直接溶剂萃取气相色谱质谱联用技术分析检测烟草中碱性香味成分的方法
【技术领域】
[0001] 本发明属于烟草香味成分检测技术领域，具体设及一种直接溶剂萃取气相色谱质 谱联用技术分析检测烟草中碱性香味成分的方法。
【背景技术】
[0002] 烟草香味成分是影响烟草及卷烟质量的主要因素之一，是评价烟草制品感官质量 的重要指标。烟草香味成分大致可W分为酸性香味成分、中性香味成分、碱性香味成分。烟 草中碱性香味成分主要包括化晚、化嗦、化咯、哇嘟等杂环类化合物，它们是烟草中一类重 要的香味物质，尽管它们在烟草中的含量甚微，但是由于它们有很强的气味和较低的阔值， 使它们在增强烟草香气特性方面起着重要的作用。
[0003]同时蒸馈萃取(SDE)将样品的水蒸气蒸馈和有机溶剂萃取结合，定性定量效果好， 是目前最常用的烟草中香味成分提取方法。尽管SDE在烟草香味成分分析中普遍采用的样 品前处理技术，但是SDE也不可回避地存在W下几个问题：（1)同时蒸馈萃取是一个敞开体 系，在空气环境和大气压下长时间高溫加热蒸馈，一些活性高的碱性香味成分会发生氧化、 热降解等化学反应。一方面产生了原样品中没有的成分，另一方面原有的成分部分散失，给 分析结果造成误差；（2)蒸馈溫度高，沸点较低的碱性香味成分会散失，但水溶液体系造成 蒸馈溫度又不可能太高，沸点太高的碱性香味成分却蒸馈不出；（3)含量很低的碱性成分很 难定量。因此，研究简单、溫和、快速的分离富集前处理方法显得很有必要。
[0004]因此，建立常溫下碱性香味成分的萃取方法并通过气相色谱质谱联用技术分析测 试烟草中碱性香味成分的方法可W准确测定烟草中碱性香味成分，对指导卷烟科学配方、 提高卷烟香吃味质量具有重要的理论意义和应用价值。
【发明内容】
[000引本发明的目的正是基于上述现有技术状况而提供一种分析检测烟草中碱性香味 成分的方法。
[0006]本发明的目的是通过W下技术方案来实现的： 一种直接溶剂萃取气相色谱质谱联用技术分析检测烟草中碱性香味成分的方法，包括W下具体步骤： 1) 精确称取10-25g烟末样品，加入100-300mL1%-20%的氨氧化钢溶液，加入内标溶液， 浸泡15min,超声萃取60min,离屯、得到上清液； 2) 将上清液倒入分液漏斗，加入lOOmL二氯甲烧萃取溶剂，摇匀后静置分层，放出下层 二氯甲烧相，重复萃取Ξ次，收集合并二氯甲烧相;加入20g无水硫酸钢，振荡后静置3小时， 旋转蒸发至ImL，用0.45微米滤膜过滤后加入到色谱瓶，得到待检测样品； 3) 采用GC-MS仪器对步骤2)所得样品进行检测。检测完毕，对图谱数据进行处理得到碱 性香味成分的分析测试结果。
[0007]本发明所述的碱性香味成分包括化晚及其衍生物(如3-甲基化晚、4-甲基化晚、2-乙酷基化晚、2-化晚甲醒、3-化晚甲醒、2，3-联化晚等）、化嗦及其衍生物(如2-甲基化嗦、2， 5-二甲基化嗦、2，6-二甲基化嗦）、化咯及其衍生物(如2-乙酷基化咯、2-化咯甲醒）、哇嘟。 [000引步骤（3)中所述检测的色谱条件为：色谱柱：DB-Innowaxe1:;r(60mX0.32mmi.d.X 0.50皿d.f.);载气:He;流速：1.0ml/min;进样口溫度:250°C;进样量：1化;分流比10:1;溶 剂延迟lOmin;传输线溫度:250°C;程序升溫:60°CW2°C/min升到230°C，保留30min。
[0009]步骤(3)中所述检测的质谱条件为：电离方式:El;离子源溫度:230°C;电离能量： 70eV;扫描方式:SCAN和SIM同时扫描，保留时间及定量离子见表1。
[0010] 表1.碱性香味成分的保留时间、定量离子
' 步骤3)中的检测采用内标定量法，混合标准工作溶液含1种内标及15种碱性香味成分I 目标物，溶剂二氯甲烧，各浓度混合标准工作溶液中内标気代化晚的浓度10yg/mL，且每种 碱性香味成分浓度一样，混合标准工作溶液中碱性香味成分浓度量级从低到高依次为0.化 邑/mL、0.5μ邑/mL、5μ邑/mL、1Ομ邑/mL、50μ邑/mL、1ΟΟμ邑/mL、200μ邑/mL。
[0011 ] 15种碱性香味成分的线性方程、线性范围、检出限如表2所示。。
[001引表2 15种碱性香味成分的线性方程、线性范围、检出限
本发明w氨氧化钢溶液浸泡使碱性香味成分从烟草中游离出来，再用二氯甲烧直接萃 取，运种前处理方法在常溫下进行，处理条件溫和，不破坏碱性香味成分的化学结构，并且 防止沸点低的香味成分的挥发流失，因此分析结果比现在用的同时蒸馈萃取方法更真实可 靠。因此，本方法具有前处理条件溫和、操作简单、分析结果准确可靠等优点。
【具体实施方式】
[0013] 下面通过实施例对本发明进行进一步说明： 实施例1 1)精确称取15g烤烟烟末样品，加入lOOmL10%的氨氧化钢溶液，加入lOyg内标溶液，浸 泡15min,超声萃取60min,离屯、得到上清液。
[0014] 2)将上清液倒入分液漏斗，加入lOOmL二氯甲烧萃取溶剂，摇匀后静置分层，放出 下层二氯甲烧相。重复萃取Ξ次，收集二氯甲烧相。加入20g无水硫酸钢，振荡后静置3小时。 旋转蒸发至ImL，用0.45微米滤膜过滤后加入到色谱瓶，得到待检测样品。
[0015] 3)采用GC-MS仪器对步骤2)所得样品进行检测。检测完毕，对图谱数据进行处理得 到碱性香味成分的分析测试结果。
[0016] 实施例2 1)精确称取25g烤烟烟末样品，加入200血15%的氨氧化钢溶液，加入lOyg内标溶液，浸 泡15min,超声萃取60min,离屯、得到上清液。
[0017] 2)将上清液倒入分液漏斗，加入lOOmL二氯甲烧萃取溶剂，摇匀后静置分层，放出 下层二氯甲烧相。重复萃取Ξ次，收集二氯甲烧相。加入20g无水硫酸钢，振荡后静置3小时。 旋转蒸发至ImL，用0.45微米滤膜过滤后加入到色谱瓶，得到待检测样品。
[0018] 3)采用GC-MS仪器对步骤2)所得样品进行检测。检测完毕，对图谱数据进行处理得 到碱性香味成分的分析测试结果。
[0019] 实施例3 1)精确称取20g白肋烟烟末样品，加入300mL20%的氨氧化钢溶液，加入lOyg内标溶液， 浸泡15min,超声萃取60min,离屯、得到上清液。
[0020] 2)将上清液倒入分液漏斗，加入lOOmL二氯甲烧萃取溶剂，摇匀后静置分层，放出 下层二氯甲烧相。重复萃取Ξ次，收集二氯甲烧相。加入20g无水硫酸钢，振荡后静置3小时。 旋转蒸发至ImL，用0.45微米滤膜过滤后加入到色谱瓶，得到待检测样品。
[0021] 3)采用GC-MS仪器对步骤2)所得样品进行检测。检测完毕，对图谱数据进行处理得 到碱性香味成分的分析测试结果。
[0022] 实施例的检测结果见表3。
[0023] 表3碱性香味成分测试结果
【主权项】
1. 一种直接溶剂萃取气相色谱质谱联用技术分析检测烟草中碱性香味成分的方法，其 特征在于:包括以下具体步骤： 1) 精确称取10-25g烟末样品，加入100-300mL1%-20%的氢氧化钠溶液，加入内标溶液， 浸泡15min，超声萃取60min，离心得到上清液； 2) 将上清液倒入分液漏斗，加入100mL二氯甲烷萃取溶剂，摇匀后静置分层，放出下层 二氯甲烷相，重复萃取三次，收集合并二氯甲烷相;加入20g无水硫酸钠，振荡后静置3小时， 旋转蒸发至lmL，用0.45微米滤膜过滤后加入到色谱瓶，得到待检测样品； 3) 采用GC-MS仪器对步骤2)所得样品进行检测;检测完毕，对图谱数据进行处理得到碱 性香味成分的分析测试结果； 色谱条件为：色谱柱:DB-Innowaxetr，规格60mX0 · 32mmi·d·X0 · 50μπκ! ·f;载气:He;流 速：1.0ml/min;进样口温度：250°C;进样量：lyL;分流比10:1;溶剂延迟lOmin;传输线温 度:250°C;程序升温:60°C以2°C/min升到230°C，保留30min; 质谱条件为：电离方式:EI;离子源温度:230°C;电离能量:70eV;扫描方式:SCAN和SM同时扫描。2. 根据权利要求1所述的分析检测烟草中碱性香味成分的方法，其特征在于:所述内标 为氘代吡啶，内标溶液的浓度为10yg/mL，溶剂为二氯甲烷。3. 根据权利要求1所述的分析检测烟草中碱性香味成分的方法，其特征在于:步骤3)中 的检测采用内标定量法，混合标准工作溶液含1种内标及15种碱性香味成分目标物，溶剂二 氯甲烷，各浓度混合标准工作溶液中内标氘代吡啶的浓度10yg/mL，且每种碱性香味成分 浓度一样，标准工作溶液中碱性香味成分浓度量级从低到高依次为〇.Ug/mL、0.5yg/mL、5y g/mL、1Oyg/mL、50yg/mL、100yg/mL、200yg/mL〇4. 根据权利要求1所述的分析检测烟草中碱性香味成分的方法，其特征在于:所述碱性 香味成分包括以下15种：吡啶、3-甲基吡啶、4-甲基吡啶、2-乙酰基吡啶、2-吡啶甲醛、3-吡 啶甲醛、2，3-联吡啶、吡嗪、2-甲基吡嗪、2，5-二甲基吡嗪、2，6-二甲基吡嗪、吡咯、2-乙酰基 吡咯、2-吡咯甲醛、喹啉。
【专利摘要】一种直接溶剂萃取气相色谱质谱联用技术分析检测烟草中碱性香味成分的方法，其特征在于：具体包括以下步骤：1）精确称取烟末样品，加入氢氧化钠溶液，加入内标溶液，浸泡、超声萃取；2）在上清液中加二氯甲烷萃取溶剂，重复萃取三次，收集合并二氯甲烷相；加入无水硫酸钠，振荡后静置，旋转蒸发至1mL，用0.45微米滤膜过滤后，得到待检测样品；3）采用GC-MS仪器对样品进行检测；检测完毕，对图谱数据进行处理得到碱性香味成分的分析测试结果。本发明的优点在于：前处理过程简单、温和、快速，可以准确测定烟草中碱性香味成分，对指导卷烟科学配方、提高卷烟香吃味质量具有重要的理论意义和应用价值。
【IPC分类】G01N27/62, G01N30/02
【公开号】CN105445392
【申请号】CN201510777330
【发明人】贾云祯, 聂聪, 王宜鹏, 孙学辉, 秦亚琼, 王晓瑜, 孙培健, 杨松, 刘惠民, 陈黎, 崔华鹏, 潘立宁
【申请人】中国烟草总公司郑州烟草研究院
【公开日】2016年3月30日
【申请日】2015年11月13日