4,现已保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心， 保藏编号为CGMCC No. 11308,保藏日期为2015年9月11日。2. 权利要求1所述的矮小伞霉在促进铁皮石斛生长中的应用。3. 根据权利要求2所述的应用，其特征在于：将矮小伞霉（Umbelopsis nana) JSNL001-4制备成固体菌剂，置于铁皮石斛幼苗栽培基质表面，每丛铁皮石斛幼苗的固体菌 剂接种量为5g，施用菌剂后，基质相对含水量维持在60%以上10天，以确保菌丝在基质内 成活。4. 根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述的固体菌剂按如下方法制备得到：以 棉籽壳菌渣为培养基质、硝酸铵为外源氮源、蔗糖为外源碳源，制备成固体培养基，灭菌，接 种矮小伞霉（Umbelopsis nana) JSNL001-4,在 26°C、12h 光照 +12h 黑暗、pH6. 5 条件下培 养25~30天，将培养好的菌剂切割成Icm3大小的块状物，用于铁皮石斛植株菌根菌剂的 接种。
【专利摘要】本发明公开了一种矮小伞霉，其分类命名为接合菌亚门毛霉目伞形霉属矮小伞霉(Umbelopsis？nana)，菌株号为JSNL001-4，现已保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC？No.11308，保藏日期为2015年9月11日。本发明矮小伞霉JSNL001-4能够促进铁皮石斛生长，效果显著；且能够人工培养，繁殖速度快，便于进行规模化生产，具有良好的开发应用前景。CGMCC No.1130820150911
【IPC分类】A01N63/04, C12N1/14, C12R1/645, A01P21/00
【公开号】CN105112309
【申请号】CN201510623700
【发明人】徐超, 贾君, 汪善峰, 张红岩, 郑凯, 杨鹤同, 席刚俊, 史俊, 赵桂华
【申请人】江苏农林职业技术学院
【公开日】2015年12月2日
【申请日】2015年9月25日