专利名称：校准试剂的调整方法、校准试剂、以及使用上述校准试剂的血液成分测定装置的校正方法
技术领域：
本发明涉及一种对血液成分测定装置进行校正时使用的校准试剂的调整方法、校 准试剂、以及使用该校准试剂的血液成分测定装置的校正方法。上述血液成分测定装置是 使显色试剂与血液成分发生反应，并按照光学法测定所发生的显色(例如，使用载带有与 血液成分反应的显色试剂的专用试纸，来测定所述血液成分的浓度)。
背景技术：
作为测定血液中特定成分的方法，包括使含浸有与特定成分反应并显色的显色试 剂的试纸等中含有血液，测定显色试剂的显色情况的方法。存在下述血液成分测定装置使 用上述方法对含有显色试剂的试纸照射特定波长的光，由光的反射强度对作为特定对象的 特定成分进行检测或定量(例如日本特开2004-347436号公报)。对于这种血液成分测定装置，需要检查装置本身或者包括试纸的测定系统是否能 正确测定上述特定成分。为此开发了各种校正用的校准试剂(有时也称为标准试剂)。具 体而言，例如测定作为上述特定成分的葡萄糖时，存在下述校准试剂预先将已知量的葡萄 糖在作为溶剂的水中与缓冲剂、防腐剂、表面活性剂或者界面活性剂等一起混合(日本专 利第3509864号)。
发明内容
然而，如日本专利第3509864号技术所述，存在下述问题对于测定葡萄糖等血液 中所含的特定成分时使用的校准试剂来说，因为溶液的颜色几乎是透明的，与血液颜色不 同，所以实际校正装置时会产生误差。上述问题的原因基本在于，使含有显色试剂的试纸吸收血液时，在因特定成分引 起显色的同时还伴有血液颜色。然而，由于使用校准试剂时没有血液的颜色而只有显色试 剂的反应色(生成的色素的颜色)，所以在相同的测定算法中，仅因血液颜色部分造成了测 定值的偏差。因此，本发明的目的在于提供一种校准试剂的调整方法，上述校准试剂能够校正 下述测定装置，所述测定装置用于测定血液颜色、与因血液中的成分使显色试剂发生显色 后的颜色相混合状态的颜色。本发明的其他目的在于提供一种校准试剂，上述校准试剂能够校正下述测定装 置，所述测定装置用于测定血液颜色、与因血液中的成分使显色试剂发生显色后的颜色相 混合状态的颜色。本发明的另一个目的在于提供一种使用下述校准试剂的血液成分测定装置的校 正方法，所述校准试剂能够校正下述测定装置，所述测定装置用于测定血液颜色、与因血液 中的成分使显色试剂发生显色后的颜色相混合状态的颜色。另外，本发明人等为了解决上述问题，尝试在校准试剂中添加色素，使校正色素的颜色与血液颜色类似。通过上述努力可以在一定程度上解决上述问题，但是由于另外添加 的色素具有与血液成分不同的物理特性，所以判断会产生其他问题。S卩，测定装置中通常设置下述温度校正算法的程序，所述温度校正算法用于对在 使用测定装置进行测定血液样品中的特定成分(例如葡萄糖)时因温度条件引起的测定值 的波动进行校正。其目的在于测定时温度条件发生变化时，对与其相伴的因测定装置引起 的测定值的波动(通常存在如果测定温度上升则测定值变大的倾向)进行校正。然而，为 了使校准试剂的颜色模拟血液颜色，而另外添加的上述色素不一定显示与血液相同的温度 特性。因此，可以判断若将用于血液而设置的程序化算法应用于校准试剂来校正测定装置， 则存在因血液与校准试剂中的色素的温度特性差异导致无法准确地进行校正的问题。所以，本发明的另一个目的在于提供一种校准试剂的调整方法，上述校准试剂即 使在测定时的温度条件发生变化的情况下，也能准确地校正测定装置。本发明的另一个目的在于提供一种校准试剂，所述校准试剂即使在测定时的温度 条件发生变化的情况下，也能准确地校正测定装置。本发明的另一个目的在于提供一种使用下述校准试剂的血液成分测定装置的校 正方法，所述校准试剂即使在测定时的温度条件发生变化的情况下，也能够准确地校正测
定装置。通过以下方法达到上述目的。(1) 一种校准试剂的调整方法，是对用光学法测定血液成分的血液成分测定装置 进行校正时使用的校准试剂的调整方法，其特征在于，组合2种以上的不同色素并进行调 整，使校准试剂的形状接近血液的形状。(2) 一种校准试剂的调整方法，是对用光学法测定血液成分的血液成分测定装置 进行校正时使用的校准试剂的调整方法，其特征在于，在以上述血液成分测定装置中使用 的发光元件的标称波长为中心值的发光光谱的至少半值宽度的波长范围内，将吸收光谱的 斜率不同的第1色素和第2色素进行组合，进行调整，使在上述波长范围内被组合的吸收光 谱的形状与在上述波长范围内的血液的吸收光谱的形状相同。(3)如上述(2)所述的调整方法，其特征在于，上述第1色素具有下述吸收光谱 相对于上述标称波长，长波长侧与短波长侧相比具有较高的吸光度，上述第2色素具有下 述吸收光谱相对于上述标称波长，短波长侧与长波长侧相比具有较高的吸光度。(4)如上述(2)或(3)所述的调整方法，其特征在于，上述发光光谱的半值宽度的 波长范围至少是波长580 630nm的范围。(5)如上述(2) (4)中任一项所述的调整方法，其特征在于，上述第1色素在波 长610nm以上、小于700nm的范围内有吸收光谱峰，上述第2色素在波长560nm以上、小于 6IOnm的范围内有吸收光谱峰。(6) 一种校准试剂的调整方法，是对使用试纸按照光学法测定血液成分的血液成 分测定装置进行校正时使用的校准试剂的调整方法，其特征在于，组合2种以上不同的色 素并进行调整，使得在上述试纸的一面滴入上述校准试剂，用规定波长的光照射另一面来 测定反射吸光度时上述反射吸光度基于测定温度的变化倾向，与滴入血液代替上述校准试 剂进行测定时反射吸光度基于测定温度的变化倾向相同。(7)如上述(6)所述的调整方法，其特征在于，将上述2种以上的色素进行组合，以使对因校准试剂不含血液中的色素成分引起的测定误差进行校正。(8)如上述(7)所述的调整方法，其特征在于，将上述发光元件的发光光谱半值 宽度的中心值置于上述血液成分测定装置中使用的发光元件的标称波长时，在以上述标称 波长为中心值的至少上述半值宽度的波长范围内，从反射吸光度光谱的斜率不同的2种以 上的色素中选择上述2种以上的色素并进行组合，由此进行调整，使使上述波长范围内的 反射吸光度光谱的倾斜倾向，与在上述波长范围内的血液的反射吸光度光谱的倾斜倾向相 同。(9)如上述(6) (8)中任一项所述的调整方法，其特征在于，上述2种以上的色 素包含选自在波长短于eiOnm的短波长侧具有最大吸收波长的色素组中的1种以上的色 素，和选自在波长长于eiOnm的长波长侧具有最大吸收波长的色素组中的1种以上的色素。(10)如上述(9)所述的调整方法，其特征在于，上述2种以上的色素包含6-氨 基-4-羟基-5 ((4-硝基-2-磺苯基)偶氮)-2-萘磺酸以及α绿Α。(11) 一种校准试剂的调整方法，是对使用试纸按照光学法测定血液成分的血液成 分测定装置进行校正时使用的校准试剂的调整方法，其特征在于，在以上述血液成分测定 装置中使用的发光元件的标称波长作为中心值的发光光谱的至少半值宽度的波长范围内， 将吸收光谱的斜率不同的第1色素和第2色素进行组合，进行调整，使得在上述波长范围内 被组合的吸收光谱的形状与上述波长范围内血液的吸收光谱的形状相同，并且在上述试纸 的一面滴入上述校准试剂，用规定波长的光照射试纸的另一面测定反射吸光度时上述反射 吸光度基于测定温度的变化倾向，与滴入血液来代替上述校准试剂进行测定时反射吸光度 基于测定温度的变化倾向相同。(12) 一种校准试剂，是对按照光学法测定血液成分的血液成分测定装置进行校正 时使用的校准试剂，其特征在于，含有其成分量已知的血液成分和2种以上不同的色素，组 合上述2种以上的色素，使校准试剂的性状接近血液的性状。(13) 一种校准试剂，是对按照光学法测定血液成分的血液成分测定装置进行校正 时使用的校准试剂，其特征在于，含有其成分量已知的血液成分、和第1色素和第2色素，所 述第1色素和第2色素在以上述血液成分测定装置中使用的发光元件的标称波长作为中 心值的发光光谱的至少半值宽度的波长范围内其吸收光谱的斜率不同，对在上述波长范围 内被组合的吸收光谱的形状进行调整，使其与在上述波长范围内血液的吸收光谱的形状相 同。(14)如上述(13)所述的校准试剂，其特征在于，所述第1色素具有下述吸收光谱 相对于上述标称波长，长波长侧与短波长侧相比具有较高的吸光度，所述第2色素具有下 述吸收光谱相对于上述标称波长，短波长侧与长波长侧相比具有较高的吸光度。(15)如上述(13)或(14)所述的校准试剂，其特征在于，上述发光光谱的半值宽度 的波长范围至少是在波长580 630nm的范围。(16)如上述(13) (15)中任一项所述的校准试剂，其特征在于，上述第1色素在 波长610nm以上、小于700nm的范围内有吸收光谱峰；上述第2色素在波长560nm以上、小 于eiOnm的范围内有吸收光谱峰。(17) 一种校准试剂，是对使用试纸按照光学法测定血液成分的血液成分测定装 置进行校正时使用的校准试剂，其特征在于，含有其成分量已知的血液成分和组合的2种
7以上的不同色素，组合2种以上的不同色素时，使在上述试纸的一面滴入上述校准试剂，用 规定波长的光照射试纸的另一面测定反射吸光度时，上述反射吸光度基于测定温度的变化 倾向，与滴入血液来代替上述校准试剂进行测定时反射吸光度基于测定温度的变化倾向相 同。(18)如上述(17)所述的调整方法，其特征在于，上述2种以上的色素包含选自在 波长短于eiOnm的短波长侧具有最大吸收波长的色素组中的1种以上的色素、和选自在波 长长于eiOnm的长波长侧具有最大吸收波长的色素组中的1种以上的色素。(19)如上述(18)所述的校准试剂，其特征在于，上述2种以上的色素包含6-氨 基-4-羟基-5 ((4-硝基-2-磺苯基)偶氮)-2-萘磺酸以及α绿Α。(20) 一种校准试剂，是对使用试纸按照光学法测定血液成分的血液成分测定装置 进行校正时使用的校准试剂，其特征在于，含有其成分量已知的血液成分、和第1色素和第 2色素，所述第1色素和第2色素在以上述血液成分测定装置中使用的发光元件的标称波 长作为中心值的发光光谱的至少半值宽度的波长范围内其吸收光谱的斜率不同，组合上述 第1色素和第2色素，使得在上述波长范围内被组合的吸收光谱的形状与上述波长范围内 血液的吸收光谱的形状相同，并且在上述试纸的一面滴入上述校准试剂，用规定波长的光 照射试纸的另一面测定反射吸光度时，上述反射吸光度基于测定温度的变化倾向，与滴入 血液来代替上述校准试剂进行测定时，反射吸光度基于测定温度的变化倾向相同。(21)如上述(12) (20)中任一项所述的校准试剂，其特征在于，用于测定上述血 液成分的波长是基于与上述血液成分发生反应的显色试剂的波长。(22) 一种血液成分测定装置的校正方法，是按照光学法测定血液成分的血液成分 测定装置的校正方法，其特征在于，使用上述(12) (16)中任一项所述的校准试剂，将该 校准试剂应用于上述血液成分测定装置求出测定值，判断该测定值是否在由上述校准试剂 的已知成分量设定的允许范围内。(23) 一种血液成分测定装置的校正方法，是使用试纸按照光学法测定血液成分的 血液成分测定装置的校正方法，其特征在于，使用上述(17) (20)中任一项所述的校准试 剂，将该校准试剂应用于上述血液成分测定装置求出测定值，判断该测定值是否在由上述 校准试剂的已知成分量设定的允许范围内。本发明产生下述效果。根据上述(1)所述的发明，由于组合2种以上不同的色素进行调整使校准试剂的 性状接近血液性状，所以能够容易地调整校准试剂的颜色，上述校准试剂校正下述装置，所 述装置测定血液颜色、与因血液中的成分引起显色试剂显色后的颜色相混合后状态的颜 色。根据上述(2)或(3)所述的发明，通过用2种色素着色，使得以测定中使用的发光 元件的发光光谱中的标称波长为中心，在其半值宽度的波长范围内，使校准试剂与血液的 吸收光谱具有相同的斜率倾向。由此，能够容易地调整校准试剂的颜色，上述校准试剂校正 下述装置，所述装置测定血液颜色、与因血液成分使显色试剂显色后的颜色相混合后状态 的颜色。而且，使颜色的调整范围是在以发光元件的发光光谱的最大发光波长为中心的至 少半值宽度的波长范围内，由此仅使用2种色素即能够在该波长范围内充分地校准试剂模 拟血液颜色。
根据上述(4)所述的发明，可以在至少波长580 630nm的范围内，使校准试剂与 血液的吸收光谱的斜率倾向相同，因此使用标称波长设定为eiOnm的发光元件时，即使该 发光元件的最大发光波长在该范围内有波动，也能够对校准试剂进行调整，所述校准试剂 能够忽略该波动对装置进行校正。根据上述(5)所述的发明，作为第1色素使用波长在610歷以上、小于700nm范围 内有吸收光谱峰的色素，作为第2色素使用波长在560nm以上、小于610nm范围内有吸收光 谱峰的色素。由此，在以波长eiOnm为中心、波长560 700nm的范围内，若欲使长波长侧 的光谱上升则增加第1色素的量，若欲使短波长侧的光谱上升则增加第2色素的量，通过上 述方法可以容易地调整校准试剂的吸收光谱。根据上述(6)所述的发明，能够提供一种校准试剂的调整方法，所述校准试剂即 使测定时的温度条件发生变化的情况下，也能准确地校正测定装置校准试剂。根据上述(7)或(8)所述的发明，在测定中使用的波长范围内，即使有其他误差原 因，也可以使校准试剂的颜色充分模拟血液颜色。根据上述(9)或(10)所述的发明，能够更显著地体现出上述(6)所述的发明效^ ο根据上述(11)所述的发明，可以容易地调整校准试剂的颜色，上述校准试剂校正 下述装置，所述装置测定血液颜色、与基于血液中成分的颜色相混合后状态的颜色。而且， 即使测定时的温度条件发生变化的情况下，也能准确地校正测定装置。根据上述(12)所述的发明，由于组合2种以上不同的色素使校准试剂的性状接近 血液的性状，所以能够对测定血液颜色、与基于血液中成分的颜色相混合后状态的颜色的 装置进行校正，并且能够不使用校准试剂专用的标准曲线，与血液样品的测定同样地进行 校正操作。根据上述(13)或(14)所述的发明，由于为使用2种色素进行调整的校准试剂，使 以测定中使用的发光元件的发光光谱的标称波长为中心的至少的半值宽度的波长范围内， 使校准试剂与血液的吸收光谱具有相同的斜率倾向，所以能够对测定血液颜色、和基于血 液中成分的颜色相混合后状态的颜色的装置进行校正，并且能够不使用校准试剂专用的标 准曲线，与血液样品的测定同样地进行校正操作。根据上述(15)所述的发明，至少在波长580 630nm的范围内，使校准试剂与血 液的吸收光谱的斜率倾向相同。因此，使用标称波长设定为eiOnm的发光元件时，即使该发 光元件的最大发光波长在该范围内发生波动，也可以忽略波动进行装置的校正。根据上述(16)所述的发明，作为第1色素使用波长在eiOnm以上、小于700nm范 围内具有吸收光谱峰的色素，作为第2色素使用波长在560nm以上、小于eiOnm范围内具有 吸收光谱峰的色素。因此，在波长560 700nm的范围内，以波长610nm为中心，校准试剂 在长波长侧及短波长侧均与血液的吸收光谱的倾斜倾向一致。根据上述(17)所述的发明，能够提供一种校准试剂，所述校准试剂即使在测定时 的温度条件发生变化的情况下，也能准确地校正测定装置。根据上述(18)或(19)所述的发明，能更显著地体现出上述(17)所述的发明效^ ο根据上述(20)所述的发明能够提供一种校准试剂，所述校准试剂能够对测定血
9液颜色、和基于血液中成分的颜色相混合后状态的颜色的装置进行校正，并且能够不使用 校准试剂专用的标准曲线，与血液样品的测定同样地进行校正操作，而且即使测定时的温 度条件发生变化的情况下，也能准确地校正测定装置。根据上述(21)所述的发明，使校正时的测定波长为实际测定血液样品中使用的 波长(基于与血液成分发生反应的显色试剂的波长)，由此不需要设置多个发光元件，即可 以使用血液用测定算法。根据上述(22)所述的发明，不需要另外设置校准试剂专用的标准曲线及测定模 式，即可以与测定血液同样地用校准试剂进行测定。根据上述(23)所述的发明，能够提供一种使用了校准试剂的血液成分测定装置 的校正方法，所述校准试剂即使在测定时的温度条件发生变化的情况下，也能准确地校正 测定装置。
图1是用于说明葡萄糖测定装置的大致构成的说明图。图2是用于说明发光二极管的发光光谱的个体差异的图。图3是表示在血液及无着色的校准试剂中分别添加已知量的葡萄糖进行测定时 由显色试剂引起的显色的吸收光谱的曲线图。图4是表示罂红的吸收光谱的图。
图5是表示α绿A的吸收光谱的图。图6是表示苋菜红的吸收光谱的图。图7是表示色素A的吸收光谱的图。图8是表示硝基红的吸收光谱的图。图9Α是表示实施例1-1和比较例1的反射率光谱的曲线图。图9Β是表示实施例1-1和比较例1的吸收光谱的曲线图。图IOA是发光元件的发光光谱与图9Α叠加的曲线图。图IOB是发光元件的发光光谱与图9Β叠加的曲线11是表示在实施例1-1和比较例1的吸收光谱上，叠加罂红(ER)和苋菜红(AM) 各自单独的吸收光谱的图。图12A是表示实施例1-2和比较例1的反射率光谱的曲线图。图12B是表示实施例1-2和比较例1的吸收光谱的曲线图。图13A是发光元件的发光光谱与图12A叠加的曲线图。图13B是发光元件的发光光谱与图12B叠加的曲线图。图14是表示在实施例1-2和比较例1的吸收光谱上，叠加酸性湖蓝(AL)和色素 A各自单独的吸收光谱的图。图15是表示使用含有180mg/dl葡萄糖的血液样品，使测定时的温度变化为10°C、 15°C、20°C、25°C、30°C时，叠加其反射吸光度光谱的图。图16是表示在5种温度条件下(12°C、15°C、20°C、25°C、3(rC)测定血液(血糖值 180mg/dL)的葡萄糖浓度，使用温度校正算法校正后的测定值的曲线图。图17是表示将添加有罂红的校准试剂滴在试纸上，用分光计分别在各温度条件
10下(10°C、15°C、20°C、25°C、3(rC )测定时反射吸光度光谱的曲线图。图18是表示将添加有α绿A的校准试剂滴在试纸上，用分光计分别在各温度条 件下(10°C、15°C、20°C、25°C、3(rC )测定时反射吸光度光谱的曲线图。图19是表示将添加有色素A的校准试剂滴在试纸上，用分光计分别在各温度条件 下(10°C、15°C、20°C、25°C、3(rC )测定时反射吸光度光谱的曲线图。图20是表示将添加有α绿A和色素A的组合的校准试剂(实施例)滴在试纸 上，用分光计在各温度条件下(10°C、15°C、2(TC、25°C、3(rC )测定时反射吸光度光谱的曲 线图。图21是从图15、图18、图19和图20，将波长610nm处的各反射吸光度相对于测定 温度绘制而成的曲线图。图22是表示使用单独添加有α绿Α、单独添加有色素Α、或添加有α绿A和色素 A的组合的校正色素进行校正，通过用与图16相同的血液用温度校正算法得到的测定值的 曲线图。图23是表示对单独含有罂红的水溶液，在使测定温度变化的情况下，观察其反射 吸光度的时间过程的结果的曲线图。图24是表示对单独含有α绿A的水溶液，在使测定温度变化的情况下，观察其反 射吸光度的时间过程的结果的曲线图。符号说明
100测定装置主体
101试纸
102发光元件
103受光元件
111支架
具体实施例方式
下面，参照
本发明的实施方式。本发明提供的校准试剂，含有其成分量已知的血液成分和2种以上不同的色素。 而且，在上述校准试剂中，组合2种以上的色素，使校准试剂的性状接近血液的性状。应用本发明的实施方式之一所得的校准试剂中，该2种色素为下述第1色素和第 2色素将发光元件的发光光谱的半值宽度的中心值置于血液成分测定装置中使用的发光 元件的标称波长时，至少在以标称波长为中心值的半值宽度的波长范围内，所述第1色素 具有下述吸收光谱相对于该发光元件的标称波长，长波长侧与短波长侧相比具有较高的 吸光度，所述第2色素具有下述吸收光谱相对于相同的标称波长，短波长侧与长波长侧相 比具有较高的吸光度。而且，经过上述2种色素调整的校准试剂，在以血液成分测定装置中使用的发光 元件的发光光谱的最大发射波长为中心的发光光谱的半值宽度的波长范围内，其吸收光谱 的形状与血液的吸收光谱的形状相同。以下，详细说明如上所述使用2种色素调整校准试剂的吸收光谱的方法。首先，就测定血液中的特定成分的血液成分测定装置(以下，简称为“测定装置”)进行说明。作为测定装置，例如可以举出如上述专利文献1所公开的那样，测定血中葡萄糖 的血糖测定装置。图1是用于说明上述血糖测定装置的大致构成的说明图。上述血糖测定装置包括由多孔质膜构成的试纸101，以特定波长的光照射试纸 101的发光元件102，接受其反射光的受光元件103。试纸101安装在支架111上。支架111 与测定装置主体是可拆卸的。试纸101中预先含浸有与葡萄糖反应并进行显色的显色试 剂。作为测定对象的血液，在支架111安装于测定装置主体100的状态下，通过支架 111的细管被试纸101吸收。由此，在试纸101中，被含浸的显色试剂与葡萄糖反应生成色 素，呈现出与葡萄糖浓度相应浓淡度的颜色。接着，从发光元件102向试纸101照射特定波长的光，受光元件103接受该反射光 并测定反射光量。此时，从显色时刻开始计时，经过规定时间后由该反射光的强度算出血液 中的葡萄糖浓度。测定装置主体100中，内置有图中未示出的微机(microcomputer)，该微机通过将 来自受光元件103的电信号与预先存储的标准曲线对比，算出葡萄糖的浓度。需要说明的是，虽然图中未示出，但是该测定装置安装有显示测定结果的显示装 置、调节来自受光元件103的电信号量(增益)的调节器等。在上述装置中，作为发光元件102选用下述波长，所述波长为在作为测定成分的 葡萄糖与显色试剂反应生成的色素的反射吸光度光谱中特征性且定量性良好的波长。因 此，通常使用发出上述特定波长的光的发光二极管(LED)。因此，用于由反射光强度(实际 上来自受光元件103的信号电压)求出葡萄糖浓度的标准曲线是基于该特定波长而制作 的。然而，发光二极管的波长将标称波长作为最大发射波长(波峰)，形成具有一定程 度范围的钟形(吊钟形)。但是，发光二极管存在个体差异，其最大发射波长稍稍偏移标称 波长，分散在标称波长附近。图2是用于说明发光二极管的发光光谱个体差异的图，为表示多个发光二极管的 发光光谱的图。图中强度表示每个波长相对于发光二极管的总光量的比例。此处，给出标称波长为eiOnm的5个市售发光二极管的数据。从图中可以看出，实 际的最大发射波长以eiOnm为中心上下偏移约5nm左右。即，可以认为发光二极管相对于 作为其发射波长而设定的波长(标称波长)，实际的发射波长以一定程度分散。而且，发光 光谱的范围约为570 680nm左右，发光光谱的最大发射波长的分散范围约为600 615nm 左右ο另一方面，血液的吸收光谱根据波长而不同。图3是表示在血液和无着色的校准 试剂(即不适用本发明)中，分别添加已知量的葡萄糖而测定出的吸收光谱的曲线图。此处，图3分别表示Bl 调整至葡萄糖为70mg/dl的血液，Sl 调整至葡萄糖为 70mg/dl的无着色校准试剂，B2 调整至葡萄糖为180mg/dl的血液，S2 调整至葡萄糖为 180mg/dl的无着色校准试剂。如图所示，葡萄糖浓度无论是高还是低，相对于血液来说，无着色校准试剂以波长
12约609nm为界限，在波长短的一侧显示比血液低的吸光度，在波长长的一侧显示比血液高 的吸光度。由上述可知，用血液和无着色的校准试剂测定时，如果测定的波长有偏差，则对应 于该偏离测定值的误差变大。因此，在实际的测定装置中必须分别准备2种标准曲线用于 由测定血液时的显色得知葡萄糖浓度的标准曲线，和用于由测定无着色的校准试剂得知葡 萄糖浓度的标准曲线。为了不必准备上述复杂的2种标准曲线，而仅用血液用标准曲线测定校准试剂， 由此时的显色得知葡萄糖浓度，可以使校准试剂的基本吸收光谱与血液颜色的吸收光谱相 一致。但是，即使其颜色与血液颜色相一致，为了调整为完全一致的颜色，需要多种色素(3 种、4种或者4种以上)，并且调整它们的混合程度，这是非常困难的。因此，本实施方式中仅在以测定中使用的波长为中心的规定范围内，获得了具有 与血液的吸收光谱相同形状的吸收光谱。如果在上述限定范围内则能容易地使其颜色一 致，并且如果不是使其完全一致而是仅显示相同的形状，那么通过使用2种色素就能容易 地调整。此处规定的波长范围，只要包括上述各发光元件102产生的发光光谱的分散(偏 离)发光光谱即可。即，在发光元件102的最大发射波长因各发光元件102而偏离的范围 内，只要形成与血液颜色相同倾向的吸收光谱，那么即使发光元件102的最大发射波长分 散，也不会与血液产生大的测定误差。再次参照图2，发光元件102的最大发射波长的波动如上所述约为600 615nm左 右。即使针对波动的范围考虑到安全系数，在大致以作为标称波长的eiOnm为中心的情况 下，可知上述范围在其半值宽度的范围内，即在图2的波长580 630nm的范围内。因此， 在将发光元件的发光光谱的半值宽度的中心值置于血液成分测定装置中使用的发光元件 的标称波长上时，至少在以标称波长为中心值的半值宽度的波长范围内，只要使校准试剂 的颜色具有与血液颜色相同形状(相同倾向)的吸收光谱即可。以下，将发光元件102的 发光光谱的半值宽度的波长范围称为“规定范围”。在上述规定范围内，用于使吸收光谱一致而使用的色素为2种。一种是第1色素， 所述第1色素具有下述吸收光谱相对于发光光谱的标称波长，长波长侧与短波长侧相比 具有较高的吸光度。另一种是第2色素，所述第2色素具有下述吸收光谱相对于发光光谱 的标称波长，短波长侧与长波长侧相比具有较高的吸光度。即，上述2种色素在规定范围内 具有不同的吸收光谱倾向。通过使用上述2种色素，在规定范围内可以调整出具有显示出与血液的吸收光谱 相同斜率倾向的吸收光谱的液体颜色。即，为了使吸收光谱的长波长侧变高，若使该波形倾 斜则需多添加第1色素；相反地，为了使短波长侧变高，若使该波形倾斜则需多添加第2色 素。而且，若要提高整体的着色浓度，则可以保持能达到所希望的吸收光谱的第1色素和第 2色素的比例，同时提高各色素相对于全部溶剂的浓度即可。另外，实际测定试纸101的反射率时，影响该反射率的光并不是发光光谱的整个 波长范围的光，而是相当于发光强度最强的最大发射波长的半值宽度的范围内的光。因此， 通过使相当于半值宽度的范围与血液的吸收光谱为相同的斜率倾向，能够充分地减小测定 误差。需要说明的是，所谓形状相同是指在血液的吸收光谱中，例如在长波长方向斜率为正的波长范围部分内，校准试剂的吸收光谱的斜率也同样为正(反之亦然，在短波长方向斜 率为正的波长范围部分内，校准试剂的吸收光谱的斜率也同样为正)。即，可以说斜率倾向 是相同的。作为上述2种色素，例如可以举出表1所示的色素。需要说明的是，虽然表中只 列举了各色素的最大吸收波长，但上述色素均为公知的色素，具体的吸收光谱在色素的目 录及文献中有记载。作为文献例子有例如Aldrich Chemical Companyl990年出版的《The Sigma-Aldrich Handbook of StainsK ((Dyes and Indicators)) [表1]
权利要求
一种校准试剂的调整方法，是对用光学法测定血液成分的血液成分测定装置进行校正时使用的校准试剂的调整方法，其特征在于，组合2种以上的不同色素并进行调整，使校准试剂的性状接近血液的性状。
2.一种校准试剂的调整方法，是对用光学法测定血液成分的血液成分测定装置进行校 正时使用的校准试剂的调整方法，其特征在于，在以所述血液成分测定装置中使用的发光元件的标称波长为中心值的发光光谱的至 少半值宽度的波长范围内，将吸收光谱的斜率不同的第1色素和第2色素进行组合，进行调整，使在所述波长范围内被组合的吸收光谱的形状与在所述波长范围内的血液 的吸收光谱的形状相同。
3.如权利要求2所述的调整方法，其特征在于，所述第1色素具有下述吸收光谱相对于所述标称波长，长波长侧与短波长侧相比具 有较高的吸光度，所述第2色素具有下述吸收光谱相对于所述标称波长，短波长侧与长波长侧相比具 有较高的吸光度。
4.如权利要求2或3所述的调整方法，其特征在于，所述发光光谱的半值宽度的波长范围至少是波长580 630nm的范围。
5.如权利要求2 4中任一项所述的调整方法，其特征在于，所述第1色素在波长eiOnm以上、小于700nm的范围内有吸收光谱峰，所述第2色素在波长560nm以上、小于610nm的范围内有吸收光谱峰。
6.一种校准试剂的调整方法，是对使用试纸按照光学法测定血液成分的血液成分测定 装置进行校正时使用的校准试剂的调整方法，其特征在于，组合2种以上不同的色素并进行调整，使得在所述试纸的一面滴入所述校准试剂，用 规定波长的光照射试纸的另一面来测定反射吸光度时所述反射吸光度基于测定温度的变 化倾向，与滴入血液代替所述校准试剂进行测定时反射吸光度基于测定温度的变化倾向相 同。
7.如权利要求6所述的调整方法，其特征在于，将所述2种以上的色素进行组合，以校正因校准试剂不含血液中的色素成分而引起的测定误差。
8.如权利要求7所述的调整方法，其特征在于，将所述发光元件的发光光谱半值宽度的中心值置于所述血液成分测定装置中使用的 发光元件的标称波长时，在以所述标称波长为中心值的至少所述半值宽度的波长范围内， 从反射吸光度光谱的斜率不同的2种以上的色素中选择所述2种以上的色素并进行组合， 由此进行调整，使所述波长范围内的反射吸光度光谱的倾斜倾向，与在所述波长范围内的 血液的反射吸光度光谱的倾斜倾向相同。
9.如权利要求6 8中任一项所述的调整方法，其特征在于，所述2种以上的色素包含选自在波长短于eiOnm的短波长侧具有最大吸收波长的色素 组中的1种以上的色素、和选自在波长长于eiOnm的长波长侧具有最大吸收波长的色素组 中的1种以上的色素。
10.如权利要求9所述的调整方法，其特征在于，所述2种以上的色素包含6-氨基-4-羟基-5 ((4-硝基-2-磺苯基)偶氮)-2-萘磺 酸以及α绿A。
11.一种校准试剂的调整方法，是对使用试纸按照光学法测定血液成分的血液成分测 定装置进行校正时使用的校准试剂的调整方法，其特征在于，在以所述血液成分测定装置中使用的发光元件的标称波长作为中心值的发光光谱的 至少半值宽度的波长范围内，将吸收光谱的斜率不同的第1色素和第2色素进行组合，进行调整，使得在所述波长范围内的被组合的吸收光谱的形状与所述波长范围内的血 液的吸收光谱的形状相同，并且在所述试纸的一面滴入所述校准试剂，用规定波长的光照 射试纸的另一面测定反射吸光度时所述反射吸光度基于测定温度的变化倾向，与滴入血液 来代替所述校准试剂进行测定时反射吸光度基于测定温度的变化倾向相同。
12.—种校准试剂，是对按照光学法测定血液成分的血液成分测定装置进行校正时使 用的校准试剂，其特征在于，含有其成分量已知的血液成分和2种以上不同的色素，组合所述2种以上的色素，使校准试剂的性状接近血液的性状。
13.一种校准试剂，是对按照光学法测定血液成分的血液成分测定装置进行校正时使 用的校准试剂，其特征在于，含有其成分量已知的血液成分和第1色素以及第2色素，所述第1色素和第2色素在以所述血液成分测定装置中使用的发光元件的标称波长作 为中心值的发光光谱的至少半值宽度的波长范围内其吸收光谱的斜率不同，对在所述波长范围内被组合的吸收光谱的形状进行调整，使其与在所述波长范围内血 液的吸收光谱的形状相同。
14.如权利要求13所述的校准试剂，其特征在于，所述第1色素具有下述吸收光谱相对于所述标称波长，长波长侧与短波长侧相比具 有较高的吸光度，所述第2色素具有下述吸收光谱相对于所述标称波长，短波长侧与长波长侧相比具 有较高的吸光度。
15.一种校准试剂，是对使用试纸按照光学法测定血液成分的血液成分测定装置进行 校正时使用的校准试剂，其特征在于，含有其成分量已知的血液成分和组合的2种以上的不同色素，组合2种以上的不同色 素时，使在所述试纸的一面滴入所述校准试剂，用规定波长的光照射试纸的另一面测定反 射吸光度时，所述反射吸光度基于测定温度的变化倾向，与滴入血液来代替所述校准试剂 进行测定时反射吸光度基于测定温度的变化倾向相同。
16.如权利要求15所述的校准试剂，其特征在于，所述2种以上的色素包含选自在波长短于eiOnm的短波长侧具有最大吸收波长的色素 组中的1种以上的色素、和选自在波长长于eiOnm的长波长侧具有最大吸收波长的色素组 中的1种以上的色素。
17.一种校准试剂，是对使用试纸按照光学法测定血液成分的血液成分测定装置进行 校正时使用的校准试剂，其特征在于，含有其成分量已知的血液成分和第1色素以及第2色素，所述第1色素和第2色素在以所述血液成分测定装置中使用的发光元件的标称波长作 为中心值的发光光谱的至少半值宽度的波长范围内其吸收光谱的斜率不同，组合所述第1色素和第2色素，使得在所述波长范围内被组合的吸收光谱的形状与所 述波长范围内血液的吸收光谱的形状相同，并且在所述试纸的一面滴入所述校准试剂，用 规定波长的光照射试纸的另一面测定反射吸光度时，所述反射吸光度基于测定温度的变化 倾向，与滴入血液来代替所述校准试剂进行测定时，反射吸光度基于测定温度的变化倾向 相同。
18.如权利要求12 17中任一项所述的校准试剂，其特征在于，用于测定所述血液成分的波长是基于与所述血液成分发生反应的显色试剂的波长。
19.一种血液成分测定装置的校正方法，是按照光学法测定血液成分的血液成分测定 装置的校正方法，其特征在于，使用权利要求12 14中任一项所述的校准试剂，将所述校准试剂应用于所述血液成 分测定装置求出测定值，判断所述测定值是否在由所述校准试剂的已知成分量设定的允许 范围内。
20.—种血液成分测定装置的校正方法，是使用试纸按照光学法测定血液成分的血液 成分测定装置的校正方法，其特征在于，使用权利要求15 17中任一项所述的校准试剂，将所述校准试剂应用于所述血液成 分测定装置求出测定值，判断所述测定值是否在由所述校准试剂的已知成分量设定的允许 范围内。
全文摘要
本发明提供一种校准试剂的调整方法，所述校准试剂能够校正下述测定装置，所述测定装置对血液颜色、与因血液中的成分而显色试剂发生显色的颜色相混合状态的颜色进行测定。另外，提供一种即使测定时的温度条件发生变化，也能够正确校正测定装置的校准试剂的调整方法。根据本发明，提供一种校准试剂的调整方法，是对用光学法测定血液成分的血液成分测定装置进行校正时使用的校准试剂的调整方法，其特征在于，组合2种以上不同的色素并进行调整，使校准试剂的性状接近血液的性状。
文档编号G01N33/96GK101981454SQ20098011148
公开日2011年2月23日 申请日期2009年3月27日 优先权日2008年3月31日
发明者中村寿久, 内田高雄, 有田荣次, 熊谷安祐实, 长泽靖 申请人:泰尔茂株式会社