一种用于晚期糖基化终末产物检测的吸附剂及制备方法与流程

本发明涉及食品安全检测，具体为一种用于晚期糖基化终末产物检测的吸附剂及制备方法。

背景技术：

1、公开该背景技术部分的信息仅仅旨在增加对本发明的总体背景的理解，而不必然被视为承认或以任何形式暗示该信息构成已经成为本领域一般技术人员所公知的现有技术。

2、晚期糖基化终末产物(advanced glycation endproducts，ages)是食品加工过程中伴生化学危害物，主要是还原糖与蛋白质的自由氨基或与游离氨基酸经美拉德反应等途径形成的一系列稳定聚合产物的总称。ages广泛存在于各种各样的食品中，通过食品摄入体内的ages以被人体吸收，并随着年龄的增长在体内积累。ages的积累对人体的潜在危害比较大，容易引起人体氧化应激反应，可能诱发糖尿病、肾病、动脉粥样硬化、免疫缺陷、衰老、炎症、阿尔兹海默病(俗称老年痴呆症)等各种疾病。因此，近年来针对食品中ages的研究越来越受到关注和重视。

3、食品中ages的种类繁多，结构比较复杂，目前的检测方法主要分为仪器分析法和免疫检测法两大类。仪器分析法包括二极管阵列检测器(dad)、荧光检测器(fld)、串联质谱(ms/ms)等。气相色谱(gc)一般连接质谱(ms)。免疫分析法主要是elisa法。每种分析方法都有其优点和缺点。目前，最常用的食品中多种ages的检测方法还是lc-ms/ms法，尤其是随着uplc技术的发展，该方法检测的灵敏度和准确性逐步提高。在检测之前，需要对样品进行前处理。固相微萃取是上世纪末发明的一种绿色样品前处理技术，这种技术可以集采样、萃取和浓缩于一体，同时具有操作简单、快速和需要的样品量少等优点。

技术实现思路

1、本发明提供的发明目的在于提供一种用于晚期糖基化终末产物检测的吸附剂及制备方法。该用于晚期糖基化终末产物检测的吸附剂及制备方法，本发明的氨基酸的共价有机框架材料，其中同时含有大量的氨基和羧基，能够进一步加强晚期糖基化终末产物与酸、碱的结合强度，本发明制备的固相微萃取探针原位吸附，有利于油炸食品中低含量残留的晚期糖基化终末产物的萃取检测，采用本申请制备的在线固相微萃取-高效液相色谱-串联质谱法检测晚期糖基化终末产物灵敏度高、检测限低、线性范围宽，并且可以同时检测多种晚期糖基化终末产物。

2、为了实现上述效果，本发明提供如下技术方案：一种用于晚期糖基化终末产物检测的吸附剂，包括：带有氨基酸的共价有机框架材料。

3、制备如权利要求1所述的一种用于晚期糖基化终末产物检测的吸附剂的方法，其特征在于，包括以下步骤：

4、s1、以1,3,5-三(4-氨基苯基)苯、2,5-二乙烯基对苯二甲醛作为反应功能单体，乙酸为催化剂，在溶剂中反应获得带有乙烯基的共价有机框架材。

5、s2、以乙烯基的共价有机框架材、l-半胱氨酸作为反应功能单体，引发剂存在下，在溶剂中点击反应得到带有氨基酸的共价有机框架材料。

6、s3、带有氨基酸的共价有机框架材料进行提纯，依次用丙酮、水以及乙醇溶液进行洗涤，干燥后即得纯净产物。

7、s4、固相微萃取探针包括载体、固相微萃取吸附剂与密封胶。

8、s5、将密封胶均匀涂覆于不锈钢针丝表面，将带有氨基酸的共价有机框架材料通过密封胶粘附于不锈钢针丝上，得到固相微萃取探针。

9、s6、利用固相微萃取探针对样品进行原位吸附，取出固相微萃取探针，利用脱附剂处理固相微萃取探针，得到脱附液，对脱附液进行液相色谱-串联质谱法检测。

10、进一步的，包括以下步骤：根据s1中的操作步骤，所述乙烯基的共价有机框架材合成反应的温度为70-150℃，反应的时间为24-72小时。

11、进一步的，包括以下步骤：根据s1中的操作步骤，所述催化剂为3-6m乙酸，所述1,3,5-三(4-氨基苯基)苯、2,5-二乙烯基对苯二甲醛、催化剂的摩尔比为2：3：(0.1-0.3)，进一步优选为2：3：(0.1-0.2)。

12、进一步的，包括以下步骤：根据s1中的操作步骤，所述溶剂为二氧六环：正丁醇＝1：1、邻二氯苯：正丁醇＝1，1、二氧六环：三甲苯＝1：1、邻二氯苯：三甲苯＝1：1中的一种。

13、进一步的，包括以下步骤：根据s2中的操作步骤，所述带有氨基酸的共价有机框架材料点击反应的温度为75-85℃，反应的时间为12-48小时。

14、进一步的，包括以下步骤：根据s2中的操作步骤，所述反应过程中，通入氮气进行保护，所述反应过程中，溶剂为三氟甲苯，所述引发剂为偶氮二异丁腈、2-羟基-4'-(2-羟乙氧基)-2-甲基苯丙酮中的一种。

15、进一步的，包括以下步骤：根据s4中的操作步骤，所述每平方厘米的载体上负载的固相微萃取吸附剂的量为1-5mg，所述密封胶为环氧树脂胶或聚氨酯密封胶，密封胶与固相微萃取吸附剂的质量比为(0.5-1):9。

16、进一步的，包括以下步骤：根据s4中的操作步骤，所述载体为不锈钢丝。

17、进一步的，包括以下步骤：根据s6中的操作步骤，所述吸附时间为10-30分钟，脱附剂由乙腈和甲酸组成，乙腈与甲酸的体积比范围是100：(1-10)，优选为100：(1-2)，反应过程中脱附时间为20分钟。

18、本发明提供了一种用于晚期糖基化终末产物检测的吸附剂及制备方法，具备以下有益效果：

19、(1)、本发明的氨基酸的共价有机框架材料，其中同时含有大量的氨基和羧基，能够进一步加强晚期糖基化终末产物与酸、碱的结合强度。

20、(2)、本发明制备的固相微萃取探针原位吸附，有利于油炸食品中低含量残留的晚期糖基化终末产物的萃取检测。

21、(3)、采用本申请制备的在线固相微萃取-高效液相色谱-串联质谱法检测晚期糖基化终末产物灵敏度高、检测限低、线性范围宽，并且可以同时检测多种晚期糖基化终末产物。

技术特征：

1.一种用于晚期糖基化终末产物检测的吸附剂，其特征在于，包括：带有氨基酸的共价有机框架材料。

2.制备如权利要求1所述的一种用于晚期糖基化终末产物检测的吸附剂的方法，其特征在于，包括以下步骤：

3.据权利要求2所述的一种用于晚期糖基化终末产物检测的吸附剂的制备应用方法，其特征在于，包括以下步骤：根据s1中的操作步骤，所述乙烯基的共价有机框架材合成反应的温度为70-150℃，反应的时间为24-72小时。

4.据权利要求2所述的一种用于晚期糖基化终末产物检测的吸附剂的制备应用方法，其特征在于，包括以下步骤：根据s1中的操作步骤，所述催化剂为3-6m乙酸，所述1,3,5-三(4-氨基苯基)苯、2,5-二乙烯基对苯二甲醛、催化剂的摩尔比为2：3：(0.1-0.3)，进一步优选为2：3：(0.1-0.2)。

5.据权利要求2所述的一种用于晚期糖基化终末产物检测的吸附剂的制备应用方法，其特征在于，包括以下步骤：根据s1中的操作步骤，所述溶剂为二氧六环：正丁醇＝1：1、邻二氯苯：正丁醇＝1，1、二氧六环：三甲苯＝1：1、邻二氯苯：三甲苯＝1：1中的一种。

6.据权利要求2所述的一种用于晚期糖基化终末产物检测的吸附剂的制备应用方法，其特征在于，包括以下步骤：根据s2中的操作步骤，所述带有氨基酸的共价有机框架材料点击反应的温度为75-85℃，反应的时间为12-48小时。

7.据权利要求2所述的一种用于晚期糖基化终末产物检测的吸附剂的制备应用方法，其特征在于，包括以下步骤：根据s2中的操作步骤，所述反应过程中，通入氮气进行保护，所述反应过程中，溶剂为三氟甲苯，所述引发剂为偶氮二异丁腈、2-羟基-4'-(2-羟乙氧基)-2-甲基苯丙酮中的一种。

8.据权利要求2所述的一种用于晚期糖基化终末产物检测的吸附剂的制备应用方法，其特征在于，包括以下步骤：根据s4中的操作步骤，所述每平方厘米的载体上负载的固相微萃取吸附剂的量为1-5mg，所述密封胶为环氧树脂胶或聚氨酯密封胶，密封胶与固相微萃取吸附剂的质量比为(0.5-1):9。

9.据权利要求2所述的一种用于晚期糖基化终末产物检测的吸附剂的制备应用方法，其特征在于，包括以下步骤：根据s4中的操作步骤，所述载体为不锈钢丝。

10.据权利要求2所述的一种用于晚期糖基化终末产物检测的吸附剂的制备应用方法，其特征在于，包括以下步骤：根据s6中的操作步骤，所述吸附时间为10-30分钟，脱附剂由乙腈和甲酸组成，乙腈与甲酸的体积比范围是100：(1-10)，优选为100：(1-2)，反应过程中脱附时间为20分钟。

技术总结
本发明公开了一种用于晚期糖基化终末产物检测的吸附剂及制备方法，属于食品安全检测技术领域，该用于晚期糖基化终末产物检测的吸附剂及制备方法，包括：带有氨基酸的共价有机框架材料。本发明的氨基酸的共价有机框架材料，其中同时含有大量的氨基和羧基，能够进一步加强晚期糖基化终末产物与酸、碱的结合强度，制备的固相微萃取探针原位吸附，有利于油炸食品中低含量残留的晚期糖基化终末产物的萃取检测，采用本申请制备的在线固相微萃取‑高效液相色谱‑串联质谱法检测晚期糖基化终末产物灵敏度高、检测限低、线性范围宽，并且可以同时检测多种晚期糖基化终末产物。

技术研发人员：纪文华,王荣雨,王晓,刘伟,耿岩玲
受保护的技术使用者：山东省分析测试中心
技术研发日：
技术公布日：2024/5/16