细胞浓缩液的制造方法以及细胞悬浊液处理系统的制作方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及使用具有填充了中空纤维分离膜的细胞悬浊液处理器的细胞悬浊液处理系统来对细胞悬浊液进行浓缩的技术。
【背景技术】
[0002]在细胞医疗的领域中将用于治疗的细胞投药于患者的情况下，存在从生物体采取后马上投药于患者的情况，也存在暂时在生物体外培养后再次投药于患者的情况。一般，用于这些治疗的细胞通过适于治疗的悬浊液清洗，经过浓缩为适于投药的液量等细胞调制过程后，进行移植。清洗是指将悬浊有细胞的体液、培养基等置换为生理盐水、输液等。通过对细胞浓缩液进行反复进行稀释与浓缩的清洗处理，能够除去细胞浓缩液中的不需要的异物，从而能够在向人、动物的移植中适当地使用。
[0003]用于细胞医疗的细胞贵重，得到较多的细胞存在限制的情况占大多数，因此必须极力避免在细胞调制过程中损失细胞。另外，存在混入悬浊液中的成分对治疗带来负面影响的担忧，因此需要进行清洗，尽可能除去混入的成分。
[0004]根据以上内容，在细胞调制过程中，减少细胞的损失、极力减少不需要的成分混入细胞悬浊液来调制细胞是影响其后的治疗成果的重要课题。
[0005]作为细胞调制方法，公知有例如，使用了离心分离的浓缩、清洗操作。使用离心分离的方法为了细胞的浓缩清洗，通过使细胞悬浊液存积于封闭容器进行离心分离来使细胞沉淀。其后，在净化操作台等，打开容器除去悬浊液的上清液。此时，细胞向大气敞开，存在污染等的品质的劣化的可能性。因此，提出在封闭系统的离心操作(专利文献1)，从而担忧装置大型、成本增大。
[0006]另外，作为其他细胞调制方法，提出使用了旋转膜过滤器的细胞悬浊液的浓缩清洗方法(专利文献2)。根据该方法能够使装置紧凑简便，另外能够在封闭系统的回路无菌地操作细胞。但是，根据上述专利文献2，形成如下手段:为了自动地进行浓缩清洗工序，利用计重秤测定存积容器的重量并将重量变化反馈于工序的控制，从而自动地进行工序。然而，重量的变化中准确性、响应性存在担忧，从而工序切换是否正确地进行存在担忧，进而存在细胞悬浊液的浓缩、清洗未准确地进行，品质方面有缺陷的担忧。
[0007]与此相对地，提出使用过滤单元进行过滤、清洗的系统(专利文献3)。该系统是以将因手术等损失的患者血液再利用为目的系统。记载有在该系统中，边对存储于储藏槽的血液使用液面的液位传感器，边将存储于储藏槽的血液量保持在固定范围内。该方法中，通过气泡检测器对系统内的气泡进行检测来进行工序的控制。通过这样的气泡的检测进行控制，从而能够正确地迅速掌握回路内的液量，因此能够期待各工序的切换立即准确地进行。另一方面，上述的系统是以血液为对象的系统，血液处理中气泡的混入有害，因此未假设将检测气泡的系统用于作为细胞调制过程的目的不需要的成分的除去、为了减少投药的液量而进行浓缩的系统。另外，在以血液作为对象的浓缩系统中，如上述专利那样使用中空纤维，但在使用中空纤维膜的情况下，根据中空纤维的种类，存在气泡的混入对中空纤维的分离性能产生负面影响并对清洗效率产生影响的担忧。
[0008]专利文献1:日本特表2007 - 524396号公报
[0009]专利文献2:日本专利第4307714号公报
[0010]专利文献3:日本专利第3012689号公报
【发明内容】
[0011]本发明的目的在于解决使用了中空纤维分离膜的细胞浓缩液的制造中的上述课题，在于提供细胞的损失以及污染的担忧低、对细胞的损伤低、而且高精度地制造细胞浓缩液的方法。
[0012]另外，本发明的另一目的在于提供能够高效地制造上述那样的细胞浓缩液的细胞悬浊液处理系统。
[0013]本发明人们为了解决上述课题重复深入研究，结果发现，使用具备:与填充了中空纤维分离膜的细胞悬浊液处理器一起存积细胞的容器、检测该存积容器内或者将存积容器与细胞悬浊液处理器连通的管内的液量的设备、以及以使细胞悬浊液一边在存积容器与细胞悬浊液处理器之间循环一边可进行浓缩的方式连接的回路的细胞悬浊液处理系统，对上述存积容器内或者将上述存积容器与细胞悬浊液处理器连通的管内的液量进行检测，对基于上述循环的浓缩进行控制，由此细胞的污染的担忧低，对细胞的损伤低，细胞损失的担忧小，而且，发现能够高效率地制造细胞浓缩液，由此以至完成本发明。
[0014]S卩，本发明所提供的如以下那样。
[0015](1) 一种细胞浓缩液的制造方法，使用细胞悬浊液处理系统，该细胞悬浊液处理系统具备:
[0016]细胞悬浊液的存积容器，其具有溶液入口、循环出口以及循环入口 ；
[0017]细胞悬浊液处理器，其在具有细胞悬浊液导入口、细胞悬浊液导出口以及滤液用出口的容器内填充有中空纤维分离膜，用于从细胞悬浊液过滤液体而进行浓缩；
[0018]循环回路，其具有将上述存积容器的循环入口与上述细胞悬浊液处理器的细胞悬浊液导入口连通的导入用连通管、以及将上述细胞悬浊液处理器的细胞悬浊液导出口与上述存积容器的循环出口连通的导出用连通管，用于使细胞悬浊液一边在存积容器以及细胞悬浊液处理器之间循环一边进行浓缩；
[0019]被浓缩后的细胞浓缩液的回收容器；
[0020]回收路径，其用于将上述存积容器内、上述细胞悬浊液处理器内以及上述循环回路内的细胞浓缩液送至上述回收容器；
[0021]注入路径，其用于向上述存积容器的溶液入口注入溶液；以及
[0022]检测单元，其用于检测上述存积容器内或者循环回路的导入用连通管内的细胞浓缩液的液量，
[0023]在上述细胞浓缩液的制造方法中，
[0024]包括:
[0025]a)从上述溶液入口将细胞悬浊液供给到存积容器而进行存积的工序；
[0026]b)使存积容器内的细胞悬浊液经由循环回路的导入用连通管朝细胞悬浊液处理器流通，然后经由循环回路的导出用连通管向存积容器循环而将细胞悬浊液浓缩的工序；
[0027]c)通过对存积容器内或者循环回路的导入用连通管内的细胞浓缩液的液量进行检测，使上述b)工序停止的工序；以及
[0028]d)使上述存积容器内、上述细胞悬浊液处理器内以及循环回路内的细胞浓缩液经由回收路径送至回收容器而进行回收的工序。
[0029](2)上述细胞浓缩液的制造方法中，在c)工序后，从上述存积容器的溶液入口将稀释液注入存积容器而将存积容器内的细胞浓缩液稀释之后，进一步反复b)工序以及c)工序。
[0030](3)上述细胞浓缩液的制造方法中，在a)工序前，从溶液入口注入预充液(priming solut1n ；7° 7 ^ ^ >夕'液)，进行预充。
[0031](4)上述细胞浓缩液的制造方法中，并行实施a)工序和b)工序。
[0032](5)上述细胞浓缩液的制造方法中，检测循环回路内的液量的检测单元是上述循环回路的导入用连通管所具备的气泡传感器。
[0033](6)上述细胞浓缩液的制造方法中，检测存积容器内的液量的检测单元是在与存积容器平行且与存积容器下部连通的回路上所具备的一个以上的气泡传感器。
[0034](7)上述细胞浓缩液的制造方法中，在与上述存积容器下部连通的回路具备腔室。
[0035](8)上述细胞浓缩液的记载的制造方法中，在上述注入路径具备气泡传感器。
[0036](9) 一种细胞悬浊液处理系统，具备:
[0037]细胞悬浊液的存积容器，其具有溶液入口、循环出口以及循环入口 ；
[0038]细胞悬浊液处理器，其在具有细胞悬浊液导入口、细胞悬浊液导出口以及滤液用出口的容器内填充有中空纤维分离膜，用于从细胞悬浊液过滤液体而进行浓缩；
[0039]循环回路，其具有将上述存积容器的循环入口与上述细胞悬浊液处理器的细胞悬浊液导入口连通的导入用连通管、以及将上述细胞悬浊液处理器的细胞悬浊液导出口与上述存积容器的循环出口连通的导出用连通管，用于使细胞悬浊液一边在存积容器以及细胞悬浊液处理器之间循环一边进行浓缩；
[0040]回收容器，其回收被浓缩后的细胞浓缩液；
[0041]回收路径，其用于将上述存积容器内、上述细胞悬浊液处理器内以及上述循环回路内的细胞浓缩液送至上述回收容器；
[0042]注入路径，其用于向上述存积容器的溶液入口注入溶液；
[0043]检测单元，其用于检测上述存积容器内或者循环回路的导入用连通管内的细胞浓缩液的液量；以及
[0044]控制单元，其通过上述检测单元对细胞浓缩液浓缩至规定的液量进行检测，使细胞浓缩液从上述存积容器朝细胞悬浊液处理器的输送停止。
[0045](10)上述细胞悬浊液处理系统中，检测循环回路内的液量的检测单元是上述循环回路的导入用连通管所具备的气泡传感器。
[0046](11)上述细胞悬浊液处理系统中，检测存积容器内的液量的检测单元是在与存积容器平行且与存积容器下部连通的回路上所具备的气泡传感器。
[0047](12)上述细胞悬浊液处理系统中，在与上述存积容器下部连通的回路具备腔室。
[0048](13)上述细胞悬浊液处理系统中，在上述注入路径具备气泡传感器。
[0049](14)上述细胞悬浊液处理系统中，上述溶液入口、循环出口以及循环入口全部位于存积容器的下部。
[0050](15)上述细胞悬浊液处理系统中，在存积容器上部附近具备通气口，使存积容器内成为大气敞开系统。
[0051]本发明中，使用具备:与填充了中空纤维分离膜的细胞悬浊液处理器一起存积细胞的容器、将上述存积容器与上述细胞悬浊液处理器连接的回路、以及对上述存积容器内或者将存积容器与细胞悬浊液处理器连通的管内的液量进行检测的设备的细胞悬浊液处理系统，通过上述检测单元对细胞浓缩液浓缩至规定的液量的情况进行检测，使从上述存积容器朝细胞悬浊液处理器的细胞浓缩液的输送停止，由此能够在无菌的封闭系统高精度地制造对细胞的损伤低、细胞损失以及污染的担忧小的细胞浓缩液。因此，被浓缩了的细胞能够用于细胞治疗用。并且，在上述细胞悬浊液处理系统对预先处理条件进行编程而进行了细胞浓缩液制造的自动化的情况下，也能够高效地生产细胞浓缩液。
[0052]另外，细胞浓缩液的制造方法中，在细胞浓缩结束后，将稀释液注入存积容器而稀释了存积容器内的细胞浓缩液后，进一步反复进行b)浓缩工序以及c)浓缩停止工序，从而除去细胞浓缩液中的不需要的成分，能够得到纯度更高的细胞浓缩液。
[0053]另外，在细胞浓缩液的制造方法中，在a)存积工序前，从溶液入口注入预充液，进行预充，从而能够作业性良好地进行细胞浓缩。
[0054]另外，在细胞浓缩液的制造方法中，并行实施a)存积工序与b)浓缩工序，从而能够缩短处理时间。
[0055]另外，检测上述细胞悬浊液处理系统的循环回路内的液量的检测单元是上述循环回路的导入用连通管所具备的气泡传感器，从而与检测存积容器内的液量的情况相比，能够进一步浓缩细胞悬浊液，因此能够减少被浓缩的悬浊液量，能够降低悬浊液中的不需要的成分的量。
[0056]另外，检测上述存积容器内的液量的检测单元是在与存积容器平行且与存积容器下部连通的回路上所具备的一个以上的气泡传感器，从而与如检测存积容器的液面的情况那样需要检测范围大的气泡传感器相比，检测回路内的液面检测范围小，而能够通过更紧凑的气泡传感器来应对。