专利名称：一种牛黄上清组合物及其制备方法
技术领域：
本发明涉及中药领域，特别涉及一种牛黄上清组合物及其制备方法。
背景技术：
2010年版《中华人民共和国药典》临床用药须知中药成方制剂卷收载的清热泻火药共有5个品系，牛黄上清胶囊(片、丸)属其中ー个品系。牛黄上清胶囊(片、丸)具有清热泻火、散风止痛的功效，用于热毒内盛、风火上攻所致的头痛眩晕、目赤耳鸣、咽喉肿痛、ロ舌生疮、牙龈肿痛、大便燥结。其中牛黄上清丸采用全生药粉入药，含有大量的药材纤維，有效成分含量低，不符合现代中药发展的趋势；牛黄上清胶囊和牛黄上清片均对处方中的大部分药材进行了提取处理，大大提高了有效成分含量，但两者制法相差较大。其中，牛黄上清片制法如下将牛黄、冰片研细；黄连、大黄粉碎成细粉，过筛；连翘荆芥穗、薄荷提取 挥发油后，药渣加水煎一次，滤过；黄芪、梔子、桔梗、赤芍、当归地黄、石膏、甘草加水煎煮ニ次，毎次ニ小时，滤过，合并滤液；黄柏、川芎、白芷照流浸膏剂与浸膏剂项下有渗漉法(附录17页)以70%こ醇为溶剂进行渗漉，收集漉液，回收こ醇。菊花热浸二次，毎次人2小时，滤过。合并以上各药液，减压浓缩成稠膏状加入黄连、大黄细粉及辅料适量，混匀，制成颗粒，60°C以下干燥，再兑入牛黄、冰片细粉。喷以连翘等挥发油，混匀，压制成1000片，包糖衣，即得。牛黄上清胶囊制法如下大黄、冰片、人工牛黄分别粉碎成细粉，过筛，备用；薄荷、荆芥穗、白芷、川芎、当归、菊花、连翘蒸馏提取挥发油，蒸馏后的水溶液另器收集备用；药渣与梔子等九味加水煎煮二次，毎次I. 5小时，合并煎液，滤过，滤液与上述蒸馏后的水溶液合并，浓缩至相对密度为1.321.36 (55°C)的稠膏，加入大黄粉，在80°C以下干燥，粉碎成细粉，过筛，用配研法加入人工牛黄、冰片，挥发油用こ醇溶解喷入，混匀，过筛，装入胶囊，制成1000粒，即得。发明人针对上述情况，对部分药材对药效的影响进行了研究，通过研究发现，黄连、黄柏、连翅、黄岑等四味味药材对药效影响较大。
发明内容
本发明的目的在于提供一种牛黄上清组合物及其制备方法，本发明提供的牛黄上清组合物有效成分含量高、疗效好，制备方法科学合理。本发明提供的牛黄上清组合物，包括如下重量配比的原料药人工牛黄2. 9份、薄荷44. I份、菊花58. 8份、荆芥穗23. 5份、白芷23. 5份、川芎23. 5份、梔子73. 5份、黄连23. 5份、黄柏14. 7份、黄芩73. 5份、大黄117. 7份、连翘73. 5份、赤芍23. 5份、当归73. 5份、地黄94. I份、桔梗23. 5份、甘草14. 7份、石膏117. 7份、冰片14. 7份，其中人工牛黄、大黄、冰片经粉碎后入药，其余药材经提取后入药，其特征在干该组合物质量满足如下质量要求
Cl)组合物中小檗碱含量以盐酸小檗碱计不低于O. 406% ；
(2)组合物中连翘苷含量不低于O.043% ；
(3)组合物中黄芩苷含量不低于I.54%。
本发明提供的牛黄上清组合物中的小檗碱含量采用高效液相色谱法測定，測定方法如下
色谱条件及系统适应性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以体积比为20:72:0. I的こ腈ー 33mmol/L磷酸ニ氢钾溶液一三こ胺的混合溶液用磷酸调pH值为4. 50为流动相，检测波长为345nm ;理论塔板数按盐酸小檗碱峰计算，应不低于2000 ；
对照品溶液制备取盐酸小檗碱对照品适量，精密称定，加甲醇制成每Iml含40μ g的溶液，即得； 供试品溶液的制备取I. Og组合物细粉，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇25ml密塞，称定重量，超声处理30分钟，放冷，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，精密量取续滤液2ml，用5g碱性氧化铝吸附，装柱，并用50ml甲醇洗脱，收集洗脱液，水浴蒸干，再用甲醇溶解转移至IOml容量瓶，定容，用微孔滤膜滤过，取续滤液，即得；
測定方法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10 μ 1，注入液相色谱仪，測定，即得。本发明提供的牛黄上清组合物中的连翘苷含量采用高效液相色谱法測定，測定方法如下
色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以体积比为25:75的こ臆-水混合溶液为流动相，检测波长为230nm ;理论板数按连翘苷峰计算，应不低于3000 ；
对照品溶液的制备取连翘苷对照品适量，精密称定，加甲醇制成每Iml含40μ g的溶液，即得；
供试品溶液的制备取组合物细粉2. 5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇25ml，密塞，称定重量，超声处理30分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，精密量取续滤液5ml，蒸干，残渣加水20ml使溶解，用三氯甲烷振摇提取5次，毎次20ml，合并三氯甲烷液，回收至干，残渣用50%甲醇溶解，转移至5ml量瓶中，加50%甲醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得；
測定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10 μ 1，注入液相色谱仪，測定，即得。本发明提供的牛黄上清组合物中的黄芩苷含量采用高效液相色谱法測定，測定方法如下
色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以体积比为45:55:0. 2的甲醇-水-磷酸混合溶液为流动相，检测波长为276nm ;理论板数按黄芩苷峰计算，应不低于5000 ；
对照品溶液的制备取黄芩苷对照品适量，精密称定，加70%こ醇制成每Iml含50μ g的溶液，即得；
供试品溶液的制备取组合物细粉O. 2g，精密称定，置IOOml具塞锥形瓶中，精密加入70%こ醇50ml，称定重量，温浸I小时后加热回流30分钟，放冷，再称定重量，用70%こ醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得；
測定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10 μ 1，注入液相色谱仪，測定，即得。
本发明提供的牛黄上清组合物，其制备方法包括如下步骤
(O大黄、冰片、人工牛黄分别粉碎成细粉，过筛，备用；
(2)薄荷、荆芥穗、白芷、川芎、当归、菊花蒸馏提取挥发油，蒸馏后的水溶液另器收集备
用；
(3)将步骤(2)药渣与梔子、赤芍、地黄、桔梗、甘草、石膏一起加水提取二次，合并提取液，滤过，滤液备用；
(4)黄连、黄柏加水提取二次，合并提取液，滤过，滤液与步骤(3)滤液合并，浓 缩得稠膏I，备用；
(5)连翘、黄芩加309Γ85%こ醇提取二次，合并提取液，滤过，滤液浓缩得稠膏II，备用；
(6)将稠膏I和稠膏II合并，加入大黄粉，在80°C以下干燥，粉碎成细粉，过筛，用配研法加入人工牛黄、冰片，挥发油用こ醇溶解喷入，混匀，即得。本发明提供的牛黄上清组合物，可以压制成片剂或灌装成胶囊。本发明创新之处在于通过缺味药材的牛黄上清组合物与全处方量组合物进行抗炎、镇痛作用的比较，发现黄连、黄柏、黄芩、连翘等四味药材对组合物的药效有重要贡献。本发明还通过对组合物中含上述四味药材主要药效成分小檗碱、黄芩苷、连翘苷量的多少与组合物药效强弱关系的研究，将上述成分作为鉴别组合物质量的依据。下面将通过实验对本发明作进ー步说明。实验I :缺味牛黄上清组合物药效影响试验
牛黄上清组合物处方中共有19味药材，2010年版《中华人民共和国药典》一部收载的牛黄上清片只对黄芩苷和梔子苷的含量进行了控制，牛黄上清胶囊也只对大黄素和龙脑的含量进行了控制。由于牛黄上清片和牛黄上清胶囊中的人工牛黄、大黄和冰片都采用粉碎入药，未经提取处理，因此本实验未对其进行研究。黄芩提取方法研究的文献报道较多，采用的提取溶媒主要为水和不同浓度的こ醇溶液，考虑到牛黄上清片标准中黄芩苷含量限度偏低，因此本实验对黄芩及清热泻火药中常用药材黄连、黄柏、连翘等四味药材进行缺味药材试验研究,具体试验内容如下
(1)试验药物牛黄上清组合物全组方样品(对照组)和缺味样品(样品组)
牛黄上清组合物全组方样品制备方法
人工牛黄2.9g 薄荷44. Ig 菊花58.8g 荆芥穗23. 5g 白芷23. 5g 川芎23. 5g梔子 73. 5g 黄连 23. 5g 黄柏 14. 7g 黄芩 73. 5g 大黄 117. 7g
连翘73. 5g赤芍23. 5g 当归 73. 5g 地黄94. Ig桔梗23. 5g 甘草
14. 7g 石膏 117. 7g冰片 14. 7g
以上十九味，以上十九味，除人工牛黄、冰片外，其余薄荷等十七味粉碎成细粉；将冰片研细，与人工牛黄及上述粉末配研，过筛，混匀，即得.
牛黄上清组合物缺味样品制备方法除采用等重量份淀粉代替缺味药材外，其余内容同全组方样品制备方法.
样品组I (缺黄连、黄柏)
样品组2 (缺黄芩)
样品组3 (缺连翘)
(2)对巴豆油所致鼠耳肿胀作用影响取BABL/C雄性小白鼠，体重18 22g，随机分为5组，每组10只。设空白对照组、对照组(14. O g · kg—1)、样品组(14. O g · kg—1);空白对照组给予等容量生理盐水,体积为40ml /kg。致炎前I小时给药，致炎后2小时再给一次药。用2%巴豆油致炎.致炎后4小时处死动物，沿耳廓基线剪下两耳，用9mm直径打孔器分别在同一部位打下圆耳片，用分析天平称重，计算各组鼠耳肿胀度和各药物组鼠耳的肿胀抑制率，比较组间差异，结果见表I.
表I各药物组对巴豆油致小鼠耳肿胀的影响(X土S) _
权利要求
1.一种牛黄上清组合物，包括如下重量配比的原料药人工牛黄2. 9份、薄荷44. I份、菊花58. 8份、荆芥穗23. 5份、白芷23. 5份、川芎23. 5份、梔子73. 5份、黄连23. 5份、黄柏14. 7份、黄芩73. 5份、大黄117. 7份、连翘73. 5份、赤芍23. 5份、当归73. 5份、地黄94. I份、桔梗23. 5份、甘草14. 7份、石膏117. 7份、冰片14. 7份，其中人工牛黄、大黄、冰片经粉碎后入药，其余药材经提取后入药，其特征在于该组合物质量满足如下质量要求 Cl)组合物中小檗碱含量以盐酸小檗碱计不低于O. 406% ； (2)组合物中连翘苷含量不低于O.043% ； (3)组合物中黄芩苷含量不低于I.54%。
2.如权利要求I所述的牛黄上清组合物，其特征在干 (O组合物中小檗碱含量采用高效液相色谱法測定，測定方法如下 色谱条件及系统适应性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以体积比为.20:72:0. I的こ腈ー 33mmol/L磷酸ニ氢钾溶液一三こ胺的混合溶液用磷酸调pH值为4. 50为流动相，检测波长为345nm ;理论塔板数按盐酸小檗碱峰计算，应不低于2000 ； 对照品溶液制备取盐酸小檗碱对照品适量，精密称定，加甲醇制成每Iml含40μ g的溶液，即得； 供试品溶液的制备取I. Og组合物细粉，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇25ml密塞，称定重量，超声处理30分钟，放冷，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，精密量取续滤液2ml，用5g碱性氧化铝吸附，装柱，并用50ml甲醇洗脱，收集洗脱液，水浴蒸干，再用甲醇溶解转移至IOml容量瓶，定容，用微孔滤膜滤过，取续滤液，即得； 測定方法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10 μ 1，注入液相色谱仪，測定，即得； (2)组合物中连翘苷含量采用高效液相色谱法測定，測定方法如下 色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以体积比为25:75的こ臆-水混合溶液为流动相，检测波长为230nm ;理论板数按连翘苷峰计算，应不低于.3000 ； 对照品溶液的制备取连翘苷对照品适量，精密称定，加甲醇制成每Iml含40μ g的溶液，即得； 供试品溶液的制备取组合物细粉2. 5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇25ml，密塞，称定重量，超声处理30分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，精密量取续滤液5ml，蒸干，残渣加水20ml使溶解，用三氯甲烷振摇提取5次，毎次20ml，合并三氯甲烷液，回收至干，残渣用50%甲醇溶解，转移至5ml量瓶中，加50%甲醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得； 測定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10 μ 1，注入液相色谱仪，測定，即得; (3)组合物中黄芩苷含量采用高效液相色谱法測定，測定方法如下 色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以体积比为45:55:0. 2的甲醇-水-磷酸混合溶液为流动相，检测波长为276nm ;理论板数按黄芩苷峰计算，应不低于5000 ； 对照品溶液的制备取黄芩苷对照品适量，精密称定，加70%こ醇制成每Iml含50μ g的溶液，即得； 供试品溶液的制备取组合物细粉O. 2g，精密称定，置IOOml具塞锥形瓶中，精密加入70%こ醇50ml，称定重量，温浸I小时后加热回流30分钟，放冷，再称定重量，用70%こ醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得； 測定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10 μ 1，注入液相色谱仪，測定，即得。
3.制备如权利要求I所述的牛黄上清组合物的方法如下 (O大黄、冰片、人工牛黄分别粉碎成细粉，过筛，备用； (2)薄荷、荆芥穗、白芷、川芎、当归、菊花蒸馏提取挥发油，蒸馏后的水溶液另器收集备用； (3)将步骤(2)药渣与梔子、赤芍、地黄、桔梗、甘草、石膏一起加水提取二次，合并提取液，滤过，滤液备用； (4)黄连、黄柏加水提取二次，合并提取液，滤过，滤液与步骤(3)滤液合并，浓缩得稠膏I，备用； (5)连翘、黄芩加309Γ85%こ醇提取二次，合并提取液，滤过，滤液浓缩得稠膏II，备用； (6)将稠膏I和稠膏II合井，加入大黄粉，在80°C以下干燥，粉碎成细粉，过筛，用配研法加入人工牛黄、冰片，挥发油用こ醇溶解喷入，混匀，即得。
4.如权利要求I所述的牛黄上清组合物，可以制成片剂或胶囊。
全文摘要
本发明公开了一种牛黄上清组合物及其制备方法。所述牛黄上清组合物，包括人工牛黄、薄荷、菊花、荆芥穗、白芷、川芎、栀子、黄连、黄柏、黄芩、大黄、连翘、赤芍、当归、地黄、桔梗、甘草、石膏、冰片，其中人工牛黄、大黄、冰片经粉碎后入药，其余药材经提取后入药，其特征在于该组合物质量满足如下质量要求(1)以盐酸小檗碱计，小檗碱含量不低于0.406%；(2)连翘苷含量不低于0.043%；(3)黄芩苷含量不低于1.54%。本发明提供的牛黄上清组合物药效明显好于不满足要求的组合物。
文档编号G01N30/02GK102688336SQ201210069218
公开日2012年9月26日 申请日期2012年3月16日 优先权日2012年3月16日
发明者严建良, 刘永祥, 吴孔松, 吴安明 申请人:江西天施康中药股份有限公司