r>【具体实施方式】
[0018] 为了使本发明更加容易理解，下面结合具体实施例，进一步阐述本发明。应理解， 运些实施例仅用于说明本发明而不用于限制本发明的范围。
[001引实施例1 一种鸡新城疫、禽流感特异性病毒稀释液，该病毒稀释液每1000ml憐酸缓冲液中含 有：氨基酸组合3g(其中天冬氨酸0. 9g、脯氨酸0. 9g、谷氨酷胺1. 2g)、维生素组合5g(其 中维生素B1 1.5g、维生素B3 1.75g、维生素B7 1.75g)、复方中药多糖40g、亚砸酸钢4mg， 该稀释液抑为7.0。
[0020] -种鸡新城疫、禽流感特异性病毒稀释液的制备方法，其步骤是： (1)憐酸缓冲溶液的配制：按上述憐酸盐缓冲液配方准确称取氯化钢8g，氯化钟0. 2g， 憐酸氨二钢1. 15g，憐酸二氨钟0. 2g，氯化巧0.Ig，含6个结晶水的氯化儀0.Ig溶于1000ml 双蒸水中，无菌条件下通过0. 22μm滤膜，过滤除菌备用。
[0021] (2)复方中药多糖的制备 a、按比例称取所述中药原料，切碎、洗净后用冷水浸泡过夜，再加入原料重量15倍的 纯化水，水浴至90°C，并保持在90°C，熬制2小时，熬制过程中每10分钟揽拌一次。
[0022] b、弃去a中药渣，收集药液，室溫冷却后经1000化pm离屯、10分钟，弃去沉淀，收集 上清。
[0023] C、采用公知的醇沉法，将b中上清进行醇沉，沉淀为粗制中药多糖。
[0024] t用灭菌纯化水洗涂c中粗制多糖，洗涂后用20倍量的42°C灭菌纯化水进行溶 解，溶解后，按0. 5%比例加入活性炭4°C吸附过夜，吸附后经1000化pm离屯、10分钟，弃去沉 淀，收集上清。
[0025] e、采用公知的真空减压浓缩法，将d中上清液进行10倍浓缩，制得中药多糖浓缩 液。
[0026]f、采用公知的真空冷冻干燥法，将e中药多糖浓缩液进行真空冷冻干燥制得复合 中药多糖冻干粉。
[0027] (3)接种鸡胚用病毒稀释液配制：按上述优选稀释液组分数准确称取天冬氨酸 〇.9g、脯氨酸0.9g、谷氨酷胺1.2g、维生素B1 1.5g、维生素B31.75g、维生素B7 1.75g、复 方中药多糖40g，亚砸酸钢4mg，按比例溶解于步骤（1)中的1000ml憐酸缓冲溶液中，充分 混匀，用酸或碱调节pH至7. 0,无菌条件下通过0. 22μm滤膜，过滤除菌后置4°C保存备用。 [002引实施例2 一种鸡新城疫、禽流感特异性病毒稀释液，该病毒稀释液每1000ml憐酸缓冲液（由氯 化钢lOg，氯化钟0. 5g，憐酸氨二钢1. 2g，憐酸二氨钟0. 5g，氯化巧0. 2g，含6个结晶水的 氯化儀0. 2g溶于1000ml双蒸水中得到）中含有：氨基酸组合4g(其中天冬氨酸2g、脯氨 酸0.8g、谷氨酷胺1.2g)、维生素组合6g(其中维生素B1 2. Ig、维生素B3 1.2g、维生素B7 2. 7g)、复方中药多糖50g(由海藻20份、地肤子5份、桑叶10份、牵牛子5份和丹参10份 提取得到)、亚砸酸钢2mg，该稀释液抑为7. 0。
[0029] 一种鸡新城疫、禽流感特异性病毒稀释液的制备方法，其步骤同实施例1。
[0030] 实施例3 一种鸡新城疫、禽流感特异性病毒稀释液，该病毒稀释液每1000ml憐酸缓冲液（由氯 化钢6g，氯化钟0. 05g，憐酸氨二钢Ig，憐酸二氨钟0. 05g，氯化巧0. 05g，含6个结晶水的 氯化儀0. 05g溶于1000ml双蒸水中得到)中含有：氨基酸组合2g(其中天冬氨酸0. 4g、脯 氨酸〇.8g、谷氨酷胺0.8g)、维生素组合3g(其中维生素B1 0.45g、维生素B3 1.5g、维生素 B71. 05g)、复方中药多糖20g(海藻40份、地肤子20份、桑叶30份、牵牛子20份和丹参30 份)、亚砸酸钢lOmg，该稀释液抑为7.2。
[0031] 一种鸡新城疫、禽流感特异性病毒稀释液的制备方法，其步骤同实施例1。
[0032] 实施例4 :一种鸡新城疫、禽流感同胚培养的方法，采用鸡新城疫、禽流感特异性 病毒稀释液稀释新城疫病毒至1000-5000倍，稀释禽流感病毒至5000-10000倍，分别在4°C 解育30-60分钟后按1:1比例混合均匀，接种9-10日龄鸡胚，0. 1-0. 15ml/胚，36-37Γ继续 培养至96小时，弃去48小时前死亡鸡胚，收获48-96小时死活胚液，既得鸡新城疫病毒、禽 流感病毒混合病毒液。
[0033] 实施例5 :-种鸡新城疫、禽流感特异性病毒稀释液的使用方法 1)鸡新城疫、禽流感特异性病毒稀释液及其配制，方法同实施例1。
[0034] 2)接种毒液的配制 (1)开启种毒分别取鸡新城疫种毒和鸡禽流感种毒，无菌条件下开启种毒。
[0035] (2)恢复原量用鸡新城疫、禽流感特异性病毒稀释液将鸡新城疫种毒和禽流感 种毒恢复至原量。
[0036] (3)稀释种毒用鸡新城疫、禽流感特异性病毒稀释液将鸡新城疫毒种稀释至 5000倍，禽流感种毒稀释至80000倍。
[0037] (4)解育将稀释后毒液分别置于4°C解育40分钟，备用。
[003引（5)混合将解育后的鸡新城疫毒液和禽流感毒液按1:1 (V:V)比例混合均匀。
[0039] 2)接种与培养繁殖 (1)接种鸡胚的选择 选择发育良好的10日龄SPF鸡胚，1000枚。
[0040] (2)接种 取混合后病毒液，每胚尿囊腔内接种0. 1ml。接种后密封针孔，置36~37°C继续解育， 不必翻蛋。
[0041] (3)解育和观察 鸡胚接种后，每日照蛋一次，将在60小时前死亡的鸡胚弃去。60小时后，每4~8小时 照蛋一次，死亡鸡胚随时取出，直至120小时，不论死亡与否，全部取出，气室向上直立，置 于2~8°C冷却。
[0042] (4)收获 将冷却4~24小时的鸡胚取出，用舰町消毒气室部位，然后W无菌手术剥除气室部卵 壳，掲去卵壳膜，剪破绒毛尿囊膜及羊膜(勿使卵黄破裂)，吸取鸡胚液，每若干个鸡胚的胚 液混合为一组。收获后的胚液置于灭菌容器中，加入适宜的抗生素，在2~8°C冰库处理。 留样后，结冻保存。在收获胚液的同时，逐个检查鸡胚，如胎儿腐败、胚液混浊及有任何污染 可疑者弃去不用。
[0043] (5)病毒悬液检验 无菌检验：经处理过的胚液，每组分别取样，按《无菌检验或纯粹检验操作规程》进行无 菌检验，应无细菌生长。
[0044] 病毒含量测定：按含毒鸡胚液量用灭菌生理盐水作10倍系列稀释至10 4,分别取 1ml于2只灭菌试管中，第一只管加入等量鸡新城疫阳性血清，第二只加入等量禽流感阳性 血清，室溫中和1小时（中间摇1次)，第一管继续10倍系列稀释，取3个适宜稀释度各尿 囊腔内接种10日龄SPF鸡胚5个，每胚0. 1ml，置36~37°C继续解育，48小时W前死亡的 鸡胚弃去不计，在48~120小时死亡的鸡胚随时取出，收获鸡胚液，同一稀释度的胚液等 量混合，按稀释度分别测定红细胞凝集价，至120小时，取出所有活胚，逐个收获鸡胚液，分 别测定红细胞凝集价，凝集价> 1:16者判为感染，计算EIDs。，每0. 1ml病毒含量应不低于 10??。。第二管继续10倍系列稀释，取3个适宜稀释度各尿囊腔内接种10日龄SPF鸡 胚5个，每胚0. 1ml，置36~37°C继续解育，48小时W前死亡的鸡胚弃去不计，在48~120 小时死亡的鸡胚随时取出，收获鸡胚液，同一稀释度的胚液等量混合，按稀释度分别测定红 细胞凝集价，至120小时，取出所有活胚，逐个收获鸡