专利名称：三聚氰胺免疫层析检测技术的制作方法
技术领域：
本发明涉及生物领域中用于快速检测的三聚氰胺免疫层析检测技术。
背景技术：
免疫分析技术经过近100年的发展，目前已经成为检验、检疫方面的核心技术之一，并
不断向自动化和件变化两个方面发展，其中免疫层析试条极适合临床试验室、野外检验和家 庭检验，在新世纪开始后得到了广泛地的应用，其检测对象已经涉及到肿瘤系列、心梗系列、 微生物、毒品系列和激素系列等。
目前企业和个人在蛋白质产品尤其是乳制品中添加三聚氰胺，对食用者尤其是婴幼儿造
成了极大的伤害。2007年12月13日杨曙明和于洪侠发明了ELISA检测技术(一种检测三 聚氰胺的酶联免疫试剂盒，CN101183105 )，但是该技术仍然需要特殊的检测设备和特定监 测人员。目前国内外尚发现关于本发明所涉及相关改造的报道和专利文献，因此我们进行了 相关的研究，希望找到一种普及型检测技术。
发明内容
本发明涉及一种三聚氰胺免疫层析检测技术，由样品采集单元，层析单元和免疫捕获单 元构成。其特征是样品中的三聚氰胺利用毛细吸收作用依次通过样品采集单元、层析单元 到达捕获单元，在层析单元和成色标记亲和体结合并阻止标记亲和体在捕获单元被固定化三 聚氰胺纯品浓集呈色。
其中，检验系统的介质由亲水性介质构成，可选择纤维素、纤维素衍生物、有机高分子 材料和玻璃纤维；样品采集单元，层析单元和免疫捕获单元可在同一个介质上依次排布，也 可以选用独立的介质首尾相接；样品采集单元，层析单元和免疫捕获单元可以选择同一材质 也可以选择不同材质。
其中，层析单元含有针对三聚氰胺的特异性呈色标记亲和体，水化后可随流动相泳动； 亲和体可以是抗原、抗体、酶或者经过基因文库筛选获得的特异性亲和分子；呈色标记方式
3可以是金属标记、酶标记、荧光标记和常规染料标记，其中优选但不限于胶体金标记。
其中免疫捕获单元含有固定化三聚氰胺，可以将流经捕获区的未与检测样品中三聚氰胺结合的标记亲和体截留，浓集呈色。
其中，捕获单元可含有一条捕获区带，用于定量分析；也可以含有多个捕获区带，分别固定相应数量的三聚氰胺，对样品中检测对象的三聚氰胺含量进行半定量分析。
实施方案
本发明所涉及的联合免疫层析技术，由样品采集单元，层析单元和免疫捕获单元构成。待检测样品滴加或者浸没样品采集单元，液体在毛细吸收效应下，自样品采集单元经过层系单元到达免疫捕获单元。待检测的三聚氰胺在层析单元和相应的呈色亲和体特异性结合，并在捕获区阻止该亲和体和固定化三聚氰胺结合，使相应的区带不显色。如果样品中不含有三聚氰胺，则相应捕获区带呈色；如果样品中含有三聚氰胺，则相应区带呈色条不呈色，从而实现对样品中相应分子实现定性检验。
在半定量系统中，捕获单元针对特定目标分子含有多条捕获区带，每条区带固定有一定数量的三聚氰胺，并且层析单元含有一定数量的标记亲和体。当三聚氰胺分子的数量超过亲和体数量时，则所有区带不呈色；当三聚氰胺分子的数量低于标记亲和体数量时，未结合三聚氰胺的标记亲和体在第一捕获区带浓集呈色，未结合三聚氰胺的标记亲和体超过第一区带捕获数量时，依次使后续捕获区带呈色。根据捕获区带未呈色的数量，可对三聚氰胺的含量进行半定量分析。
图1三聚氰胺免疫检验条示意图实施实例
下面我们将参照附图对本发明所涉及的三聚氰胺免疫层析检测技术作进一步说明，实例和附图内容不构成对本发明所所要求权力的限制。检测系统由样品采集区[7]、免疫层析区[6]和免疫捕获区[5]构成，其中样品捕获区含有 质控带U]。其中图1以所示为半定量待测目标分子检测条。免疫捕获区含有一到三条免疫捕 获带[1-3]，用于对三聚氰胺进行定性或者半定量监测，每条捕获区带固定一定数量的三聚氰 胺纯品。捕获区带呈色数量和样品中相应分子的含量成反比。
具体实施实例
下面我们将参照附图1对本发明所涉及的三聚氰胺免疫层析检测技术操作方法进一步说 明，实例和附图内容不构成对本发明所所要求权力的限制。
在如图1所描述的检测系统中，捕获单元[5]选择硝酸纤维素膜制成，捕获单元中三条检 测条带分别固定一定数量的三聚氰胺；层析单元[6]选择玻璃纤维膜制成，其中附着有分别针 对三聚氰胺的胶体金标记抗体，水化以后可随水流动；样品采集单元[7]由玻璃纤维膜制成， 用于采集样品。另外在捕获单元上不可含有吸水滤纸，以促进样品由采集单元向捕获单元的 流动。
应用时将样品采集区进入待测溶液5到10秒钟，平置到质控带显色，然后根据显色条带 数量判断样品中三聚氰胺分子含量。
权利要求
1本发明涉及一种三聚氰胺免疫层析检测技术，由样品采集单元，层析单元和免疫捕获单元构成。其特征是样品中的三聚氰胺利用毛细吸收作用依次通过样品采集单元、层析单元到达捕获单元，在层析单元和成色标记亲和体结合并阻止标记亲和体在捕获单元被固定化三聚氰胺纯品浓集呈色，根据呈色条带数量可以判断样品中三聚氰胺含量。
2 根据权利要求1所述的三聚氰胺免疫层析检测技术，其特征是检验系统的介质由亲水 性介质构成，可选择纤维素、纤维素衍生物、有机高分子材料和玻璃纤维；样品采集单元， 层析单元和免疫捕获单元可在同一个介质上依次排布，也可以选用独立的介质首尾相接；样品采集单元，层析单元和免疫捕获单元可以选择同一材质也可以选择不同材质。
3 根据权力要求1所述的三聚氰胺免疫层析检测技术，其特征是层析单元含有针对三聚 氰胺的特异性呈色标记亲和体，水化后可随流动相泳动；亲和体可以是抗原、抗体、酶或者 经过基因文库筛选获得的特异性亲和分子；呈色标记方式可以是金属标记、酶标记、荧光标 记和常规染料标记，其中优选但不限于胶体金标记。
4 根据权利要求1所述的三聚氰胺免疫层析检测技术，其特征是免疫捕获单元含有固定 化三聚氰胺，可以将流经捕获区的未与检测样品中三聚氰胺结合的标记亲和体截留，浓集呈 色。
5 根据权利要求1所述的三聚氰胺免疫层析检测技术，其特征是捕获单元可含有一条捕 获区带，用于定量分析；也可以含有多个捕获区带，分别固定相应数量的三聚氰胺，对样品 中检测对象的三聚氰胺含量进行半定量分析。
全文摘要
本发明所涉及一种三聚氰胺免疫层析检测技术，由样品采集单元[7]，层析单元[6]和免疫捕获单元[5]构成。其中样品捕获区含有质控带[4]和1到3条免疫捕获带[1-3]，样品中的三聚氰胺利用毛细吸收作用依次通过样品采集单元、层析单元到达捕获单元，在层析单元和成色标记亲和体结合并阻止其在捕获单元被固定化三聚氰胺结合浓集呈色。该系统具有操作简单，快捷，灵敏等特征，食品和其他生活用品检验等领域具有广泛的应用前景。
文档编号G01N21/77GK101685096SQ200810223010
公开日2010年3月31日 申请日期2008年9月26日 优先权日2008年9月26日
发明者张永钢 申请人:张永钢