一种酿酒酵母及其在制备皮肤外用剂中的应用
【技术领域】
[0001] 本发明涉及微生物领域，具体涉及一种酿酒酵母及其在制备皮肤外用剂中的应 用。
【背景技术】
[0002] 自由基衰老学说（Harman，D·Aging:Atheorybasedonfreeradicaland radiationchemistry.J.Gerontol· 1956，11: 289-300)，认为过多的自由基是造成生物老 化的重要原因。根据这一理论，体内过量的活性氧自由基与不饱和脂肪酸作用产生丙二醛 等物质，丙二醛与细胞膜上的蛋白质等作用产生褐色素，沉淀于皮肤成为各种色斑。过量的 自由基还能使皮肤内的胶原纤维、弹性纤维发生交联变性、变脆、失去弹性，当皮肤水分不 足时，容易使弹性纤维断裂，出现暗纹、细纹、皱纹等皮肤老化现象。此外，环境中的离子辐 射以及诸如空气污染与化学物质的环境污染物，也会使生物体内不断地产生自由基。例如 紫外线会使皮肤真皮中的纤维母细胞及粒线体受到刺激，进而释放出超氧阴离子，而过量 的超氧阴离子则会转换成其它破坏性更强的自由基。
[0003] 虽然人体内具有能够维持氧化与抗氧化之间平衡状态的抗氧化防御系统，用以减 缓活性氧及自由基的产生，但若长期过度地曝晒在阳光下，则人体内大量产生的自由基会 导致皮肤的抗氧化防御能力降低，造成皮肤的伤害，例如光老化、表皮皱纹、皮肤免疫力失 调等。目前已知有维生素E、维生素C等生物体内的清除自由基型抗氧化剂，另外也报道了植 物来源的抗氧化剂如莲花、梅果提取物等。
[0004] 皮肤老化的原因可以分为光老化和内因引起的老化，紫外线(UV)暴露引起的光老 化会引起皮肤弹性蛋白酶的活性增加。目前已知有植物来源的抗老化活性物有寥蓝、香豌 豆等。
[0005] 酿酒酵母(Saccharomycescerevisiae)是单细胞真菌，形态通常有球形、卵圆形 等，一般为1~5微米至5~30微米，有细胞壁、细胞膜、细胞核、细胞质结构。酿酒酵母主要生 长在偏酸性的潮湿的含糖环境中，菌体含有丰富的蛋白质、脂肪、糖分和B族维生素等，以及 酶、辅酶、核糖核酸、留醇和一些新陈代谢的中间产物，具有丰富的营养价值。酿酒酵母丰富 的代谢产物可利用于药物或化妆品的制备中，如SAM、NAD(H)激酶、Pos5p、胞外多糖、金属硫 蛋白等。SAM是半胱氨酸、牛磺酸和谷胱甘肽等重要物质的前体。如谷胱甘肽是美国Merle Norman经典作品，风行欧美50年，堪称世纪美白祛斑经典。NAD(Η)激酶的缺失将导致细胞抗 氧化性能出现障碍。在细胞面临不同类型的氧化胁迫时，P〇s5p都能有效行使其NAD(H)激酶 活性，补充NADP(H)的损耗，从而对细胞起到抗氧化保护作用。酿酒酵母多糖作为多糖中的 一种，研究发现其具有多种生理活性，能够提高机体免疫力，还具有抗氧化、抗病毒和抑制 肿瘤等作用。
[0006] 尽管来源于微生物的具有抗氧化清除自由基和抗衰老活性作用的抗老化物质正 日渐得到护肤产业的重视，但是目前仍然缺乏具有抵御紫外线能力强、糖苷酶活性强的酿 酒酵母。
【发明内容】
[0007]本发明所要解决的技术问题是，针对目前缺乏具有抵御紫外线能力强、糖苷酶活 性强的酿酒酵母的不足，提供一种抵御紫外线能力强、糖苷酶活性强的酿酒酵母及其在制 备皮肤外用剂中的应用。
[0008] 本发明的技术方案之一是:一种酿酒酵母(Saccharomycescerevisiae)，其保藏 在中国典型培养物保藏中心(CCTCC)，保藏号为:CCTCCNo:M2015725。
[0009] 将购自中国工业微生物菌种保藏管理中心（ChinaCenterofIndustrial CultureCollection，CICC)的酿酒酵母菌株通过神舟十号载人飞船搭载进入太空，历经15 天的太空搭载后，经选择获得所述的酿酒酵母CCTCCNo:M2015725。所述的酿酒酵母CCTCC No:Μ2015725在PDA液体培养基中生长良好，具有抵御紫外线能力强、糖苷酶活性强的特 性。对该菌株进行鉴定，结果为酿酒酵母(Saccharomycescerevisiae)，命名为JBA-DZ-49-Gly-3-05。该菌株已于2015年12月7日保藏于中国典型培养物保藏中心，并收到保藏编号 CCTCCNo:M2015725〇
[0010] 本发明的技术方案之二是，一种培养酿酒酵母CCTCCΝο:Μ2015725的方法，其包 括以下的步骤:在培养基中培养所述的酿酒酵母CCTCCΝο:Μ2015725即可。
[0011] 其中，所述的培养基为本领域常规的培养基，能够生长所述的酿酒酵母CCTCCNo: Μ2015725即可，较佳地为PDA液体培养基、YH)培养基或GMMY培养基。所述的Η)Α液体培养基 为本领域常规的PDA液体培养基，较佳地，其包括5g/L马铃薯浸粉、15g/L葡萄糖、10g/L蛋白 胨和5g/LNaCl。所述培养的温度为本领域常规的温度，能够生长所述的酿酒酵母CCTCC No:Μ2015725即可，较佳地为28~30°C，更佳地为28°C。所述培养的时间为本领域常规的时 间，较佳地为2~3天，更佳地为2天。
[0012] 较佳地，所述的培养前还包括使用种子培养基进行种子培养的步骤。所述的种子 培养为本领域常规的种子培养。所述的种子培养基为本领域常规的种子培养基，较佳地为 PDA液体培养基。所述种子培养的时间为本领域常规的时间，较佳地为48~60小时，更佳地 为48小时。所述种子培养的温度为本领域常规的温度，较佳地为28~30°C。所述种子培养的 接种量为本领域常规的接种量，较佳地为5%，所述百分比为体积百分比。
[0013]本发明的技术方案之三是:一种酿酒酵母CCTCCNo:M2015725在制备皮肤外用剂 中的应用。
[0014] 本发明所述酿酒酵母CCTCCNo:M2015725具有抵御紫外线能力强、β-糖苷酶酶活 性高的特性，能够应用于皮肤外用剂的制备中，以达到抗氧化、抗衰老的目的。
[0015]本发明中，所述皮肤外用剂是通常用于皮肤外部的所有成分的统称概念，例如可 以是化妆品或药品。所述化妆品中可以是基础化妆品、面部妆容化妆品、头部用护理品、身 体用化妆品等，对其剂型无特殊限制，根据不同目的可合理选择。
[0016]本发明中，所述的皮肤外用剂的形式可以为任何合适的产品形式，所述的产品形 式包括，但不限于气溶胶型喷雾剂、霜剂、乳液、固体、液体、分散体、泡沫、凝胶、化妆水、摩 丝、软膏、粉剂、贴剂、润发油、手按栗型喷雾剂、棒状物、面膜和湿纸巾。众所周知地，本发明 的皮肤外用剂可为化妆品、皮肤病学或药物局部施用产品，其制备方法可为本领域常规的 制备方法。
[0017]所述的皮肤外用剂还可以进一步包含可药用载体。所述的可药用载体是本领域常 规可药用载体，较佳地为防腐剂、香精、亲水性活性剂和亲脂性活性剂中的一种或多种。所 述的可药用载体的含量为本领域常规的含量。
[0018]所述的皮肤外用剂还可以进一步包括一种或多种下述成分:抗过敏剂、抗微生物 剂、抗氧化剂、螯合剂、着色剂去色素剂、润肤剂、乳化剂、表皮脱落剂、香料、保湿剂、昆虫驱 避剂、润滑剂、药物活性剂、增湿剂、耐光剂、防腐剂、护肤剂、皮肤渗透增强剂、防晒剂、稳定 剂、表面活性剂、增稠剂、粘度调节剂、维生素或其任意组合。该些成分的含量可为本领域常 规的含量。
[0019] 在符合本领域常识的基础上，上述各优选条件，可任意组合，即得本发明各较佳实 例。
[0020] 本发明所用试剂和原料均市售可得。
[0021] 本发明的积极进步效果在于:本发明通过太空搭载诱变及后续的筛选方法，获得 了一株抵御紫外线能力强、糖苷酶活性强的酿酒酵母CCTCCNo:M2015725,并且提供了其 在制备皮肤外用剂中的应用。酿酒酵母CCTCCNo:M2015725具有抵御紫外线能力强、β-糖 苷酶酶活性高的特性，并且可以通过发酵提高植物提取物的生物可利用性和活性，因此该 酿酒酵母能够应用于皮肤外用剂的制备中。所制得的皮肤外用剂拥有更强的抗老化和抗衰 老能力，该皮肤外用剂能够帮助皮肤清除的自由基，抵御UV辐射，防止光老化。
[0022]生物材料保藏信息
[0023]本发明的所述的酿酒酵母（Saccharomycescerevisiae)，已于2015年12月7日保 藏在中国典型培养物保藏中心(CCTCC)，保藏地址：中国武汉武汉大学，邮编:430072，保藏 编号为CCTCCNo:M2015725,培养物名称为酿酒酵母JBA-DZ-49-Gly-3-05,分类命名为 SaccharomycescerevisiaeJBA-DZ-49-Gly-3-〇5〇
【具体实施方式】
[0024]下面通过实施例的方式进一步说明本发明，但并不因此将本发明限制在所述的实 施例范围之中。下列实施例中未注明具体条件的实验方法，按照常规方法和条件，或按照商 品说明书选择。
[0025]实施例中所述室温是本领域常规的室温，较佳地为10~30°C。
[0026]实施例中所述培养基的组分如下所示：
[0027] YPD培养基：1% (w/w)酵母膏、2% (w/w)蛋白胨、2% (w/w)葡萄糖和水，pH为6.0。 [0028]PDA液体培养基:5g/L马铃薯浸粉、15g/L葡萄糖、15g/L蛋白胨和5g/LNaCl。
[0029]实施例1本发明新微生物的获得
[0030] 将购自中国工业微生物菌种保藏管理中心（ChinaCenterofIndustrial CultureCollection，CICC)的酵母菌菌株(菌株保藏编号CICC1210)等分为两份，一份通过 神舟十号载人飞船搭载进入太空，历经15天的太空搭载后，分离获得太空诱变的酵母菌菌 株DZ-39、DZ-49,另外一份为出发菌株CK作为对照，以便进行以下的试