专利名称：银花芒果胶囊的质量控制方法
银花芒果胶囊的质量控制方法 发明领域
本发明涉及一种中药制剂的质量控制方法，具体涉及银花芒果胶囊的质量控制方法。
背景技术：
银花芒果胶囊处方来源于《中成药地方标准上升国家标准》(肺系二分册)271页收载的 品种银花芒果颗粒，标准代号为WS-10890 (ZD-0890) -2002，具有疏风清热，止咳化痰的功 效。用于外感风热所致的咽痛、喉痒、咳嗽，及上呼吸道感染见有上述症状者。银花芒果胶 囊的处方为金银花335g、芒果叶500g、蒲公英1000g、桔梗335g、百部335g、陈皮500g、 甘草335g;制法为以上七味，加水煎煮二次，第一次3小时，第二次2小时，合并煎液， 滤过，滤液浓縮至相对密度为1.20 (8CTC)的清膏，加乙醇使含醇量至63%，搅匀，静置48 小时，滤过，滤液浓縮稠膏，加入辅料，混匀，干燥，粉碎，加入助流剂，混匀，装入胶囊， 制成1000粒，即得。
银花芒果胶囊克服了颗粒剂含糖多，剂量大，易吸潮变质，稳定性差，需开水冲服，携 带、使用、贮藏均不方便、辅料中含有大量蔗糖，不适于糖尿病患者使用等不足，丰富了临 床用药。由于胶囊剂与颗粒剂相比辅料有了较大变化，需制定确实可行的质量控制方法以保 证产品质量和临床疗效。且原银花芒果颗粒标准中存在金银花的薄层色谱鉴别受杂质干扰大， 不易观察，且需放置48小时，鉴别时间过长；甘草薄层色谱鉴别受杂质干扰大，且斑点不圆
整，比移值过低等问题，需要对其胶囊剂的质控方法进行优化和提升。
发明内容
本发明目的在于提供一种银花芒果胶囊的质量控制方法，该方法重现性好，确实可行， 可保证产品质量和临床疗效。
一种银花芒果胶囊的质量控制方法，包括以下步骤中的一种或多种 (l)薄层鉴别金银花取本品内容物适量，研细，用水润湿，加乙酸乙酯超声处理， 弃去乙酸乙酯液，残渣加入lmol/L盐酸溶液数滴，加乙酸乙酯超声处理，取乙酸乙酯液， 蒸干，残渣加乙醇lml使溶解，作为供试品溶液。另取绿原酸对照品，加乙醇制成每lml含 0.5mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典相应附录)试验，吸取上述供试品溶液及对照品溶液适量，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以乙 酸丁酯-甲酸-水(7:3:2)的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以氨制硝酸银溶液。 供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
(2) 薄层鉴别芒果叶取本品内容物适量，研细，加甲醇超声处理，滤过，滤液蒸干， 残渣加水使溶解，滤过，滤液用乙酸乙酯振摇提取3次，弃去乙酸乙酯液，水溶液用水饱和 的正丁醇振摇提取，取正丁醇液，蒸干，残渣加甲醇适量使溶解，作为供试品溶液。另取芒 果叶对照药材lg，加乙醇加热回流提取，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇lml使溶解，作为对 照药材溶液。照薄层色谱法(中国药典相应附录)试验，吸取上述两种溶液适量，分别点于同 一聚酰胺薄膜上，以甲醇为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(365咖)下检视。供试 品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。
(3) 薄层鉴别甘草取本品内容物适量，研细，加乙醚加热回流，滤过，弃去乙醚液， 残渣挥干，加甲醇加热回流，滤过，滤液蒸干，残渣加水使溶解，用正丁醇提取，取正丁醇 液，用水洗涤，蒸干，残渣加甲醇溶解，作为供试品溶液。另取甘草对照药材lg，同法制成 对照药材溶液。照薄层色谱法(中国药典相应附录)试验，吸取上述供试品溶液及对照药材溶 液，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-甲醇-水为展 开齐U，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，加热至斑点显色清晰，置紫外光灯(365nm) 下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。
(4) 测定橙皮苷的含量 照高效液相色谱法(中国药典相应附录)测定。
色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈-水(14 22:86 78)为流动相；检测波长为283nm。
对照品溶液的制备精密称取橙皮苷对照品适量，加50%甲醇制成每lml含20 u g的溶液， 即得。
供试品溶液的制备取本品内容物，研细，取适量，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密 加入一定量甲醇，称定重量，超声处理,放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀， 滤过，精密量取续滤液5ml置10ml量瓶中，加水至刻度，摇匀，即得。
测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液适量，注入液相色谱仪，测定，即得。 一种银花芒果胶囊的质量控制方法，包括以下步骤中的一种或多种 (l)薄层鉴别金银花取本品内容物0.5 5g，研细，用水润湿，加乙酸乙酯超声处理 1 3次，每次10 50ml，每次5 30分钟，弃去乙酸乙酯液，残渣加入lmol/L盐酸溶液 数滴，加乙酸乙酯超声处理2 4次，每次10 50ml，每次10 60分钟，合并乙酸乙酯液，蒸干，残渣加乙醇lml使溶解，作为供试品溶液。另取绿原酸对照品，加乙醇制成每lml含 0.5mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典相应附录)试验，吸取上述供试品 溶液及对照品溶液各1 10W，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上， 以乙酸丁酯-甲酸-水(7:3:2)的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以氨制硝酸银溶 液。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
(2) 薄层鉴别芒果叶取本品内容物0. 5 5g，研细，加甲醇10 100ml，超声处理10 60分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水10 50ml使溶解，滤过，滤液用乙酸乙酯振摇提取2 4次，每次10 50ml，弃去乙酸乙酯液，水溶液用水饱和的正丁醇振摇提取3次，每次10 50ml,合并正丁醇液，蒸干，残渣加甲醇lml使溶解，作为供试品溶液。另取芒果叶对照药 材lg,加乙醇20ml，加热回流l小时，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇lml使溶解，作为对照 药材溶液。照薄层色谱法(中国药典相应附录)试验，吸取上述两种溶液1 5Hl，分别点于同 一聚酰胺薄膜上，以甲醇为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视。供试 品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。
(3) 薄层鉴别甘草取本品内容物0.5 5g，研细，加乙醚20 100ml，加热回流0. 5_2 小时，滤过，弃去乙醚液，残渣挥干，加甲醇20 100ml，加热回流0.5 2小时，滤过，滤 液蒸干，残渣加水20 50ml使溶解，用正丁醇提取3次，每次20ral，合并正丁醇液，用水 洗涤3次，每次15ni1，取正丁醇液，蒸干，残渣加甲醇溶解，作为供试品溶液。另取甘草对 照药材lg，同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法(中国药典相应附录)试验，吸取上述供试 品溶液及对照药材溶液2 10W，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板 上，以三氯甲垸-甲醇-水(35 45:8 12:0.8 1.2)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10% 硫酸乙醇溶液，100r 12(TC加热至斑点显色清晰，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱 中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。
(4) 测定橙皮苷的含量 照高效液相色谱法(中国药典相应附录)测定。
色谱条件与系统适用性试验以十八垸基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈-水(16 20:84 80)为流动相；检测波长为283nm。
对照品溶液的制备精密称取橙皮苷对照品适量，加50%甲醇制成每lml含20 u g的溶液， 即得。
供试品溶液的制备取本品内容物，研细，取O. 05 lg,精密称定，置具塞锥形瓶中， 精密加入甲醇25 100ml，称定重量，超声处理20 60分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补 足减失的重量，摇匀，滤过，精密量取续滤液5ml置10ml量瓶中，加水至刻度，摇匀，即得。测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各5 20)4，注入液相色谱仪，测定， 即得。
具体实施例方式
本发明的质量控制方法是经过大量的筛选得到的最佳方案，下面的实验例用于进一步说 明本发明的技术方案和技术效果。 实验例1薄层色谱鉴别金银花。
按本品原剂型质量标准金银花的薄层方法进行鉴别，结果受杂质干扰大，不易观察，且 供试液制备需放置48小时，鉴别时间过长，故对本方法进行改进。
对以下2种提取纯化方法进行了对比试验①取本品内容物1.5g,研细，加甲醇50ml， 超声处理30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水25ml使溶解，用乙酸乙酯提取3次，每次15 ml,合并乙酸乙酯液，蒸干，残渣加甲醇1 ml使溶解，作为供试品溶液。②取本品内容物1.5g, 研细，加甲醇50ml，超声处理30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水25ml使溶解，用乙酸乙 酯提取3次，每次15 ml,乙酸乙酯液用PH=8~9的碱液提取3次，每次15 ml，合并碱液， 用稀盐酸调节PH值至3 4，用乙酸乙酯提取3次，每次15ml，合并乙酸乙酯液，蒸干，残 渣加甲醇lml使溶解，作为供试品溶液。结果方法①、②杂质都多，分离效果不好。
另试用了不同的展开系统①甲苯-乙酸乙酯-甲酸-冰醋酸-水(1:15:1:1:2)的上层溶 液；②乙酸丁酯-甲酸-水(15:8:5)。结果方法①分离效果不好，方法②比移值偏高。
另比较了紫外(365nm)下检视和本发明方法，以本发明收载检视方法斑点清晰，杂质干 扰少。
以银花芒果胶囊按实施例1金银花薄层鉴别方法进行试验，结果供试品色谱中，在与绿 原酸对照品色谱相应的位置上，显相同的黑褐色主斑点。本方法薄层色谱分离效果好，比移 值适中，重现性和专属性好，阴性对照无干扰。 实验例2薄层色谱鉴别芒果叶。
对比了以下提取纯化方法取本品内容物1.5g，研细，加甲醇50ml，超声处理30分钟， 滤过，滤液蒸干，残渣加水25ml使溶解，滤过，滤液用乙酸乙酯提取3次，每次15ml，弃 去乙酸乙酯液，水溶液用水饱和的正丁醇提取3次，每次15ml，正丁醇液用PH=8~9的碱液 提取3次，每次15 ml，碱液用稀盐酸调节PH值至2 3，用水饱和的正丁醇提取3次，每次 15ml，合并正丁醇液，蒸干，残渣加甲醇2ml使溶解，作为供试品溶液。结果此方法亦能达 到较好的分离效果，但此方法步骤多，操作烦琐，故不采用。
试用了不同的展开系统①三氯甲烷-乙酸乙酯-甲酸(3:4:2);②乙酸乙酯-甲醇-稀醋 酸(8:3:3);③正丁醇-醋酸-水(4:1:5)的上层溶液。结果方法①斑点不圆整，方法②③斑 点不清晰，分离效果不好，故均不采用。以银花芒果胶囊按实施例1芒果叶薄层鉴别方法进行试验，结果供试品色谱中，在与对 照药材色谱相应的位置上，显相同的棕红色荧光主斑点，放置后变为桔黄色。 实验例3薄层色谱鉴别甘草。
按本品原剂型质量标准甘草的薄层方法进行鉴别，结果受杂质干扰大，不易观察，且斑 点不圆整，比移值过低。
试用了不同的展开系统①正丁醇-冰醋酸-水(6:1:2);②乙酸乙酯-甲酸-冰醋酸-水 (15:1:1:2);③甲苯-乙酸乙酯-丙酮-甲醇(7:1:0.5:1.5)。结果方法①杂质干扰大；方法 ②斑点较弱，模糊不清；方法③分离效果不好。故均不予采用。
以银花芒果胶囊按实施例1甘草薄层鉴别方法进行试验，结果供试品色谱中，在与对照 药材色谱相应的位置上，显2个以上相同颜色的荧光斑点。本发明方法薄层色谱分离效果好， 斑点圆整，重现性和专属性好，阴性对照无干扰。 实验例4芍药苷含量测定研究
1、溶液的制备
对照品溶液的制备精密称取橙皮苷对照品9.88mg,置100ml量瓶中，加甲醇溶解并稀 释至刻度，摇匀，精密量取2ml置10ml量瓶中，加50%甲醇稀释至刻度，摇匀，即得(每lml 含橙皮苷19. 76tig)。
供试品溶液的制备取本品内容物，研细，取0.2g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密 加入甲醇50ml，称定重量，超声处理30分钟(250W， 50Hz)，放冷，再称定重量，用甲醇补 足减失的重量，摇匀，滤过，精密量取续滤液5ml置10ml量瓶中，加水至刻度，摇匀，即得。
阴性样品溶液的制备取缺陈皮的本品制剂按上述"供试品溶液的制备"方法制备不含 陈皮的阴性样品溶液。
2、色谱条件与系统适用性试验
色谱柱十八烷基硅烷键合硅胶柱(岛津VP- ODS柱,4.6X150咖)，保护柱YWG C18 10 X4.6mm;流动相乙腈-水(18:82);流速l.Oml/min'柱温室温;日本岛津SPD-10Avp 紫外检测器，日本岛津SPD-M10Avp二极管阵列检测器；检测波长283mn。
精密吸取对照品溶液20ul，注入液相色谱仪，用二极管阵列检测器检测，结果橙皮苷在 283nm处有最大吸收峰，橙皮苷在此波长处峰纯度为1. 000，符合含量测定要求，故选择283nm 为检测波长。
分别吸取橙皮苷对照品溶液、供试品溶液及不含陈皮的阴性样品溶液各20yl，注入液相 色谱仪，测定。此条件下橙皮苷与其它组分达到基线分离，分离度R〉1.5，理论板数按橙皮 苷峰计算大于3000。阴性样品溶液色谱在相应位置无吸收峰，可见阴性无干扰。3、对照品纯度检查
精密称取橙皮苷对照品10.03mg，置10ml量瓶中，加甲醇9ml水浴微热使溶解，放冷， 加甲醇至刻度，摇匀，按上述色谱条件，进样20ul，测定，用峰面积归一化法计算，含量为 99.92%，符合含量测定要求。
4、方法学考察线性关系考察以峰面积积分A对橙皮苷进样量C(yg)进行回归分析，得回 归方程A= 1364616C-5807, r=0. 9999，线性范围为0. 0988 0. 9880 n g，直线通过原点，可用 单点外标法进行测定和计算。仪器精密度试验，测得峰面积平均值为542872， RSD为0.74X;稳 定性试验测得日内峰面积平均值为661520, RSD为0. 94%，日间峰面积平均值为665172， RSD 为0. 78%;重复性试验测得含量平均值为5. 55 mg/粒，RSD为1. 31%;加样回收率试验测得平 均回收率为98. 43%， RSD为1.23X。
以上方法学验证表明，该方法准确，专属性、重复性好，符合含量测定要求。
具体实施例如下
实施例1银花芒果胶囊质量控制方法
(l)金银花的薄层鉴别..取本品内容物1.5g，研细，用水润湿，加乙酸乙酯20m1,超 声处理5分钟，弃去乙酸乙酯液，残渣自"加乙酸乙酯20ml"起同法重复处理l次，残渣 加入lmol/L盐酸溶液7滴，加乙酸乙酯20ml，超声处理5分钟，取乙酸乙酯液，残渣自"加 乙酸乙酯20ml"起同法重复处理2次，合并乙酸乙酯液，蒸干，残渣加乙醇lml使溶解， 作为供试品溶液。另取绿原酸对照品，加乙醇制成每lml含0. 5mg的溶液，作为对照品溶液。 照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VIB)试验，吸取上述供试品溶液4ul、对照品 溶液2ul，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以乙酸丁酯-甲酸-水(7:3:2)的上层溶液为展开剂,展开，取出，晾干，喷以氨制硝酸银溶液。供试品色谱中， 在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
(3)芒果叶的薄层鉴别取本品内容物1.5g，研细，加甲醇50ml，超声处理30分钟， 滤过，滤液蒸干，残渣加水25ml使溶解，滤过，滤液用乙酸乙酯振摇提取3次，每次15ml， 弃去乙酸乙酯液，水溶液用水饱和的正丁醇振摇提取3次，每次15ral,合并正丁醇液，蒸干， 残渣加甲醇2ml使溶解，作为供试品溶液。另取芒果叶对照药材lg，加乙醇20ml，加热回流 1小时，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇lm]使溶解，作为对照药材溶液。照薄层色谱法(中国 药典2005年版一部附录VI B)试验，吸取上述两种溶液各lul，分别点于同一聚酰胺薄膜上， 以甲醇为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对 照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。(4) 甘草的薄层鉴别取本品内容物1.5g，研细，加乙醚40ml，加热回流l小时，滤 过，弃去乙醚液，残渣挥千，加甲醇30ml，加热回流l小时，滤过，滤液蒸干，残渣加水40ml 使溶解，用正丁醇提取3次，每次20ml，合并正丁醇液，用水洗涤3次，每次20ml，蒸干， 残渣加甲醇5ml使溶解，作为供试品溶液。另取廿草对照药材lg,同法制成对照药材溶液。 照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VI B)试验，吸取上述供试品溶液3 li 1、对照药 材溶液lul，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-甲醇 -水(40:10:1)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，在105'C加热至斑点显 色清晰，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相 同颜色的荧光斑点。
(5) 含量测定测定本品中橙皮苷的含量 照高效液相色谱法(中国药典2005年版一部附录VI D)测定。
色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈-水(18:82) 为流动相；检测波长为283nm。理论板数按橙皮苷计算应不低于3000。
对照品溶液的制备精密称取橙皮苷对照品适量，加50%甲醇制成每lml含20 " g的溶液， 即得。
供试品溶液的制备取本品内容物，研细，取0.2g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密 加入甲醇50ml，称定重量，超声处理30分钟(250W， 50Hz)，放冷，再称定重量，用甲醇补 足减失的重量，摇匀，滤过，精密量取续滤液5ml置10ml量瓶中，加水至刻度，摇匀，即得。
测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各20ul，注入液相色谱仪，测定，即得。
本品每粒含陈皮以橙皮苷(C28H34015)计，不得少于5.0mg。
实施例2银花芒果胶囊质量控制方法
(l)薄层鉴别金银花取本品内容物5g，研细，用水润湿，加乙酸乙酯超声处理3次，
每次50ml，每次30分钟，弃去乙酸乙酯液，残渣加入lniol/L盐酸溶液数滴，加乙酸乙酯 超声处理4次，每次50ml，每次30分钟，合并乙酸乙酯液，蒸干，残渣加乙醇lml使溶解， 作为供试品溶液。另取绿原酸对照品，加乙醇制成每lml含0.5mg的溶液，作为对照品溶液。 照薄层色谱法(中国药典相应附录)试验，吸取上述供试品溶液及对照品溶液各1W，分别点 于同一 以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以乙酸丁酯-甲酸-水(7:3:2)的上层 溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以氨制硝酸银溶液。供试品色谱中，在与对照品色谱 相应的位置上，显相同颜色的斑点。
(2)薄层鉴别芒果叶取本品内容物5g 研细，加甲醇100ml，超声处理60分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水50ml使溶解，滤过，滤液用乙酸乙酯振摇提取4次，每次50ml， 弃去乙酸乙酯液，水溶液用水饱和的正丁醇振摇提取3次，每次50ml，合并正丁醇液，蒸干， 残渣加甲醇lml使溶解，作为供试品溶液。另取芒果叶对照药材lg，加乙醇20ral，加热回流 1小时，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇lml使溶解，作为对照药材溶液。照薄层色谱法(中国 药典相应附录)试验，吸取上述两种溶液1W，分别点于同一聚酰胺薄膜上，以甲醇为展开剂， 展开，取出，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的 位置上，显相同颜色的荧光斑点。
(3) 薄层鉴别甘草取本品内容物5g，研细，加乙醚100ml，加热回流2小时，滤过， 弃去乙醚液，残渣挥干，加甲醇100ml，加热回流2小时，滤过，滤液蒸干，残渣加水50ml 使溶解，用正丁醇提取3次，每次20ml，合并正丁醇液，用水洗涤3次，每次15ml，取正丁 醇液，蒸干，残渣加甲醇溶解，作为供试品溶液。另取甘草对照药材lg,同法制成对照药材 溶液。照薄层色谱法(中国药典相应附录)试验，吸取上述供试品溶液及对照药材溶液2W， 分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-甲醇-水(45:8: 1.2)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，12(TC加热至斑点显色清晰，置 紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧 光斑点。
(4) 测定橙皮苷的含量 照高效液相色谱法(中国药典相应附录)测定。
色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈-水(20:80) 为流动相；检测波长为283nm。
对照品溶液的制备精密称取橙皮苷对照品适量，加50%甲醇制成每lml含20 u g的溶液， 即得。
供试品溶液的制备取本品内容物，研细，取lg，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加 入甲醇100ral，称定重量，超声处理60分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量， 摇匀，滤过，精密量取续滤液5ml置10ml量瓶中，加水至刻度，摇匀，即得。
测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各5W，注入液相色谱仪，测定，即得。 实施例3银花芒果胶囊质量控制方法
(l)薄层鉴别金银花取本品内容物0.5g，研细，用水润湿，加乙酸乙酯10 ml，超 声处理5分钟，弃去乙酸乙酯液，残渣加入lmol/L盐酸溶液数滴，加乙酸乙酯超声处理2 次，每次10ml，每次5分钟，合并乙酸乙酯液，蒸干，残渣加乙醇lml使溶解，作为供试 品溶液。另取绿原酸对照品，加乙醇制成每lml含0. 5mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典相应附录)试验，吸取上述供试品溶液及对照品溶液各IOW，分别点于同 一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以乙酸丁酯-甲酸-水(7:3:2)的上层溶液 为展开剂，展开，取出，晾干，喷以氨制硝酸银溶液。供试品色谱中，在与对照品色谱相应 的位置上，显相同颜色的斑点。
(2) 薄层鉴别芒果叶取本品内容物0.5g，研细，加甲醇10ml，超声处理10分钟，滤 过，滤液蒸干，残渣加水10ml使溶解，滤过，滤液用乙酸乙酯振摇提取2次，每次10ml， 弃去乙酸乙酯液，水溶液用水饱和的正丁醇振摇提取3次，每次10ml，合并正丁醇液，蒸干， 残渣加甲醇lml使溶解，作为供试品溶液。另取芒果叶对照药材lg,加乙醇20ml，加热回流 l小时，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇lml使溶解，作为对照药材溶液。照薄层色谱法(中国 药典相应附录)试验，吸取上述两种溶液5W，分别点于同一聚酰胺薄膜上，以甲醇为展开剂， 展开，取出，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的 位置上，显相同颜色的荧光斑点。
(3) 薄层鉴别甘草取本品内容物0.5g，研细，加乙醚20ml，加热回流0.5小时，滤 过，弃去乙醚液，残渣挥干，加甲醇20ml，加热回流0.5小时，滤过，滤液蒸干，残渣加水 20ml使溶解，用正丁醇提取3次，每次20ml，合并正丁醇液，用水洗涤3次，每次15ml, 取正丁醇液，蒸干，残渣加甲醇溶解，作为供试品溶液。另取甘草对照药材lg，同法制成对 照药材溶液。照薄层色谱法(中国药典相应附录)试验，吸取上述供试品溶液及对照药材溶液 2~10l4，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-甲醇-水(35: 12:0.8)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，IOO'C加热至斑点 显色清晰，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显 相同颜色的荧光斑点。
(4) 测定橙皮苷的含量
照高效液相色谱法(中国药典相应附录)测定。
色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈-水(16:84) 为流动相；检测波长为283nm。
对照品溶液的制备精密称取橙皮苷对照品适量,加50%甲醇制成每lml含20 H g的溶液， 即得。
供试品溶液的制备取本品内容物，研细，取0.05g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精 密加入甲醇25ml，称定重量，超声处理20分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重 量，摇匀，滤过，精密量取续滤液5tnl置10ml量瓶中，加水至刻度，摇匀，即得。
测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各2(M，注入液相色谱仪，测定，即得。
权利要求
1.一种银花芒果胶囊的质量控制方法，其特征在于，该方法包括以下全部或部分内容薄层鉴别金银花；薄层鉴别芒果叶；薄层鉴别甘草；高效液相色谱法测定橙皮苷的含量。
2. 如权利要求1所述的质量控制方法，其特征在于，包括以下步骤中的一个或多个(l)薄层鉴别金银花取本品内容物适量，研细，用水润湿，加乙酸乙酯超声处理，弃 去乙酸乙酯液，残渣加入lmol/L盐酸溶液数滴，加乙酸乙酯超声处理，取乙酸乙酯液，蒸 干，残渣加乙醇lml使溶解，作为供试品溶液。另取绿原酸对照品，加乙醇制成每lml含0. 5mg 的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典相应附录)试验，吸取上述供试品溶液及 对照品溶液适量，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以乙酸丁酯 -甲酸-水(7:3:2)的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以氨制硝酸银溶液。供试品 色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。(2) 薄层鉴别芒果叶取本品内容物适量，研细，加甲醇超声处理，滤过，滤液蒸干， 残渣加水使溶解，滤过，滤液用乙酸乙酯振摇提取3次，弃去乙酸乙酯液，水溶液用水饱和 的正丁醇振摇提取，取正丁醇液，蒸干，残渣加甲醇适量使溶解，作为供试品溶液。另取芒 果叶对照药材lg,加乙醇加热回流提取，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇lml使溶解，作为对 照药材溶液。照薄层色谱法(中国药典相应附录)试验，吸取上述两种溶液适量，分别点于同 一聚酰胺薄膜上，以甲醇为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视。供试 品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。(3) 薄层鉴别甘草取本品内容物适量，研细，加乙醚加热回流，滤过，弃去乙醚液， 残渣挥干，加甲醇加热回流，滤过，滤液蒸干，残渣加水使溶解，用正丁醇提取，取正丁醇 液，用水洗涤，蒸干，残渣加甲醇溶解，作为供试品溶液。另取甘草对照药材lg，同法制成 对照药材溶液。照薄层色谱法(中国药典相应附录)试验，吸取上述供试品溶液及对照药材溶 液，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-甲醇-水为展 开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，加热至斑点显色清晰，置紫外光灯(365nm) 下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。(4) 高效液相色谱法测定橙皮苷的含量 照高效液相色谱法(中国药典相应附录)测定。色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈-水(14 22:86 78)为流动相；检测波长为283nm。对照品溶液的制备精密称取橙皮苷对照品适量，加50%甲醇制成每lml含20 u g的溶液， 即得。供试品溶液的制备取本品内容物，研细，取适量，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入一定量甲醇，称定重量，超声处理,放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀， 滤过，精密量取续滤液5ml置10ml量瓶中，加水至刻度，摇匀，即得。测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液适量，注入液相色谱仪，测定，即得。
3.如权利要求1所述的质量控制方法，其特征在于，包括以下步骤中的一个或多个(1) 薄层鉴别金银花取本品内容物0.5 5g，研细，用水润湿，加乙酸乙酯超声处理 1 3次，每次10 50ml，每次5 30分钟，弃去乙酸乙酯液，残渣加入lmol/L盐酸溶液 数滴，加乙酸乙酯超声处理2 4次，每次10 50ml，每次10 60分钟，合并乙酸乙酯液， 蒸干，残渣加乙醇lml使溶解，作为供试品溶液。另取绿原酸对照品，加乙醇制成每lml含 0.5mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典相应附录)试验，吸取上述供试品 溶液及对照品溶液各l Kmi，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上， 以乙酸丁酯-甲酸-水(7:3:2)的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以氨制硝酸银溶 液。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。(2) 薄层鉴别芒果叶取本品内容物0.5 5g，研细，加甲醇10 100ml，超声处理10 60分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水10 50ml使溶解，滤过，滤液用乙酸乙酯振摇提取2 4次，每次10 50ml，弃去乙酸乙酯液，水溶液用水饱和的正丁醇振摇提取3次，每次10 50ml,合并正丁醇液，蒸干，残渣加甲醇lml使溶解，作为供试品溶液。另取芒果叶对照药 材lg，加乙醇20ml，加热回流l小时，滤过，滤液蒸千，残渣加甲醇kil使溶解，作为对照 药材溶液。照薄层色谱法(中国药典相应附录)试验，吸取上述两种溶液1 5W，分别点于同 一聚酰胺薄膜上，以甲醇为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视。供试 品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。(3) 薄层鉴别甘草:取本品内容物0.5 5g,研细，加乙醚20 100ml，加热回流0.5-2 小时，滤过，弃去乙醚液，残渣挥干，加甲醇20 100ml，加热回流0.5 2小时，滤过，滤 液蒸干，残渣加水20 50ml使溶解，用正丁醇提取3次，每次20ml，合并正丁醇液，用水 洗涤3次，每次15ml，取正丁醇液，蒸干，残渣加甲醇溶解，作为供试品溶液。另取甘草对 照药材lg，同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法(中国药典相应附录)试验，吸取上述供试 品溶液及对照药材溶液2 10W，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板 上，以三氯甲烷-甲醇-水(35 45:8 12:0.8 1.2)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10% 硫酸乙醇溶液，10(TC 12(TC加热至斑点显色清晰，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱 中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。(4) 测定橙皮苷的含量照高效液相色谱法(中国药典相应附录)测定。色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈-水(16 20:84 80)为流动相；检测波长为283nm。对照品溶液的制备精密称取橙皮苷对照品适量，加50%甲醇制成每lml含20 n g的溶液，即得。供试品溶液的制备取本品内容物，研细，取0.05 lg，精密称定，置具塞锥形瓶中， 精密加入甲醇25 100ml，称定重量，超声处理20 60分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补 足减失的重量，摇匀，滤过，精密量取续滤液5ml置IOml量瓶中，加水至刻度，摇匀，即得。测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各5 20W，注入液相色谱仪，测定， 即得。
全文摘要
本发明公开了一种中药制剂银花芒果胶囊的质量控制方法，所述质量控制方法包括以下步骤采用薄层色谱法鉴别金银花、芒果叶、甘草，采用高效液相色谱法测定制剂中橙皮苷的含量。该质量控制方法确实可行，可保证产品质量和临床疗效。
文档编号G01N30/00GK101574495SQ20091011407
公开日2009年11月11日 申请日期2009年5月18日 优先权日2009年5月18日
发明者唐弟光, 廖厚知, 品 李, 霞 梁, 梁山丹, 荣燕李, 莫少红 申请人:唐弟光