啤酒和麦汁中硫醇与非硫醇含硫类物质同时检测的方法
【专利摘要】本发明公开一种啤酒和麦汁中硫醇与非硫醇含硫类物质同时检测的方法，采用顶空衍生固相微萃取-GCMS/MS的方法进行检测，采用了PFBBr作为衍生试剂，并在萃取过程中加入NaCl、EDTA，将吸附了含硫物质的萃取头通过GC-MS/M解析、分离、检测。本发明改变纤维萃取头吸附特性，使不能有效萃取MBT等微量硫醇的纤维萃取头实现了对啤酒及麦汁挥发物中的挥发性非硫醇含硫化合物及硫醇衍生物的同时衍生和萃取，以达到同时检测非硫醇含硫化合物及硫醇物质的目的。本发明可在同一过程依次完成衍生剂吸附、衍生、萃取、进样、分离和检测五个步骤，实现了自动化连续操作，提高了检测效率和准确性，实现了10种啤酒及麦汁中的非硫醇含硫化合物及硫醇物质的准确高效定量分析。
【专利说明】啤酒和麦汁中硫醇与非硫醇含硫类物质同时检测的方法
【技术领域】
[0001]本发明创造涉及一种啤酒的分析检测方法，具体涉及一种啤酒和麦汁中硫醇与非硫醇含硫类物质同时检测的方法。
【背景技术】
[0002]啤酒中的含硫化合物对啤酒风味是一把双刃剑。低于阈值时它们是构成啤酒风味不可少的物质，高于阈值时则会对啤酒风味带来不利的影响。随着消费者口味的改变，淡爽型啤酒的日益盛行，人们对啤酒中的不良风味物质的感觉越来越灵敏。因此了解啤酒中的含硫化合物，采取有效的措施减少啤酒中的含硫化合物，是酿造风味优良的啤酒的关键之一。啤酒中的含硫挥发性化合物有几十种，对啤酒风味影响较大的也有十几种，而且不排除它们之间能发生的相互转化。
[0003]含硫化合物因其低含量、且挥发性等理化特性相差很大不宜检测，需要用合适的富集装置和高敏感、高选择的检测器才能对这些物质实现有效检测。虽然已有像SPME、吹扫捕集前处理技术和GCMS、PFPD等高灵敏度的检测器应用到啤酒中挥发性含硫化合物的检测，但至今还没有一个完备的方法同时检测啤酒中的多种主要含硫化合物。
[0004]挥发性硫类物质对啤酒的风味影响很大，会赋予类似甜玉米、洋葱、硫臭以及白菜等味道。硫类物质在啤酒中含量较低，一般为0.l-20ppb。BRI (BrewingReasechInternationl国际酿造研究中心)对将硫味的描述分为总硫味、DMS味、洋葱味、硫化物味、烂白菜味、熟的蔬菜味，并认为硫代乙酸甲酯(S-MAC)、硫代乙酸乙酯(S-EAC),3-甲硫基丙酸乙酯(3-MePrAc)、3-甲硫基丙醇(3-MeProl) 二甲基二硫(DMDS)、二甲基三硫(DMTS)为啤酒中主要非硫醇含硫风味物质，而主要硫醇如甲硫醇(MT)、乙硫醇(ET)和3-甲基-2- 丁烯-1-硫醇(MBT)、苄硫醇(BMT)等对啤酒风味影响也很大。我们对目前国外主要关注的硫类化合物于整理，如表I。由于硫醇物质具有风味活性高、阈值低的特点，虽在啤酒中的含量极低，控制不当也会对啤酒风味造成极大的影响，例如甲硫醇、3-甲基-2-丁烯-1-硫醇、苄硫醇。甲硫醇是硫醇的代表性物质，据报道其风味阈值仅为
0.15 μ g/L，通常情况下其含量不高，一旦控制不当将会导致恶心的腐败味，对啤酒风味造成严重的不良影响。同时，甲硫醇是许多硫化合物的前驱体，因而其含量多少对啤酒品质的影响很大。同时，啤酒的风味物质多达千种，背景的复杂性使得微量硫醇的检测更为困难，一直是酿造研究者未顺利攻克的难题。3-甲基-2-丁烯-1-硫醇(MBT)是通常所说的啤酒被太阳光暴晒后产生的“臭fi自味或日光臭”的物质基础，其风味阈值为2ng/L, —般认为其含量的多少与异α-酸(来自酒花)的侧链降解有关。苄硫醇的
[0005]风味阈值为1.7ng/L，通常是使用质量不好的酒花造成的。
[0006]表I啤酒中主要含硫化合物阈值及其风味特征
[0007]
【权利要求】
1.一种啤酒和麦汁中硫醇与非硫醇含硫类物质同时检测的方法，其特征在于，所述方法利用五氟苯甲基溴(PFBBr )改性PDMS/DVB纤维萃取头，使其能够同时吸附啤酒及麦汁中的挥发性硫醇的PFBBr衍生物及非硫醇含硫化合物，然后进行GC-MS/MS进行检测，具体步骤如下: (1)将检测样品排气，取5mL放入20mL顶空瓶中； (2)在顶空瓶中再加入2gNaCl ； (3)再向顶空瓶中加入0.0l?0.05g铜离子螯合剂； (4)将65μ m PDMS/DVB纤维萃取头插入装有五氟苯甲基溴(PFBBr)衍生液的顶空瓶内10分钟，使衍生液吸附在纤维萃取头上；将吸附了 PFBBr的纤维萃取头插入装有待检测样品的顶空瓶内进行衍生萃取，萃取温度为55°C,萃取时间为10分钟； (5)萃取完毕，将纤维萃取头插入气相色谱(GC)进样口，解吸2分钟进入GC-MS/MS检测。
2.根据权利要求1所述的啤酒和麦汁中硫醇与非硫醇含硫类物质同时检测的方法，其特征在于所述步骤(3)向检测样品中加入0.025g EDTA，使其在检测样品中的浓度达到5000mg/L。
3.根据权利要求1或2任一项所述的啤酒和麦汁中硫醇与非硫醇含硫类物质同时检测的方法，其特征在于所述步骤(5)中的GC-MS/MS的检测条件如下: (1)色谱条件为:气相色谱柱为DB-5MS，0.25 mm内径，15 m长，膜厚0.25 μ m ;载气为氦气，流速1.5mL/min，进样口温度250°C，无分流进样；程序升温:60°C保持2分钟，10°C /分钟升温至130°C，5°C /分钟升温至180°C，3(TC /分钟升温至300°C，保持2分钟； (2)质谱条件为:电子轰击(EI)离子源，电子能量70eV;气相色谱-二级质谱联用(GC-MS/MS)接口温度:250°C ;离子源温度:230°C ;四极杆温度:180°C ;全扫描范围:40?400amu ;采用标准物质定性，采用子离子模式定量。
4.根据权利要求3所述的啤酒和麦汁中硫醇与非硫醇含硫类物质同时检测的方法，其特征在于所述非硫醇含硫化合物和硫醇物质为硫代乙酸甲酯、硫代乙酸乙酯、3-甲硫基丙酸乙酯、3-甲硫基丙醇、二甲基二硫、二甲基三硫、甲硫醇、乙硫醇、3-甲基-2- 丁烯-1-硫醇、苄硫醇的一种或几种的组合。
【文档编号】G01N30/88GK103512995SQ201310494646
【公开日】2014年1月15日 申请日期:2013年10月18日 优先权日:2013年10月18日
【发明者】尹花, 董建军, 陈华磊, 郝俊光, 闫鹏, 田玉红, 李华, 李梅, 杨朝霞, 张宇昕 申请人:青岛啤酒股份有限公司