专利名称：一种奈拉滨的检测分析方法
技术领域：
本发明属于医药技术领域，具体涉及一种奈拉滨的检测分析方法。
背景技术：
急性T细胞型淋巴母细胞白血病(T-ALL)和T细胞型淋巴母细胞性淋巴瘤 (T-LBL)是两种恶化速度非常快的疾病，其中T-ALL在我国急性淋巴细胞白血病的发病率仅次于普通型急性淋巴细胞白血病，占发病率的第二位。奈拉滨是9-β -arabinofuranosy lguanine (ara-G)的水溶性前药，在血浆中可产生ara_G，而ara_G对T细胞具有选择性的细胞毒作用，因此，奈拉滨对T细胞淋巴瘤具有特异性，对T-ALL和T-LBL具有较好的疗效。 2005年10月观日由FDA批准奈拉滨静脉注射液Q50mg/50ml)用于至少2种化疗方案治疗无效或治疗后复发的T-ALL和T-LBL的治疗。有关物质与药品质量、安全性及疗效密切相关，有关物质的存在会降低药物的疗效，甚至引起毒副作用，因此，必须通过适当的检测分析方法控制药物中有关物质的种类和含量，确保药品质量。经检索，目前尚无针对奈拉滨的检测分析方法的相关专利或公开文献报道。
发明内容
本发明的目的在于构建一种奈拉滨的检测分析方法，该方法专属性好，能将可能的降解杂质和可能的残留中间体与主成分有效分开，且灵敏度高，此方法应用于奈拉滨和奈拉滨注射液的质量控制，控制产品中的6-甲氧基鸟苷(光学异构体)、同分异构体、2-氨基-6-甲氧嘌呤(降解产物)及其它杂质。本发明通过以下技术方案实现—种奈拉滨的检测分析方法，其特征在于所采用检测分析方法为照中国药典2005年版二部附录VD高效液相色谱法测定，以十八烷基键合硅胶为填充剂，ODS预柱，柱温25°C，检测波长为210-247nm，流速为0. 7-1. lml/min,以磷酸溶液为流动相 A，以体积比为1 2-2 1的乙腈-磷酸溶液为流动相B，按0-60分钟，流动相A比例为 92 %，流动相B比例为8 %，60-80分钟，流动相A比例为70 %，流动相B比例为30 %，80-90 分钟，流动相A比例为92%，流动相B比例为8%进行梯度洗脱；供试品溶液的制备精密称取样品，加水稀释，摇勻，作为供试品溶液；
精密吸取供试品溶液注入液相色谱仪中，记录色谱图。其中磷酸可以用醋酸、磷酸二氢钠、磷酸氢二钠、磷酸二氢钾、磷酸氢二钾代替。其中乙腈可以用甲醇代替。色谱方法的方法学验证1、专属性试验取样品进行高温、高湿、强光、酸、碱、氧化破坏试验，采用本发明进行检测，以考察该系统的专属性、灵敏性。(1)样品对照试验取样品溶液、空白溶剂分别注入液相色谱仪，记录色谱图。结论空白溶剂不干扰样品有关物质的测定。有梯度洗脱系统峰出现，样品色谱图中主峰与各杂质峰能有效分离。(2)高温试验取经高温105°C加热考察他的样品，加水溶解，摇勻滤过，取续滤液注入液相色谱仪，记录色谱图。结论无新杂质产生，总杂质基本无变化。取经60°C加热10天的样品，加水溶解，摇勻滤过，取续滤液注入液相色谱仪，记录色谱图。结论样品在高温60°C加热10天后杂质含量发生变化，总杂质有由0. 20%增至 0. 25%。(3)强光试验取经4500士500Lx照射10天的样品，加水溶解，摇勻滤过，取续滤液注入液相色谱仪，记录色谱图。结论样品在4500士500Lx照射10天杂质含量发生变化，总杂质有由0. 20%增至 0. 41%。(4)高湿试验(RH9O士)取经90士5%的湿度条件下放置10天的样品，加水溶解，摇勻滤过，取续滤液注入液相色谱仪，记录色谱图。结论无新杂质产生，总杂质基本无变化。(5)酸降解试验酸空白试验取0. lmol/L盐酸溶液，加水稀释，摇勻，注入液相色谱仪，记录色谱图。取样品，加0. lmol/L盐酸溶液，放置4h后，加水溶解，摇勻滤过，取续滤液注入液相色谱仪，记录色谱图。结论有新杂质产生，且杂质较大，总杂质有由0.20%增至0.85%。(6)碱降解试验碱空白试验取0. lmol/L氢氧化钠溶液，加水稀释，摇勻，注入液相色谱仪，记录色谱图。取样品，加0. lmol/L氢氧化钠溶液，放置4h后，加水溶解，摇勻滤过，取续滤液注入液相色谱仪，记录色谱图。结论有新杂质产生，约占0.01%，总杂质有由0.20%增至1. 14%。(7)氧化分解试验氧化空白试验取30 %的过氧化氢溶液，加水稀释，摇勻，注入液相色谱仪，记录色谱图。 取样品，加30 %的过氧化氢溶液，放置4h后，加水溶解，摇勻滤过，取续滤液注入液相色谱仪，记录色谱图。
结论有新杂质产生，总杂质有由0. 20%增至1. 04%。(8)溶液热破坏(80°C )试验取样品，加水溶解，摇勻，滤过，作为供试品溶液，置80°C水浴中恒温加热8小时后，取溶液注入液相色谱仪，记录色谱图。结论有新杂质产生，总杂质有由0. 20%增至0. 23%。(9)峰纯度试验取样品，加水溶解，摇勻，注入液相色谱仪，采用二极管阵列检测器进行检测，记录色谱图。结论奈拉滨主峰峰纯度良好。(10)专属性试验各破坏实验杂质变化总结(各杂质的量均按峰面积归一化法)
其他杂质
权利要求
1.一种奈拉滨的检测分析方法，其特征在于所采用检测分析方法为照中国药典2005年版二部附录VD高效液相色谱法测定，以十八烷基键合硅胶为填充剂，ODS预柱；柱温25°C，检测波长为210-247nm，流速为0. 7-1. lml/min,以磷酸溶液为流动相A，以体积比为1 2-2 1的乙腈-磷酸溶液为流动相B，按0-60分钟，流动相A比例为92%， 流动相B比例为8 %，60-80分钟，流动相A比例为70 %，流动相B比例为30 %，80-90分钟， 流动相A比例为92%，流动相B比例为8%进行梯度洗脱；供试品溶液的制备精密称取样品，加水稀释，摇勻，作为供试品溶液； 精密吸取供试品溶液注入液相色谱仪中，记录色谱图。
2.根据权利要求1所述的一种奈拉滨的检测分析方法，其中磷酸用醋酸、磷酸二氢钠、 磷酸氢二钠、磷酸二氢钾、磷酸氢二钾代替。
3.根据权利要求1所述的一种奈拉滨的检测分析方法，其中乙腈用甲醇代替。
全文摘要
本发明公开了一种奈拉滨的检测分析方法，包括奈拉滨、奈拉滨注射液的高效液相色谱法检测分析，其特征在于使用水、磷酸和乙腈为流动相，采用梯度洗脱的方法检测分析奈拉滨、奈拉滨注射液中的2-氨基-6-甲氧嘌呤、奈拉滨光学异构体和奈拉滨同分异构体等有关物质，保证奈拉滨、奈拉滨注射液中有关物质的可控性。
文档编号G01N30/02GK102313780SQ20101021936
公开日2012年1月11日 申请日期2010年7月7日 优先权日2010年7月7日
发明者姜威, 孙学伟, 孙德杰, 米长江, 顾群 申请人:北京本草天源药物研究院