一种氟-铕共掺杂柱状羟基磷灰石纳米晶的制备方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及一种氟-铕共掺杂柱状羟基磷灰石纳米晶的低温矿化制备方法。
【背景技术】
[0002]纳米羟基磷灰石(Ca10(OH)2(PO4)6，HAp)是人体骨骼和牙齿中无机相的主要组成物质，具有良好的生物相容性。此外，羟基磷灰石晶体属于六方晶系，其特殊的空间结构使它晶格中的阴、阳离子均能被其它的适宜离子取代，从而赋予其新的理化性质和功效。
[0003]稀土元素铕和铽常被用于掺杂羟基磷灰石制备细胞荧光探针，以克服传统荧光染料的低荧光强度和较低的耐光性，提高探针的稳定性和弥补光漂白的缺陷，同时克服荧光量子点探针的高毒性缺陷。其中，氟离子常被用于共掺杂以消除羟基磷灰石晶格里羟基对稀土离子的光淬灭效应。目前，合成单晶氟-铕共掺杂的羟基磷灰石纳米晶均在中高温条件下。
【发明内容】
[0004]本发明的目的是提供一种氟-铕共掺杂柱状羟基磷灰石纳米晶的低温矿化制备方法。
[0005]本发明的实现过程如下:
一种氟-铕共掺杂羟基磷灰石纳米晶的制备方法，在油酸、油胺和乙醇混合液中，加入I丐盐水溶液、磷酸盐水溶液、硝酸铕水溶液和氟化钠水溶液，搅拌均匀后在O V?30°C的环境中静置7~30天即可获得柱状氟-铕共掺杂羟基磷灰石纳米晶，其中最终油酸、油胺、乙醇、水的体积比为(2-6):1: (10-30): (10-30)。
[0006]所述钙盐为硝酸钙；磷酸盐选自磷酸钠、磷酸氢钠、磷酸二氢钠；钙盐与磷酸盐的摩尔比为1:1.67 ;氟化钠与钙盐的摩尔比为(0.05~0.2):1 ;硝酸铕与钙盐的摩尔比为(0.05-0.2):1。
[0007]使用环己烷和乙醇反复洗涤数次获得的终产物，环己烷为洗涤剂，乙醇为助沉淀剂。
[0008]上述制备的氟-铕共掺杂羟基磷灰石纳米晶为柱状，直径10~15 nm，长度25 ~50nmo
[0009]上述方法制备得到的的氟-铕共掺杂羟基磷灰石纳米晶可应用在细胞荧光标记和生物组织修复材料中。
[0010]本发明基于天然羟基磷灰石矿化和易被杂质离子掺杂的机理，借鉴生物体内硬组织形成环境中存在疏水性物质，改变以往生物质矿化体系为水相体系为在矿化反应体系中引进疏水性物质形成亲疏水性混合体系，以及利用一价氟离子和三价铕离子强相互作用的特点，在常温反应体系获得含氟-铕共掺杂的六方柱状纳米羟基磷灰石。
[0011]本发明的积极效果:本发明基于自然界羟基磷灰石的生物矿化法通过改进矿化反应体系，确立一简单的油水混合矿化体系，以及利用强阴、强阳离子之间的作用力，进行低温矿化制备氟-铕共掺纳米杂羟基磷灰石。本发明制备方法原料廉价易得，反应条件极其温和，合成工艺简单易实现，工艺放大容易且重现性能好，反应成本低，产物质量稳定；本方法所制备的氟-铕共掺杂的六方柱状纳米羟基磷灰石具有红色荧光，可用于细胞荧光标记，亦可作为无机原材料用于制备人工骨、骨水泥等生物医用组织修复材料。
【附图说明】
[0012]图1是实施例1制备的氟-铕共掺杂的羟基磷灰石纳米晶的TEM图；
图2是实施例1制备的氟-铕共掺杂的羟基磷灰石纳米晶的HRTEM图；
图3是实施例1制备的氟-铕共掺杂的羟基磷灰石纳米晶的H)S图；
图4是实施例1制备的氟-铕共掺杂的羟基磷灰石纳米晶的XRD图；
图5是实施例1制备的氟-铕共掺杂的羟基磷灰石纳米晶的荧光光谱图(右上角图为局部放大图)；
图6是实施例4制备的氟-铕共掺杂的羟基磷灰石梭状纳米晶的TEM图；
图7是实施例5制备的氟-铕共掺杂的羟基磷灰石纳米晶的细胞标记图。
【具体实施方式】
[0013]下述实施例中所使用的实验方法如无特殊说明，均为常规方法；所用的材料、试剂等，如无特殊说明，均可从商业途径得到。
[0014]实施例1氟-铕共掺杂的羟基磷灰石纳米晶的制备
在250mL的烧杯中，加入1mL油酸，5ml油胺，50mL乙醇，然后再加入0.25M的硝酸钙溶液25mL、0.25M的硝酸铕溶液2.5mL、0.15M的磷酸钠溶液25mL和0.25M的氟化钠溶液5mL，搅拌均匀，封孔膜封住烧杯口，在室温中静置20d。反应结束后，离心收集沉淀，并用环己烷和乙醇洗涤数次获得终产物。
[0015]通过透射电镜检测显示反应的产物为的六方柱状纳米晶，直径约15nm，长约30~50nm,如图1所示；对产物进行HRTEM检测发现纳米颗粒结晶性良好，如图2所示；EDS分析发现产物中含有钙、磷、氟、铕等元素，如图3所示；经XRD分析知所的产物为羟基磷灰石，如图4所不；经焚光光谱扫描发现产物在594nm和617nm处有强的红光吸收峰，如图5所示。
[0016]实施例2氟-铕共掺杂的羟基磷灰石纳米晶的制备
在250mL的烧杯中，加入1mL油酸，5ml油胺，50mL乙醇，然后再加入0.25M的硝酸钙溶液25mL、0.25M的硝酸铕溶液2.5mL、0.15M的磷酸钠溶液25mL和0.25M的氟化钠溶液5mL，搅拌均匀，封孔膜封住烧杯口，在10°C恒温箱中静置20d。反应结束后，离心收集沉淀，并用环己烷和乙醇洗涤数次获得终产物。产物类似于实例I的结果，为直径约12nm和长约25~40nm的六方柱状纳米晶。
[0017]实施例3氟-铕共掺杂的羟基磷灰石纳米晶的制备
在50mL的烧杯中，加入4mL油酸，Iml油胺，15mL乙醇，然后再加入0.25M的硝酸钙溶液1mL, 0.25M的硝酸铕溶液2mL、0.15M的磷酸钠溶液1mL和0.25M的氟化钠溶液2mL，搅拌均匀，封孔膜封住烧杯口，在4°C恒温箱中静置30d。反应结束后，离心收集沉淀，并用环己烷和乙醇洗涤数次获得终产物。产物类似于实例I的结果，为直径约1nm和长约25~35nm纳米晶。
[0018]实施例4对比实例
与实例I类似，不同之处在于反应为150°C的水热反应体系。
[0019]在250mL的烧杯中，加入1mL油酸，5ml油胺，50mL乙醇，然后再加入0.25M的硝酸钙溶液25mL、0.25M的硝酸铕溶液2.5mL、0.15M的磷酸钠溶液25mL和0.25M的氟化钠溶液5mL，搅拌均匀，密封于钢套中，在150°C的烘箱中反应10小时。反应结束后，离心收集沉淀，并用环己烷和乙醇洗涤数次获得终产物，其透射电镜检测如图6所示为长度约10nm的梭状纳米晶。
[0020]实施例5氟-铕共掺杂的羟基磷灰石单晶纳米棒的应用
第一步，纳米棒表面的亲疏水性转换。称取实施例1制备的20mg的铕掺杂羟基磷灰石单晶纳米棒沉淀，重新分散于3ml的环己烧中，并加入到溶有20mg Pluronic F127的1ml水溶液中，然后再加入6ml四氢呋喃，震荡混匀后，获得浑浊的悬浮液。然后通过减压旋转蒸发移除混合液中的有机溶剂，再用水洗去多余的Pluronic F127后获得亲水性氟-铕共掺杂的羟基磷灰石单晶纳米粒子。
[0021]第二步，具有红色荧光的氟-铕共掺杂的羟基磷灰石单晶纳米棒的细胞标记。
[0022]在37°C的CO2含量为5%的细胞培养箱中，用含有10%胎牛血清、2 mM谷氨酰胺、100 U/ml的青霉素、100 μ g/ml链霉素的DMEM培养液培养A549细胞，维持在指数生长状态。把灭菌的玻璃底片放入24孔板中，然后加入已经计数的A549细胞悬浮液，使每个玻璃片上有I X 15的细胞数，培养24h，再加入150 Pg/ml荧光纳米粒子溶液在37°C培养4 h，再用灭菌的PBS洗去未摄取的纳米粒子，取出玻璃片立刻用4%多聚甲醛在室温下固定1min,固定好的细胞用激光扫描共焦显微镜观察形貌，结果如图7所示。
【主权项】
1.一种氟-铕共掺杂柱状羟基磷灰石纳米晶的制备方法，其特征在于:在油酸、油胺和乙醇的混合液中，加入I丐盐水溶液、磷酸盐水溶液、硝酸铕水溶液和氟化钠水溶液，搅拌均匀后在(TC?30°C的环境中静置7~30天即可获得柱状氟-铕共掺杂羟基磷灰石纳米晶，其中最终油酸、油胺、乙醇、水的体积比为(2~6):1: (10~30): (10-30)。2.根据权利要求1所述方法，其特征在于:钙盐为硝酸钙；磷酸盐选自磷酸钠、磷酸氢钠、磷酸二氢钠；钙盐与磷酸盐的摩尔比为1:1.67 ;氟化钠与钙盐的摩尔比为(0.05-0.2):1 ;硝酸铕与钙盐的摩尔比为(0.05-0.2):1。3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于:使用环己烷和乙醇反复洗涤数次获得的终产物，环己烷为洗涤剂，乙醇为助沉淀剂。4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于:制备的氟-铕共掺杂羟基磷灰石纳米晶为柱状，直径10-15 nm，长度25 ~ 50nm。5.权利要求1所述方法制备得到的的氟-铕共掺杂羟基磷灰石纳米晶在细胞荧光标记中的应用。6.权利要求1所述方法制备得到的的氟-铕共掺杂羟基磷灰石纳米晶在生物组织修复材料中的应用。
【专利摘要】本发明公开了一种氟-铕共掺杂柱状羟基磷灰石纳米晶的制备方法，其在油酸、油胺和乙醇的混合液中，加入钙盐溶液、磷酸盐水溶液、硝酸铕水溶液和氟化钠水溶液，搅拌均匀后在0℃～30℃的环境中静置7~30d，即可获得柱状氟-铕共掺杂的羟基磷灰石纳米晶。本发明制备的羟基磷灰石纳米晶具有红色荧光特性，可用于生物细胞的荧光标记和制备人工骨等可降解的生物医用修复材料。
【IPC分类】B82Y40/00, C01B25/32, B82Y30/00, A61L27/42, G01N21/64, C09K11/71, C09K11/86, A61L27/50
【公开号】CN105219391
【申请号】CN201510605197
【发明人】郑晓燕, 马海霞, 范代娣, 惠俊峰
【申请人】西北大学
【公开日】2016年1月6日
【申请日】2015年9月22日