酸序列与启动子合并也在 本领域公知常识的范围内。该启动子可以是非病毒启动子或病毒启动子，例如巨细胞病毒 (CMV)启动子、S V40启动子、RSV启动子和鼠干细胞病毒的长末端重复中发现的启动子。优 选的启动子是视紫红质启动子。
[0082] 本发明的重组表达载体可设计为瞬时表达、稳定表达或上述两种表达。同样地，这 些重组表达载体可制备为用于组成型表达或可诱导表达。
[0083] 本发明还提供了包含本发明所述重组表达载体中任一种的宿主细胞。本文中，术 语"宿主细胞"指能够含有本发明的重组表达载体的任何类型的细胞。该宿主细胞可以是 真核细胞（如植物、动物、真菌或藻类），或者可以是原核细胞（如细菌或原生动物）。该宿 主细胞可以是培养的细胞或原代细胞，即直接从生物体（如人）中分离。该宿主细胞可以 是粘附性细胞或悬浮的细胞，即在悬浮液中生长的细胞。合适的宿主细胞是本领域已知的 且包括例如DH5 α、大肠杆菌细胞、中华仓鼠卵巢细胞、猴VERO细胞、COS细胞、HEK293细胞 等。出于扩增或复制重组表达载体的目的，该宿主细胞优选是原核细胞，例如DH5ci细胞。
[0084] 本文中，术语"治疗"和"预防"及其衍生词不必表示100%或完全治疗或预防。而 是，存在不同程度的治疗或预防，其被本领域技术人员认为具有潜在益处或疗效，在这一方 面，本发明的方法可提供对例如哺乳动物中miR 204和/或miR 211相关病症的任何量或 任何水平的治疗或预防。此外，本发明的方法提供的治疗或预防可包括待治疗或预防的疾 病的一种或多种病症或症状。同样，出于本发明所述目的，"预防"可包括延迟疾病或其相 关症状或病症的发生。"有效量"指适用于预防或治疗个体中以感光细胞退化为特征的疾病 或病症的剂量。治疗或预防性应用的有效量取决于例如待治疗疾病或病症的阶段和严重程 度，患者的年龄、体重和总体健康状态，以及主治医师的判断。剂量的大小还可由以下因素 确定：所选择的化合物、给药方法、给药时机和频率以及伴随给予特点化合物和所需生理效 果的任何不良副作用的存在、本质和程度。本领域技术人员应理解，多种疾病或病症可能需 要涉及多次给药的延长的治疗，可能是在各轮或多轮给药中使用miR 204、miR 211和/或 其模拟物。miR及其模拟物可在组合物（如药物组合物）中给予，所述组合物可包含至少一 种赋形剂（如药学上可接受的赋形剂）以及其他治疗剂（例如其他miR和/或其模拟物）。 该组合物可通过任意合适的途径给予，包括胃肠道外、外敷、口服或局部给药。
[0085] 药学上可接受的赋形剂优选在使用条件下对miR和/或其模拟物是化学上惰性 的且具有没有或几乎没有副作用。这类药学上可接受的运载体包括但不限于：水、盐水、 Cremophor EL(西格玛化学公司（Sigma Chemical Co.)，密苏里州圣路易斯）、丙二醇、聚乙 二醇、醇及其组合。运载体的选择可部分由具体miR和/或其模拟物决定，以及由给予组合 物的具体方法确定。因此，存在多种合适的组合物制剂。
[0086] 在本发明的实施方式中，该药物组合物可以是例如丸剂、胶囊剂或片剂的形式，各 自含有预定量的一种或多种活性化合物并优选经包衣以易于吞服，粉末剂或颗粒剂的形 式，或溶液剂或混悬剂的形式。对于口服给药，细粉末或颗粒剂可含有稀释、分散和或表面 活性剂且可存在于例如水中或糖浆中，以干燥状态存在于胶囊或小袋中，或存在于其中可 包含助悬剂的非水溶液或悬浮液中，或存在于其中可包含粘合剂和润滑剂的片剂中。该药 物组合物还可存在某些组分，例如甜味剂、调味剂、防腐剂（如抗微生物防腐剂）、助悬剂、 增稠剂和/或乳化剂。在以液体溶液剂或混悬剂给予时，该制剂可含有一种或多种活性化 合物和纯化的水。液体溶液剂或混悬剂中任选的组分包括合适的防腐剂（如抗微生物防腐 剂）、缓冲剂、溶剂及其混合物。制剂中的组分可具有超过一种功能。
[0087] 可以使用防腐剂。合适的防腐剂可包括，例如，对羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸 丙酯、苯甲酸钠和苯扎氯铵。任选可使用两种或多种防腐剂的混合物。防腐剂或其混合物 的存在量通常是约0.0001%至约2% (以组合物总重量计）。合适的缓冲剂可包括，例如， 柠檬酸、柠檬酸钠、磷酸、磷酸钾和多种其他酸和盐。任选可使用两种或多种缓冲剂的混合 物。缓冲剂或其混合物的存在量通常是约0.001 %至约4% (以组合物总重量计）。以下用 于口服、气溶胶、胃肠道外（例如皮下、静脉内、动脉内、肌内、皮内、腹膜内和鞘内）以及直 肠给药的制剂仅是示例性的而不是限制性的。
[0088] 适用于口服给药的制剂可由以下成分组成：（a)液体溶液，如溶解于稀释剂（如 水、盐水或橙汁）中的有效量的化合物；(b)胶囊剂、小袋剂、片剂、锭剂和糖锭剂，其各自含 有预定量的活性成分，如固体或颗粒形式；（C)粉末；（d)适当液体中的悬浮液；以及（e)合 适的乳液。液体制剂可包含稀释剂，如水和醇，例如乙醇、苯甲醇和聚乙烯醇，其中科添加 或不添加药学上可接受的表面活性剂、助悬剂或乳化剂。胶囊剂形式可以是普通的硬或软 壳明胶类型，含有例如表面活性剂、润滑剂和惰性填充剂，例如乳糖、鹿糖、磷酸钙和玉米淀 粉。片剂形式能包含一种或多种乳糖、蔗糖、甘露醇、玉米淀粉、马铃薯淀粉、藻酸、微晶纤维 素、阿拉伯胶、明胶、胶体二氧化硅、交联羧甲基纤维素钠、滑石、硬脂酸镁、硬脂酸钙、硬脂 酸锌、硬脂酸和其他赋形剂、着色剂、稀释剂、缓冲剂、崩解剂、润湿剂、防腐剂、调味剂和药 学上相容的运载体。锭剂形式能包含调味料（通常是蔗糖和阿拉伯胶或黄芪胶）中的活性 成分，以及含有惰性基料（如明胶和甘油）或蔗糖中活性成分的软锭剂，和阿拉伯胶、乳液、 凝胶等，其除活性成分以外还含有本领域已知的运载体。miR及其模拟物（单独或与其他合 适组分联用）可配置为气溶胶制剂以通过吸入给予。可将这些气溶胶制剂置于加压可接受 推进剂中，如二氯二氟甲烷、丙烷、氮气等。其还可配制为非加压制剂的药物，例如在喷雾器 或雾化器中。适于胃肠道外给予的制剂包括水性和非水性、等渗无菌注射溶液，能包含使该 制剂与预期接受者的血液等渗的抗氧化剂、缓冲液、抑菌剂和溶质，以及含有助悬剂、增溶 剂、增稠剂、稳定剂和防腐剂的水性和非水性无菌混悬剂。miR及其模拟物可在药物运载体 中的生理上可接受的稀释剂中给予，例如无菌液体或液体混合物，包括水、盐水、水性右旋 糖和相关糖溶液、醇（如乙醇、异丙醇或十六醇）、二醇（如丙二醇或聚乙二醇）、甘油缩酮 (如2, 2-二甲基-1，3-二氧环戊烷-4-甲醇）、醚（如聚（乙二醇）400)、油、脂肪酸、脂肪 酸酯或甘油酯、或添加或不添加药学上可接受的表面活性剂（如皂或去垢剂）的乙酰化脂 肪酸甘油酯、助悬剂（如果胶、卡波姆、甲基纤维素、羟丙基甲基纤维素或羧甲基纤维素）或 乳化剂和其他药学佐剂。
[0089] 可用于胃肠道外制剂的油包括石油、动物油、植物油或合成油。油的具体示例包括 花生油、大豆油、芝麻油、棉花籽油、玉米油、橄榄油、凡士林油和矿物油。可用于胃肠道外制 剂的脂肪酸包括油酸、硬脂酸和异硬脂酸。油酸乙酯和肉豆蔻酸异丙酯是合适的脂肪酸酯 的示例。
[0090] 用于胃肠道外制剂的合适的皂可包括脂肪碱金属、铵和三乙胺盐，且合适的去垢 剂包括（a)阳离子型去垢剂，例如二甲基二烷基卤化铵和卤化烷基吡啶嗡，（b)阴离子型 去垢剂，例如烷基、芳基和烯烃磺酸盐，烷基、烯烃、醚和单甘油磺酸盐，以及磺基琥珀酸酯， (c)非离子型去垢剂，例如脂肪胺氧化物、脂肪酸烷醇酰胺和聚氧乙烯-聚丙烯共聚物，（d) 两性去垢剂，例如烷基-β -氨基丙酸盐/酯和2-烷基-咪唑啉季铵盐，以及（3)其混合物。
[0091] 合适的防腐剂或缓冲剂可用于这类制剂。为最小化或消除注射位点处的刺激，这 类组合物可含有一种或多种非离子型表面活性剂，其具有约12至约17的亲水亲油平衡值 (HLB)。这类制剂中表面活性剂的量为约5重量％至约15重量％。合适的表面活性剂包括 聚乙烯脱水山梨醇脂肪酸酯，例如脱水山梨醇单油酸酯和环氧乙烷与疏水性碱的高分子量 加合物，其由环氧丙烷与丙二醇的浓缩形成。这些胃肠道外制剂可存在于单位剂量或多重 剂量密封容器中，例如安瓿和小瓶，并可储存于冷冻干燥（冻干）状态下，仅需要在使用前 加入无菌液体运载体，例如注射用水。可由无菌粉末剂、颗粒剂和片剂制备临时注射溶液剂 和混悬剂。
[0092] miR及其模拟物可以可注射制剂的形式给予。用于可注射组合物的有效药物运载 体的要求是本领域技术人员熟知的。参见Pharmaceutics and Pharmacy Practice (《药 理学和药剂学实践》），JBL公司（J.B. Lippincott Co.)，宾夕法尼亚州费城，Banker和 Chalmers 编，第 238-250 页（1982)，以及 ASHP Handbook on Injectable Drugs (《可注射 药物的ASHP手册》），ToiSSel，第4版，第622-630页（1986)。局部制剂（包括可用于透皮 药物释放的那些）是本领域技术人员熟知的并可适用于本发明的实施方式以用于向皮肤 施用。
[0093] 药物制剂中本发明的实施方式的化合物的粘度可以变化，例如，根据所选的具体 给药方式，从小于约1重量％ (通常是或至少约10重量％ )至多达20重量％至50重量％ 或更多，并可主要通过流体体积或粘度选择。用于制备可给药（如可胃肠道外给药）的组合 物的方法对本领域技术人员而言是已知和显而易见的并更详细地描述于例如Remington's Pharmaceutical Science (《雷明顿药物科学》）（第17版，马克出版公司（Mack Publishing Company)，宾夕法尼亚州伊斯顿，1985)。除了前述药物组合物外，miR及其模拟物还可配 制为包合配合物，例如环糊精包合配合物或脂质体。脂质体可用于将miR及其模拟物靶向 至特定组织。脂质体还可用于提高miR及其模拟物的半衰期。许多方法可用于制备脂质 体，例如参见 Szoka 等，Ann. Rev. Biophys. Bioeng.，9:467(1980)和美国专利 4, 235, 871、 4, 501，728、4, 837, 028 和 5, 019, 369。
[0094] 当本发明的试剂（如miR、miR模拟物）与一种或多种其他治疗剂一起给予时，可 向哺乳动物共同给予一种或多种其他治疗剂。"共同给予"指给予一种或多种其他治疗剂和 miR和/或其模拟物在时间上足够接近，使得miR和/或其模拟物能够增强一种或多种其 他治疗剂的效果。在这一方面，可首先给予miR和/或其模拟物并其次给予一种或多种其 他治疗剂，反之亦然。或者，可同时给予一种或多种其他治疗剂和miR和/或其模拟物。其 他治疗剂可以是包含野生型形式的编码序列的重组表达载体，该编码序列负责遗传性视网 膜营养不良并在适当启动子的控制下。其他治疗剂可包括神经保护性分子，如：生长因子如 睫状神经营养因子（CNTF)、神经胶质来源的神经营养因子（GDNF)、心肌营养素1、脑来源的 神经营养因子（BDNF)和基本成纤维细胞生长因子（bFGF)或视杆细胞来源的视锥活力因子 (如 RdCVF 和 RdCVF2)。
[0095] 用于本发明的实施方式的递送系统可包括时释、迟释和缓释递送系统，使得本发 明的组合物的递送先于（或有足够时间导致）待治疗位点的敏化。本发明的组合物可与 其他治疗剂或治疗联用。这类系统可避免重复给予本发明的组合物，从而提高对象和医师 的便利性，并可特别适用于本发明的某些组合物实施方式。许多类型的释放递送系统是本 领域技术人员可以获得和已知的。包括基于聚合物的系统，例如聚（丙交酯-乙交酯）、共 聚草酸酯（copolyoxalate)、聚己内酯、聚酯酰胺、聚原酸酯、多羟基丁酸和聚酐。含前述 聚合物的药物的微胶囊描述于例如美国专利5, 075, 109。递送系统还包括是脂质的非聚 合物系统，包括固醇如胆固醇、胆固醇酯和脂肪酸或中性脂肪如单、双或三甘油酯；水凝胶 递送系统；硅橡胶（sylastic)系统；基于肽的系统；蜡包衣；使用常规粘合剂和赋形剂的 压缩的片剂；部分融合的植入物；等。具体的示例包括但不限于：(a)侵蚀系统，其中活性 组合物以基质内的形式包含在内，例如参见美国专利4, 452, 775、4, 667, 014、4, 748, 034和 5, 239, 660以及（b)扩散系统，其中活性组分以受控速率从聚合物向外弥漫，例如参见美国 专利3, 832, 253和3, 854, 480。此外，可以使用基于泵的硬件递送系统，其中一些适用于植 入。
[0096] 通过参考下图非限制性实施例阐述本发明。
[0097] 图1.使用AAV. CMV.前体miR204注射的眼的ONL中的miR-204表达水平。㈧激 光捕获显微切割（LCM)之前（左图）和之后（右图）的视网膜切片。将含有外核层（ONL) 的显微切割样品收集起来用于RNA提取。（B)对三只动物的LCM收集的ONL的miRNA表达谱 分析，对这些动物在6周龄时使用AAV进行视网膜下注射并在3周后处死。对使用AAV. CMV. 前体miR204 (204inj)和AAV. CMV. EGFP (EGFP)注射的视网膜中提取的总RNA进行RT-qPCR 以测定表达水平。个体miRNA的表达水平针对sno234的水平标准化，该sno234用作对照。 视网膜下给予AAV. CMV.前体miR204载体使miR-204与内源性水平相比提高1. 5至2倍。 miR-124的水平不显著变化。缩写：GCL，神经节细胞层；INL，内核层；0NL，外核层；RPE，视网 膜色素上皮细胞。
[0098] 图2. P4时视网膜下递送AAV. CMV. EGFP和AAV. CMV.前体miR204载体后来自 Aipll_〃小鼠的视网膜的组织学分析。（A)P21时视网膜切片的DAPI染色。使用AAV. CMV. EGFP对照载体注射的Aipll - / -眼的ONL中仅存在一排细胞核（A中方图）。而使用AAV. CMV.前体miR204载体注射的对侧眼的ONL处细胞核的排数和密度都增加（B中方图）。其 他视网膜层（INUIPL和GCL)似乎未受影响。（C)该图显示与对侧眼（使用对照载体注射） 相比经治疗的眼（η = 11)中感光细胞细胞核的平均排数。缩写：〇NL，外核层；INL，内核层； IPL，内网层；GCL，神经节细胞层。
[0099] 图3.出生后第4天（P4)时视网膜下递送AAV. CMV. EGFP和AAV. CMV.前体miR204 载体后来自Aipir^小鼠的视网膜的免疫组织学分析。P21时视网膜切片上视杆细胞标志 物视紫红质（A，B)和视锥细胞标志物视锥抑制蛋白（C，D)免疫标记的共聚焦显微图像。与 使用EGFP对照载体注射的对侧眼相比，在使用AAV. CMV.前体miR204载体注射的眼的ONL 处观察到视杆细胞和视锥细胞标志物的染色增加。这些切片的DAPI染色示于E或F。缩 写：0NL，外核层；INL，内核层；IPL，内网层；GCL，神经节细胞层。
[0100] 图4.出生后第4天（P4)时视网膜下递送AAV. CMV. EGFP和AAV. CMV.前体miR204 载体后来自Aipir^小鼠的视网膜的M视蛋白免疫标记。P21时视网膜切片上视锥细胞 标志物M-视蛋白（A，B)的共聚焦显微图像。与使用EGFP对照载体注射的对侧眼相比，在 使用AAV. CMV.前体miR204载体注射的眼的ONL处观察到M-视蛋白的染色增加。这些切 片的DAPI染色示于C或D。缩写：0NL，外核层；INL，内核层；IPL，内网层；GCL，神经节细胞 层。
[0101] 图5^六￥介导的1^1^-204和1^1?1^1基因的组合递送后八丨？11-/-小鼠中视网膜 结构的部分保持。P30时视网膜切片的DAPI染色显示，与仅注射AAV. CMV. hAIPLl的对侧眼 (A)相比，在P4时视网膜下同时注射两种不同载体（AAV. CMV.前体miR204以及AAV. CMV. hAIPLl)后（B)，Aipll-/-小鼠中视网膜厚度（感光细胞细胞核数目）的部分保留。
[0102] 图6.出生后第4天AAV介导的miR-204递送后P347S视紫红质转基因小鼠的视 网膜功能。在P347S小鼠中，AAV.CMV.前体miR204的视网膜下注射（η = 16)导致注射后 一个月视网膜功能的改善，表示为与使用对照构建体AAV. CMV. EGFP注射的对侧眼相比（η =16)，b波ERG振幅统计学上显著地增加（Ρ〈0. 05)。
[0103] 图7.出生后第4天AAV介导的miR-204递送后视紫红质P347S转基因小鼠的视 网膜功能。P347S小鼠中AAV.CMV.前体miR204的视网膜下递送后获得的视网膜功能的改 善持续长达注射后至少2个月，表示为与使用对照AAV. CMV. EGFP注射的对侧眼相比，经治 疗的眼中b波ERG振幅增加 （η = 7)。
[0104] 图8. AAV介导的miR-204递送后P347S小鼠中感光细胞标志物的免疫组化分析。 P40视网膜切片上视锥标记物M-视蛋白（A，B)和S-视蛋白（E，F)的共聚焦显微图像。与 对侧的对照眼相比，在使用AAV. CMV.前体miR204载体注射的眼中观察到这些标志物的染 色增加。这些切片的DAPI染色分别示于C、D、G或H。缩写：ONL，外核层；INL，内核层；IPL， 内网层；RPE，视网膜色素上皮细胞。
[0105] 图9. AAV介导的miR-204递送后P347S小鼠中视网膜细胞死亡的减少。（A，B)来 自使用AAV.CMV.前体miR204 (B)和对照载体（A)注射的眼的TUNEL染色的视网膜切片的 共聚焦显微图像。这些切片的DAPI染色示于C或D。缩写：ONL，外核层；INL，内核层；IPL， 内网层。（E)通过对来自连续切片、定向的眼的相应切片进行计数来定量TUNEL阳性感光 细胞的数目。与使用对照载体注射的对侧眼相比，注射AAV. CMV.前体miR204后P347S小 鼠的视网膜中凋亡的感光细胞数目显著减少（70%，P〈0. 001) (η = 5个视网膜；误差线是 SEM ;***p〈0, 001)。
[0106] 图10 :AAV介导的miR-204递送后P347S小鼠中视网膜胶质细胞增生的减少。P40 视网膜切片上抗谷氨酰胺合成酶（GS6)免疫标记的共聚焦显微图像（A，B)。与对侧对照眼 相比，在使用AAV. CMV.前体miR204载体注射的眼中观察到活化的视网膜小胶质细胞数目 的减少（由GS6的染色检测）。这些切片的DAPI染色示于C或D。缩写：0NL，外核层；INL， 内核层；IPL，内网层。
[0107] 图11.出生后第4天时AAV介导的视紫红质（感光细胞特异性）启动子控制下 miR-204过表达后P347S视紫红质转基因小鼠的视网膜功能。在P347S小鼠中，视网膜下 注射AAV. RHO.前体miR204 (η = 5)，其中前体miR-204在感光细胞特异性（视紫红质）启 动子控制下，导致视网膜功能的改善，表示为与注射对照AAV. CMV. EGFP (η = 5)的对侧眼相 比，治疗的眼中b波ERG振幅统计学显著地增加。
[0108] 图12.出生后第4天AAV介导的miR-211递送后P347S视紫红质转基因小鼠中视 网膜功能的改善。在P347S小鼠中，视网膜下注射AAV. CMV.前体miR204(n = 4)和AAV. CMV.前体miR211 (η = 9)都导致与注射对照AAV. CMV. EGFP(n = 7)的对侧眼相比，治疗的 眼中b波ERG振幅出现高度类似的增加。
[0109] 图13. AAV介导的miR-211递送后P347S小鼠中视锥细胞标志物的免疫组化分析。 P40视网膜切片上视锥标志物M-视蛋白（A，B)和S-视蛋白（E，F)的荧光显微图像。与对 侧的对照眼相比，在使用AAV. CMV.前体miR211载体注射的眼中观察到这些标志物的染色 增加。这些切片的DAPI染色分别示于C、D、G或H。缩写：ONL，外核层；INL，内核层；IPL， 内网层；GCL，神经节细胞层。
[0110] 图14. AAV介导的miR-204递送后的成年阶段野生型C57/BL6小鼠的视网膜功能。 在成年野生型小鼠中，视网膜下注射AAV. CMV.前体miR204不会损害视网膜功能，表示为治 疗的眼（η = 35)中的b波ERG响应与注射对照AAV. CMV. EGFP的对侧眼（η = 35)类似。
[0111] 图15.在出生后第4天AAV介导的miR-204递送后野生型C57/BL6小鼠的视网膜 功能。在野生型幼鼠中，出生后第4天（P4)视网膜下注射AAV.CMV.前体miR204不会显著 损害视网膜功能，表示为治疗的眼（η = 13)中的b波ERG响应与注射对照AAV. CMV. EGFP 的对侧眼（η = 12)类似。
[0112] 图16.出生后第4天AAV介导的miR-204递送后P347S视紫红质转基因小鼠的视 网膜功能。在P347S小鼠中，AAV.CMV.前体miR204的视网膜下注射（η = 39)导致注射后 一个月视网膜功能的改善，表示为与使用对照构建体AAV. CMV. EGFP注射的对侧眼相比（η =56)，b波ERG振幅统计学上显著地增加（Ρ〈0. 05)。
[0113] 图17^六￥介导的1^1^-204/211递送后的成年阶段野生型057作1^小鼠的视网膜 功能。在成年野生型小鼠中，视网膜下注射AAV.CMV.前体miR204/miR211不会损害视网膜 功能，表示为治疗的眼（η = 11)中的b波ERG响应与注射对照AAV. RHO. EGFP的对侧眼（η =11)类似。
[0114] 图18.来自成年野生型小鼠的视网膜切片中的miR-204/211表达。使用 miRCURY?LNA 检测探针（Exiqon)对 miR-204 进行 RNA ISH。在神经视网膜中，miR-204/211 强力表达于INL和GCL而在感光层（0NL和OS)未检测到表达。缩写：GCL，神经节细胞层； INL，内核层；IPL，内网层；0NL，外核层。
[0115] 图19. 3个月时miR-211敲除小鼠中的视网膜功能。与野生型（WT)相比，观察到 miR-211纯合（OMO)和杂合（HET)KO小鼠中b波ERG振幅的统计学显著降低（P〈0. 05)。
[0116] 图20.人眼。a)人眼的示意图。b)人视网膜的截面图，显示其分层结构，由以 下层组成：⑴神经节细胞层，其轴突形成视神经，其将视网膜与脑连接；⑵内核层，其 含有二级神经元，例如双极、无长突和水平细胞；（3)感光细胞（PR)的外核层，其含有视 杆细胞和视锥细胞的细胞体和细胞核；(4) PR外节，其与含视蛋白的盘致密堆积且由狭窄 的200 - 500nm长衔接纤毛（不可见）与内节和细胞体隔开；以及（5)视网膜色素上皮细 胞（RPE)，含有紧密连接的单层细胞，其将神经视网膜与脉络膜隔开，后者向RPE和PR (外 视网膜）供血。应注意，感光细胞存在于层⑶和⑷且与RPE(5)显著不同。修改自： Photoreceptor degeneration:genetic and mechanistic dissection of a complex trait (感光细胞退化：复杂性状的遗传和机械解析）.Wright AF, Chakarova CF, Abd El-Aziz MM，Bhattacharya SS.Nat Rev 〇6的1;.2010年4月；11(4):273-84。
[0117] 发明详述
[0118] 材料与方法
[0119] 序列
[0120] >hsa-mir-204 SEQ ID NO:6
[0121] GGCUACAGUCUUUCUUCAUGUGACUCGUGGAC uugcctuugucauccuaugcct GAGAAUAUAUGAAG GAGGCUGGGAAGGCAAAGGGACGUUCAAUUGUCAUCACUGGC
[0122] -成熟序列（粗体）从碱基33至碱基54
[0123] -种子序列（下划线）从碱基33至碱基39
[0124] >mmu-mir-204 SEQ ID NO:7
[0125] UGGAC uucCCTUUGUCAUCCUAUGCCU GAGAAUAUAUGAAGGAGGCUGGGAAGGCAAAGGGACGUUCA
[0126] -成熟序列（粗体）从碱基6至碱基27
[0127] -种子序列（下划线）从碱基6至碱基12
[0128] >hsa-mir-211 SEQ ID NO:8
[0129] UCACCUGGCCAUGUGACUUGUGGGC uucccuuugucauccuucgccu AGGGCUCUGAGCAGGGCAGGG ACAGCAAAGGGGUGCUCAGUUGUCACUUCCCACAGCACGGAG
[0130] -成熟序列（粗体）从碱基26至碱基47
[0131] -种子序列（下划线）从碱基26至碱基32
[0132] >mmu-mir-211 SEQ ID NO:9
[0133] CUGCUUGGACCUGUGACCUGUGGGC uucccuuugucaugcuuugccu AGGCCUCUGA⑶GAGGCAAGG ACAGCAAAGGGGGGCUCAGUGGUCACCUCUACUGCAGA
[0134] -成熟序列（粗体）从碱基26至碱基47
[0135] -种子序列（下划线）从碱基26至碱基32
[0136] >pAAV.CMV.前体 miR204SEQ ID N0:10
[0137] 下划线序列是前体_miR204的序列
[0138] AGCGCCCAATACGCAAACCGCCTCTCCCCGCGCGTTGGCCGATTCATTAATGCAGCTGGCACGACAGGT TTCCCGACTGGAAAGCGGGCAGTGAGCGCAACGCAATTAATGTGAGTTAGCTCACTCATTAGGCACCCCAGGCTTTA CACTTTATGCTTCCGGCTCGTATGTTGTGTGGAATTGTGAGCGGATAACAATTTCACACAGGAAACAGCTATGACCA TGATTACGCCAGATTTAATTAAGGCTGCGCGCTCGCTCGCTCACTGAGGCCGCCCGGGCAAAGCCCGGGCGTCGGGC GACCTTTGGTCGCCCGGCCTCAGTGAGCGAGCGAGCGCGCAGAGAGGGAGTGGCCAACTCCATCACTAGGGGTTCCT TGTAGTTAATGATTAACCCGCCATGCTACTTATCTACGTAGCCATGCTCTAGGAAGATCGGAATTCGCCCTTAAGCT AGCTAGTTATTAATAGTAATCAATTACGGGGTCATTAGTTCATAGCCCATATATGGAGTTCCGCGTTACATAACTTA CGGTAAATGGCCCGCCTGGCTGACCGCCCAACGACCCCCGCCCATTGACGTCAATAATGACGTATGTTCCCATAGTA ACGCCAATAGGGACTTTCCATTGACGTCAATGGGTGGAGTAT
[0139] TTACGGTAAACTGCCCACTTGGCAGTACATCAAGTGTATCATATGCCAAGTACGCCCCCTATTGACGTC AATGACGGTAAATGGCCCGCCTGGCATTATGCCCAGTACATGACCTTATGGGACTTTCCTACTTGGCAGTACATCTA CGTATTAGTCATCGCTATTACCATGGTGATGCGGTTTTGGCAGTACATCAATGGGCGTGGATAGCGGTTTGACTCAC GGGGATTTCCAAGTCTCCACCCCATTGACGTCAATGGGAGTTTGTTTTGGCACCAAAATCAACGGGACTTTCCAAAA TGTCGTAACAACTCCGCCCCATTGACGCAAATGGGCGGTAGGCGTGTACGGTGGGAGGTCTATATAAGCAGAGCTGG TTTAGTGAACCGTCAGATCCTGCAGAAGTTGGTCGTGAGGCACTGGGCAGGTAAGTATCAAGGTTACAAGACAGGTT TAAGGAGACCAATAGAAACTGGGCTTGTCGAGACAGAGAAGACTCTTGCGTTTCTGATAGGCACCTATTGGTCTTAC TGACATCCACTTTGCCTTTCTCTCCACAGGTGTCCAGGCGGCCGCCTGTTCAGGACTTGGCTAAGCATTGCTTTGAA CAAAATATCAAACAAGGACTCAAGGGGCAGAGAATGCTGGTCAGTGGCTAAGATGCCGGAGAATCAAGATGAGCAGG AAATGAAGAGGTTGGCTAAGAGGGGCAGAGGAGGCAGGCGGAGGAGCTCCTGACCGTGTACCATGGCTACAGTCCTT CTTCATGTGACTCGTGGACTTCCCTTTGTCATCCTATGCCTGAGAATATATGAAGGAGGCTGGGAAGGCAAAGGGAC GTTCAATTGTCATCACTGGCATCTTTTTTGATCATTACACCATCATCAAAAGCATTTGGATAACCATAACATGAAAA TTACCATCATTGAGCCCATAACTTTCCTAAGACAAGGGTGACAATTTGAAACATCAAAGAACCTTACCCAGGGAATT CAAGAAGTGAGAAGAGTGAATCAGATTCTCCCAGATTAACAACCCCATGTTGGATCCAATCAACCTCTGGATTACAA AATTTGTGAAAGATTGACTGGTATTCTTAACTATGTTGCTCCTTTTACGCTATGTGGATACGCTGCTTTAATGCCTT TGTATCATGCTATTGCTTCCCGTATGGC