专利名称：利用气相色谱-质谱联用测定烟草及烟草制品中西柏烷二萜醇的方法
技术领域：
本发明涉及烟草测定方法，特别是一种利用气相色谱-质i普联用测定烟草 及烟草制品中西柏烷二碎醇的方法，该技术利用超声萃取，溶剂处理，衍生化 试剂衍生化和气质联用分析从而实现快速准确测定。
背景技术：
烟草中的化学成分是多种多样和十分复杂的，西柏烷二薛醇是烟草中 一种 分布较广泛的重要化学成分，它们被认为是重要的香味物质前体。但由于对西 柏烷二辟醇的提取和分离纯化较为困难，因而它们被认为是较难准确测定的烟 草化学成分之一。目前烟草西柏烷二萜醇的分析方法大即有气相色谱法、气质 联用法，又有液质联用法，甚至连薄层色傳法都有应用。因为气相和气质联用 方法分析时如果不进行衍生化处理，则不能实现这两种物质的分离，进行衍生 化处理时，对衍生化条件的掌握尺度又会导致精确定量的难以实现。对液相和
';M:条件而言，因萃取溶剂和进样溶剂的限制，对这两种物质实现基线分离和
精确定量分析是非常困难的。
发明内容
本发明的目的正是针对现有技术中所存在的不足之处，提供利用气相色谱 -质谱联用测定烟草及烟草制品中西柏烷二萜醇的方法。该方法能够有效地将 烟草中的西柏烷二辟醇首先实现完全萃取,再进行一种行之有效的衍生化方法， 从而实现烟草中的西柏烷二薛醇的精确定量分析。
本发明的目的是通过以下技术方案来实现的本发明的利用气相色谱-质 谱联用测定烟草及烟草制品中西柏烷二碎醇的方法依次包括以下步骤
(1)、烟草制品中西柏烷二辟醇类化合物的萃取称取烟草或烟草制品于 容器中，用一种卣代烃试剂l萃取烟草或烟草制品中的二萜醇类化合物；
(2 )、对萃取液进行浓缩至干；
(3 )、应用另一种氯代烃试剂2对样品进行洗涤，并定容； (4 )、移取步骤(3 )中定容后的溶液O. 5-5ml于一容器里，浓缩至干； (5 )、向该容器中加入一种难挥发溶剂，该难挥发溶剂为曱苯、二氯乙烷、 二曱基曱酰胺(DMF)或二曱基亚砜(DMS0)中的任意一种，加入量为步骤(4 ) 中干物质的O. 2-l倍，同时加入与难挥发溶剂等量的硅烷化试剂，该该硅烷化 试剂为N，O-双(三曱基硅烷基)三氟乙酰胺(BSTFA)或三曱基氯硅烷(TMCS)， 在30-9(TC的某一温度下石圭烷化0. 5-5小时；
(6 )、对所得样品进行气相色谱-质i普联用分析，
气相条件为色语柱DB-5MS， 3 Om x 0. 25mm x 2. 5 |a m,程序升温120 。C (5min), 2 (TC/min升至210°C ，然后0. 5°C/min升至220°C, 10°C/min 升至280 °C。保留30min。
在本发明中，所述烟草或烟草制品可为烟草碎末、烤烟青烟叶或香料烟青 烟叶。所述萃取过程可为超声波萃取，也可为浸泡萃取，或浸蘸萃取。
所述卣代烃试剂l可为包括一个、二个或三个碳原子的一取代或多取代烃 氯代烃，该试剂中内含正十七烷醇和蔗糖八乙酸酯的内标。所述氯代烃试剂2 可为三氯甲烷、也可为曱苯或1，2-二氯乙烷。
在本发明中，萃取液进行浓缩时可采用减压浓缩，真空度在5 kPa—500 kPa 之间，温度控制在20-6(TC之间。在步骤(4)中的浓缩至干过程是在惰性气体 保护下进行或在低温下浓缩至干。
本发明的突出优点在于能够有效地将烟草中的西柏烷二萜醇首先实现完 全萃取，再进行一种行之有效的衍生化方法，从而实现烟草中的西柏烷二萜醇 的精确定量分析。本发明的方法不仅具有可以进行萃取分析诸如烟草这样复杂 体系的西柏烷二萜醇，并且萃取效率高、操作简便、快速。
附图为本发明方法的操作流程图。
具体实施例方式
本发明以下将结合实施例作进一步描述，但并不限制本发明 实施例1
a、 称取过40目筛的烟草样品0. 2-0. 5 g于玻璃烧瓶中，加入20-50ml的 二氯曱烷(内含16mg/ml正十七烷醇和6mg/ml的蔗糖八乙酸酯的内标)，在常 温下、超声波萃取频率为50KHz和超声功率350w下超声10min,冷却至室温后， 用装有5g无水辟u酸钠的滤纸滤去烟末。
b、 将所得滤液在10-13kpa下浓缩至干。残渣用三氯甲烷定容至5-10ml。 取出1毫升，在惰性气体保护下浓缩至干。加入500ul 1 : 1的DMF : BSTFA， 在60-80。C下反应0. 5-1. 5小时。
c、 对所得样品进行GC-MS分析。 实施例2
a、 取两片烤烟青烟叶，在5000ml的玻璃烧杯中加入2000ml的1， 2-二氯 乙烷，(内含16mg/ml正十七烷醇和6 mg/ml的蔗糖八乙酸酯)，将烟叶在烧杯 中浸蘸三次，每次六秒种。蘸后溶液用装有50克无水硫酸钠的滤纸过滤。
b、 将所得滤液在10-13kpa下浓缩至干。残渣用二氯曱烷定容至50ml。 取出1毫升，在惰性气体保护下浓缩至干。加入500ul 1 : 1的DMSO : TMCS， 在60-80。C下反应0. 5-1. 5小时。
c、 对所得样品进行GC-MS分析。 实施例3
a、 取五片香津+烟青烟叶，在2000ml的玻璃烧杯中加入500ml的三氯曱烷 (内含16mg/ml正十七烷醇和6mg/ml的蔗糖八乙酸酯)，将烟叶在烧杯中浸蘸
五次，每次三秒种。蘸后溶液用装有15克无水硫酸钠的滤纸过滤。
b、 将所得滤液在10-13kpa下浓缩至干。残渣用1 ， 2-二氯乙烷定容至1 Oml 。 取出1毫升，在惰性气体保护下浓缩至干。加入500ul 1 : 1的DMF : TMCS，在 60-80。C下反应0. 5-1. 5小时。
c、 对所得样品进行GC-MS分析。
权利要求
1、一种利用气相色谱-质谱联用测定烟草及烟草制品中西柏烷二萜醇的方法，其特征在于该方法依次包括以下步骤(1)、烟草制品中西柏烷二萜醇类化合物的萃取称取烟草或烟草制品于容器中，用一种卤代烃试剂1萃取烟草或烟草制品中的二萜醇类化合物；(2)、对萃取液进行浓缩至干；(3)、应用另一种氯代烃试剂2对样品进行洗涤，并定容；(4)、移取步骤(3)中定容后的溶液0.5-5ml于一容器里，浓缩至干；(5)、向该容器中加入一种难挥发溶剂，该难挥发溶剂为甲苯、二氯乙烷、二甲基甲酰胺(DMF)或二甲基甲酰胺(DMF)中的任意一种，加入量为步骤(4)中干物质的0.2-1倍，同时加入与难挥发溶剂等量的硅烷化试剂，该硅烷化试剂为N，O-双(三甲基硅烷基)三氟乙酰胺(BSTFA)或三甲基氯硅烷(TMCS)，在30-90℃的某一温度下硅烷化0.5-5小时；(6)、对所得样品进行气相色谱-质谱联用分析，气相条件为色谱柱DB-5MS，30m×0.25mm×2.5μm，程序升温120℃(5min)，20℃/min升至210℃，然后0.5℃/min升至220℃，10℃/min升至280℃。保留30min。
2 、根据权利要求1所述的测定烟草及烟草制品中西柏烷二萜醇的方法， 其特征在于所述烟草或烟草制品可为烟草碎末、烤烟青烟叶或香料烟青烟叶。
3 、根据权利要求1所述的测定烟草及烟草制品中西柏烷二萜醇的方法， 其特征在于所述萃取过程可为超声波萃取，也可为浸泡萃取，或浸蘸萃取。
4 、根据权利要求1所述的测定烟草及烟草制品中的西柏烷二萜醇的方法， 其特征在于卣代烃试剂l可为包括一个、二个或三个碳原子的一取代或多取 代烃氯代烃。
5 、才艮据外又利要求1所述的测定烟草及烟草制品中西柏烷二碎醇的方法， 其特征在于萃取液进行浓缩时可釆用减压浓缩，真空度在5kPa—S00kPa之 间，温度控制在20-60。C之间。
6 、根据权利要求1所述的测定烟草及烟草制品中西柏烷二碎醇的方法， 其特征在于氯代烃试剂2可为三氯甲烷、也可为二氯曱烷或1,2-二氯乙烷。
7、根据权利要求1所述的测定烟草及烟草制品中西柏烷二碎醇的方法，其 特征在于步骤(4)中的浓缩至干过程是在惰性气体保护下进行，或在低温浓 缩过程下进行。
全文摘要
一种利用气相色谱-质谱联用测定烟草及烟草制品中西柏烷二萜醇的方法，其特征在于包括下述步骤a.首先，取一定重量的烟草制品，加入一定的萃取溶剂卤代烃类；之后，采用超声波振荡萃取出二萜醇类；b.将萃取溶剂在一定条件下蒸发至干后加入另一种卤代烃类，溶解定容后取出适量；c.将取出的溶剂在一定条件下蒸干，加入一定体积的另一种难挥发溶剂和同比例的某种硅衍生化试剂，在一定温度条件下进行衍生化。衍生化完全后直接进行色谱-质谱联用方法测定其中的西柏烷二萜醇。本发明的方法相比现有技术不仅具有可以进行萃取分析诸如烟草这样复杂体系的西柏烷二萜醇，而且萃取效率高、操作简便、快速。
文档编号G01N30/02GK101178390SQ20071019309
公开日2008年5月14日 申请日期2007年12月12日 优先权日2007年12月12日
发明者丽 丁, 刘克建, 谢复炜, 乐 赵 申请人:中国烟草总公司郑州烟草研究院