专利名称：蒺藜总皂苷的检测方法
技术领域：
本发明涉及蒺藜提取物的检测方法，属于中药领域。
背景技术：
白蒺藜(Tribulus Terrestris L)为蒺藜科蒺藜属植物，具有活血通络、平肝潜 阳、祛湿化痰、宣痹通阳、补益肝肾等功效。历代本草多有记载，《本草纲目》日“蒺藜气味 苦温，其性宣通，治胸痹痞满，利肝肾。”《本经》载“蒺藜主恶血，破积聚。”《本草再新》“益 气化痰，散湿。，，《本草汇言》谓其“去风下气，行水化瘀之药也。”蒺藜总皂苷临床已被应用 多年以治疗心血管疾病。临床及实验药理学都证明可改善心功能、缩小心肌梗塞面积、缓解 心绞痛的症状、延长心绞痛的发作间期、减少心绞痛的发作次数，对陈旧性心肌梗塞伴左室 功能异常者亦能减轻其胸闷、气促和心悸等症状，增加左室收缩功能和排血量。目前，现有技术并没有公开蒺藜提取物的指纹图谱的检测方法。
发明内容
本发明目的在于提供一种蒺藜提取物的检测方法。本发明目的在于提供一种蒺藜总皂苷的检测方法。本发明提供一种蒺藜提取物的高效液相_蒸发光散射指纹图谱检测方法，该方法 包括如下步骤色谱条件室温，相对湿度25-40%;以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以60 90 %乙腈溶液为流动相A，以水为流动相B，按下表中的规定进行梯度洗脱，流速0. 4 0. 6ml/min，柱温25 45°C ；蒸发光散射检测器漂移管温度105 120°C，气体流速1 3L/min。
权利要求
一种蒺藜提取物的指纹图谱检测方法，其特征在于该方法为色谱条件为室温，相对湿度25 40％；以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以60～90％乙腈溶液为流动相A，以水为流动相B，梯度洗脱，流速0.4～0.6ml/min，柱温25～45℃；蒸发光散射检测器的条件为漂移管温度105～120℃，气体流速1～3L/min；取蒺藜提取物制成每1ml含3 6mg的溶液；注入液相色谱仪，记录色谱图。
2.如权利要求1所述的指纹图谱检测方法，其特征在于梯度洗脱过程为第0.01分 钟流动相A乙腈溶液为24%，流动相B水为76% ；第8分钟流动相A乙腈溶液为32%， 流动相B水为68% ；第45分钟流动相A乙腈溶液为40%，流动相B水为60% ；第75分 钟流动相A乙腈溶液为55 %，流动相B水为45 %。
3.如权利要求1所述的指纹图谱检测方法，其特征在于供试品溶液的制备方法为称 取蒺藜提取物适量，加水适量，超声处理5-20分钟，放冷，滤过，制成每Iml含3-6mg的溶 液。
4.如权利要求1所述的指纹图谱检测方法，其特征在于色谱条件中室温为20°C;相对 湿度为35%0
5.如权利要求3所述的指纹图谱检测方法，其特征在于供试品溶液的制备中超声处理 10分钟；制成每Iml含5mg的溶液。
6.如权利要求2所述的指纹图谱检测方法，其特征在于梯度洗脱过程为第0. 01分钟流动相A乙腈溶液为24%，流动相B水为76% ；第8分钟流动相A乙 腈溶液为32 %，流动相B水为68 % ；第45分钟流动相A乙腈溶液为40 %，流动相B水为 60% ；第75分钟流动相A乙腈溶液为55%，流动相B水为45% ；第80分钟流动相A乙 腈溶液为75%，流动相B水为25%;第120分钟流动相A乙腈溶液为75%，流动相B水为 25%。
7.如权利要求2所述的指纹图谱检测方法，其特征在于蒺藜提取物指纹图谱中为10 个共有峰，与蒺藜呋留皂苷甲为对照品色谱峰相对应的8号峰为参照峰，计算各共有峰的 相对保留时间和相对峰面积比值，相对保留时间1#0. 35-0. 43、2#0· 40-0. 48、3#0· 40-0. 50、 4#0· 65-0. 79、5#0· 67-0. 81、6#0· 83-1. 01、7#0· 87-1. 07、8#1· 00、9#1· 21-1. 47、10#1· 30-1. 60 ； 相对峰面积1#0. 4 1. 0、2#0· 2 0. 3、4#0· 2 0. 4、6#0· 2 0. 4、8#1. OOUOflO. 2 0. 4。
8.如权利要求6所述的指纹图谱检测方法，其特征在于蒺藜提取物指纹图谱中为13 个共有峰，与蒺藜呋留皂苷甲为对照品色谱峰相对应的8号峰为参照峰，计算各共有峰的 相对保留时间和相对峰面积比值，相对保留时间1#0. 35-0. 43、2#0· 40-0. 48、3#0· 40-0. 50、 4#0· 65-0. 79、5#0· 67-0. 81、6#0· 83-1. 01、7#0· 87-1. 07、8#1· 00、9#1· 21-1. 47、10#1· 30-1. 60、 11#1· 38-1. 86、12#1· 44-1. 94、13#1· 73-2. 33 ；相对峰面积1#0. 4 1. 0、2#0· 2 0. 3、 4#0· 2 0. 4、6#0· 2 0. 4、8#1. OOUOflO. 2 0. 4、12#0· 5 0. 9。
9.如权利要求1所述的指纹图谱检测方法，其特征在于所述蒺藜提取物由如下方法制 备取蒺藜草分别加水5 15倍量，煎煮1 5次，合并煎液，滤过，滤液减压浓缩放冷，加 入乙醇，搅勻，静置，滤过，滤液减压回收乙醇至无醇味，加水稀释，滤过，滤液通过已处理好 的大孔吸附树脂柱，再用水洗至流出液近无色澄清，继用60% 85%乙醇洗脱至洗脱液无 苦味，收集洗脱液，减压回收乙醇，浓缩，即得蒺藜提取物。
10.如权利要求9所述的指纹图谱检测方法，其特征在于所述蒺藜提取物由如下方法制备所述蒺藜皂苷更优选由如下方法制备取蒺藜草切段，分别加水5 15倍量，煎煮 1 5次，每次1 4h，合并煎液，滤过，滤液减压浓缩至50 60°C相对密度1. 1 1. 25，放 冷，加入80% 99%乙醇，搅勻，静置1 5h，滤过，滤液减压回收乙醇至无醇味，加水稀释， 滤过，滤液通过已处理好的大孔吸附树脂柱，药液流速控制在400 700L/h，再用水洗至流 出液近无色澄清，继用60% 85%乙醇洗脱至洗脱液无苦味，收集洗脱液，减压回收乙醇， 浓缩至50 60°C相对密度1. 05 1. 15，得蒺藜皂苷浓缩液，干燥，得蒺藜皂苷。
全文摘要
本发明公开了一种蒺藜提取物的检测方法，该方法为色谱条件室温，相对湿度25-40％；以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以60～90％乙腈溶液为流动相A，以水为流动相B，进行梯度洗脱，流速0.4～0.6ml/min，柱温25～45℃；蒸发光散射检测器漂移管温度105～120℃，气体流速1～3L/min。本方法具有良好的精密性、重现性、稳定性。
文档编号G01N30/36GK101953868SQ20101028347
公开日2011年1月26日 申请日期2010年9月15日 优先权日2010年9月15日
发明者刘巍, 孙东成, 孙申国, 朱天全, 沈丽娟, 王国栋, 程志国, 邹兆鹏, 钱本余 申请人:吉林敖东洮南药业股份有限公司