一种籽瓜中l-瓜氨酸的提取方法及泡腾片的制备方法
【专利摘要】本发明公开了一种籽瓜中L?瓜氨酸的提取方法，该方法包括制备超滤液、上柱洗脱、减压蒸馏、结晶，本发明还公开了上述方法提取的L?瓜氨酸的应用，具体为将所需各重量份的物质制备成酸颗粒、碱颗粒，干燥后喷入柠檬香精，然后再干燥，加入聚乙二醇6000，混和均匀，压片，即可得L?瓜氨酸泡腾片。本发明的提取方法制备流程简单，成本低廉，能耗低，废弃污染物产量低，用所提取的L?瓜氨酸制备的泡腾片崩解迅速、泡腾效果好、酸甜适口、服用方便，为籽瓜的综合开发利用提供一种新的途径。
【专利说明】
-种巧瓜中L-瓜氨酸的提取方法及泡腾片的制备方法
技术领域
[0001] 本发明属于农产品加工领域，设及一种巧瓜中k瓜氨酸的提取方法及泡腾片的制 备方法。
【背景技术】
[0002] 巧瓜是西瓜的分支品种，相对于常见的食用类西瓜，巧瓜的种植W获取瓜巧为主， 瓜飄、瓜皮都被作为废物白白丢弃，资源浪费严重的同时使农民们蒙受巨大的经济损失，也 极大地阻碍了巧瓜产业的发展，因而综合开发利用巧瓜是必然的选择。
[0003] 巧瓜中的心瓜氨酸，是一种非必需氨基酸。在预防和治疗前列腺疾病方面，k瓜氨 酸具有明显的作用，与提高性能力药物不同，1^-瓜氨酸可提高男性性功能且可W被完全的 吸收到血液中。在人体内，由于k瓜氨酸是合成k精氨酸的前体，心瓜氨酸在许多组织中能 被转化成心精氨酸，而胃肠道和肝脏不代谢k瓜氨酸，亦不诱导精氨酸酶活性升高，因此补 充心瓜氨酸能辅助治疗k精氨酸缺乏引起的相关疾病。此外瓜氨酸可作为抗衰老、提高 免疫力的保健品，也可作为护肤、防皱、桂斑、抗衰老的女性美容化妆品。
[0004] 目前生产心瓜氨酸的方法主要是发酵法、酶法、合成法和提取法，现有技术中采用 的化学法或生物合成法，步骤繁琐成本较高且存在酶法转化等复杂过程，此过程控制较为 困难，往往含有大量的旋光对映体D-瓜氨酸;而现有的提取法包括压棒、浓缩、阳离子交换、 结晶等步骤，运些方法均存在其他氨基酸残留过高，产品纯度不高，产生大量污水等缺点。
【发明内容】
[0005] 发明目的：为了克服上述现有技术的不足，本发明提供一种巧瓜中k瓜氨酸的提 取方法，主要目的是简化制备流程，降低成本，节约能源。
[0006] 本发明的另外一个目的是提供一种巧瓜中k瓜氨酸泡腾片的制备方法。
[0007] 技术方案:为实现第一发明，本发明提供一种巧瓜中k瓜氨酸的提取方法，包括如 下步骤：
[000引1)制备超滤液:将去巧后的巧瓜瓜飄棒汁、离屯、、取上清液，将上清液用微滤膜过 滤后超滤，再进行浓缩，得超滤液；
[0009] 2)上柱洗脱:将超滤液pH值至1.0-2.0,得上柱液，将上柱液通入阳离子交换树脂 交换吸附瓜氨酸，当检测流出液中k瓜氨酸质量浓度与超滤液中k瓜氨酸质量浓度相同 时，交换吸附完毕，然后用氨水作为洗脱剂，进行洗脱，洗脱终点为洗出液巧=酬反应为阴 性，收集洗脱液；
[0010] 3)减压蒸馈:将洗脱液减压蒸馈浓缩后得浓缩汁；
[0011] 4)结晶：将浓缩汁用无水乙醇结晶，重复结晶2-3次，冷冻干燥后得心瓜氨酸晶体。
[0012] 进一步的，所述微滤膜为0.1-0.3um孔径的平板膜，超滤选取截留分子量为5000- 7000道尔顿的平板膜，超滤时间为20-80min;
[0013] 所述超滤液中k瓜氨酸质量浓度为0.2-4. Omg/mL。
[0014] 进一步的，所述阳离子交换树脂为OOl X7型、皿-8型或732型；
[0015] 所述上柱液的过柱流速为3.6-7.28￥/11，所述阳离子交换树脂的用量为20-251111;
[0016] 所述浓缩汁的体积为洗脱液体积的1/5-2/3;
[0017] 所述浓缩汁与无水乙醇的体积比1:3-5。
[0018] 进一步的，所述氨水的摩尔浓度为0.6-0.9mol/L，洗脱流速为3.6-7.2BVA。
[0019] 进一步的，所述步骤2)之前还包括对阳离子交换树脂预处理的步骤:将阳离子交 换树脂置于塑料容器中，用清水漂洗，用水浸泡树脂12-2地，使其充分膨胀，然后将阳离子 交换树脂装入柱中，用阳离子交换树脂体积3-6倍的4%的HCl WlmL/min的速度流过树脂 层，反复冲洗3至5次;然后再用水自上而下洗涂树脂，直至流出液pH为3-5;再用阳离子交换 树脂体积2-4倍4%的化0田容液W1血/min的速度流过树脂层，然后水洗至pH为8-9，再用2-4 倍阳离子交换树脂体积的4%的HCl溶液WlmL/min的速度流过树脂层，然后水洗至抑为3- 5,无 C广即可。
[0020] 进一步的，一种k瓜氨酸，是按照上述的提取方法制备得到。
[0021] 为实现本发明的第二目的，本发明提供一种巧瓜中k瓜氨酸泡腾片的制备方法：
[0022] -种用于泡腾片的组合物，包括W下重量份的组分：
[0023] レ瓜氨酸25-35份、巧樣酸17-21份、甘露醇10-14份、S氯薦糖2-4份、甜菊糖巧 0.1-0.5份、PVP-k3〇 乙醇A 溶液 4-6份；
[0024] 碳酸氨钢14-17份、甘露醇16-20份、PVP-k3〇乙醇B溶液5-9份；
[0025] 巧樣香精0.6-1.0份，聚乙二醇6000 1.8-2.5份；
[0026] 所述k瓜氨酸选自权利要求5所述心瓜氨酸；
[0027] 所述PVP-k3〇乙醇A溶液为质量浓度为90%的PVP-k3〇乙醇溶液，所述PVP-k3〇乙醇B 溶液为质量浓度为20 %的PVP-k3〇乙醇溶液。
[0028] 优选的，使用上述组合物制备泡腾片的方法，包括如下步骤：
[0029] 1)将心瓜氨酸、巧樣酸、甘露醇、S氯薦糖、甜菊糖巧、PVP-k3G乙醇A溶液混合均匀 后直接制成酸颗粒，然后干燥酸颗粒；
[0030] 2)将碳酸氨钢、甘露醇和PVP-k3〇乙醇B溶液混合均匀后直接制成碱颗粒，然后干燥 碱颗粒；
[0031] 3)将酸颗粒和碱颗粒整粒后喷入巧樣香精，干燥后加入聚乙二醇6000,混和均匀， 压片，即可得泡腾片。
[0032] 优选的，所述制备泡腾片时所需溫度为18-30°C，相对湿度为30-48%。
[0033] 优选的，所述步骤1)中干燥的溫度为42-47°C，干燥的时间为1.5-3.化;所述步骤 2)中干燥的溫度为35-42°C，干燥的时间为8-12min;所述步骤3)中干燥的溫度为38-42°C， 干燥的时间为0.8-1.化。
[0034] 本发明的有益效果为：
[0035] 1.本发明选用经过浓缩的超滤液作为上柱液，将上柱液适当的浓缩可提高浓度， 减少树脂的用量，减少富集液收集的体积，利于资源回收，节约能源的消耗。
[0036] 2.本发明W巧瓜废弃物为原料，利用超滤和离子交换树脂方法直接从巧瓜中提取 瓜氨酸，工艺流程短，能耗低，适合于工业化生产；因提取的上清液中各种蛋白、糖类等杂质 较多，为提高树脂对レ瓜氨酸的吸附量，本发明将上柱液进行了预处理，即：选取孔径为 0.1-0.3um的平板膜将上清液抽滤后再选取截留分子量为5000-7000道尔顿的平板膜超滤， 用超滤膜对上清液进行过滤，调解pH值得到上柱液后再上离子交换树脂吸附，可明显提高 树脂分离效率，减轻对树脂的污染，延长树脂使用周期，节省投资，且能提高产品纯度，获得 的瓜氨酸产品不含有害物质，可直接用于食品药品生产。
[0037] 3.本发明选用酸碱分开湿法制粒工艺，可有效防止制备过程中酸源和碱源发生反 应，确保了生产过程中产品的稳定性;压片过程不易黏冲，能顺利出片，片剂光滑整洁、呈淡 黄色；由于心瓜氨酸含有簇基，所W不宜与碳酸氨钢混合制软材，适宜与巧樣酸一起制备酸 颗粒，因而本发明选取巧樣酸与k瓜氨酸一起制备酸颗粒;该制备工艺重现性良好，片剂质 量稳定，制备的心瓜氨酸泡腾片崩解迅速、泡腾效果好、酸甜适口、服用方便。
【附图说明】
[0038] 图1为本发明实施例中pH值对离子交换效果的影响图；
[0039] 图2为本发明实施例中上柱液浓度对树脂吸附性能的影响图；
[0040] 图3为本发明实施例中在交换树脂上，过柱流速对k瓜氨酸交换量的影响图；
[0041 ]图4为本发明实施例中洗脱液氨水浓度对洗脱效果的影响图。
【具体实施方式】
[0042] 为更进一步阐述本发明为达成预定发明目的所采取的技术手段及功效，W下结合 附图及较佳实施例，对依据本发明申请的【具体实施方式】、步骤、技术特征及其功能、效果，详 细说明如后。
[0043] -种巧瓜中k瓜氨酸的提取方法，包括如下步骤：
[0044] 1)制备超滤液:将去巧后的巧瓜瓜飄棒汁、离屯、、取上清液，将上清液用微滤膜过 滤后超滤，再进行浓缩，得超滤液，将超滤液浓缩；
[0045] 2)上柱洗脱:将超滤液pH值至1.0-2.0,得上柱液，将上柱液通入阳离子交换树脂 交换吸附瓜氨酸，当检测流出液中k瓜氨酸质量浓度与超滤液中k瓜氨酸质量浓度相同 时，交换吸附完毕，然后用氨水作为洗脱剂，进行洗脱，洗脱终点为洗出液巧=酬反应为阴 性，收集洗脱液；
[0046] 3)减压蒸馈:将洗脱液减压蒸馈浓缩后得浓缩汁；
[0047] 4)结晶：将浓缩汁用无水乙醇结晶，重复结晶2-3次，冷冻干燥后得心瓜氨酸晶体。 [004引本发明将超滤液浓缩后调节pH值，得到上柱液，通过微滤和超滤除去上柱液中各 种蛋白、糖类等杂质，提高上柱后树脂的吸附量，减轻对树脂的污染，延长树脂使用周期，提 高产品纯度。
[0049]本发明中上柱液的pH值对离子交换效果的影响有两方面，一方面是对树脂交换基 团解离的影响，另一方面是影响被吸附物质的解离;所W上柱液的pH值主要影响k瓜氨酸 的解离;分别取上柱液30mL，浓度为0.9569mg/mL的原提取液，用酸度计调不同的抑值，加入 3g湿树脂，摇床静态吸附地，转速为114r/min考察不同的pH值对树脂静态吸附量的影响，如 图1所示，在抑为1-2时吸附量差异不大，且在此抑值下吸附量最大，因此为了达到较好的吸 附效果，本发明将上柱液的pH值调整为1-2;因为k瓜氨酸的等电点为5.97,抑为1-2恰好远 离心瓜氨酸的等电点，所W基本带正电，吸附量最优，若提取液pH恰好在1-2范围内，则提取 液不需要调节抑即可直接上柱。
[0050] 本发明中为了使瓜氨酸具有更好的吸附量，阳离子交换树脂需要预处理，即将树 脂置于塑料容器中，用清水漂洗，用水浸泡树脂12-24h，使其充分膨胀，然后将树脂装入柱 中，用树脂体积5倍的4%的肥iWlmL/min的速度流过树脂层，反复冲洗3至5次;然后再用低 纯水自上而下洗涂树脂，直至流出液抑约为4;再用树脂体积3倍4%的化0田容液处理，然后 水洗至微碱性，再用3倍树脂体积的4%的肥1溶液处理，然后水洗至抑约为4,无 C广即可。
[0051] 优选地，所述微滤膜为0.1-0.3um孔径的平板膜，超滤选取截留分子量为5000- 7000道尔顿的平板膜，超滤时间为20-80min;所述超滤液浓缩后k瓜氨酸质量浓度为0.2- 4.0mg/mL。
[0052] 本发明所使用的微滤膜具有孔径比较均匀，孔隙率高，无介质脱落，质地薄，阻力 小，滤速快等特点，使用0.1-0.3um孔径的平板膜可W过滤除去固形不溶物和大部分的大分 子类杂质，之后使用5000-7000道尔顿的平板膜超滤后，可W去除微生物、胶体等其他物质。
[0053] 为了明确上柱液浓度对树脂吸附性能的影响，本发明配制浓度分别为0.2392、 04785、0.9569、1.1438、1.1798、1.8594、2.3359111邑/1111的心瓜氨酸样品液各30mL，加入3g湿 树脂，摇床静态吸附地，考察不同浓度对树脂静态吸附量的影响，如图2所示，随着k瓜氨酸 浓度的增加，吸附量相应增加，此结果与吸附平衡理论相吻合，将超滤液适当的浓缩可提高 浓度，减少富集液收集的体积，利于资源回收，节约能源的消耗。因此，本发明选用经过浓缩 的超滤液作为上柱液比较有利。
[0054] 优选地，所述阳离子交换树脂为001X7型、皿-8型或732型，所述上柱液的过柱流 速为 3.6-7.2BVA。
[0055] 为了明确过柱流速对k瓜氨酸交换量的影响，本发明各取25mL预处理好的阳离子 交换树脂装柱，瓜氨酸浓度为3.9685mg/mL的提取液过柱交换，控制过柱速度分别为 3.6BVA，5.4BVA，7.2BVA，W每10血为单位分别收集过柱液，测定其中过柱液中k瓜氨酸 浓度，直至流出液中k瓜氨酸浓度为3.9685mg/mL为止，如图3所示，随着过柱液流速增加， 所用上柱液体积减少，阳离子交换树脂交换心瓜氨酸的量减少。当流速为3.6BVA时，树脂 的交换量为31.75mg/mL当流速提高到7.2BVA时，其交换量下降至20.64mg/mL。显然，运与 k瓜氨酸在树脂中的扩散速度有关。阳离子交换树脂与k瓜氨酸的交换速率是确定的，而 k瓜氨酸在过柱过程中不断在溶液与树脂之间进行扩散，过柱流速较小时，心瓜氨酸可W 与树脂进行充分的离子交换，因此，其交换量大；随着过柱流速增大，1^-瓜氨酸流经交换柱 的时间逐渐减少。若提取液中，心瓜氨酸浓度较高，则部分心瓜氨酸来不及与树脂进行离子 交换反应就通过交换柱，因此，树脂对心瓜氨酸的交换量降低。
[0056] 优选地，所述氨水的摩尔浓度为0.6-0.9mol/L，洗脱流速为3.6-7.2BVA。
[0057] k瓜氨酸的等电点为5.97,抑=1-2恰好远离心瓜氨酸的等电点，此时k瓜氨酸W 阳离子形式被吸附在树脂中。本发明选择氨水为洗脱剂是因为氨水显碱性，创造碱性环境， 此时溶液环境抑大于k瓜氨酸等电点，可^把心瓜氨酸从树脂中洗脱出来。因为氨基酸在 碱性条件下易引起构型变化而失去生理活性，所W洗脱液可W采用减压蒸馈的方式除去洗 脱剂。氨水易挥发，洗脱后采用减压蒸馈法很容易除去氨水，故选择氨水作为洗脱剂。
[0058] W氨水作为洗脱剂，洗脱剂的浓度可W直接影响洗脱的效果，如果洗脱剂浓度偏 高，洗脱能力就强，从树脂上流下来的杂质就很多，如果洗脱剂浓度偏稀，则收集液的体积 就会加大，出峰平坦，收集时间会延长。本发明取载荷浓度为〇.3968mol/L的IOmlX-瓜氨酸 溶液、树脂量为20mL的732型阳离子交换树脂装柱，W不同浓度的氨水(0.2、0.6、1.0mol/L) 为洗脱剂，控制洗脱流速为7.2BV/h，W每IOmL为单位分别收集过柱液，测定流出液的吸光 度，换算成心瓜氨酸含量。W洗脱剂体积为横坐标，洗脱过柱液k瓜氨酸含量为纵坐标绘制 洗脱曲线，比较S个不同洗脱剂浓度对洗脱效果的影响。如图4所示，1. OmoVL洗脱力最强， 收集时间短，但考虑到其流出杂质也多，所W本发明优选〇.6mol/L的氨水溶液，虽然收集液 体积较l.Omol/L的大，但其出峰并不平坦。
[0059] 本发明还提供一种巧瓜中k瓜氨酸泡腾片的制备方法，该方法首先提供一种用于 泡腾片的组合物，该组合物包括W下重量份的组分：
[0060] レ瓜氨酸25-35份、巧樣酸17-21份、甘露醇10-14份、S氯薦糖2-4份、甜菊糖巧 0.1-0.5份、PVP-k3〇 乙醇A 溶液 4-6份；
[0061 ] 碳酸氨钢14-17份、甘露醇16-20份、PVP-k3〇乙醇B溶液5-9份；
[0062] 巧樣香精0.6-1.0份，聚乙二醇6000 1.8-2.5份；
[0063] k瓜氨酸是根据前述的一种巧瓜中心瓜氨酸的提取方法制备而成，PVP-k3〇乙醇A 溶液为质量浓度为90 %的PVP-k3〇乙醇溶液，PVP-k3〇乙醇B溶液为质量浓度为20 %的PVP-k3〇 乙醇溶液。
[0064] 制备泡腾片常用填充剂有薦糖、乳糖、可溶性淀粉、甘露醇等，作为填充剂薦糖具 有良好的可压性和日感，但易吸收水分，不适合糖尿病患者;而心瓜氨酸含有伯氨基，不宜 与乳糖等还原糖合用，在一定条件下会发生美拉德反应;可溶性淀粉，成型性和可压性较 差;甘露醇为白色结晶性粉末，易溶于水，性质不活泼，且甜味爽口，稳定性好，露置于空气 中无变化，流动性和可压性良好，无吸湿性，干燥快，所做片剂外表光滑美观，另外，由于泡 腾片剂型限制，可供选择的填充剂范围比较少，经试验考察选择甘露醇作为填充剂，各项指 标均符合规定。
[0065] 巧樣酸圆润柔和的酸味，使其作为食品添加剂受到广泛青睐，是目前应用最广泛 的泡腾酸源，而酒石酸、苹果酸等酸源在口感方面均有不足；同碳酸钢相比碳酸氨钢与有机 酸反应更为快速，相同用量情况下产生更多的二氧化碳气体，因此，本发明最终选择巧樣酸 和碳酸氨钢作泡腾崩解剂，并优化出二者的最佳配比和添加量。
[0066] 泡腾片对溶液外观有一定的要求，1^-瓜氨酸水中溶解性较好，适宜制成水溶性泡 腾片，经试验筛选，PEG 6000作为润滑剂，润滑效果好，不粘冲，泡腾后溶液澄清，所压片剂 表面光滑圆整，不易磨损。
[0067] 与纤维素类粘合剂相比，PVPkso既能溶于水又能溶于乙醇，黏性良好，且不影响片 剂的崩解W及崩解后溶液的澄清度，被选为本发明的粘合剂，巧樣酸遇水则立即吸水变湿， 软材难W过筛，颗粒易成条状，因此选择高浓度的乙醇作为润湿剂，能起到较好的黏性分散 作用，制备出适宜的软材。
[0068] 本实施列在上述实施例的基础上，使用上述组合物制备泡腾片的方法，包括如下 步骤：
[0069] 1)将心瓜氨酸、巧樣酸、甘露醇、S氯薦糖、甜菊糖巧、PVP-k3G乙醇A溶液混合均匀 后直接制成酸颗粒，然后干燥酸颗粒；
[0070] 2)将碳酸氨钢、甘露醇和PVP-k3〇乙醇B溶液混合均匀后直接制成碱颗粒，然后干燥 碱颗粒；
[0071] 3)将酸颗粒和碱颗粒整粒后喷入巧樣香精，干燥后加入聚乙二醇6000,混和均匀， 压片，即可得泡腾片。
[0072] 本发明的制备方法选用酸碱分开湿法制粒工艺，可有效防止制备过程中酸源和碱 源发生反应，确保了生产过程中产品的稳定性，压片过程不易黏冲，能顺利出片，片剂光滑 整洁、呈淡黄色；由于心瓜氨酸含有簇基，所W不宜与碳酸氨钢混合制软材，而适宜与巧樣 酸一起制备酸颗粒，因此本发明选用巧樣酸与k瓜氨酸一起制备酸颗粒;此方法重现性良 好，片剂质量稳定，制备的心瓜氨酸泡腾片崩解迅速、泡腾效果好、酸甜适口、服用方便。
[0073] 本实施列在上述实施例的基础上，制备泡腾片时所需溫度为18-30°C，相对湿度为 30-48%。
[0074] 泡腾片中含有巧樣酸，吸湿性强，应严格控制生产车间的相对湿度和物料的胆存 条件，防止吸潮。在室溫18-30°C，相对湿度48%的条件下，压片效果较好。根据实验观察，W 控制相对湿度(RH)为30-48%为佳，否则酸碱颗粒混合后有可能会发生化学反应并产生气 泡，从而使片剂的外观不光滑，有斑点等。
[0075] 本实施列在上述实施例的基础上，步骤1)中酸颗粒的干燥溫度为40-50°C，时间为 2-4h;步骤2)中碱颗粒的干燥溫度为40-50°C，干燥时间为10-30min;步骤3)中干燥的溫度 为38-42 °C，干燥时间为0.8-1.化。
[0076] 在制备k瓜氨酸泡腾片过程中，酸、碱颗粒的含水量很重要，要比较干燥，并且要 严格控制环境空气中的湿度，否则容易吸潮，并且制粒过程要快。
[0077] 颗粒的含水量会影响压片情况和储存过程中产品的稳定性，因此，需要控制颗粒 中的水分在适宜的范围内。碳酸氨钢在65°C W上极易受热分解，应控制干燥溫度低于65°C。 另外，干燥时间的选择也很重要，干燥时间太长，效率低且能源消耗增加，干燥时间太短，颗 粒干燥不彻底，影响产品质量，因此，需选择合适的干燥时间和溫度控制颗粒的水分，本发 明选取一定的溫度和时间分别干燥酸颗粒和碱颗粒，如表1和表2所示，酸颗粒在40-50°C， 2-4h干燥条件下，颗粒含水量均低于1.9%，碱颗粒在40-50°C，10-30min干燥条件下，含水 量均低于1 %，另外，喷入巧樣香精后在38-42°C溫度下，干燥0.8-1.化后压片均无粘冲现 象，所压片剂硬度适中，片面光洁。从节约能源和时间成本W及压片最好的效果考虑，优选 酸颗粒在45°C溫度中干燥化，碱颗粒在45°C溫度中干燥20min，喷入巧樣香精后，在40°C溫 度下，干燥化。
[0078] 亲1酸丽輪平極条化
[0079]
[0080] 表如咸颗粒干燥条件
[0081]
[0082] 下面通过具体的实施例对本发明作进一步的说明。
[0083] 实施例1:
[0084] -种巧瓜中k瓜氨酸的提取方法，包括如下步骤：
[0085] 1)制备超滤液:将去巧后的巧瓜瓜飄棒汁、离屯、、取上清液，将上清液用0.2um孔径 的平板膜真空抽滤后，选取截留分子量为5000道尔顿的平板膜超滤50min，再真空浓缩至k 瓜氨酸质量浓度为4. Omg/mL，得超滤液；
[0086] 2)上柱洗脱：将超滤液pH值调节至1.2得上柱液，将上柱液通入装填量为20ml的 732型阳离子交换树脂交换吸附瓜氨酸，过柱流速为7.2BVA，流出液中心瓜氨酸质量浓度 为4. Omg/mL时吸附完毕，用摩尔浓度为0.6mol/L的氨水洗脱，洗脱流速为7.2BVA，洗脱终 点为洗出液巧=酬反应为阴性，收集洗脱液；
[0087] 3)减压蒸馈:将洗脱液用减压蒸馈装置蒸馈浓缩至原体积的1/3后得浓缩汁；
[0088] 4)结晶:将浓缩汁用无水乙醇结晶，结晶体缓慢析出至无结晶体析出时为终点，过 滤后的晶体用质量为3倍于晶体质量的水溶解，再用无水乙醇重复结晶2次，冷冻干燥后得 k瓜氨酸晶体，所用无水乙醇与浓缩汁的体积比4:1;
[0089] 步骤2)之前对阳离子交换树脂预处理的步骤为:将阳离子交换树脂置于塑料容器 中，用清水漂洗，用水浸泡树脂20h，使其充分膨胀，然后将阳离子交换树脂装入柱中，用阳 离子交换树脂体积5倍的4%的HCl W ImL/min的速度流过树脂层，反复冲洗4次;然后再用水 自上而下洗涂树脂，直至流出液抑为4;再用阳离子交换树脂体积3倍4 %的化0田容液WlmL/ min的速度流过树脂层，然后水洗至抑为8,再用3倍阳离子交换树脂体积的4%的HCl溶液W ImL/min的速度流过树脂层，然后水洗至pH为4，无 C广即可。
[0090] -种巧瓜中k瓜氨酸泡腾片的制备方法，包括如下步骤：
[0091] 1)取1^-瓜氨酸30g、巧樣酸19.1g、甘露醇12.1g、S氯薦糖1.5g、甜菊糖巧0.3g、质 量浓度为90 %的PVP-k3〇乙醇溶液5g混合均匀后直接制成酸颗粒，45 °C干燥化；
[0092] 2)取碳酸氨钢15.9g、甘露醇18.4g、质量浓度为20%的PVP-k3〇乙醇溶液7g，混合均 匀后直接制成碱颗粒，45°C干燥20min;
[0093] 3)将干燥好的酸颗粒、碱颗粒整粒后喷入巧樣香精0.8g，40°C干燥化后，加入2g聚 乙二醇6000，混和均匀，压片，即可得成品。
[0094] 配制泡腾片所需溫度为25°C，相对湿度为48%。
[0095] 实施例2:
[0096] -种巧瓜中k瓜氨酸的提取方法，包括如下步骤：
[0097] 1)制备超滤液:将去巧后的巧瓜瓜飄棒汁、离屯、、取上清液，将上清液用0.1 um孔径 的平板膜真空抽滤后，选取截留分子量为7000道尔顿的平板膜超滤20min，再真空浓缩至k 瓜氨酸质量浓度为3. Omg/mL，得超滤液；
[0098] 2)上柱洗脱：将超滤液pH值调节至2.0得上柱液，将上柱液通入装填量为25ml的 OOl X7型阳离子交换树脂交换吸附瓜氨酸，过柱流速为3.6BVA，流出液中心瓜氨酸质量浓 度为3. Omg/mL时吸附完毕，用摩尔浓度为0.9mol/L的氨水洗脱，洗脱流速为3.6BVA，洗脱 终点为洗出液巧=酬反应为阴性，收集洗脱液；
[0099] 3)减压蒸馈:将洗脱液用减压蒸馈装置蒸馈浓缩至原体积的1/5后得浓缩汁；
[0100] 4)结晶:将浓缩汁用无水乙醇结晶，结晶体缓慢析出至无结晶体析出时为终点，过 滤后的晶体用质量为2倍于晶体质量的水溶解，再用无水乙醇重复结晶3次，冷冻干燥后得 k瓜氨酸晶体，所用无水乙醇与浓缩汁的体积比3:1;
[0101] 步骤2)之前对阳离子交换树脂预处理的步骤为:将阳离子交换树脂置于塑料容器 中，用清水漂洗，用水浸泡树脂12h，使其充分膨胀，然后将阳离子交换树脂装入柱中，用阳 离子交换树脂体积3倍的4%的HCl W ImL/min的速度流过树脂层，反复冲洗3次;然后再用水 自上而下洗涂树脂，直至流出液抑为3;再用阳离子交换树脂体积2倍4%的化0田容液WlmL/ min的速度流过树脂层，然后水洗至抑为8,再用2倍阳离子交换树脂体积的4%的HCl溶液W ImL/min的速度流过树脂层，然后水洗至pH为3，无 C广即可。
[0102] -种巧瓜中k瓜氨酸泡腾片的制备方法，包括如下步骤：
[0103] 1)取心瓜氨酸25g、巧樣酸21g、甘露醇10g、S氯薦糖4g、甜菊糖巧O.lg、质量浓度 为90%的PVP-k3G乙醇溶液4g混合均匀后直接制成酸颗粒，42°C干燥1.化；
[0104] 2)取碳酸氨钢17g、甘露醇20g、质量浓度为20%的PVP-k3〇乙醇溶液5g，混合均匀后 直接制成碱颗粒，42 °C干燥Smin;
[0105] 3)将干燥好的酸颗粒、碱颗粒整粒后喷入巧樣香精1. Og, 38°C干燥1.化后，加入 1. Sg聚乙二醇6000，混和均匀，压片，即可得心瓜氨酸泡腾片。
[0106] 配制泡腾片所需溫度为18°C，相对湿度为30%。
[0107] 实施例3:
[0108] -种巧瓜中k瓜氨酸的提取方法，包括如下步骤：
[0109] 1)制备超滤液:将去巧后的巧瓜瓜飄棒汁、离屯、、取上清液，将上清液用0.3um孔径 的平板膜真空抽滤后，选取截留分子量为6000道尔顿的平板膜超滤80min，再真空浓缩至k 瓜氨酸质量浓度为0.2mg/mL，得超滤液；
[0110] 2)上柱洗脱：将超滤液pH值调节至1.5得上柱液，将上柱液通入装填量为25ml的 皿-8型阳离子交换树脂交换吸附瓜氨酸，过柱流速为5.4BVA，流出液中心瓜氨酸质量浓度 为0.2mg/mL时吸附完毕，用摩尔浓度为0.8mol/L的氨水洗脱，洗脱流速为5.4BVA，洗脱终 点为洗出液巧=酬反应为阴性，收集洗脱液；
[0111] 3)减压蒸馈:将洗脱液用减压蒸馈装置蒸馈浓缩至原体积的2/3后得浓缩汁；
[0112] 4)结晶:将浓缩汁用无水乙醇结晶，结晶体缓慢析出至无结晶体析出时为终点，过 滤后的晶体用质量为2.5倍于晶体质量的水溶解，再用无水乙醇重复结晶2次，冷冻干燥后 得心瓜氨酸晶体，所用无水乙醇与浓缩汁的体积比为5:1;
[0113] 步骤2)之前对阳离子交换树脂预处理的步骤为:将阳离子交换树脂置于塑料容器 中，用清水漂洗，用水浸泡树脂24h，使其充分膨胀，然后将阳离子交换树脂装入柱中，用阳 离子交换树脂体积6倍的4%的HCl W ImL/min的速度流过树脂层，反复冲洗5次;然后再用水 自上而下洗涂树脂，直至流出液抑为5;再用阳离子交换树脂体积4倍4 %的化0田容液WlmL/ min的速度流过树脂层，然后水洗至抑为9,再用4倍阳离子交换树脂体积的4%的HCl溶液W ImL/min的速度流过树脂层，然后水洗至pH为5，无 C广即可。
[0114] -种巧瓜中k瓜氨酸泡腾片的制备方法，包括如下步骤：
[0115] 1)取心瓜氨酸35g、巧樣酸17g、甘露醇10g、S氯薦糖2g、甜菊糖巧0.5g、质量浓度 为90 %的PVP-k3G乙醇溶液6g混合均匀后直接制成酸颗粒，47 °C干燥3.化；
[0116] 2)取碳酸氨钢14g、甘露醇16g、质量浓度为20%的PVP-k3〇乙醇溶液9g，混合均匀后 直接制成碱颗粒，3 5 °C干燥12m i n;
[0117] 3)将干燥好的酸颗粒、碱颗粒整粒后喷入巧樣香精0.6g，42°C干燥0.化后，加入 2.5g聚乙二醇6000，混和均匀，压片，即可得心瓜氨酸泡腾片。
[0118] 泡腾片配制所需溫度为30°C，相对湿度为43%。
[0119] 泡腾片成品的检验:按照单因素和正交试验结果进行验证试验，制备3批心瓜氨酸 泡腾片，并对其进行质量检查，指标分别为崩解时限、抑值、口感、硬度和脆碎度。所制得的 k瓜氨酸泡腾片呈淡黄色圆形片剂，表面光洁完整，片重差异符合规定，如表1所示，平均抑 值为5.85，酸甜适口，平均崩解时间55s，平均硬度为53N，脆碎度0.58%，结果表明所确定的 较优工艺比较稳定。
[0120] 表1验证试验各指标值
[0121]
[0122]最后说明的是，W上实施例仅是本发明中的几个典型例子，用W说明本发明的技 术方案而非限制，本领域的普通技术人员可W对本发明的技术方案进行修改或者等同替 换，而不脱离本发明技术方案的宗旨和范围，其均应涵盖在本发明的权利要求范围当中。
【主权项】
1. 一种籽瓜中L-瓜氨酸的提取方法，其特征在于，包括如下步骤： 1) 制备超滤液:将去籽后的籽瓜瓜瓤榨汁、离心、取上清液，将上清液用微滤膜过滤后 超滤，再进行浓缩，得超滤液； 2) 上柱洗脱:将超滤液pH值至1.0-2.0，得上柱液，将上柱液通入阳离子交换树脂交换 吸附瓜氨酸，当检测流出液中L-瓜氨酸质量浓度与超滤液中L-瓜氨酸质量浓度相同时，交 换吸附完毕，然后用氨水作为洗脱剂，进行洗脱，洗脱终点为洗出液茚三酮反应为阴性，收 集洗脱液； 3) 减压蒸馏:将洗脱液减压蒸馏浓缩后得浓缩汁； 4) 结晶：将浓缩汁用无水乙醇结晶，重复结晶2-3次，冷冻干燥后得L-瓜氨酸晶体。2. 根据权利要求1所述的提取方法，其特征在于，所述微滤膜为0.1-0.3um孔径的平板 膜，超滤选取截留分子量为5000-7000道尔顿的平板膜，超滤时间为20-80min; 所述超滤液中L-瓜氨酸质量浓度为0.2-4. Omg/mL。3. 根据权利要求1所述的提取方法，其特征在于，所述阳离子交换树脂为001 X 7型、HD-8型或732型； 所述上柱液的过柱流速为3.6-7.28￥/11，所述阳离子交换树脂的用量为20-251111; 所述浓缩汁的体积为洗脱液体积的1/5-2/3; 所述浓缩汁与无水乙醇的体积比1:3-5。4. 根据权利要求1所述的提取方法，其特征在于，所述氨水的摩尔浓度为0.6-0.9mol/ U洗脱流速为3.6-7.2BV/h。5. 根据权利要求1所述的提取方法，其特征在于，所述步骤2)之前还包括对阳离子交换 树脂预处理的步骤：将阳离子交换树脂置于塑料容器中，用清水漂洗，用水浸泡树脂12-24h，使其充分膨胀，然后将阳离子交换树脂装入柱中，用阳离子交换树脂体积3-6倍的4% 的HCl以lmL/min的速度流过树脂层，反复冲洗3至5次;然后再用水自上而下洗涤树脂，直至 流出液pH为3-5;再用阳离子交换树脂体积2-4倍4%的NaOH溶液以lmL/min的速度流过树脂 层，然后水洗至pH为8-9，再用2-4倍阳离子交换树脂体积的4 %的HCl溶液以lmL/min的速度 流过树脂层，然后水洗至pH为3-5，无 Cll卩可。6. -种L-瓜氨酸，其特征在于，按照权利要求1-5任一项所述的提取方法制备得到。7. -种用于泡腾片的组合物，其特征在于，包括以下重量份的组分： L-瓜氨酸25-35份、柠檬酸17-21份、甘露醇10-14份、三氯蔗糖2-4份、甜菊糖苷0.1-0.5 份、PVP-k3Q乙醇A溶液4-6份； 碳酸氢钠14-17份、甘露醇16-20份、PVP-k3Q乙醇B溶液5-9份； 柠檬香精〇 · 6-1 · 0份，聚乙二醇6000 1 · 8-2 · 5份； 所述L-瓜氨酸选自权利要求5所述L-瓜氨酸； 所述PVP-k3Q乙醇A溶液为质量浓度为90%的PVP-k3Q乙醇溶液，所述PVP-k 3Q乙醇B溶液 为质量浓度为20 %的PVP-k3Q乙醇溶液。8. 使用权利要求7所述的组合物制备泡腾片的方法，其特征在于，包括如下步骤： 1) 将L-瓜氨酸、柠檬酸、甘露醇、三氯蔗糖、甜菊糖苷、PVP-k3Q乙醇A溶液混合均匀后直 接制成酸颗粒，然后干燥酸颗粒； 2) 将碳酸氢钠、甘露醇和PVP-k3Q乙醇B溶液混合均匀后直接制成碱颗粒，然后干燥碱颗 粒； 3)将酸颗粒和碱颗粒整粒后喷入柠檬香精，干燥后加入聚乙二醇6000,混和均匀，压 片，即可得泡腾片。9. 根据权利要求8所述的方法，其特征在于，所述制备泡腾片时所需温度为18-30°C，相 对湿度为30-48 %。10. 根据权利要求8所述的方法，其特征在于，所述步骤1)中干燥的温度为42-47Γ，干 燥的时间为1.5-3.5h;所述步骤2)中干燥的温度为35-42°C，干燥的时间为8-12min;所述步 骤3)中干燥的温度为38-42 °C，干燥的时间为0.8-1.2h。
【文档编号】A61K31/198GK105924371SQ201610281991
【公开日】2016年9月7日
【申请日】2016年4月28日
【发明人】陈文 , 王军
【申请人】石河子开发区石大合旭科技开发有限公司