一种饲料级海洋鱼低聚肽粉的制备方法
【技术领域】
[0001]本发明属于低值海洋鱼粉深加工技术领域，具体涉及一种饲料级海洋鱼低聚肽粉的制备方法。
【背景技术】
[0002]海洋鱼粉是一种重要的高品质动物源蛋白粉，氨基酸含量丰富、组成平衡，是全世界使用最广泛、营养价值最丰富的饲料蛋白原料，在饲料、养殖行业中起着不可代替的作用。随着饲料行业的发展，鱼粉需求量逐年增加，我国已经跃升成为世界上最大的鱼粉需求国，目前我国鱼粉生产厂家已达500多家，主要集中在山东省和浙江省，年产量超过400万吨。
[0003]低聚肽是指一类由2?10个氨基酸组成，分子量小于100Da的功能性生物活性肽。低聚肽具有很强的生物活性，包括:调节激素水平；改善矿物质和微量元素吸收；抵抗细菌和病毒；提高免疫力等。研究表明动物尤其是幼小动物对低聚肽的消化吸收比氨基酸更为优胜，如果对海洋鱼粉进行深加工，生产海洋鱼低聚肽，可以有效提高鱼粉企业经济效益。
【发明内容】
[0004]本发明的目的在于提供一种具备营养成分丰富，易消化、易吸收、增强免疫力等生理功能的海洋鱼低聚肽粉的制备方法。
[0005]为实现上述目的，本发明采用如下技术手段:
一种饲料级海洋鱼低聚肽粉的制备方法，包括如下步骤:
(O以海洋低脂肪鱼粉为原料，按照料水质量比1:2?15加入纯水，于5?60°C搅拌水洗5?60min，过滤，得到水洗鱼粉；
(2)按照料水质量比1:4?15将水洗鱼粉与纯水混合，调整pH值至6.0?10.0，加入蛋白酶，控制蛋白酶与底物的质量比为0.1?5%，在40?65°C下酶解3?6h，得到酶解液；
(3)将酶解液升温至80?99°C，灭酶10?25min，冷却后过滤，得到脱渣酶解液；
(4)用截留分子量3500?1000Da超滤膜对脱渣酶解液进行膜分离，得到的透过液经过喷雾干燥即得饲料级海洋鱼低聚肽粉。
[0006]由上述制备方法制得的饲料级海洋鱼低聚肽粉粗蛋白含量为80.00-95.00%，低聚妝含量80%?90%，由2?4个氛基酸组成的分子量180?500Da的寡妝含量50%?62%，作为添加剂与饲料混合饲喂动物，可以有效提高鱼粉蛋白生物利用度，提高动物抗病能力。
[0007]进一步地，本发明还提供了上述制备方法的优选条件，如:
优选步骤(I)中料水质量比1:5，温度25°C，时间lOmin，在洗去大量盐分的同时减少蛋白损失。
[0008]优选步骤(2)中料水质量比1:6，以实现蛋白质与酶的充分接触，提高蛋白质的水解度。
[0009]优选步骤(2 )中蛋白酶为碱性蛋白酶和中性蛋白酶的混合物，所述的碱性蛋白酶如NS 37071 (丹麦诺维信公司)，中性蛋白酶如Neutrase 0.8L (丹麦诺维信公司)。
[0010]优选步骤(2)中两种蛋白酶的添加量均为底物质量的1%，足量的酶便于充分水解蛋白O
[0011]优选步骤(2 )中pH值8.5和7.5，温度55 °C，酶解时间5h。该条件有利于碱性蛋白酶和中性蛋白酶对鱼粉蛋白的水解。
[0012]优选步骤(3)中酶解液在95°C，灭酶lOmin，避免时间过长导致部分肽失活。
[0013]优选步骤(4)中截留分子量1000Da超滤膜进行分离，去除1000Da以上的大分子蛋白，通量大，分离效率高，避免因为分离时间过长导致肽液被微生物污染发臭。
[0014]优选步骤(4)中喷雾干燥的进风温度为180°C，出风温度为90°C，流速为600ml/h。
[0015]优选海洋低脂肪鱼粉粗蛋白含量70-75%，水分< 8.0%，粗脂肪< 2.5%。
[0016]本发明充分利用我国现有的丰富的海水低值鱼类资源，以低脂肪海洋鱼粉为原料，利用蛋白酶酶解制备活性肽粉，可以改善鱼粉蛋白的功能特性，提高鱼粉的营养价值，为我国海洋低值鱼类蛋白的开发利用开辟新的途径。
【具体实施方式】
[0017]实施例1
以海洋低脂肪鱼粉为原料(粗蛋白72.5%，水分7.0%，粗脂肪2.0%)，按照1:5料水比加水混合，在25°C下搅拌水洗10min，300目滤布过滤，得到水洗鱼粉。再按照1:5料水比加水混合均匀，调节pH值至8.5，加入底物质量1%的碱性蛋白酶NS 37071，在55°C下酶解5h。升温至95°C，灭酶lOmin，冷却后300目滤布过滤，得到脱渣的酶解液。酶解液经过400目袋式过滤器过滤后，用1000Da卷式膜于0.8MPa、40°C下分离lh，得到的透过液经喷雾干燥成粉即得饲料级海洋鱼低聚肽粉，喷雾干燥的进风温度为180°C，出风温度为90°C，流速为600ml/h。经检测，本实施例所制得的饲料级海洋鱼低聚肽粉中，低聚肽含量为80.50%，由2?4个氨基酸组成的分子量180?500Da的寡肽含量53.18%。
[0018]实施例2
以海洋低脂肪鱼粉为原料(粗蛋白75%，水分8.0%，粗脂肪2.5%)，按照1:15料水比加水混合，在60°C下搅拌水洗60min，300目滤布过滤，得到水洗鱼粉。再按照1:15料水比加水混合均匀，调节pH值至8.5，加入底物质量1%的碱性蛋白酶NS 37071，在55°C下酶解5h。升温至80°C，灭酶25min，冷却后300目滤布过滤，得到脱渣的酶解液。酶解液经过400目袋式过滤器过滤后，用5000Da卷式膜于1.2MPa、60°C下分离3h，得到的透过液经喷雾干燥成粉即得饲料级海洋鱼低聚肽粉，喷雾干燥的进风温度为180°C，出风温度为90°C，流速为600ml/h。经检测，本实施例所制得的饲料级海洋鱼低聚肽粉中，低聚肽含量为81.50%，由2?4个氨基酸组成的分子量180?500Da的寡肽含量52.57%。
[0019]实施例3
以海洋低脂肪鱼粉为原料(粗蛋白75%，水分8.0%，粗脂肪2.5%)，按照1:2料水比加水混合，在5°C下搅拌水洗5min，300目滤布过滤，得到水洗鱼粉。再按照1:4料水比加水混合均匀，调节pH值至8.5，加入底物质量1%的碱性蛋白酶NS 37071，在55°C下酶解5h。升温至80°C，灭酶25min，冷却后300目滤布过滤，得到脱渣的酶解液。酶解液经过400目袋式过滤器过滤后，用3500Da卷式膜于0.4MPa、20 V下分离30min，得到的透过液经喷雾干燥成粉即得饲料级海洋鱼低聚肽粉，喷雾干燥的进风温度为180°C，出风温度为90°C，流速为600ml/h。经检测，本实施例所制得的饲料级海洋鱼低聚肽粉中，低聚肽含量为80.37%，由2?4个氨基酸组成的分子量180?500Da的寡肽含量50.51%。
[0020]实施例4
按照实施例1的方法制得水洗鱼粉，再按照1:10料水比加水混合均匀，将pH值调至7.5，加入底物质量1%的中性蛋白酶Neutrase 0.8L，在50°C下酶解5h，其余操作步骤同实施例I ο经检测，本实施例所制得的饲料级海洋鱼低聚肽粉中，低聚肽含量为83.22%，由2?4个氨基酸组成的分子量180?500Da的寡肽含量56.83%。
[0021]实施例5
按照实施例1的方法制得水洗鱼粉，按照1:6料水比加水混合均匀，将pH值调至7.5，先添加底物质量1%的碱性蛋白酶NS 37071，在55°C下酶解0.5h，至pH值降至7.5，加入1%的中性蛋白酶Neutrase 0.8L，继续酶解4.5h，其余操作步骤同实施例1。经检测，本实施例所制得的饲料级海洋鱼低聚肽粉中，低聚肽含量为87.95%，由2?4个氨基酸组成的分子量180?500Da的寡肽含量60.64%。
【主权项】
1.一种饲料级海洋鱼低聚肽粉的制备方法，其特征在于:包括如下步骤: (O以海洋低脂肪鱼粉为原料，按照料水质量比1:2?15加入纯水，于5?60°C搅拌水洗5?60min，过滤，得到水洗鱼粉； (2)按照料水质量比1:4?15将水洗鱼粉与纯水混合，调整pH值至6.0?10.0，加入蛋白酶，控制蛋白酶与底物的质量比为0.1?5%，在40?65°C下酶解3?6h，得到酶解液； (3)将酶解液升温至80?99°C，灭酶10?25min，冷却后过滤，得到脱渣酶解液； (4)用截留分子量3500?1000Da超滤膜对脱渣酶解液进行膜分离，得到的透过液经过喷雾干燥即得饲料级海洋鱼低聚肽粉。2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于:步骤(I)中料水质量比为1:5，温度25°C，水洗时间1min。3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于:步骤(2)中料水质量比为1:6。4.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于:步骤(2)所述蛋白酶为碱性蛋白酶和中性蛋白酶，所述碱性蛋白酶和中性蛋白酶的最适PH分别为8.5和7.5，两种蛋白酶的添加量均为底物质量的1%。5.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于:步骤(2)中pH值为8.5和7.5。6.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于:步骤(2)中酶解的温度为55°C，酶解的时间为5h。7.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于:步骤(3)中灭酶温度为95°C，灭酶时间 1min。8.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于:步骤(4)中超滤膜的截留分子量为1000Da,温度 20 ?60°C，压力 0.4 ?1.2MPa，时间 30 ?180min。9.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于:步骤(4) 中喷雾干燥的进风温度为180°C，出风温度为90°C，流速为600ml/h。10.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于:所述的海洋低脂肪鱼粉为海洋低值鱼经脱脂制成的低脂肪鱼蛋白粉，粗蛋白含量55-75%，水分彡10.0%，粗脂肪彡4.0%。
【专利摘要】本发明提供了一种饲料级海洋鱼低聚肽粉的制备方法，具体包括如下步骤：（1）以海洋低脂肪鱼粉为原料，按照料水质量比加入纯水，搅拌水洗，过滤，得到水洗鱼粉；（2）将水洗鱼粉与纯水混合，调整pH值加入蛋白酶，得到酶解液；（3）将酶解液升温灭酶，冷却后过滤，得到脱渣酶解液；（4）用超滤膜对脱渣酶解液进行膜分离，得到的透过液经过喷雾干燥即得饲料级海洋鱼低聚肽粉。按照本发明制备的饲料级海洋鱼低聚肽粉，小分子低聚肽含量高，消化吸收效果好，作为添加剂与饲料混合饲喂动物，不仅可以提高鱼粉蛋白生物利用率，还可以提高动物，尤其是幼小动物的免疫力，增强抗病能力。
【IPC分类】C12P21/06, C07K1/34
【公开号】CN105154505
【申请号】CN201510601643
【发明人】王立梅, 齐斌
【申请人】常熟理工学院
【公开日】2015年12月16日
【申请日】2015年9月21日