专利名称：妇科止血灵胶囊的质量控制方法
妇科止血灵胶囊的质量控制方法 发明领域
本发明涉及一种中药制剂的质量控制方法，具体涉及妇科止血灵胶囊的质量控制方法。
背景技术：
妇科止血灵胶囊为妇科止血灵片改剂型而来，处方来源于卫生部药品标准中药成方制剂 第五册69页，标准代号为WS3-B-0936-91，具有补肾敛阴，固冲止血的功效，用于妇女宫能 性子宫出血。妇科止血灵胶囊处方为熟地黄139g、白芍139g、杜仲(炭)69g、续断69g、 槲寄生69g、山药69g、五味子69g、牡蛎(煅)139g、海螵蛸lllg、蒲黄(炭)69g、地榆 (炒)139g;制法为以上十一味，海螵蛸、山药、蒲黄(炭)粉碎成细粉。其余熟地黄等 八味，加水煎煮二次，第一次3小时，第二次2小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩成稠膏， 加入上述细粉，混匀，干燥，粉碎成细粉，加入辅料适量，混匀，装入胶囊，制成1000粒， 即得。
妇科止血灵胶囊提取工艺与片剂一致，但制剂工艺和辅料不同，需制定确实可行的质量 控制方法以保证产品质量和临床疗效。
原妇科止血灵片剂标准中质量控制项目简单，只有性状描述及芍药苷的薄层鉴别，无含 量测定项目，难以保证制剂质量及临床应用安全。有文献(RP-HPLC法测定妇科止血灵片中 芍药苷的含量，中华临床医学研究杂志，2008， 14 (12) :1778)报道了用高效液相色谱法测 定妇科止血灵片中芍药苷的含量，但该法使用稀乙醇进行样品制备，过滤缓慢，直接造成其 液相色谱中杂质较多，且需要用到毒性较大的乙腈作为流动相。需要对质控方法进行全面地 提升及补充。
发明内容
本发明目的在于提供一种妇科止血灵胶囊的质量控制方法，进而保证产品质量和临床疗效。
本发明在系统研究的基础上，建立了五味子、地榆、槲寄生的薄层色谱鉴别，并采用高 效液相色谱法测定白芍主要成分芍药苷的含量，含测方法相比文献优选了甲醇作为提取溶剂， 减少了供试液中的干扰杂质，采用毒性较低的甲醇-水系统作为流动相即可达到有效分离，一 并解决了供试制备中过滤较慢及流动相毒性大的问题。
妇科止血灵胶囊质量控制方法包括以下全部或部分内容薄层色谱鉴别五味子及地榆、薄层色谱鉴别槲寄生、高效液相色谱法测定芍药苷的含量。
妇科止血灵胶囊质量控制方法包括以下步骤中的一种或多种
(1) 薄层色谱鉴别五味子及地榆取本品内容物适量，加甲醇超声处理，滤过，滤液蒸 干，残渣加水使溶解，用乙醚提取，取乙醚液，蒸干，残渣加乙醇lml使溶解，作为供试品 溶液。另取五味子对照药材适量，同法制成五味子对照药材溶液。再取地榆对照药材适量， 加甲醇加热回流提取，滤过，滤液蒸干，残渣加水使溶解，用乙醚提取，取乙醚液，蒸干， 残渣加乙醇lml使溶解，制成地榆对照药材溶液。照薄层色谱法(中国药典相应附录)试验， 吸取上述供试品溶液、地榆对照药材溶液及五味子对照药材溶液，分别点于同一以羧甲基纤 维素钠为粘合剂的硅胶GF254薄层板上，以甲苯-乙酸乙酯为展开剂，展开，取出，晾干，置紫 外光灯(254nm)下检视，供试品色谱中，在与五味子对照药材及地榆对照药材色谱相应的位
置上，分别显相同颜色的主斑点。
(2) 薄层色谱鉴别槲寄生取本品内容物适量，加甲醇超声处理，滤过，滤液蒸干，
残渣加水使溶解，用乙醚提取，弃去乙醚液，水层用水饱和的正丁醇提取，正丁醇提取液 用正丁醇饱和的水洗漆，弃去水液，正丁醇液蒸干，残渣加乙醇lml使溶解，作为供试品 溶液。另取槲寄生对照药材适量，加水加热回流提取，滤过，滤液用水饱和的正丁醇提取， 取正丁醇提取液，蒸干，残渣加乙醇lml使溶解，作为对照药材溶液。照薄层色谱法(中国 药典相应附录)试验，吸取上述两种溶液，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为粘合剂的硅胶 G薄层板上，以甲苯-乙酸乙酯-甲醇-冰乙酸为展开剂，展开，取出，晾干，喷以1%三氯化 铝乙醇溶液，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上， 显相同颜色的荧光斑点。
(3) 用高效液相色谱法测定芍药苷的含量
色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇-水为流动相；紫 外检测器。
对照品溶液的制备精密称取芍药苷对照品适量，用甲醇制成每lml含60yg的溶液， 即得。
供试品溶液的制备取本品内容物，研细，取适量，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密 加入一定量甲醇，密塞，称定重量，超声处理，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量， 摇匀，滤过，取续滤液，即得。
测定法分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液，注入液相色谱仪，测定，即得。
妇科止血灵胶囊质量控制方法包括以下步骤中的一种或多种 (1)薄层色谱鉴别五味子及地榆取本品内容物2 10g，加甲醇20 100ml，超声处理10 60分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水10 50ml使溶解，用乙醚提取2次，每次10 50ml， 合并乙醚提取液，蒸干，残渣加乙醇lml使溶解，作为供试品溶液。另取五味子对照药材0. 2 2g，同法制成五味子对照药材溶液。再取地榆对照药材0.5 5g,加甲醇20 100ml，加热回 流0.5 2小时，滤过，滤液蒸干，残渣加水10 50ml使溶解，同法制成地榆对照药材溶液。 照薄层色谱法(中国药典相应附录)试验，吸取上述供试品溶液、地榆对照药材溶液及五味 子对照药材溶液各1 10 ii 1,分别点于同一以羧甲基纤维素钠为粘合剂的硅胶GF254薄层板上， 以甲苯-乙酸乙酯(6 8:2 4)为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(254rim)下检视， 供试品色谱中，在与五味子对照药材及地榆对照药材色谱相应的位置上，分别显相同颜色的 主斑点。
(2) 薄层色谱鉴别槲寄生取本品内容物2 10g，加甲醇20 100ml，超声处理10 60分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水10 50ml使溶解，用乙醚提取2次，每次10 50ml， 弃去乙醚液，水层用水饱和的正丁醇提取2次，每次10 50ml，合并正丁醇提取液，用正 丁醇饱和的水10 50ml洗涤，弃去水液，正丁醇液蒸干，残渣加乙醇lml使溶解，作为供 试品溶液。另取槲寄生对照药材0.2 2g，加水20 50ml，加热回流0.5 2小时，滤过， 滤液用水饱和的正丁醇提取2次，每次10 50ml，合并正丁醇提取液，蒸干，残渣加乙醇 lml使溶解，作为对照药材溶液。照薄层色谱法(中国药典相应附录)试验，吸取上述两种 溶液各l 10ul，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为粘合剂的硅胶G薄层板上，以甲苯-乙 酸乙酯-甲醇-冰乙酸(8 12:5 7:4 6:0.6 l)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以1%三 氯化铝乙醇溶液，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位 置上，显相同颜色的荧光斑点。
(3) 用高效液相色谱法测定该药物中芍药苷的含量 色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇-水(20 30:80~
70)为流动相；检测波长为225nm 235nm。
对照品溶液的制备精密称取芍药苷对照品适量，用甲醇制成每lml含60ug的溶液， 即得。
供试品溶液的制备取本品内容物，研细，取0.2 2g，精密称定，置具塞锥形瓶中， 精密加入甲醇25ml 100ml，密塞，称定重量，超声处理30-60分钟，放冷，再称定重量， 用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。
测定法分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液5 20ul，注入液相色谱仪，测定，即得。
上述妇科止血灵胶囊的质量控制方法分离度高，重现性好，还可用于其他妇科止血灵制剂的质量控制，其他制剂取样量按常规取样而定。
上述其他妇科止血灵制剂是指按妇科止血灵片剂或胶囊剂处方比例，以现有的制备方法 制成的制剂，包括片剂、颗粒剂、滴丸剂、口服液、糖浆剂、煎膏剂、口含片、丸齐!J、散齐U、 栓剂、贴剂、注射液等临床或药学上可接受的常用剂型。
具体实施例方式
本发明的质量控制方法是经过大量的筛选得到的最佳方案，下面的实验例用于进一步说 明本发明的技术方案和技术效果。 实验例1五味子及地榆的薄层鉴别研究
曾对以下3种提取纯化方法进行了对比试验①取本品内容物5g，加三氯甲垸40ml，加 热回流30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加乙酸乙酯lral使溶解，作为供试品溶液；②取本品 内容物5g，加乙酸乙酯40ml，加热回流l小时，滤过，滤液浓縮至lml,作为供试品溶液； ③取本品内容物5g，加水40ml，加热至沸，搅匀，趁热用棉花滤过，放冷，用盐酸饱和的乙 醚提取2次，每次20ml，合并乙醚提取液，蒸干，残渣加乙酸乙酯lml使溶解，作为供试品 溶液。结果方法①②供试品色谱中，杂质较多，特征斑点不够清晰，方法③与上述方法效果 相当，斑点清晰圆整。
按实施例1中五味子及地榆的薄层鉴别方法对妇科止血灵胶囊进行试验，结果检出相应 斑点。本方法薄层色谱分离效果好，斑点清晰、圆整，比移值适中，重现性和专属性好，阴 性对照无干扰。
实验例2槲寄生的薄层鉴别研究
曾试用了不同的展开方法①甲苯-乙酸乙酯-冰乙酸(8:2:0.1),喷以10%硫酸乙醇溶 液,80'C加热至斑点显色清晰，置日光下及紫外光灯(365nm)下检视；②三氯甲烷-甲醇-甲 酸(8:2:0.1)，喷以1%三氯化铝乙醇溶液，置紫外光灯(365nm)下检视；③二氯甲烷-乙醇-甲酸(8:2:1)，喷以1%三氯化铝乙醇溶液，置紫外光灯(365nm)下检视等。结果方法①阴性
有干扰，方法②③斑点不圆整。
按实施例1中槲寄生的薄层鉴别方法对妇科止血灵胶囊进行试验，结果检出相应斑点。
本方法薄层色谱分离效果好，斑点清晰、圆整，比移值适中，重现性和专属性好，阴性对照
无干扰。
实验例3:妇科止血灵胶囊中芍药苷的含量测定研究 1.溶液的制备
对照品溶液的制备精密称取芍药苷对照品15.08mg，置100ml量瓶中，加甲醇溶解并 稀释至刻度，摇匀，精密量取4ml置10ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即得(每lml含芍药苷60. 32 ug)。
供试品溶液的制备取本品内容物，研细，取0.4g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密 加入甲醇25ml，密塞，称定重量，超声处理(功率260W，频率50Hz) 30分钟，放冷，再称 定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。
阴性样品溶液的制备阴性样品溶液是按处方比例称取除白芍外的药味，按制法制成白 芍阴性制剂，再取此阴性制剂按上述"供试品溶液的制备"方法制备不含白芍的阴性样品溶 液。
试验中考察了提取溶剂稀乙醇及甲醇，结果两者测得含量无差别，但使用甲醇过滤时较 用稀乙醇快，且杂质较少。
试验中考察了超声处理的时间(10分、20分、30分、40分、60分)，结果表明超声处理 30分钟即可提取完全。
2. 色谱条件与系统适用性试验
仪器日本岛津LC-10Avp高效液相色谱仪；检测器日本岛津SPD-10Atvp紫外检测器；
色谱柱十八烷基硅烷键合硅胶色谱柱(岛津VP-ODS柱，4.6X150mm)，保护柱YWG C18 10 X4.6咖；威玛龙色谱工作站；流动相甲醇_水(25:75);流速1. Oml/min，柱温室温。 检测波长为230nm。
分别吸取芍药苷对照品溶液、供试品溶液及不含白芍的阴性样品溶液各10 nl，注入液 相色谱仪测定，即得。此条件下芍药苷与其它组分达到基线分离，分离度R>1.5。理论板数 按芍药苷峰计算大于4000。阴性样品溶液色谱在相应位置无吸收峰，可见阴性无干扰。
流动相考察了不同比例的乙腈-0. 1%磷酸系列、乙腈-水系列、甲醇-0. 1%磷酸系列、甲 醇-水系列，结果均能达到较好的分离效果，但以甲醇-水为流动相较简单，且毒性低。
由于供试液制备方法的改变，使得供试液中的干扰杂质减少，因此色谱分离难度也有所 降低，可以使用简单、低毒的流动相进行分离。
3. 波长选择
精密称取芍药苷对照品15.08呢，置100ml量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀， 精密量取lml置10ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，用紫外分光光度仪扫描，结果芍药苷在 225nm 235nm有较大吸收，均可作为测定波长，以230nm为最佳测定波长。
4. 对确定的方法进行方法学验证，结果如下
精密度试验重复进样5次，芍药苷峰面积RSD为0.33X,表明精密度较好；线性关系 考察以峰面积积分值A对芍药苷进样量C(Wg)进行回归分析，得回归方程A =1. 17X
106C-3. 02X103, r=0.9999，线性范围为0. 1508 1. 2064 u g，并且直线通过原点，可用单点外标法进行测定和计算；供试品溶液稳定性试验峰面积平均值为730122， RSD为0.88%,表 明供试品溶液在72h内稳定性较好；重复性试验计算得芍药苷的含量平均值为1. 7mg/粒， RSD为1. 6%，表明方法重复性较好；加样回收率试验平均回收率为99. 5%， RSD为1. 68%。 以上方法学验证表明，该方法准确，专属性、重复性好，符合含量测定要求。
具体实施例如下
实施例l妇科止血灵胶囊质量控制方法
1、 薄层鉴别五味子及地榆取本品内容物5g，加甲醇50ml，超声处理30分钟，滤过， 滤液蒸干，残渣加水30ml使溶解，用乙醚提取2次，每次30ml，水层备用，合并乙醚提取 液，蒸干，残渣加乙醇lml使溶解，作为供试品溶液。另取五味子对照药材0.5g，同法制成 五味子对照药材溶液。再取地榆对照药材2g，加甲醇50ml，加热回流l小时，滤过，滤液蒸 干，残渣加水30ml使溶解，同法制成地榆对照药材溶液。照薄层色谱法(中国药典2005年 版一部附录VIB)试验，吸取上述供试品溶液、地榆对照药材溶液各5wl、五味子对照药材
溶液2 U 1,分别点于同一以羧甲基纤维素钠为粘合剂的硅胶GF254薄层板上，以甲苯-乙酸乙酯
(7:3)为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(254nm)下检视，供试品色谱中，在与五
味子对照药材及地榆对照药材色谱相应的位置上，分别显相同颜色的主斑点。
2、 薄层鉴别槲寄生取鉴别1项下乙醚提取后的水溶液，用水饱和的正丁醇提取2次，
每次20ml，合并正丁醇提取液，用正丁醇饱和的水30ml洗涤，弃去水液，正丁醇液蒸干， 残渣加乙醇lml使溶解，作为供试品溶液。另取槲寄生对照药材0.5g，加水30ml，加热回 流1小时，滤过，滤液用水饱和的正丁醇提取2次，每次20ml，合并正丁醇提取液，蒸干， 残渣加乙醇lml使溶解，作为对照药材溶液。照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录 VI B)试验，吸取上述两种溶液各3 5txl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为粘合剂的硅 胶G薄层板上，以甲苯-乙酸乙酯-甲醇-冰乙酸(10:6:5:0.8)为展开剂，展开，取出，晾干， 喷以1%三氯化铝乙醇溶液，置紫外光灯(365rai)下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱 相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。
3、 用高效液相色谱法测定该药物中芍药苷的含量
色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇-水(25:75)为 流动相；检测波长为230nm。
对照品溶液的制备精密称取芍药苷对照品适量，用甲醇制成每lml含60 u g的溶液， 即得。
供试品溶液的制备取装量差异项下的本品内容物，研细，取0.4g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇25ml，密塞，称定重量，超声处理30分钟，放冷，再称定重量， 用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。
测定法分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各10 ul，注入液相色谱仪，测定，即得。
本品每粒含白芍以芍药苷(C23H280 )计，不得少于0.80mg。 实施例2妇科止血灵片质量控制方法
1、 薄层鉴别五味子及地榆取本品除去包衣，研细，取2g，加甲醇20ml，超声处理IO 分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水10ml使溶解，用乙醚提取2次，每次10ml，水层备用， 合并乙醚提取液，蒸干，残渣加乙醇lml使溶解，作为供试品溶液。另取五味子对照药材0. 2g， 同法制成五味子对照药材溶液。再取地榆对照药材0. 5g,加甲醇20ml，加热回流0.5小时， 滤过，滤液蒸干，残渣加水10ml使溶解，同法制成地榆对照药材溶液。照薄层色谱法(中国 药典2005年版一部附录VIB)试验，吸取上述供试品溶液、地榆对照药材溶液各10tU、五
味子对照药材溶液8 li 1，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为粘合剂的硅胶GF254薄层板上，以
甲苯-乙酸乙酯(6:4)为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(254nm)下检视，供试品色
谱中，在与五味子对照药材及地榆对照药材色谱相应的位置上，分别显相同颜色的主斑点。
2、 薄层鉴别槲寄生取鉴别1项下乙醚提取后的水溶液，用水饱和的正丁醇提取2次，
每次10ml，合并正丁醇提取液，用正丁醇饱和的水10ml洗涤，弃去水液，正丁醇液蒸干， 残渣加乙醇lml使溶解，作为供试品溶液。另取槲寄生对照药材0.2g，加水20ml，加热回 流0.5小时，滤过，滤液用水饱和的正丁醇提取2次，每次10ml，合并正丁醇提取液，蒸 干，残渣加乙醇lml使溶解，作为对照药材溶液。照薄层色谱法(中国药典2005年版一部 附录VI B)试验，吸取上述两种溶液各5 10ul，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为粘合 剂的硅胶G薄层板上，以甲苯-乙酸乙酯-甲醇-冰乙酸(8:7:4:l)为展开剂，展开，取出，晾 干，喷以1%三氯化铝乙醇溶液，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照药材 色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。
3、 用高效液相色谱法测定该药物中芍药苷的含量
色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇-水(20:80)为 流动相；检测波长为225nm。
对照品溶液的制备精密称取芍药苷对照品适量，用甲醇制成每lml含60yg的溶液， 即得。
供试品溶液的制备取本品，除去包衣，研细，取0.2g，精密称定，置具塞锥形瓶中， 精密加入甲醇25ml，密塞，称定重量，超声处理60分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。
测定法分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各5H1，注入液相色谱仪，测定，即得。 实施例4妇科止血灵颗粒质量控制方法
1、 薄层鉴别五味子及地榆取本品研细，取10g，加甲醇100ml，超声处理60分钟，滤 过，滤液蒸干，残渣加水50ml使溶解，用乙醚提取2次，每次50ml，水层备用，合并乙醚 提取液，蒸干，残渣加乙醇lml使溶解，作为供试品溶液。另取五味子对照药材2g，同法制 成五味子对照药材溶液。再取地榆对照药材5g，加甲醇100ml，加热回流2小时，滤过，滤 液蒸干，残渣加水50ml使溶解，同法制成地榆对照药材溶液。照薄层色谱法(中国药典2005 年版一部附录VIB)试验，吸取上述供试品溶液、地榆对照药材溶液各2ul、五味子对照药 材溶液1 P 1,分别点于同一以羧甲基纤维素钠为粘合剂的硅胶GF254薄层板上，以甲苯-乙酸乙 酯(8:2)为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(254nm)下检视，供试品色谱中，在与
五味子对照药材及地榆对照药材色谱相应的位置上，分别显相同颜色的主斑点。
2、 薄层鉴别槲寄生取鉴别1项下乙醚提取后的水溶液，用水饱和的正丁醇提取2次，
每次50ml，合并正丁醇提取液，用正丁醇饱和的水50ml洗涤，弃去水液，正丁醇液蒸干， 残渣加乙醇lml使溶解，作为供试品溶液。另取槲寄生对照药材2g，加水50ml，加热回流 2小时，滤过，滤液用水饱和的正丁醇提取2次，每次50ml，合并正丁醇提取液，蒸干， 残渣加乙醇lml使溶解，作为对照药材溶液。照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录 VI B)试验，吸取上述两种溶液各l 3tU，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为粘合剂的硅 胶G薄层板上，以甲苯-乙酸乙酯-甲醇-冰乙酸(12:5:6:0.6)为展开剂，展开，取出，晾干， 喷以1%三氯化铝乙醇溶液，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱 相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。
3、 用高效液相色谱法测定该药物中芍药苷的含量
色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇-水(30: 70)为 流动相；检测波长为230nm。
对照品溶液的制备精密称取芍药苷对照品适量，用甲醇制成每lml含60 ug的溶液， 即得。
供试品溶液的制备取本品，研细，取5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇 100ml，密塞，称定重量，超声处理40分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量， 摇匀，滤过，取续滤液，即得。
测定法分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各20 ul，注入液相色谱仪，测定，即得。实施例4妇科止血灵口服液质量控制方法
1、 薄层鉴别五味子及地榆精密量取本品15ml,用乙醚提取2次，每次10ml，水层备 用，合并乙醚提取液，蒸干，残渣加乙醇lml使溶解，作为供试品溶液。另取五味子对照药 材lg,同法制成五味子对照药材溶液。再取地榆对照药材3g，加甲醇50ml，加热回流1小 时，滤过，滤液蒸干，残渣加水30ml使溶解，同法制成地榆对照药材溶液。照薄层色谱法(中 国药典2005年版一部附录VI B)试验，吸取上述供试品溶液、地榆对照药材溶液各3ul、 五味子对照药材溶液4ul,分别点于同一以羧甲基纤维素钠为粘合剂的硅胶GF^薄层板上， 以甲苯-乙酸乙酯(6:2)为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(254nm)下检视，供试品
色谱中，在与五味子对照药材及地榆对照药材色谱相应的位置上，分别显相同颜色的主斑点。
2、 薄层鉴别槲寄生取鉴别1项下乙醚提取后的水溶液，用水饱和的正丁醇提取2次，
每次10ml，合并正丁醇提取液，用正丁醇饱和的水20ml洗涤，弃去水液，正丁醇液蒸干， 残渣加乙醇lml使溶解，作为供试品溶液。另取槲寄生对照药材1.5g，加水40ml，加热回 流1.5小时，滤过，滤液用水饱和的正丁醇提取2次，每次30ml，合并正丁醇提取液，蒸 干，残渣加乙醇lml使溶解，作为对照药材溶液。照薄层色谱法(中国药典2005年版一部 附录VI B)试验，吸取上述两种溶液各2ul，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为粘合剂的 硅胶G薄层板上，以甲苯-乙酸乙酯-甲醇-冰乙酸(11:7:4:0.6)为展开剂，展开，取出，晾 干，喷以1%三氯化铝乙醇溶液，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照药材 色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。
3、 用高效液相色谱法测定该药物中芍药苷的含量
色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇-水(23:77)为 流动相；检测波长为228nm。
对照品溶液的制备精密称取芍药苷对照品适量，用甲醇制成每lml含60 n g的溶液， 即得。
供试品溶液的制备精密量取本品2ml，置25ml量瓶中，加入甲醇至刻度，摇匀，滤过， 取续滤液，即得。
测定法分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各15ul，注入液相色谱仪，测定，即得。
实施例6妇科止血灵滴丸质量控制方法
1、薄层鉴别五味子及地榆取本品10丸，挤碎，加甲醇30ml，超声处理30分钟，滤 过，滤液蒸干，残渣加水30ml使溶解，用乙醚提取2次，每次40ml，水层备用，合并乙醚 提取液，蒸干，残渣加乙醇lml使溶解，作为供试品溶液。另取五味子对照药材0.4g，同法制成五味子对照药材溶液。再取地榆对照药材lg，加甲醇80ml，加热回流1.5小时，滤过， 滤液蒸干，残渣加水40ml使溶解，同法制成地榆对照药材溶液。照薄层色谱法(中国药典 2005年版一部附录VI B)试验，吸取上述供试品溶液、地榆对照药材溶液各7ul、五味子
对照药材溶液4 U 1，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为粘合剂的硅胶GF254薄层板上，以甲苯-
乙酸乙酯(7:4)为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(254nm)下检视，供试品色谱中，
在与五味子对照药材及地榆对照药材色谱相应的位置上，分别显相同颜色的主斑点。
2、 薄层鉴别槲寄生取鉴别1项下乙醚提取后的水溶液，用水饱和的正丁醇提取2次，
每次40ml，合并正丁醇提取液，用正丁醇饱和的水40ml洗涤，弃去水液，正丁醇液蒸干， 残渣加乙醇lml使溶解，作为供试品溶液。另取槲寄生对照药材1.5g，加水40ml，加热回 流0.8小时，滤过，滤液用水饱和的正丁醇提取2次，每次40ml，合并正丁醇提取液，蒸 干，残渣加乙醇lml使溶解，作为对照药材溶液。照薄层色谱法(中国药典2005年版一部 附录VI B)试验，吸取上述两种溶液各3ul，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为粘合剂的 硅胶G薄层板上，以甲苯-乙酸乙酯-甲醇-冰乙酸(9:7:6:l)为展开剂，展开，取出，晾干， 喷以1%三氯化铝乙醇溶液，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱 相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。
3、 用高效液相色谱法测定该药物中芍药苷的含量
色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅垸键合硅胶为填充剂；甲醇-水(28:72)为 流动相；检测波长为232nm。
对照品溶液的制备精密称取芍药苷对照品适量，用甲醇制成每lml含60ug的溶液， 即得。
供试品溶液的制备取本品8丸，挤碎，置50ml量瓶中(用适量甲醇洗涤乳钵，洗液并 入量瓶中)，加甲醇至刻度，超声处理40分钟，放冷，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤 液，即得。
测定法分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各10 ul，注入液相色谱仪，测定，即得。
权利要求
1.一种妇科止血灵胶囊的质量控制方法，其特征在于，该方法包括以下全部或部分内容薄层色谱鉴别五味子及地榆、薄层色谱鉴别槲寄生、高效液相色谱法测定芍药苷的含量。
2. 如权利要求1所述的妇科止血灵胶囊的质量控制方法，其特征在于，包括以下步骤中的一 种或多种(1) 薄层色谱鉴别五味子及地榆取本品内容物适量，加甲醇超声处理，滤过，滤液蒸 干，残渣加水使溶解，用乙醚提取，取乙醚液，蒸干，残渣加乙醇lml使溶解，作为供试品 溶液。另取五味子对照药材适量，同法制成五味子对照药材溶液。再取地榆对照药材适量， 加甲醇加热回流提取，滤过，滤液蒸干，残渣加水使溶解，用乙醚提取，取乙醚液，蒸干， 残渣加乙醇lml使溶解，制成地榆对照药材溶液。照薄层色谱法(中国药典相应附录)试验， 吸取上述供试品溶液、地榆对照药材溶液及五味子对照药材溶液，分别点于同一以羧甲基纤 维素钠为粘合剂的硅胶GF254薄层板上，以甲苯-乙酸乙酯为展开剂，展开，取出，晾干，置紫 外光灯(254nm)下检视，供试品色谱中，在与五味子对照药材及地榆对照药材色谱相应的位置上，分别显相同颜色的主斑点。(2) 薄层色谱鉴别槲寄生取本品内容物适量，加甲醇超声处理，滤过，滤液蒸千，残渣加水使溶解，用乙醚提取，弃去乙醚液，水层用水饱和的正丁醇提取，正丁醇提取液 用正丁醇饱和的水洗涤，弃去水液，正丁醇液蒸干，残渣加乙醇lml使溶解，作为供试品 溶液。另取槲寄生对照药材适量，加水加热回流提取，滤过，滤液用水饱和的正丁醇提取， 取正丁醇提取液，蒸干，残渣加乙醇lml使溶解，作为对照药材溶液。照薄层色谱法(中国 药典相应附录)试验，吸取上述两种溶液，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为粘合剂的硅胶 G薄层板上，以甲苯-乙酸乙酯-甲醇-冰乙酸为展开剂，展开，取出，晾干，喷以1%三氯化 铝乙醇溶液，置紫外光灯(365rmi)下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上， 显相同颜色的荧光斑点。(3) 用高效液相色谱法测定芍药苷的含量色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇-水为流动相；紫 外检测器。对照品溶液的制备精密称取芍药苷对照品适量，用甲醇制成每lml含60ng的溶液，即得。供试品溶液的制备取本品内容物，研细，取适量，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密 加入一定量甲醇，密塞，称定重量，超声处理，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量， 摇匀，滤过，取续滤液，即得。测定法分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液，注入液相色谱仪，测定，即得。
3.如权利要求1所述的妇科止血灵胶囊的质量控制方法，其特征在于，包括以下步骤中的一 种或多种(1) 薄层色谱鉴别五味子及地榆取本品内容物2 10g，加甲醇20 100ml，超声处理 10 60分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水10 50ml使溶解，用乙醚提取2次，每次10 50ml， 合并乙醚提取液，蒸干，残渣加乙醇lml使溶解，作为供试品溶液。另取五味子对照药材0. 2 2g,同法制成五味子对照药材溶液。再取地榆对照药材0.5 5g，加甲醇20 100ml，加热回 流0.5 2小时，滤过，滤液蒸干，残渣加水10 50ml使溶解，同法制成地榆对照药材溶液。 照薄层色谱法(中国药典相应附录)试验，吸取上述供试品溶液、地榆对照药材溶液及五味 子对照药材溶液各1~10 U 1，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为粘合剂的硅胶GF254薄层板上， 以甲苯-乙酸乙酯(6 8:2 4)为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(254nm)下检视， 供试品色谱中，在与五味子对照药材及地榆对照药材色谱相应的位置上，分别显相同颜色的 主斑点。(2) 薄层色谱鉴别槲寄生取本品内容物2 10g，加甲醇20 100ml，超声处理10 60分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水10 50ml使溶解，用乙醚提取2次，每次10 50ml， 弃去乙醚液，水层用水饱和的正丁醇提取2次，每次10 50ml，合并正丁醇提取液，用正 丁醇饱和的水10 50ml洗涤，弃去水液，正丁醇液蒸干，残渣加乙醇lml使溶解，作为供 试品溶液。另取槲寄生对照药材0.2 2g，加水20 50ml，加热回流0.5 2小时，滤过， 滤液用水饱和的正丁醇提取2次，每次10 50ml，合并正丁醇提取液，蒸干，残渣加乙醇 lml使溶解，作为对照药材溶液。照薄层色谱法(中国药典相应附录)试验，吸取上述两种 溶液各l 10ul，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为粘合剂的硅胶G薄层板上，以甲苯-乙 酸乙酯-甲醇-冰乙酸(8 12:5 7:4 6:0.6 l)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以1%三 氯化铝乙醇溶液，置紫外光灯(365mi)下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位 置上，显相同颜色的荧光斑点。(3) 用高效液相色谱法测定该药物中芍药苷的含量 色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇-水(20~30:80 70)为流动相；检测波长为225nm 235nm。对照品溶液的制备精密称取芍药苷对照品适量，用甲醇制成每lml含60ng的溶液， 即得。供试品溶液的制备取本品内容物，研细，取0.2 2g，精密称定，置具塞锥形瓶中， 精密加入甲醇25ml 100ml，密塞，称定重量，超声处理30-60分钟，放冷，再称定重量， 用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。测定法分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液5 20ul，注入液相色谱仪，测定，即得。
4. 如权利要求1所述的妇科止血灵胶囊的质量控制方法，其特征在于，可以用于其他妇科止 血灵制剂的质量控制，其他制剂取样量按常规取样而定。
5. 如权利要求4所述的其他妇科止血灵制剂，是指按妇科止血灵片剂或胶囊剂处方比例，以 现有的制备方法制成的制剂，包括片剂、颗粒剂、滴丸剂、口服液、糖浆剂、煎膏剂、口含 片、丸剂、散剂、栓剂、贴剂、注射液等临床或药学上可接受的常用剂型。
全文摘要
本发明公开了一种中药制剂妇科止血灵胶囊的质量控制方法，所述质量控制方法包括以下步骤采用薄层色谱法鉴别五味子、地榆、槲寄生，采用高效液相色谱法测定制剂中芍药苷的含量。该质量控制方法确实可行，可保证产品质量和临床疗效。
文档编号G01N30/36GK101574463SQ20091011407
公开日2009年11月11日 申请日期2009年5月18日 优先权日2009年5月18日
发明者伟 吴, 唐弟光, 廖厚知, 霞 梁, 梁山丹, 荣燕李, 阮碧芳, 陈晓军 申请人:唐弟光