专利名称：润燥止痒片的质量控制方法
润燥止痒片的质量控制方法 发明领域本发明涉及一种中药制剂的质量控制方法，具体涉及润燥止痒片的质量控制方法。
背景技术：
润燥止痒片处方来源于《中成药地方标准上升国家标准》(眼科、耳鼻喉、皮肤分册)397 页收载的品种润燥止痒胶囊，标准代号为WS-10029- (ZD—0029) -2002,具有养血滋阴，祛 风止痒，润肠通便功效，用于血虚风燥所致的皮肤瘙痒，痤疮，便秘。润燥止痒片处方为 何首乌291g，制何首乌265g，生地黄429g，桑叶291g，苦参291g，红活麻150g;制法为 以上六味，取制何首乌，粉碎成细粉，备用；其余苦参等五味加水煎煮三次，每次l小时， 合并煎液，滤过，滤液浓縮至相对密度为1.38 1.42 (25°C)的稠膏，加入上述制何首乌细 粉，混匀，75 8(TC干燥，粉碎成颗粒，加入适量羧甲淀粉钠等辅料，混匀，压制成1000片， 包薄膜衣，即得。该品种胶囊剂易吸潮，不易保存，不能满足临床用药需求，因此我们将其改剂型为片剂， 提取工艺与片剂一致，但制剂工艺和辅料不同，需制定确实可行的质量控制方法以保证产品 质量和临床疗效。且原胶囊标准中存在苦参碱薄层检验周期长且展开剂中用到毒性较大的苯， 桑叶薄层色谱干扰较大，含量测定项大黄素含量较低，难以有效控制本品质量等问题，亦需 要对质控方法进行进一步研究提高。发明内容本发明目的在于提供一种润燥止痒片的质量控制方法，进而保证产品质量和临床疗效。润燥止痒片的质量控制方法本发明的质量控制方法解决了原润燥止痒胶囊标准中存在的不足，苦参碱检验周期大幅 縮短，展开剂采用甲苯替代了毒性更大的苯，桑叶薄层色谱分离佳，斑点清晰，并新制定了 苦参碱的含量测定方法，使制剂质量得到更好地控制。润燥止痒片质量控制方法包括以下全部或部分内容薄层色谱鉴别制剂中的苦参、薄层 色谱鉴别制剂中的桑叶、高效液相色谱色谱法测定制剂中苦参碱的含量。润燥止痒片质量控制方法包括以下步骤中的一种或多种 (l)薄层色谱鉴别苦参取本品适量，除去薄膜衣，研细，加三氯甲垸25ml、浓氨试液0.5ria，超声处理15-60分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加无水乙醇2ml使溶解，作为供试品溶 液。另取苦参对照药材lg，同法制成对照药材溶液。再取苦参碱对照品，加乙醇制成每lml 含lmg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典相应附录)试验，吸取上述供试品 溶液和对照药材溶液各5ul、对照品溶液2ul，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅 胶G薄层板上，以甲苯-丙酮-乙酸乙酯-浓氨试液(2:3:4:0. 2)为展开剂，展开，取出，晾干， 喷以稀碘化铋钾试液，供试品色谱中，在与对照品和对照药材色谱相应的位置上，显相同颜 色的斑点。(2) 薄层色谱鉴别桑叶取本品适量，除去薄膜衣，研细，加甲醇10 100ml，超声处 理10 60分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水10 100ml使溶解，用乙酸乙酯提取1 3次， 每次10 100ml，合并乙酸乙酯液，蒸干，残渣加甲醇lml使溶解，作为供试品溶液。另取桑 叶对照药材2g，加石油醚(60 9(TC)加热回流提取，弃去石油醚液，药渣挥干，加乙醇超 声处理，滤过，滤液蒸干，残渣加热水搅拌使溶解，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇lml使溶 解，作为对照药材溶液。照薄层色谱法(中国药典相应附录)试验，吸取上述两种溶液各5ul， 分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以甲苯-乙酸乙酯-甲酸(5:2:1) 为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视，供试品色谱中，在与对照药材色 谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。(3) 高效液相色谱法测定本品中苦参碱的含量 照高效液相色谱法(中国药典相应附录)测定。色谱条件与系统适用性试验以氨基键合硅胶为填充剂；以乙腈-甲醇-3%磷酸溶液为流 动相；紫外检测器。对照品溶液的制备精密称取苦参碱对照品适量，加适当溶剂制成每lml含50 u g的溶 液，即得。供试品溶液的制备取本品除i^衣，研细。，量，精密称定，置量瓶中，加浓氨试液浸 润，再加甲醇超声处理，放冷，用甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，精密量取一定体积的续滤 液,过中性氧化铝柱，依次以三氯甲垸、三氯甲烷-甲醇(5 10:1 5)适量洗脱，收集洗脱 液，回收溶剂至干，残渣加适当溶剂使溶解，转移至量瓶中，并稀释至刻度，摇匀，滤过， 取续滤液，即得。测定法分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液，注入液相色谱仪，测定，即得。 上述所述流动相可以是乙腈-甲醇-3%磷酸溶液(85 95:2 8:2 8),最佳为乙腈-甲醇-3% 磷酸溶液(90:5:5)上述所述紫外检测器所用测定波长可以是200nm 220nm，优选波长为208nm 212nm上述所述适当溶剂可以是甲醇或乙腈或两者的任何比例，以乙腈-甲醇(20 95:80 5) 为佳，最佳为乙腈-甲醇(80:20)。上述质量控制方法重现性好，还可用于其他润燥止痒制剂的质量控制，各种制剂的取样 量按常规取样量而定。上述润燥止痒制剂是指按润燥止痒胶囊处方比例，以现有的制备方法制成的制剂，包括 片剂、胶囊剂、颗粒剂、滴丸剂、口服液、糖浆剂、煎膏剂、口含片、丸剂、散剂、栓剂、 贴剂、注射液等临床或药学上可接受的常用剂型。
具体实施方式
本发明的制备方法及质量控制方法是经过大量的筛选得到的最佳方案，下面的实验例用 于进一步说明本发明的技术方案和技术效果。 实验例1 :为苦参的薄层色谱特征鉴别。胶囊剂质量标准苦参的薄层色谱鉴别中，供试品制备时间过长，不利于实验进展，另外， 其展开系统所用试剂一一苯毒性大，不利于环保。而发明所收载的提取方法简单可行，展开系 统以毒性较小甲苯替代，亦能使斑点很好分离。对以下提取方法进行了试验取本品4片，除去薄膜衣，研细，加二氯甲烷25ml、浓氨 试液0.5ml，超声处理30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加无水乙醇2ml使溶解，作为供试品溶 液。结果供试品色谱中斑点不明显，故不采用。按实施例1苦参薄层鉴别方法进行试验，结果供试品色谱中，在与苦参对照药材和苦参 碱对照品色谱相应的位置上，显相同的红色斑点。薄层色谱分离效果好，斑点圆整，比移值适 中，重现性和专属性好，阴性对照无干扰。 实验例2:为桑叶的薄层色谱特征鉴别。胶囊剂质量标准桑叶的薄层色谱鉴别方法，受杂质干扰大，不易观察，而本发明收载方 法薄层色谱分离效果好，斑点圆整，重现性和专属性好，阴性对照无干扰。对以下提取纯化方法进行了对比试验①取本品4片，除去薄膜衣，研细，加乙醇20ml， 超声处理1小时，滤过，滤液蒸干，残渣加无水乙醇2ml使溶解，作为供试品溶液。②取本 品4片，除去薄膜衣，研细，加乙醇20ml，加热回流l小时，放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加 水20ml使溶解，用乙酸乙酯提取2次，每次20ml，合并乙酸乙酯液，蒸干，残渣加乙醇lml 使溶解，作为供试品溶液。③取本品4片，除去薄膜衣，研细，加70%乙醇30ml超声处理30 分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加乙醇2ml使溶解，作为供试品溶液。结果方法①(胶囊剂质量标准方法)、③供试品色谱中，特征斑点不够清晰，杂质干扰大；方法②供试品色谱中，特 征斑点不明显，故不采用。按实施例1桑叶薄层鉴别方法进行试验，结果供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的 位置上，显2个相同的蓝色荧光斑点。 实验例3:苦参碱含量测定研究由于制剂中大黄素的含量较低，含量低于万分之一，质量可控性不足，故本发明新建立了 制剂中苦参碱的含量测定方法。试验结果表明，在选定条件下分离效果良好，线性、稳定性、 重复性、回收率等方法学考察均符合含量测定的要求，可用于控制本制剂质量的指标。试验结果如下1. 溶液的制备对照品溶液的制备精密称取苦参碱对照品10.22mg，置10ml量瓶中，加甲醇溶解并稀 释至刻度，摇匀，精密量取0.5ml置10 ml量瓶中，加乙腈-甲醇(80:20)稀释至刻度，摇 匀，即得(每lml含苦参碱51. lug)。供试品溶液制备取本品10片，除^&衣，精密称定，研细。取0.4g，精密称定，置25ml量 瓶中，加浓氨试液lml，浸润，再加甲醇20ml，超声处理(功率260W频率50HKz) 30分钟， 放冷，用甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，精密量取续滤液10ml,过中性氧化铝柱(100 200 目，5g,内径lcm)，依次以三氯甲烷、三氯甲烷-甲醇(7:3)各40ml洗脱，收集洗脱液，回 收溶剂至干，残渣加乙腈-甲醇(80:20)使溶解，并转移至10ml量瓶中，加乙腈-甲醇(80:20) 稀释至刻度,摇匀，滤过，取续滤液，即得。本发明对超声提取时间(15分钟、30分钟、60分钟)进行了考察，结果均能较好的提取 出苦参碱，最佳的提取时间为30分钟。本发明对超声浓氨试液加入量(0.5 ml、 lml、 2ml)进行了考察，结果测得结果差异不 大，最佳的加入量为lml。浓氨试液加入量以供试品恰好浸润为佳。以甲醇、乙腈及不同比例的甲醇-乙腈混合溶剂对残渣溶解性进行了考察，结果均可溶解， 以乙腈-甲醇(20-95:80-5)为佳，以乙腈-甲醇(80:20)为最佳。阴性样品溶液的制备阴性样品是按制法制成缺苦参的阴性制剂，再取此阴性制剂按上 述"供试品溶液制备"方法制备不含苦参的阴性样品溶液。2. 色谱条件与系统适用性试验色谱柱氨基键合硅胶色谱柱(NH2柱，250mmX4.6mm);流动相乙腈-甲醇_3%磷酸溶液 (90:5:5);流速1. Oml/min，柱温室温；检测器紫外检测器，检测波长210nm。分别吸取苦参碱对照品溶液、供试品溶液及不含苦参的阴性样品溶液各lOwl,注入液相色谱仪，此条件下苦参碱与其它组分达到基线分离，分离度R〉1.5，理论板数按苦参碱峰计 算大于4000，苦参碱保留时间约为11分钟。阴性样品溶液色谱在相应位置无吸收峰，可见阴性无干扰。3. 测定波长的选择取浓度为10. 22 " g/ml的苦参碱对照品溶液，用紫外分光光度计于190 400nm范围内扫 描，结果苦参碱在200-220nm有较大吸收，均可作为测定波长。最佳检测波长为210nm。4. 对照品纯度检查取1.03mg/ml的苦参碱对照品溶液，进样20ul，用峰面积归一化法计算，含量为99.70%， 计算时按100%计算。5. 方法学验证线性关系考察以峰面积积分A对苦参碱进样量C(Ug)进行回归分析，得回归方程A=1618420C-19649， r=0. 9999。表明苦参碱进样量在0. 1022 2. 044 y g范围内线性关系良好，并且 直线通过原点，可用单点外标法进行测定和计算。仪器精密度试验结果苦参碱峰面积平均值 为842912， RSD为0. 37% ，表明精密度较好。供试液稳定性试验峰面积日内平均值为970015， RSD为1.34X;峰面积3日平均值为979070， RSD为1.36%,表明供试品溶液在72小时内 稳定。重复性试验含量平均值为1.922mg/片，RSD为1.94%,表明方法重复性较好。加样 回收率试验平均回收率为99.36%， RSD为1.92W，表明方法回收率较好。具体实施例如下实施例1润燥止痒片质量控制方法(1) 取本品4片，除去薄膜衣，研细，加三氯甲垸25ml、浓氨试液0.5ml，超声处理30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加无水乙醇2ml使溶解，作为供试品溶液。另取苦参对照药 材lg，同法制成对照药材溶液。再取苦参碱对照品，加乙醇制成每lml含lmg的溶液，作为 对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VIB)试验，吸取上述供试品溶液和 对照药材溶液各5ul、对照品溶液2ul，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄 层板上，以甲苯-丙酮-乙酸乙酯-浓氨试液(2:3:4:0.2)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以 稀碘化铋钾试液，供试品色谱中，在与对照品和对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的 斑点。(2) 取本品4片，除去薄膜衣，研细，加甲醇20ml，超声处理30分钟，滤过，滤液蒸 干，残渣加水20ml使溶解，用乙酸乙酯提取2次，每次20ml，合并乙酸乙酯液，蒸干，残渣 加甲醇lml使溶解，作为供试品溶液。另取桑叶对照药材2g，加石油醚(60~90°C) 30ml，加热回流30分钟，弃去石油醚液，药渣挥干，加乙醇30ml，超声处理30分钟，滤过，滤液 蒸干，残渣加热水10ml搅拌使溶解，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇lml使溶解，作为对照药 材溶液。照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VI B)试验，吸取上述两种溶液各5ul， 分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以甲苯-乙酸乙酯-甲酸(5:2:1) 为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视，供试品色谱中，在与对照药材色 谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。(3)苦参碱的含量测定照高效液相色谱法(中国药典2005年版一部附录VID)测定。 色谱条件与系统适用性试验以氨基键合硅胶为填充剂；以乙腈-甲醇-3%磷酸溶液 (90:5:5)为流动相；检测波长为210nm。对照品溶液的制备精密称取苦参碱对照品适量，加乙腈-甲醇(80:20)制成每lml 含50yg的溶液，即得。供试品溶液的制备取本品10片，除去薄膜衣，精密称定，研细。取0.4g，精密称定，置 25ml量瓶中，加浓氨试液lml，浸润，再加甲醇20ml，超声处理(功率260W频率50HKz) 30分钟，放冷，用甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，精密量取续滤液10ml,过中性氧化铝柱 (100 200目，5g,内径lcm)，依次以三氯甲烷、三氯甲烷-甲醇(7:3)各40ml洗脱， 收集洗脱液，回收溶剂至干，残渣加乙腈-甲醇(80:20)使溶解，并转移至10ml量瓶中， 加乙腈-甲醇(80:20)稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。测定法分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各IO"I，注入液相色谱仪，测定，即得。本品每片含苦参以苦参碱(C15H2402)计，不得少于1.2mg。实施例2润燥止痒片质量控制方法(1) 取本品4片，除去薄膜衣，研细，加三氯甲烷25ml、浓氨试液0.5ml,超声处理15分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加无水乙醇2ml使溶解，作为供试品溶液。另取苦参对照药 材lg,同法制成对照药材溶液。再取苦参碱对照品，加乙醇制成每lml含lmg的溶液，作为 对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VIB)试验，吸取上述供试品溶液和 对照药材溶液各5ul、对照品溶液2ul，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄 层板上，以甲苯-丙酮-乙酸乙酯-浓氨试液(2:3:4:0. 2)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以 稀碘化铋钾试液，供试品色谱中，在与对照品和对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的 斑点。(2) 取本品8片，除去薄膜衣，研细，加甲醇100ml，超声处理60分钟，滤过，滤液 蒸干，残渣加水100ml使溶解，用乙酸乙酯100ml提取，取乙酸乙酯液，蒸干，残渣加甲醇lml使溶解，作为供试品溶液。另取桑叶对照药材2g,加石油醚(60 90°C) 30ml，加热回 流30分钟，弃去石油醚液，药渣挥干，加乙醇30ml，超声处理30分钟，滤过，滤液蒸干， 残渣加热水10ml搅拌使溶解，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇lml使溶解，作为对照药材溶液。 照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VIB)试验，吸取上述两种溶液各5ul，分别点于 同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以甲苯-乙酸乙酯-甲酸(5:2:1)为展开 剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应 的位置上，显相同颜色的荧光斑点。(3)苦参碱的含量测定照高效液相色谱法(中国药典2005年版一部附录VID)测定。 色谱条件与系统适用性试验以氨基键合硅胶为填充剂；以乙腈-甲醇-3%磷酸溶液 (85:8:7)为流动相；检测波长为200nm。对照品溶液的制备精密称取苦参碱对照品适量，加乙腈-甲醇(20:80)制成每lml 含50ng的溶液，即得。供试品溶液的制备取本品除去薄膜衣，精密称定，研细。取0.2g，精密称定，置25ml量 瓶中，加浓氨试液0.5ml,浸润，再加甲醇20ml，超声处理15分钟，放冷，用甲醇稀释至 刻度，摇匀，滤过，精密量取续滤液10ml，过中性氧化铝柱(100 200目，3g,内径lcm), 依次以三氯甲烷、三氯甲垸-甲醇(10:1)各20ml洗脱，收集洗脱液，回收溶剂至干，残 渣加乙腈-甲醇(20:80)使溶解，并转移至10ml量瓶中，加乙腈-甲醇(20:80)稀释至刻 度,摇匀，滤过，取续滤液，即得。测定法分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各10wl，注入液相色谱仪，测定，即得。实施例3润燥止痒片质量控制方法(1) 取本品4片，除去薄膜衣，研细，加三氯甲烷25ml、浓氨试液0.5ml，超声处理60分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加无水乙醇2ml使溶解，作为供试品溶液。另取苦参对照药 材lg,同法制成对照药材溶液。再取苦参碱对照品，加乙醇制成每lml含lmg的溶液，作为 对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VIB)试验，吸取上述供试品溶液和 对照药材溶液各5ul、对照品溶液2ul，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄 层板上，以甲苯-丙酮-乙酸乙酯-浓氨试液(2:3:4:0.2)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以 稀碘化铋钾试液，供试品色谱中，在与对照品和对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的 斑点。(2) 取本品2片，除去薄膜衣，研细，加甲醇10ml，超声处理10分钟，滤过，滤液蒸 干，残渣加水10ml使溶解，用乙酸乙酯提取3次，每次10ml，合并乙酸乙酯液，蒸干，残渣加甲醇lm]使溶解，作为供试品溶液。另取桑叶对照药材2g，加石油醚(60 90°C) 30ml， 加热回流30分钟，弃去石油醚液，药渣挥干，加乙醇30ml，超声处理30分钟，滤过，滤液 蒸干，残渣加热水10ml搅拌使溶解，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇lml使溶解，作为对照药 材溶液。照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VI B)试验，吸取上述两种溶液各5ul， 分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以甲苯-乙酸乙酯-甲酸(5:2:1) 为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视，供试品色谱中，在与对照药材色 谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。(3)苦参碱的含量测定照高效液相色谱法(中国药典2005年版一部附录VID)测定。 色谱条件与系统适用性试验以氨基键合硅胶为填充剂；以乙腈-甲醇-3%磷酸溶液 (90:5:5)为流动相；检测波长为220nm。对照品溶液的制备精密称取苦参碱对照品适量，加乙腈-甲醇(95:5)制成每lml含 50ug的溶液，即得。供试品溶液的制备取本品，除去薄膜衣，精密称定，研细。取0.8g，精密称定，置50ml 量瓶中，加浓氨试液2ml，浸润，再加甲醇45ml，超声处理(功率260W频率50HKz) 30 分钟，放冷，用甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，精密量取续滤液20ml，过中性氧化铝柱(100 200目，8g，内径lcm)，依次以三氯甲垸、三氯甲烷-甲醇(1:1)各40ml洗脱，收集洗脱 液，回收溶剂至干，残渣加乙腈-甲醇(95:5)使溶解，并转移至10ml量瓶中，加乙腈-甲醇(95:5)稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。测定法分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各10ul，注入液相色谱仪，测定，即得。实施例4润燥止痒胶囊质量控制方法(1) 取本品3粒的内容物，研细，加三氯甲垸25ml、浓氨试液0.5ml，超声处理60分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加无水乙醇2ml使溶解，作为供试品溶液。另取苦参对照药材lg， 同法制成对照药材溶液。再取苦参碱对照品，加乙醇制成每lml含lmg的溶液，作为对照品 溶液。照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VI B)试验，吸取上述供试品溶液和对照药 材溶液各5ul、对照品溶液2ul，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上， 以甲苯-丙酮-乙酸乙酯-浓氨试液(2:3:4:0. 2)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以稀碘化铋 钾试液，供试品色谱中，在与对照品和对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。(2) 取本品3粒的内容物，研细，加甲醇50ml，超声处理40分钟，滤过，滤液蒸干， 残渣加水30ral使溶解，用乙酸乙酯提取2次，每次30ral，合并乙酸乙酯液，蒸干，残渣加甲 醇lml使溶解，作为供试品溶液。另取桑叶对照药材2g,加石油醚(60 90°C) 50ml，加热回流60分钟，弃去石油醚液，药渣挥干，加乙醇50ml，超声处理60分钟，滤过，滤液蒸干， 残渣加热水20ml搅拌使溶解，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇lml使溶解，作为对照药材溶液。 照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VIB)试验，吸取上述两种溶液各5ul，分别点于 同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以甲苯-乙酸乙酯-甲酸(5:2:1)为展开 剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应 的位置上，显相同颜色的荧光斑点。(3)苦参碱的含量测定照高效液相色谱法(中国药典2005年版一部附录VID)测定。 色谱条件与系统适用性试验以氨基键合硅胶为填充剂；以乙腈_甲醇-3%磷酸溶液 (85:8:7)为流动相；检测波长为215nm。对照品溶液的制备精密称取苦参碱对照品适量，加乙腈-甲醇(20:80)制成每lml 含50ug的溶液，即得。供试品溶液的制备取本品内容物，研细。取0.3g，精密称定，置50ral量瓶中，加浓氨 试液0.5ml，浸润，再加甲醇40ml，超声处理(功率150W频率30HKz) 60分钟，放冷， 用甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，精密量取续滤液10ml，过中性氧化铝柱(100 200目， 5g，内径lcm)，依次以三氯甲垸、三氯甲垸-甲醇(4:1)各80ml洗脱，收集洗脱液，回 收溶剂至干，残渣加乙腈-甲醇(20:80)使溶解，并转移至1 Oml量瓶中，加乙腈-甲醇(20:80) 稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。测定法分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各20ul，注入液相色谱仪，测定，即得。实施例5润燥止痒颗粒质量控制方法(1) 取本品3g，研细，加三氯甲烷25ml、浓氨试液2ml，超声处理15分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加无水乙醇2ml使溶解，作为供试品溶液。另取苦参对照药材lg，同法制成对 照药材溶液。再取苦参碱对照品，加乙醇制成每lml含lmg的溶液，作为对照品溶液。照薄 层色谱法(中国药典2005年版一部附录VI B)试验，吸取上述供试品溶液和对照药材溶液各 5ul、对照品溶液2ul，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以甲苯-丙酮-乙酸乙酯-浓氨试液(2:3:4:0.2)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以稀碘化铋钾试液， 供试品色谱中，在与对照品和对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。(2) 取本品3g，研细，加甲醇30ml，超声处理30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水 10ml使溶解，用乙酸乙酯提取2次，每次10ml，合并乙酸乙酯液，蒸干，残渣加甲醇lml使 溶解，作为供试品溶液。另取桑叶对照药材2g，加石油醚(60 90°C) 20ml,加热回流20 分钟，弃去石油醚液，药渣挥干，加乙醇20ml，超声处理20分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加热水5ml搅拌使溶解，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇lml使溶解，作为对照药材溶液。照 薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VIB)试验，吸取上述两种溶液各5ul，分别点于同 一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以甲苯-乙酸乙酯-甲酸(5:2:1)为展开剂， 展开，取出，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位 置上，显相同颜色的荧光斑点。(3)苦参碱的含量测定照高效液相色谱法(中国药典2005年版一部附录VID)测定。 色谱条件与系统适用性试验以氨基键合硅胶为填充剂；以乙腈-甲醇-3%磷酸溶液 (95:2:3)为流动相；检测波长为205nm。对照品溶液的制备精密称取苦参碱对照品适量，加乙腈制成每lml含50 U g的溶液， 即得。供试品溶液的制备取本品研细。取lg，精密称定，置50ml量瓶中，加浓氨试液lml， 浸润，再加甲醇45ml，超声处理(功率200W频率50HKz) 20分钟，放冷，用甲醇稀释至 刻度，摇匀，滤过，精密量取续滤液15ml，过中性氧化铝柱(100 200目，3g，内径lcm)， 依次以三氯甲烷、三氯甲烷-甲醇(6:5)各30ml洗脱，收集洗脱液，回收溶剂至干，残渣 加乙腈使溶解，并转移至10ml量瓶中，加乙腈稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。 测定法分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各10ul，注入液相色谱仪，测定，即得。实施例6润燥止痒滴丸质量控制方法(1) 取本品8丸，挤碎，加三氯甲烷25ml、浓氨试液lml，超声处理40分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加无水乙醇2ml使溶解，作为供试品溶液。另取苦参对照药材lg,同法制成 对照药材溶液。再取苦参碱对照品，加乙醇制成每lml含lmg的溶液，作为对照品溶液。照 薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VI B)试验，吸取上述供试品溶液和对照药材溶液各 5ul、对照品溶液2ul，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以甲苯-丙酮-乙酸乙酯-浓氨试液(2:3:4:0.2)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以稀碘化铋钾试液， 供试品色谱中，在与对照品和对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。(2) 取本品8丸，挤碎，加甲醇20ml，超声处理10分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水 40ml使溶解，用乙酸乙酯提取2次，每次40ml，合并乙酸乙酯液，蒸干，残渣加甲醇lml使 溶解，作为供试品溶液。另取桑叶对照药材2g，加石油醚(60 9(TC) 60ml，加热回流50 分钟，弃去石油醚液，药渣挥干，加乙醇40ml，超声处理40分钟，滤过，滤液蒸干，残渣 加热水5ml搅拌使溶解，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇lml使溶解，作为对照药材溶液。照 薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VIB)试验，吸取上述两种溶液各5ul，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以甲苯-乙酸乙酯-甲酸(5:2:1)为展开剂， 展开，取出，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位 置上，显相同颜色的荧光斑点。(3)苦参碱的含量测定照高效液相色谱法(中国药典2005年版一部附录VID)测定。 色谱条件与系统适用性试验以氨基键合硅胶为填充剂；以乙腈-甲醇-3%磷酸溶液 (92:3:5)为流动相；检测波长为212nm。对照品溶液的制备精密称取苦参碱对照品适量，加甲醇制成每lml含50 li g的溶液， 即得。供试品溶液的制备取本品8丸，挤碎，置25ml量瓶中，加浓氨试液lml，再加甲醇 20ml，超声处理(功率250W频率40服z) 40分钟，放冷，用甲醇稀释至刻度，摇匀，滤 过，精密量取续滤液20ml，过中性氧化铝柱(100~200目，2g，内径lcm)，依次以三氯 甲烷、三氯甲垸-甲醇(3:1)各20ml洗脱，收集洗脱液，回收溶剂至干，残渣加甲醇使溶 解，并转移至10ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。测定法分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各10iU，注入液相色谱仪，测定，即得。实施例7润燥止痒口服液质量控制方法(1) 取本品20ral，加浓氨试液0.5ml,用三氯甲烷提取2次，每次25ml，提取液蒸干，残渣加无水乙醇2ml使溶解，作为供试品溶液。另取苦参对照药材lg，加三氯甲烷25ml、浓 氨试液0.5ml，超声处理30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加无水乙醇2ml使溶解，制成对照 药材溶液。再取苦参碱对照品，加乙醇制成每lml含lmg的溶液，作为对照品溶液。照薄层 色谱法(中国药典2005年版一部附录VI B)试验，吸取上述供试品溶液和对照药材溶液各5ul、 对照品溶液2ul，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以甲苯-丙酮-乙酸乙酯-浓氨试液(2:3:4:0.2)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以稀碘化铋钾试液，供试 品色谱中，在与对照品和对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。(2) 取本品20ml，用乙酸乙酯提取2次，每次20ml，合并乙酸乙酯液，蒸干，残渣加 甲醇lml使溶解，作为供试品溶液。另取桑叶对照药材2g，加石油醚(60 90'C) 30ml，加 热回流30分钟，弃去石油醚液，药渣挥干，加乙醇30ml，超声处理30分钟，滤过，滤液蒸 干，残渣加热水10ml搅拌使溶解，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇lml使溶解，作为对照药材 溶液。照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VIB)试验，吸取上述两种溶液各5ul，分 别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以甲苯-乙酸乙酯-甲酸(5:2:1) 为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。
(3)苦参碱的含量测定照高效液相色谱法(中国药典2005年版一部附录VID)测定。 色谱条件与系统适用性试验以氨基键合硅胶为填充剂；以乙腈-甲醇-3%磷酸溶液 (88:4:8)为流动相；检测波长为208nm。
对照品溶液的制备精密称取苦参碱对照品适量，加乙腈-甲醇(95:5)制成每lml含 50ug的溶液，即得。
供试品溶液的制备精密量取本品10ml，置50ml量瓶中，加浓氨试液lml，再加甲醇 20ml，超声处理(功率200W频率50HKz) 10分钟，放冷，用甲醇稀释至刻度，摇匀，滤 过，精密量取续滤液10ml，过中性氧化铝柱(100 200目，5g，内径lcm)，依次以三氯 甲烷、三氯甲烷-甲醇(8:3)各20ml洗脱，收集洗脱液，回收溶剂至干，残渣加乙腈-甲 醇(95:5)使溶解，并转移至lOml量瓶中，加乙腈-甲醇(95:5)稀释至刻度，摇匀，滤过， 取续滤液，即得。
测定法分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各10ul，注入液相色谱仪，测定，即得。
权利要求
1.一种润燥止痒片的质量控制方法，其特征在于，该方法包括以下全部或部分内容定性鉴别制剂中的苦参、定性鉴别制剂中的桑叶、测定制剂中苦参碱的含量。
2. 如权利要求1所述的质量控制方法，其特征在于，包括以下步骤中的一个或多个(1) 薄层色谱鉴别苦参取本品适量，除去薄膜衣，研细，加三氯甲烷25ml、浓氨试液`0.5ml，超声处理15-60分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加无水乙醇2ml使溶解，作为供试品溶 液。另取苦参对照药材lg,同法制成对照药材溶液。再取苦参碱对照品，加乙醇制成每lml 含lmg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典相应附录)试验，吸取上述供试品 溶液和对照药材溶液各5ul、对照品溶液2ul，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅 胶G薄层板上，以甲苯-丙酮-乙酸乙酯-浓氨试液(2:3:4:0. 2)为展开剂，展开，取出，晾干， 喷以稀碘化铋钾试液，供试品色谱中，在与对照品和对照药材色谱相应的位置上，显相同颜 色的斑点。(2) 薄层色谱鉴别桑叶取本品适量，除去薄膜衣，研细，加甲醇10 100ml，超声处 理10 60分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水10~100ml使溶解，用乙酸乙酯提取1 3次， 每次10 100ml，合并乙酸乙酯液，蒸干，残渣加甲醇lml使溶解，作为供试品溶液。另取桑 叶对照药材2g，加石油醚(60 9(TC)加热回流提取，弃去石油醚液，药渣挥干，加乙醇超 声处理，滤过，滤液蒸干，残渣加热水搅拌使溶解，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇lml使溶 解，作为对照药材溶液。照薄层色谱法(中国药典相应附录)试验，吸取上述两种溶液各5ul， 分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以甲苯-乙酸乙酯-甲酸(5:2:1) 为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视，供试品色谱中，在与对照药材色 谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。(3) 测定本品中苦参碱的含量 照高效液相色谱法(中国药典相应附录)测定。色谱条件与系统适用性试验以氨基键合硅胶为填充剂；以乙腈-甲醇-3%磷酸溶液为流 动相；紫外检测器。对照品溶液的制备精密称取苦参碱对照品适量，加适当溶剂制成每lml含50ug的溶 液，即得。供试品溶液的制备取本品除* ，研细。取适量，精密称定，置量瓶中，加浓氨试液浸 润，再加甲醇超声处理，放冷，用甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，精密量取一定体积的续滤 液,过中性氧化铝柱，依次以三氯甲烷、三氯甲烷-甲醇(5 10:1 5)适量洗脱，收集洗脱 液，回收溶剂至干，残渣加适当溶剂使溶解，转移至量瓶中，并稀释至刻度，摇匀，滤过， 取续滤液，即得。测定法分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液，注入液相色谱仪，测定，即得。
3. 如权利要求1及权利要求2所述的质量控制方法，其特征在于，(3)测定本品中苦参碱的 含量所述流动相可以是乙腈-甲醇-3%磷酸溶液(85 95:2 8:2 8)，最佳为乙腈-甲醇-3%磷 酸溶液(90:5:5)
4. 如权利要求1及权利要求2所述的质量控制方法，其特征在于，(3)测定本品中苦参碱的 含量所述紫外检测器所用测定波长可以是200nm 220nm，最佳为210nm。
5. 如权利要求1及权利要求2所述的质量控制方法，其特征在于，(3)测定本品中苦参碱的 含量所述适当溶剂可以是甲醇或乙腈或两者的任何比例，以乙腈-甲醇(20 95:80 5)为佳， 最佳为乙腈-甲醇(80:20)。
6. 如权利要求1及权利要求2所述的质量控制方法，还可用于其他润燥止痒制剂的质量控制， 各种制剂的取样量按常规取样量而定。
7. 如权利要求6所述的其他润燥止痒制剂是指按润燥止痒胶囊处方比例，以现有的制备方法 制成的制剂，包括片剂、胶囊剂、颗粒剂、滴丸剂、口服液、糖浆剂、煎膏剂、口含片、丸 剂、散剂、栓剂、贴剂、注射液等临床或药学上可接受的常用剂型。
全文摘要
本发明公开了一种中药制剂润燥止痒片的质量控制方法，所述质量控制方法包括以下步骤采用薄层色谱法鉴别苦参、桑叶，采用高效液相色谱法测定制剂中苦参碱的含量。该质量控制方法确实可行，可保证产品质量和临床疗效。
文档编号G01N30/00GK101574439SQ200910114070
公开日2009年11月11日 申请日期2009年5月18日 优先权日2009年5月18日
发明者伟 吴, 唐弟光, 品 李, 梁月钊, 粟华生, 莫少红, 琳 谢, 陈晓军 申请人:唐弟光