黄精实体小分子肽的提取工艺的制作方法
【专利摘要】本发明涉及一种黄精实体小分子肽的提取工艺，通过先黄精细粉加水并在特定条件下进行保温处理得到第一预处理料，再将所述第一预处理料分别在控制条件下先后加入碱性蛋白酶、中性蛋白酶和酸性蛋白酶进行酶解处理，得到的第四预处理料经高温灭活处理后，依次进行过滤、浓缩、干燥，就能制备得到黄精实体小分子肽；得到的小分子肽分子量主要分布在100?1000D之间，多为二肽、三肽、四肽等小分子肽，属于小分子结构，纯度较高，滋补效果较好，保健功能更强，极易被人体吸收和利用。本发明所述提取工艺简单易行，生产效率高，对黄精实体小分子肽的提取率高，产品纯度高。
【专利说明】
黄精实体小分子肽的提取工艺
技术领域
[0001]本发明属于药物技术领域，具体涉及一种黄精实体小分子肽的提取工艺。
【背景技术】
[0002]黄精的医用价值是众所周知，其功能在于补肾益精、滋阴润燥，主要用于阴虚肺燥，干咳少痰，肺肾阴虚的唠嗽久咳，脾胃虚弱，肾虚精亏等。黄精中含有皂苷、烟酸、糖类、醌类、氨基酸及微量元素等多种成分。随着科学技术的发展及对中药综合研究的深入，中医药有了新的开发前景，一些药物的新用途被发现，尤其是为了增加疗效、降低毒副作用，原生药中的成分被分别提取出来，用于制备治疗某种疾病的药物，产生了药物的新用法，为中医学发展提供了新的生机。
[0003]—般2-6个氨基酸可以组成小分子肽，小分子肽的分子量段一般在1000道尔顿以下，在人体不需消化，即可直接吸收，具有吸收时不需消耗人体能量、不会增加人体胃肠功能负担、能够优先吸收且以自身能量推动人体吸收等优点。
[0004]随着人类社会的发展，人们对健康越来越关注，小分子肽的价值也得到了人们的重视，但是关于黄精实体中小分子肽的提取却未见相关报道。
【发明内容】
[0005]为了解决现有技术存在的上述问题，本发明提供了一种从黄精中提取更易吸收、保健功能更强的小分子肽的黄精实体小分子肽的提取工艺。
[0006]本发明所采用的技术方案为:
[0007]—种黄精实体小分子肽的提取工艺，包括如下步骤:
[0008](I)取黄精，干燥后进行粉碎，得到黄精细粉；
[0009](2)向步骤(I)所述黄精细粉中加入5-10倍质量水，搅拌条件下进行加热至80-850C后，保温20-30min，得到第一预处理料；
[0010](3)将步骤(2)所述第一预处理料瞬间降温至40-45°C，之后加入占所述第一预处理料的质量分数为0.5-1.5%的碱性蛋白酶，并用碱液调节pH至9-11，保温l-2h，得到第二预处理料；
[0011](4)向步骤(3)所述第二预处理料中加入中性蛋白酶，并控制所述中性蛋白酶的添加量占所述第二预处理料的质量分数为0.5-1.5%,之后用酸液调节pH至7-8，保温2-3h，得到第三预处理料；
[0012](5)向步骤(4)所述第三预处理料中加入酸性蛋白酶，并控制所述酸性蛋白酶的添加量占所述第三预处理料的质量分数为0.5-1.5%,之后用酸液调节pH至2-4，保温3-4h，得到第四预处理料；
[0013](6)将步骤(5)所述第四预处理料升温至90-98°C，并保温10-20min，进行灭活处理，得到第五预处理料；
[0014](7)将步骤(6)所述第五预处理料进行过滤，得到滤液依次进行浓缩、干燥后，即得所述的黄精实体小分子肽。
[0015]步骤(3)中，所述碱性蛋白酶的酶活力为45-55万U/g。
[0016]步骤(3)中，所述碱液为氢氧化钠、氢氧化钾、氢氧化I丐中的一种或几种按照任意比例组成的混合物，所述碱液中OH-的浓度为2-5mo I /L。
[0017]步骤(4)中，所述中性蛋白酶的酶活力为10-18万U/g。
[0018]步骤(4)中，所述酸液为盐酸、醋酸、磷酸中的一种或几种按照任意比例组成的混合物，所述酸液中H+的浓度为2-5mo I/L。
[0019]步骤(5)中，所述酸性蛋白酶为酶活力为1-5万U/g的胃蛋白酶。
[0020]步骤(5)中，所述酸液为盐酸、醋酸、磷酸中的一种或几种按照任意比例组成的混合物，所述酸液中H+的浓度为2-5mo I/L。
[0021 ]步骤(7)中，所述滤液在进行浓缩之前，还进行脱色处理，具体为:
[0022]向所述滤液中加入粉末活性炭，并控制所述粉末活性炭占所述滤液的质量分数为1-3%, 65-75 0C搅拌0.5-lh进行脱色后，过滤，得到脱色后滤液。
[0023 ]步骤(7)中，所述浓缩为真空浓缩。
[0024]步骤(7)中，所述干燥为喷雾干燥或冷冻干燥。
[0025]中性蛋白酶是由枯草芽孢杆菌经发酵提取而得的，属于一种内切酶，可用于各种蛋白质水解处理。
[0026]本发明的有益效果为:
[0027]本发明所述的黄精实体小分子肽的提取工艺，通过先黄精细粉加水并在特定条件下进行保温处理得到第一预处理料，再将所述第一预处理料分别在控制条件下先后加入碱性蛋白酶、中性蛋白酶和酸性蛋白酶进行酶解处理，得到的第四预处理料经高温灭活处理后，依次进行过滤、浓缩、干燥，就能制备得到黄精实体小分子肽;得到的小分子肽分子量主要分布在100-1000D之间，多为二肽、三肽、四肽等小分子肽，属于小分子结构，纯度较高，滋补效果较好，保健功能更强，极易被人体吸收和利用。本发明所述提取工艺简单易行，生产效率高，对黄精实体小分子肽的提取率高，产品纯度高，数据显示，对黄精实体小分子肽的提取率高达90 %以上，纯度高达99 %。
【具体实施方式】
[0028]下面结合具体实施例对本发明进行进一步说明。
[0029]实施例1
[0030]本实施例提供一种黄精实体小分子肽的提取工艺，包括如下步骤:
[0031 ] (I)取黄精，干燥后进行粉碎，得到黄精细粉；
[0032](2)向步骤(I)所述黄精细粉中加入5倍质量水，搅拌条件下进行加热至80°C，保温20min，得到第一预处理料；
[0033](3)将步骤(2)所述第一预处理料瞬间降温至40°C，再加入酶活力为45万U/g碱性蛋白酶(Novo蛋白酶)，控制所述碱性蛋白酶占所述第一预处理料的质量分数为0.5%，之后用[0H-]浓度为2mol/L的氢氧化钠溶液调节pH至9，保温lh，得到第二预处理料；
[0034](4)向步骤(3)所述第二预处理料中加入酶活力为10万U/g的中性蛋白酶，并控制所述中性蛋白酶的添加量占所述第二预处理料的质量分数为0.5%，之后用[H+]浓度为2mol/L的盐酸溶液调节pH至7，保温2h，得到第三预处理料；
[0035](5)向步骤(4)所述第三预处理料中加入酶活力为I万U/g的酸性蛋白酶，并控制所述酸性蛋白酶的添加量占所述第三预处理料的质量分数为0.5%，之后用[H+]浓度为2mol/L的盐酸溶液调节pH至2，保温3h，得到第四预处理料；
[0036](6)将步骤(5)所述第四预处理料升温至90°C，并保温lOmin，进行灭活处理，得到第五预处理料；
[0037](7)将步骤(6)所述第五预处理料进行过滤，得到滤液依次进行真空浓缩、喷雾干燥后，即得黄精实体小分子肽粉末。
[0038]实施例2
[0039]本实施例提供一种黄精实体小分子肽的提取工艺，包括如下步骤:
[0040](I)取黄精，干燥后进行粉碎，得到黄精细粉；
[0041](2)向步骤(I)所述黄精细粉中加入10倍质量水，搅拌条件下进行加热至85°C，保温30min，得到第一预处理料；
[0042](3)将步骤(2)所述第一预处理料瞬间降温至45°C，再加入酶活力为55万U/g碱性蛋白酶(Carsberg蛋白酶)，控制所述碱性蛋白酶占所述第一预处理料的质量分数为1.5%，之后用[0H-]浓度为5mol/L的氢氧化钠溶液调节pH至11，保温2h，得到第二预处理料；
[0043](4)向步骤(3)所述第二预处理料中加入酶活力为18万U/g的中性蛋白酶，并控制所述中性蛋白酶的添加量占所述第二预处理料的质量分数为1.5%，之后用[H+]浓度为5mol/L的盐酸溶液调节pH至8，保温3h，得到第三预处理料；
[0044](5)向步骤(4)所述第三预处理料中加入酶活力为5万U/g的酸性蛋白酶，并控制所述酸性蛋白酶的添加量占所述第三预处理料的质量分数为1.5%，之后用[H+]浓度为5mol/L的盐酸溶液调节pH至4，保温4h，得到第四预处理料；
[0045](6)将步骤(5)所述第四预处理料升温至98°C，并保温20min，进行灭活处理，得到第五预处理料；
[0046](7)将步骤(6)所述第五预处理料进行过滤，得到滤液，向所述滤液中加入粉末活性炭，并控制所述粉末活性炭占所述滤液的质量分数为3%，75°C搅拌Ih使其进行脱色，过滤，得到脱色后滤液；
[0047]所述的脱色后滤液依次进行真空浓缩、冷冻干燥后，即得黄精实体小分子肽粉末。
[0048]实施例3
[0049]本实施例提供一种黄精实体小分子肽的提取工艺，包括如下步骤:
[0050](I)取黄精，干燥后进行粉碎，得到黄精细粉；
[0051](2)向步骤(I)所述黄精细粉中加入8倍质量水，搅拌条件下进行加热至82°C，保温25min，得到第一预处理料；
[0052](3)将步骤(2)所述第一预处理料瞬间降温至42°C，再加入酶活力为50万U/g碱性蛋白酶，控制所述碱性蛋白酶占所述第一预处理料的质量分数为1%，之后用[0H-]浓度为3mol/L的氢氧化钠溶液调节pH至10，保温1.5h，得到第二预处理料；
[0053](4)向步骤(3)所述第二预处理料中加入酶活力为15万U/g的中性蛋白酶，并控制所述中性蛋白酶的添加量占所述第二预处理料的质量分数为1%，之后用[H+]浓度为3mol/L的盐酸溶液调节pH至7.5，保温2.5h，得到第三预处理料；
[0054](5)向步骤(4)所述第三预处理料中加入酶活力为3万U/g的酸性蛋白酶，并控制所述酸性蛋白酶的添加量占所述第三预处理料的质量分数为I %，之后用[H+]浓度为4mol/L的盐酸溶液调节pH至3，保温3.5h，得到第四预处理料；
[0055](6)将步骤(5)所述第四预处理料升温至95°C，并保温15min，进行灭活处理，得到第五预处理料；
[0056](7)将步骤(6)所述第五预处理料进行过滤，得到滤液，向所述滤液中加入粉末活性炭，并控制所述粉末活性炭占所述滤液的质量分数为1%，65°C搅拌0.5h使其进行脱色，过滤，得到脱色后滤液；
[0057]所述的脱色后滤液依次进行真空浓缩、冷冻干燥后，即得黄精实体小分子肽粉末。
[0058]实施例4
[0059]本实施例提供一种黄精实体小分子肽的提取工艺，包括如下步骤:
[0060](I)取黄精，干燥后进行粉碎，得到黄精细粉；
[0061](2)向步骤(I)所述黄精细粉中加入8倍质量水，搅拌条件下进行加热至82°C，保温25min，得到第一预处理料；
[0062](3)将步骤(2)所述第一预处理料瞬间降温至42°C，再加入酶活力为48万U/g碱性蛋白酶，控制所述碱性蛋白酶占所述第一预处理料的质量分数为1%，之后用[0H-]浓度为4mol/L的氢氧化钠溶液调节pH至9.5，保温1.5h，得到第二预处理料；
[0063](4)向步骤(3)所述第二预处理料中加入酶活力为14万U/g的中性蛋白酶，并控制所述中性蛋白酶的添加量占所述第二预处理料的质量分数为I %，之后用[H+]浓度为
2.5mol/L的盐酸溶液调节pH至7.5，保温2.5h，得到第三预处理料；
[0064](5)向步骤(4)所述第三预处理料中加入酶活力为4万U/g的酸性蛋白酶，并控制所述酸性蛋白酶的添加量占所述第三预处理料的质量分数为1%，之后用[H+]浓度为3mol/L的盐酸溶液调节pH至3，保温3.5h，得到第四预处理料；
[0065](6)将步骤(5)所述第四预处理料升温至95°C，并保温15min，进行灭活处理，得到第五预处理料；
[0066](7)将步骤(6)所述第五预处理料进行过滤，得到滤液，向所述滤液中加入粉末活性炭，并控制所述粉末活性炭占所述滤液的质量分数为2%，70°C搅拌0.Sh使其进行脱色，过滤，得到脱色后滤液；
[0067]所述的脱色后滤液依次进行真空浓缩、冷冻干燥后，即得黄精实体小分子肽粉末。
[0068]本发明不局限于上述最佳实施方式，任何人在本发明的启示下都可得出其他各种形式的产品，但不论在其形状或结构上作任何变化，凡是具有与本申请相同或相近似的技术方案，均落在本发明的保护范围之内。
【主权项】
1.一种黄精实体小分子肽的提取工艺，其特征在于，包括如下步骤: (1)取黄精，干燥后进行粉碎，得到黄精细粉； (2)向步骤(I)所述黄精细粉中加入5-10倍质量水，搅拌条件下进行加热至80-85°C后，保温20-30min，得到第一预处理料； (3)将步骤(2)所述第一预处理料瞬间降温至40-45°C，之后加入占所述第一预处理料的质量分数为0.5-1.5%的碱性蛋白酶，并用碱液调节pH至9-11，保温l-2h，得到第二预处理料； (4)向步骤(3)所述第二预处理料中加入中性蛋白酶，并控制所述中性蛋白酶的添加量占所述第二预处理料的质量分数为0.5-1.5 %，之后用酸液调节pH至7-8，保温2-3h，得到第三预处理料； (5)向步骤(4)所述第三预处理料中加入酸性蛋白酶，并控制所述酸性蛋白酶的添加量占所述第三预处理料的质量分数为0.5-1.5 %，之后用酸液调节pH至2-4，保温3-4h，得到第四预处理料； (6)将步骤(5)所述第四预处理料升温至90-98°C，并保温10_20min，进行灭活处理，得到第五预处理料； (7)将步骤(6)所述第五预处理料进行过滤，得到滤液依次进行浓缩、干燥后，即得所述的黄精实体小分子肽。2.根据权利要求1所述的黄精实体小分子肽的提取工艺，其特征在于，步骤(3)中，所述碱性蛋白酶的酶活力为45-55万U/g。3.根据权利要求1所述的黄精实体小分子肽的提取工艺，其特征在于，步骤(3)中，所述碱液为氢氧化钠、氢氧化钾、氢氧化钙中的一种或几种按照任意比例组成的混合物，所述碱液中OH—的浓度为2-5mo I /L ο4.根据权利要求1所述的黄精实体小分子肽的提取工艺，其特征在于，步骤(4)中，所述中性蛋白酶的酶活力为10-18万U/g。5.根据权利要求1所述的黄精实体小分子肽的提取工艺，其特征在于，步骤(4)中，所述酸液为盐酸、醋酸、磷酸中的一种或几种按照任意比例组成的混合物，所述酸液中H+的浓度为2-5mol/L。6.根据权利要求1所述的黄精实体小分子肽的提取工艺，其特征在于，步骤(5)中，所述酸性蛋白酶为酶活力为1-5万U/g的胃蛋白酶。7.根据权利要求1所述的黄精实体小分子肽的提取工艺，其特征在于，步骤(5)中，所述酸液为盐酸、醋酸、磷酸中的一种或几种按照任意比例组成的混合物，所述酸液中H+的浓度为2-5mol/L。8.根据权利要求1所述的黄精实体小分子肽的提取工艺，其特征在于，步骤(7)中，所述滤液在进行浓缩之前，还进行脱色处理，具体为: 向所述滤液中加入粉末活性炭，并控制所述粉末活性炭占所述滤液的质量分数为1-3%，65-75°C搅拌0.5-lh进行脱色后，过滤，得到脱色后滤液。9.根据权利要求1所述的黄精实体小分子肽的提取工艺，其特征在于，步骤(7)中，所述浓缩为真空浓缩。10.根据权利要求1所述的黄精实体小分子肽的提取工艺，其特征在于，步骤(7)中，所述干燥为喷雾干燥或冷冻干燥。
【文档编号】C07K1/34GK105821105SQ201610190930
【公开日】2016年8月3日
【申请日】2016年3月30日
【发明人】蔡庭守
【申请人】蔡庭守