本发明涉及一种食用粳糯米和食用籼糯米的质量分级方法，既可以用于对食用粳糯米进行质量分级，又可以用于对食用籼糯米进行质量分级。
背景技术：
：水稻是我国最主要的粮食作物，其总产量占粮食总产量的40％，全国有60％以上的人口以大米为主食，大米的产品质量与我国人民的身体健康息息相关。随着社会经济的发展和人民生活水平的不断提高，人们对大米产品质量的要求也越来越高，安全、好吃、好看是现代人们对大米产品质量的新要求。因此，建立一种完善的稻米质量分级(评价)方法来指导我国稻米产品的生产、消费已十分必要。虽然现在也有检测/预测大米安全质量的方法，如公开日为2014年03月19日，公开号为CN103645201A的中国专利中，公开了一种基于X射线荧光快速检测大米中重金属镉的方法，又如公开日为2015年06月10日，公开号为CN104686267A的中国专利中，公开了一种早期预测稻米中重金属镉含量的方法，但是现在还没有一种食用粳糯米和食用籼糯米的质量分级方法。技术实现要素：本发明的目的在于克服现有技术中存在的上述不足，而提供一种检测速度快、准确度高，试剂省，对环境友好、还有稳定性和重复性好，生产者可按质量等级定价，消费者可选择购买，能真正体现优质优价的食用粳糯米和食用籼糯米的质量分级方法。本发明解决上述问题所采用的技术方案是：该食用粳糯米和食用籼糯米的质量分级方法的特点在于：所述方法的步骤如下：(1)取大米样品，检测大米样品的阴糯率；(2)取大米样品，检测大米样品中的农药残留量；(3)取大米样品，检测大米样品中的重金属镉含量；(4)根据检测得到的阴糯率、农药残留量和重金属镉含量，对大米进行质量分级。作为优选，本发明所述方法还包括如下步骤：取大米样品，检测大米样品的食用品质；然后根据检测得到的阴糯率、食用品质、农药残留量和重金属镉含量，对大米进行质量分级。作为优选，本发明步骤(1)中，阴糯率的测定步骤如下：将糯稻谷脱壳成糙米，再碾磨成精度为国家标准三级的精米，用碎米分离筛分离碎米，分离掉碎米后的试样用手工进一步分拣留下长度达到试样完整米粒平均长度四分之三以上的米粒即整精米备用；打开外观品质分析仪，预热5分钟，从整精米样品中随机数取100粒，置于观测仪上，分开有半透明部分的糯米籽粒和无透明的糯米籽粒，数出半透明部分的糯米粒数，计算阴糯率，重复测定一次；阴糯率(％)＝阴糯米粒数/总粒数×100％。作为优选，本发明检测大米样品的食用品质的步骤如下：小量样品米饭的制备如下：称样：称取每份10g试样于沥水筛内；洗米：将沥水筛置于盆中，快速加入150mL自来水，每次顺时针搅拌10圈，逆时针搅拌10圈，快速换水重复上述操作一次；再用150mL蒸溜水淋洗1次，沥尽余水，倒人相应编号的蒸饭皿内；洗米时间控制在3min-5min；浸泡：籼糯米加蒸溜水量为样品量的1.6倍，粳糯米加蒸溜水量为样品量的1.3倍；浸泡水温25℃左右，浸泡时间30min；蒸煮：蒸锅内加入适量的水，加热至沸腾，取下锅盖，再将盛放样品的蒸饭皿加盖放置蒸屉上，盖上锅盖，继续加热并开始计时，蒸煮40min，停止加热，闷饭20min，趁热品评；大量样品米饭的制备如下：称样：称取每份500g；洗米：将称取的500g试样放入沥水筛内，将沥水筛置于盆中，快速加入1500ml自来水，每次顺时针搅拌10圈，逆时针搅拌10圈，快速换水重复上述操作一次；再用1500mL蒸溜水淋洗1次，沥尽余水，倒人相应编号的直热式电饭锅内；洗米时间控制在3-5min；蒸煮：电饭锅接通电源开始蒸煮米饭，在蒸煮过程中不得打开锅盖；电饭锅的开关跳开后，再闷制20min；搅拌米饭：用饭勺搅拌煮好的米饭，首先从锅的周边松动，使米饭与锅壁分离，再按横竖两个方向各平行滑动2次，接着用筷子上下搅拌4次，使多余的水分蒸发之后盖上锅盖，再闷10min；将50g试样米饭松松地盛入小碗内，每人1份，然后倒扣在白色瓷餐盘上不同的位置，呈菌锥形，趁热品评。作为优选，本发明步骤(2)中，采用气相色谱法测定大米样品中有机磷、有机氯和菊酯类农药残留量，农药残留量的检测步骤如下：大米样品中有机磷、有机氯和菊酯类农药经乙腈提取，提取液经硫酸镁盐析，经PSA分散固相萃取净化后，进气相色谱仪后用FPD检测器检测，根据保留时间进行定性，面积外标法定量；或者，大米样品中有机氯和菊酯类农药经乙腈提取，提取液经硫酸镁盐析，经弗罗里矽柱固相萃取净化后，进气相色谱仪后用ECD检测器检测，根据保留时间进行定性，面积外标法定量。作为优选，本发明采用气相色谱法测定大米样品中有机磷、有机氯和菊酯类农药残留量的步骤如下：①提取食用大米干样，称取5.0g经粉碎的大米样品，置于250mL塑料离心管中，加入25.0mL蒸馏水，静置30min，加入25.0ml乙腈，在高速分散机中匀浆2min，加入10g无水硫酸镁和1g氯化钠，在低速分散机中匀浆1分钟，离心力为2500g，离心3min，使乙腈和水相分层；②净化有机磷净化：移取4.0ml上层乙腈溶液于15ml刻度离心管中净化，待测；有机氯和菊酯净化：移取10ml上层乙腈溶液于15ml刻度离心管中，离心管中事先加入0.5g氯化钠，涡旋混合1min，静置分层，准确吸取5ml乙腈溶液于平底烧瓶，旋转蒸发至近干，用2mL的丙酮+正已烷的混合液溶解得到待净化溶液；将弗罗里矽柱依次用5.0mL丙酮+正已烷的混合液、5.0mL正已烷预淋洗，条件化，当溶剂液面到达柱吸附层表面时，立即倒入上述待净化溶液，用15mL刻度离心管接收洗脱液，用5mL丙酮+正已烷的混合液冲洗烧杯后淋洗弗罗里矽柱，并重复一次；将盛有淋洗液的离心管置于氮吹仪上，在水浴温度50℃条件下，氮吹蒸发至小于5mL，用正已烷定容至5.0mL，在旋涡混合器上混匀，待测；对于采用自动固相萃取仪进行净化时，取上述盐析好的上清液8mL，在旋转蒸发至近干后，加入丙酮+正已烷的混合液溶解并定容至8mL，仪器上样2.5mL，用4mL丙酮+正已烷的混合液分两次淋洗弗罗里矽柱，将盛有淋洗液的离心管置于氮吹仪上，在水浴温度50℃条件下，氮吹蒸发至小于2mL，用正已烷定容至2.5mL，在旋涡混合器上混匀，待测；丙酮+正已烷的混合液中，丙酮和正已烷的体积比为1:9；③有机磷测定色谱条件如下：色谱柱：DB-1701石英毛细管柱，30m×0.25mm×0.25um；柱温：初温90℃，立即以25℃/min升至270℃，保持3min；进样口：温度250℃，压力25psi；进样量：1ul；进样方式：脉冲不分流，脉冲压力50psi，保持1min，吹扫时间0.9min；检测器温度：240℃；气体：载气N2，恒压25psi；H2流速120ml/min；空气流速88ml/min；样品测定按③中的色谱条件对标准工作液和试样溶液等体积进样，根据保留时间定性，面积外标法定量；④有机氯和菊酯测定色谱条件如下：色谱柱：DB-17或DB-1石英毛细管柱，30m×0.25mm×0.25um；柱温：初温90℃，立即以25℃/min升至150℃，再以10℃/min升至270℃，保持8min；进样口：温度250℃，压力30psi；进样量：1ul；进样方式：分流，分流比为5:1；检测器温度：300℃，柱流量+尾吹流量＝30mL/min；气体：载气N2，恒压30psi；⑤样品测定按④中的色谱条件对标准工作液和试样溶液等体积进样，根据保留时间定性，面积外标法定量；⑥结果计算大米样品中被测农药含量以质量分数W计，数值以毫克每千克表示，按下列公式计算：W=A1×C×V2×VA×V1×V4V3×m]]>V1－标样进样体积，μl；V2－样品进样体积，μl；A－标样峰面积；A1－样品峰面积；m－样品质量(g)；V3－溶剂加入体积(ml)；V4－分取溶剂体积(ml)；V－定容体积(ml)。作为优选，本发明步骤(2)中，采用液相色谱/串接质谱法测定大米样品中有机磷、有机氮、氨基甲酸酯农药残留量的步骤如下：大米样品中农药经乙腈提取，提取液经硫酸镁盐析，经PSA分散固相萃取净化后，用液相色谱串接质谱仪检测，根据保留时间和定性离子及定量离子和定性离子比例进行定性，定量离子面积外标法进行定量。作为优选，本发明采用液相色谱/串接质谱法测定大米样品中有机磷、有机氮、氨基甲酸酯农药残留量的步骤如下：①提取食用大米干样，称取5.0g经粉碎的大米样品，置于250mL塑料离心管中，加入25.0mL蒸馏水，静置30min；加入25.0ml乙腈，在高速分散机中匀浆2min，加入10g无水硫酸镁和1g氯化钠，在低速分散机中匀浆1分钟，离心力为2500g，离心3min，使乙腈和水相分层；②净化移取4.0ml上层乙腈溶液于15ml刻度离心管中，净化，待测；③仪器条件色谱条件如下：色谱柱：ZORBAXSBC18(100mm×2.1mm，1.8μm)；柱温：55℃；流动相A：含0.1％甲酸的5mmol/L乙酸铵水溶液；流动相B：乙腈；流速：0.3mL/min；质谱条件如下：离子源：ESI﹢；毛细管电压：4kV；氮气流速：10L/min；质谱采集速率：500ms/cycle；雾化器压：35psi；干燥气温度：350℃；④样品测定按③中的仪器条件对标准工作液和试样溶液等体积进样，根据保留时间和定性离子及定量离子和定性离子比例进行定性，定量离子面积外标法进行定量；⑤结果计算样品中被测农药含量以质量分数W计，数值以毫克每千克表示，按下列公式计算：W=A1×C×V2×VA×V1×V4V3×m]]>V1－标样进样体积，μl；V2－样品进样体积，μl；A－标样峰面积；A1－样品峰面积；m－样品质量(g)；V3－溶剂加入体积(ml)；V4－分取溶剂体积(ml)；V－定容体积(ml)。作为优选，本发明步骤(3)中，采用石墨炉原子吸收法检测食用大米中的重金属镉含量的步骤如下：①样品制备去除大米样品中的杂物，混匀后用四分法缩分至50g，经研磨至少98％通过孔径0.180mm的筛，混匀后备用；②样品消解称取大米样品0.5g置于消化罐内，加入5mL浓硝酸，放置15min，盖好密封盖，放进微波消解系统中，转动转盘1min，进行消解；消解完全后待屏幕指示温度低于50℃时，打开微波消解仪的门，小心缓慢松开防爆膜盖以释放压力，取下温度传感器，打开密封盖，将消解液转移并定容到25mL容量瓶中，混匀待测；同时做试剂空白；③标准曲线绘制利用石墨炉自动进样器的自动稀释功能，让其自动将镉元素的顶标溶液配制标准曲线，并加入相应的基体改进剂；设定好仪器的条件；输入相关参数，并设计标准曲线的浓度梯度；绘制标准曲线；④计算X＝(c-c0)×V×1000/m×1000×1000式中：X―样品中各元素含量，mg/kg；c—样品消化液测定浓度，ng/mL；c0—样品空白消化液浓度，ng/mL；V—样品消化液总体积，mL；m―样品质量，g。作为优选，本发明根据检测得到的阴糯率、食用品质、农药残留量和重金属镉含量，对大米进行质量分级，具体如下：本发明与现有技术相比，具有以下优点和效果：1、提出稻米质量安全等级概念，为以后制修订农业行业标准提供科学依据；2、有利于指导我国稻米产品的生产、消费。生产者可按质量等级定价，消费者可进行选择购买，能真正体现优质优价。3、优质环境才能生产优质大米，有了质量分级，优质环境价值得以体现，有利于保护生态环境和农业的可持续发展。4、农药残留量和重金属镉含量的检测方法具有速度快、准确度高，试剂省，对环境友好，还有稳定性和重复性好的特点。附图说明图1是本发明实施例中镉标准溶液及标准曲线的配制流程示意图。具体实施方式下面结合附图并通过实施例对本发明作进一步的详细说明，以下实施例是对本发明的解释而本发明并不局限于以下实施例。实施例。本实施例围绕安全、好吃、好看的现实市场需要，选择农药残留、重金属镉、食味感观、阴糯率作为分级参数，其分级方法如下表：一、分级参数说明稻米质量是一个综合性的概念，指标上大致分理化和安全两类：理化指标分碾磨品质、外观品质、蒸煮食用品质和营养品质。碾磨品质主要包括出糙率(又称糙米率)、精米率和整精米率，主要反应稻米的加工特性；外观品质主要包括形状、大小、阴糯率(糯米)，主要反应稻米的外观特性；蒸煮食味品质包括稻米的糊化温度、胶稠度、直链淀粉含量、食味品质，主要反应稻米的蒸煮特性及食味感观；营养品质包括蛋白质、脂肪、维生素、矿物质等，反应稻米的营养成份。在上述理化品质指标中，最能代表好看的糯米指标是阴糯率。阴糯率：为糯米外观品质的最重要指标之一，以阴糯米粒占整个米样粒数的百分率计。阴糯米是糯米中胚乳半透明色泽发阴的米粒，是糯稻谷后熟不完全所导致，不仅影响糯米的外观，对食用品质也有很大影响。最能代表好吃的指标是食用品质。食用品质：大米食用品质是大米在熟制过程中和食用时所表现出的色泽、气味、滋味、米饭粘性及软硬适口程度等特性的综合反映。是稻米质量最重要的指标。它与稻米的糊化温度、胶稠度、直链淀粉含量等理化指标相关，也是稻米品种、种植水平、加工工艺、新陈度等质量影响因素的综合反映。安全指标主要是农药残留和重金属：农药残留：农药残留是一个很复杂的问题，水稻上常用农药达数百种，且每年施用的农药都在变化，新农药不断涌现，很难以某种具体的农药来作为分级参数，但根据全国稻米质量普查及风险评估监测结果看，我国稻米产品农残检出率高达20％以上，不少产品检出多种农药，农药检出的多少反映了生产过程中农药施用、安全间隔期控制等的实际情况，因此，把农药检出数作为分级指标简单可行。具体检测的农药参数可根据农业部发布的年度稻米质量安全风险评估检测参数而定，如2015年检测52种农药为：甲胺磷、甲基对硫磷、甲基异柳磷、久效磷、喹硫磷、乐果、磷胺、马拉硫磷、灭线磷、三唑磷、杀螟硫磷、水胺硫磷、亚胺硫磷、乙酰甲胺磷、百菌清、滴滴涕、六六六、三唑酮、噻嗪酮、三环唑、三唑醇、辛硫磷、乙草胺、异丙甲草胺、异丙威、丁草胺、甲基毒死蜱、稻丰散、敌敌畏、毒死蜱、对硫磷、二嗪磷、溴氰菊酯、氯氰菊酯、异稻瘟净、乙硫磷、苯醚甲环唑、吡虫啉、稻瘟灵、敌百虫、啶虫脒、阿维菌素、多菌灵、多效唑、氟虫腈、甲草胺、甲基硫菌灵、甲萘威、甲霜灵、克百威、咪鲜胺、噻虫嗪。重金属：水稻上通常检出的重金属有镉、铅、砷、汞、铬等，其中镉是检出率、超标率最高的，在对2003-2012年全国稻米质量普查样品的统计结果表明，镉的检出率达97％，稻米中镉含量的高低基本上反映所在稻区水土气环境的污染状况，因此，可以把镉含量的高低作为分级指标。分级指标中0.2mg/kg是国标稻米中镉的最高限量，是稻米镉含量达标要求；0.1mg/kg是普查样品镉的平均数，作为优质级的起点，样品达标率为65％；0.01mg/kg的样品达标率为16％；0.05mg/kg的样品达标率为48％。二、分级参数的检测(一)阴糯率的测定1、原理由于糯米籽粒上的半透明部分与不透明部分光学特性的差异，因而可以人眼估测，也可用外观品质分析仪完成上述检测。2、仪器及设备实验奢谷机、实验碾米机、分样器、电子天平(感量0.01g)、碎米分离筛、外观品质分析仪。3、样品制备将糯稻谷脱壳成糙米，再碾磨成精度为国家标准三级的精米，用碎米分离筛分离碎米，分离掉碎米后的试样用手工进一步分拣留下长度达到试样完整米粒平均长度四分之三及以上的米粒即整精米备用。4、阴糯率的测定打开外观品质分析仪，预热5分钟，从整精米样品中随机数取100粒，置于观测仪上，分开有半透明部分的糯米籽粒和无透明的糯米籽粒，数出半透明部分的糯米粒数，计算阴糯率，重复测定一次。阴糯率(％)＝阴糯米粒数/总粒数×100％5、结果表示计算结果以平行测定的算术平均值表示，保留1位小数。6、允许误差阴糯率平行测定相差≤1.5％。(二)稻米食用品质的测定感官评价法测定大米食用品质。大米样品在规定条件下蒸煮成米饭后，品评人员通过眼观、鼻闻、口尝等方法对所测米饭的色泽、气味、滋味、米饭粘性及软硬适口程度进行综合品尝评价的过程。1、原理稻谷经砻谷、碾白，制备成国家标准三等精度的大米作为试样。商品大米直接作为试样。取一定量的试样，在规定条件下蒸煮成米饭，品评人员感官鉴定米饭的气味、外观结构、适口性、滋味及冷饭质地等，评价结果以参加品评人员的综合评分的平均值表示。2、主要仪器和器具2.1蒸饭皿：60mL以上带盖铝(或不锈钢)盒。2.2直热式电饭锅：3L、500W。3、操作步骤3.1试样制备稻谷样制备成三等精度的大米。商品大米则直接分取试样。3.2样品的编号和登记随机编排试样的编号、制备米饭的盒号或锅号。3.3米饭的制备3.3.1小量样品米饭的制备3.3.1.1称样：称取每份10g试样于沥水筛内。试样份数按评价员每人l份准备。3.3.1.2洗米：将沥水筛置于盆中，快速加入150mL自来水，每次顺时针搅拌10圈，逆时针搅拌10圈，快速换水重复上述操作一次。再用150mL蒸溜水淋洗1次，沥尽余水，倒人相应编号的蒸饭皿内。洗米时间控制在3min-5min。3.3.1.3浸泡：籼糯米加蒸溜水量为样品量的1.6倍，粳糯米加蒸溜水量为样品量的1.3倍。加水量可依据米饭软硬适当增减。浸泡水温25℃左右，浸泡时间30min。3.3.1.4蒸煮：蒸锅内加入适量的水，用电炉或电磁炉加热至沸腾，取下锅盖，再将盛放样品的蒸饭皿加盖放置蒸屉上，盖上锅盖，继续加热并开始计时，蒸煮40min，停止加热，闷饭20min。3.3.2大量样品米饭的制备3.3.2.1称样：称取每份500g。3.3.2.2洗米：将称取的500g试样放入沥水筛内，将沥水筛置于盆中，快速加入1500ml自来水，每次顺时针搅拌10圈，逆时针搅拌10圈，快速换水重复上述操作一次。再用1500mL蒸溜水淋洗1次，沥尽余水，倒人相应编号的直热式电饭锅内。洗米时间控制在3-5min3.3.2.3蒸煮：电饭锅接通电源开始蒸煮米饭，在蒸煮过程中不得打开锅盖。电饭锅的开关跳开后，再闷制20min。3.3.2.4搅拌米饭：用饭勺搅拌煮好的米饭，首先从锅的周边松动，使米饭与锅壁分离，再按横竖两个方向各平行滑动2次，接着用筷子上下搅拌4次，使多余的水分蒸发之后盖上锅盖，再闷10min。3.3.2.5将约50g试样米饭松松地盛入小碗内，每人1份，然后倒扣在白色瓷餐盘上不同的位置，呈菌锥形，趁热品评。3.4样品品评3.4.1品评内容：品评米饭的气味、外观结构、适口性〈包括粘性、弹性、软硬度)、滋味和冷饭质地。3.4.2品评人员：由5名-10名优选评价员组成，每个评价员编上号码，分成若干组。评价员在品评前1h内不吸烟、不吃东西，但可以喝水；品评期间具有正常的生理状态，不使用化妆品或其他有明显气味的用品。3.4.3品评顺序及要求3.4.3.1品评前的准备：评价员在每次品评前用温开水漱口，漱去口中的残留物。3.4.3.2辨别米饭气昧：趁热将米饭置于鼻腔下方，适当用力地吸气，仔细辨别米饭的气味。3.4.3.3观察米饭外观：观察米饭表面的颜色、光泽和饭粒完整性。3.4.3.4辨别米饭的适口性：用筷子取米饭少许放入口中，细嚼，边嚼边用牙齿、舌头等各感觉器官仔细品尝米饭的粘性、软硬度、弹性、滋味等项。3.4.3.5冷饭质地：米饭在室温下放置1h后，品尝判断冷饭的粘弹性、粘结成团性和硬度。3.5评分3.5.1评分方法3.5.1.1根据米饭的气昧、外观结构、适口性、滋味和冷饭质地，进行评分，综合评分为各项得分之和。评分规则和记录表格式见下表。米饭感官评价评分规则和记录品评组编号:姓名:性别:年龄:品评时间:年月日时分3.5.1.2根据每个评价员的综合评分结果计算平均值，个别评价员品评误差大者(超过平均10分以上)可舍弃，舍弃后重新计算平均值。最后以综合评分的平均值作为稻米食用品质感官评定的结果，计算结果取整数。下表为结果统计表。4、判定综合评分以90分以上为优(一级)，81分-90分为好(二级)，71分-80分为较好(三级)，61分-70分为一般(四级)，51分-60分为差(等外)。(三)稻米中有机磷、有机氯和菊酯类农药残留量的测定：气相色谱法。1方法提要试样中有机磷、有机氯和菊酯类农药经乙腈提取，提取液经硫酸镁盐析，经PSA分散固相萃取净化后，进气相色谱仪后用FPD检测器检测，根据保留时间进行定性，面积外标法定量。试样中有机氯和菊酯类农药经乙腈提取，提取液经硫酸镁盐析，经弗罗里矽柱固相萃取净化后，进气相色谱仪后用ECD检测器检测，根据保留时间进行定性，面积外标法定量。2测定范围有机磷类农药包括：敌敌畏、甲胺磷、乙酰甲胺磷、甲拌磷、氧化乐果、久效磷、乐果、毒死蜱、甲基对硫磷、马拉硫磷、杀螟硫磷、对硫磷、喹硫磷、水胺硫磷、三唑磷、倍硫磷、二嗪磷、硫线磷、杀扑磷、亚胺硫磷、甲基异柳磷等。有机氯和菊酯类农药包括：六六六、滴滴涕、氯氰菊酯、氰戊菊酯、甲氰菊酯、氯菊酯、氯氟氰菊酯、氟氯氰菊酯、溴氰菊酯、联苯菊酯、氟胺氰菊酯、氟氰戊菊酯、三唑酮、百菌清、异菌脲、三氯杀螨醇、腐霉利、五氯硝基苯、乙烯菌核利等。3试剂3.1乙腈：农残级，美国天地(TEAIA)。3.2丙酮：农残级，美国天地(TEAIA)。3.3正己烷：农残级，美国天地(TEAIA)。3.4甲苯：农残级，美国天地(TEAIA)。3.5硫酸镁：本实验用到两种硫酸镁，一种为纯度＞97％，颗粒状(20～50目)，百灵威ACROS产品，因其具有颗粒状，在实验过程中不会引起粉尘，主要用于盐析。另一种为农残级，粉末状(100目)，美国Alfa公司产品，因其粉末状，吸水效果好，用于脱水步骤(因其是在密闭试管中进行，不需要考虑粉尘问题)。3.6氯化钠：农残级，德国CNW产品。3.7γ-古洛糖酸内酯。3.8保护剂溶液：称取γ-古洛糖酸内酯100mg于10ml容量瓶中，加入2ml水使之溶解，然后用乙腈定容至10ml，混匀，过0.22μm有机滤膜，备用。3.9农药标准品：国家有证标准物质(通常浓度为1000或100mg/L)；进口纯品标样(需配制成1000mg/L的高浓度单标储备液)。3.10标准工作溶液：有机磷农药标准混合溶液用乙腈配制成0.25mg/L的标准工作溶液，置于-20℃保存。测定前标样按标准工作溶液+保护剂混合液(按体积比10:1混合)加入保护剂混合溶液，混匀。有机氯和菊酯标准混合溶液用正己烷配制成0.1mg/L的标准工作溶液，置于-20℃保存。4仪器4.1气相色谱仪(附FPD和ECD检测器)。4.2高速分散机。4.3离心机。4.4天平。4.5涡旋混合器。5分析步骤5.1提取稻米样品干样，称取5.0g经粉碎的样品，置于250mL塑料离心管中，加入25.0mL蒸馏水，静置30min。加入25.0ml乙腈，在高速分散机中高速匀浆2min，加入10g无水硫酸镁和1g氯化钠，在低速分散机中低速匀浆1分钟(替代振摇步骤)，离心力为2500g离心3min，使乙腈和水相分层。5.2净化5.2.1有机磷移取4.0ml上层乙腈溶液于15ml刻度离心管中，离心管中事先加入100mgPSA和C-18、1200mg无水硫酸镁，涡旋混合1min后，3000转/分钟离心5min。准确吸取0.8ml乙腈溶液于进样瓶，并加入保护剂溶液0.08ml,摇匀，待测。5.2.2有机氯和菊酯移取10ml上层乙腈溶液于15ml刻度离心管中，离心管中事先加入0.5g氯化钠，涡旋混合1min，静置分层。准确吸取5ml乙腈溶液于平底烧瓶，旋转蒸发至近干(约0.3mL)，用约2mL的丙酮+正已烷的混合液(丙酮和正已烷的体积比为10:90)溶解，待净化。将弗罗里矽柱依次用5.0mL丙酮+正已烷的混合液(丙酮和正已烷的体积比为10:90)、5.0mL正已烷预淋洗，条件化，当溶剂液面到达柱吸附层表面时，立即倒入上述待净化溶液，用15mL刻度离心管接收洗脱液，用5mL丙酮+正已烷的混合液(丙酮和正已烷的体积比为10:90)冲洗烧杯后淋洗弗罗里矽柱，并重复一次。将盛有淋洗液的离心管置于氮吹仪上，在水浴温度50℃条件下，氮吹蒸发至小于5mL，用正已烷定容至5.0mL，在旋涡混合器上混匀，待测。对于采用自动固相萃取仪进行净化时，取上述盐析好的上清液8mL，在旋转蒸发至近干后(约0.5mL)，加入7.5mL的丙酮+正已烷的混合液(丙酮和正已烷的体积比为10:90)溶解(定容体积为8mL)，仪器上样2.5mL，用4mL丙酮+正已烷的混合液(丙酮和正已烷的体积比为10:90)分两次淋洗弗罗里矽柱，将盛有淋洗液的离心管置于氮吹仪上，在水浴温度50℃条件下，氮吹蒸发至小于2mL，用正已烷定容至2.5mL，在旋涡混合器上混匀，待测。(保持稀释倍数不变)5.3有机磷测定5.3.1色谱条件5.3.1.1色谱柱：DB-1701石英毛细管柱，30m×0.25mm×0.25um。5.3.1.2柱温：初温90℃，立即以25℃/min升至270℃，保持3min。5.3.1.3进样口：温度250℃，压力25psi。5.3.1.4进样量：1ul。5.3.1.5进样方式：脉冲不分流，脉冲压力50psi，保持1min，吹扫时间0.9min。5.3.1.6检测器温度：240℃。5.3.1.7气体：载气N2，恒压25psi；H2流速120ml/min；空气流速88ml/min。5.3.2样品测定按5.3仪器条件，对标准工作液和试样溶液等体积进样，根据保留时间定性，面积外标法定量。5.4有机氯和菊酯测定5.4.1色谱条件5.4.1.1色谱柱：DB-17或DB-1石英毛细管柱，30m×0.25mm×0.25um。5.4.1.2柱温：初温90℃，立即以25℃/min升至150℃，再以10℃/min升至270℃，保持8min。5.4.1.3进样口：温度250℃，压力30psi。5.4.1.4进样量：1ul。5.4.1.5进样方式：分流，分流比为5:1。5.4.1.6检测器温度：300℃，柱流量+尾吹流量＝30mL/min。5.4.1.7气体：载气N2，恒压30psi。5.4.2样品测定5.4仪器条件，对标准工作液和试样溶液等体积进样，根据保留时间定性，面积外标法定量。6结果计算样品中被测农药含量以质量分数W计，数值以毫克每千克(mg/kg)表示，按下列公式计算：W=A1×C×V2×VA×V1×V4V3×m]]>V1－标样进样体积，μl。V2－样品进样体积，μl。A－标样峰面积。A1－样品峰面积。m－样品质量(g)。V3－溶剂加入体积(ml)。V4－分取溶剂体积(ml)。V－定容体积(ml)。计算结果保留两位有效数字，当结果大于1mg/kg时保留三位有效数字。测定值的运算和有效数值的修约按数值修约规则进行。(四)稻米中有机磷、有机氮、氨基甲酸酯等农药残留量测定：液相色谱/串接质谱法。1方法提要稻米试样中农药经乙腈提取，提取液经硫酸镁盐析，经PSA分散固相萃取净化后，用液相色谱用串接质谱仪检测，根据保留时间和定性离子及定量离子和定性离子比例进行定性，定量离子面积外标法进行定量。2测定范围80种农药包括：3-羟基克百威、阿维菌素、乙酰甲胺磷、啶虫脒、乙草胺、甲草胺、涕灭威、涕灭威砜、涕灭威亚砜、莠去津、嘧菌酯、噻嗪酮、丁草胺、甲萘威、多菌灵、克百威、氟啶脲、灭幼脲、毒死蜱、甲基毒死蜱、环氟菌胺、二嗪磷、敌敌畏、苯醚甲环唑、除虫脲、乐果、烯酰吗啉、乙硫磷、苯线磷、杀螟硫磷、倍硫磷、氟虫腈、氟虫脲、氟硅唑、氟铃脲、噻螨酮、抑霉唑、吡虫啉、茚虫威、异菌脲、水胺硫磷、异丙威、稻瘟灵、虱螨脲、马拉硫磷、甲霜灵、甲胺磷、杀扑磷、灭多威、甲氧虫酰肼、异丙甲草胺、久效磷、氧乐果、多效唑、对硫磷、甲基对硫磷、二甲戊乐灵、甲拌磷、伏杀硫磷、亚胺硫磷、辛硫磷、抗蚜威、咪鲜胺、克螨特、苯胺灵、丙环唑、哒螨灵、嘧霉胺、喹硫磷、精喹禾灵、多杀霉素-A、多杀霉素-B、虫酰肼、噻菌灵、噻虫嗪、甲基硫菌灵、三唑酮、三唑醇、三唑磷、敌百虫、三环唑。3试剂3.1乙腈：农残级，美国天地(TEAIA)。3.2乙腈：液相色谱级，MERCK。3.3硫酸镁：本实验用到两种硫酸镁，一种为纯度＞97％，颗粒状(20～50目)，百灵威ACROS产品，因其具有颗粒状，在实验过程中不会引起粉尘，主要用于盐析。另一种为农残级，粉末状(100目)，美国Alfa公司产品，因其粉末状，吸水效果好，用于脱水步骤(因其是在密闭试管中进行，不需要考虑粉尘问题)。3.4氯化钠：分析纯，德国CNW产品。3.5PSA：美国瓦里安。3.6C-18：美国瓦里安。3.7乙酸铵：美国Sigam-FLUKA。3.8甲酸：色谱纯美国天地(TEAIA)。3.9农药标准品：国家有证标准物质(通常浓度为1000或100mg/L)；进口纯品标样(需配制成1000mg/L的高浓度单标储备液)。3.10标准混合溶液用乙腈配制成0.1mg/L的标准工作溶液，置于-20℃保存。4仪器4.1Agilent6410BLC/MS/MS。4.2高速分散机。4.3离心机。4.4天平。4.5涡旋混合器。5分析步骤5.1提取稻米样品干样，称取5.0g经粉碎的样品，置于250mL塑料离心管中，加入25.0mL蒸馏水，静置30min。加入25.0ml乙腈，在高速分散机中高速匀浆2min，加入10g无水硫酸镁和1g氯化钠，在低速分散机中低速匀浆1分钟(替代振摇步骤)，离心力为2500g离心3min，使乙腈和水相分层。5.2净化移取4.0ml上层乙腈溶液于15ml刻度离心管中，离心管中事先加入100mgPSA和C-18、1200mg无水硫酸镁，涡旋混合1min后，3000转/分钟离心5min。经0.22μm微孔滤膜过滤，待测。5.3仪器条件5.3.1色谱条件：5.3.1.1色谱柱：ZORBAXSBC18(100mm×2.1mm，1.8μm)；5.3.1.2柱温：55℃；5.3.1.3流动相A：含0.1％甲酸的5mmol/L乙酸铵水溶液；流动相B：乙腈；5.3.1.4梯度洗脱程序：时间(min)溶剂A(％)溶剂B(％)0802013109015109015.180202180205.3.1.5流速：0.3mL/min；5.3.1.6进样量：自动程序进样(1μL样液+4μL流动相A混合,洗针后进样)；5.3.2质谱条件：5.3.2.1离子源：ESI﹢；5.3.2.2毛细管电压：4kV；5.3.2.3氮气流速：10L/min；5.3.2.4质谱采集方式：动态多反应监测(DynamicMRM)；5.3.2.5质谱采集速率：500ms/cycle；5.3.2.6雾化器压：35psi；5.3.2.7干燥气温度：350℃。5.3.2.8质谱采集参数5.4样品测定按5.3仪器条件，对标准工作液和试样溶液等体积进样，根据保留时间和定性离子及定量离子和定性离子比例进行定性，定量离子面积外标法进行定量。6结果计算样品中被测农药含量以质量分数W计，数值以毫克每千克(mg/kg)表示，按下列公式计算：W=A1×C×V2×VA×V1×V4V3×m]]>V1－标样进样体积，μl。V2－样品进样体积，μl。A－标样峰面积。A1－样品峰面积。m－样品质量(g)。V3－溶剂加入体积(ml)。V4－分取溶剂体积(ml)V－定容体积(ml)。计算结果保留两位有效数字，当结果大于1mg/kg时保留三位有效数字。测定值的运算和有效数值的修约按数值修约规则进行。(五)稻米中镉的测定：石墨炉原子吸收法。1方法提要样品经酸消解后，经石墨炉自动进样器导入原子吸收分光光度计石墨炉中，经石墨炉高温原子化之后，在光路中原子吸收特定波长谱线，其吸光度与其含量成正比。2仪器设备2.1美国CEM公司MARS5微波消解仪2.2美国热电公司SollarM6原子吸收光谱仪(带FS95石墨炉自动进样器)2.3镉、铅、铬、镍空心阴极灯2.4小型电动捣碎机2.5钢瓶氮气(99.999％)或氩气(99.999％)2.6循环水装置(温度为15℃)2.7容量瓶，25mL2.8天平，感量为0.001g3试剂本方法中，除特殊规定外，所用试剂为优级纯，试验用水为高纯水。3.1硝酸(工艺超纯)3.2高氯酸3.3硝酸(1+99)(工艺超纯)：量取1.0mL硝酸(4.1)，加入100mL容量瓶中，用水定容。3.4硝酸钯溶液(0.5g/L)：称取0.05g硝酸钯，用硝酸(4.3)溶解稀释至100mL。3.5硝酸镁溶液(10g/L)：称取1.0g硝酸镁，用水溶解稀释至100mL。3.6硫酸铵(20g/L)：称取2.0g硫酸铵，用水溶解稀释至100mL。3.7镉标准贮备液：国家环境保护总局标准样品研究所生产，浓度为100mg/L。打开之后贮于冰箱里，保存1年。镉标准溶液及标准曲线的配制方法及保存的流程如图1所示。4操作步骤4.1样品制备去除样品中杂物，混匀后用四分法缩分至约50g，经研磨至少98％通过孔径0.180mm(80目)尼龙筛，混匀后贮于聚乙烯瓶或聚乙烯塑料袋中，备用。4.2样品消解——微波消化法称取大米样品0.5g，置于消化罐内，加入5mL浓硝酸，放置15min，盖好密封盖，放进微波消解系统中，转动转盘约1min，检查压力传感器是否绞缠。按照表1设置的程序消解。消化完全后待屏幕指示温度低于50℃时，打开微波消解仪的门，小心缓慢松开防爆膜盖以释放压力，取下温度传感器，打开密封盖，将消解液转移并定容到25mL容量瓶中，混匀待测。同时做试剂空白。表1植物样品微波消解程序项目功率温度℃压力psi升压时间min保持时间min参数自动1803501510注：本消解程序以温度控制为主，压力控制为辅；同时消解的一批样品的基体应基本相同。5测定5.1仪器测定条件按照表2表2仪器测定条件5.2标准曲线的绘制利用石墨炉自动进样器(FS95)的自动稀释功能，让其自动将镉元素的顶标溶液配制标准曲线，配制浓度见表3，并加入相应的基体改进剂。表3标准曲线的配制浓度和基体改进剂的种类及剂量元素镉顶标溶液浓度(ug/L)2.0标准0.5曲线1.0浓度1.5(ug/L)2.0基体硝酸钯，2.0uL改进剂硫酸铵，2.0uL5.3仪器自动计算结果方式测量设定好仪器的最佳条件。输入以下参数：样品编号、样品质量、稀释体积、进样量，并设计标准曲线的浓度梯度。调整光路并调节零点之后，进入标准系列测量，绘制标准曲线。在转入样品测定之前，可以再进入空白值测量状态，用样品空白消化液进样，让仪器取其均值作为扣底的空白值。随后可依次测定样品。测定完毕之后，选择“打印报告”即可将测定结果进行自动打印。6计算X＝(c-c0)×V×1000/m×1000×1000式中：X―样品中各元素含量，mg/kg；c—样品消化液测定浓度，ng/mL；c0—样品空白消化液浓度，ng/mL；V—样品消化液总体积，mL；m―样品质量，g；结果表述：①测定值的运算和有效数值的修约按数值修约规则进行；②有效数的位数与方法中测量仪器精度最低的有效数的位数相同，或比卫生标准中限量值多保留一位。以上检测方法具有速度快、准确度高，试剂省，对环境友好、还有稳定性和重复性好的特点。三、等级判定以产品检测指标达到的最低等级指标为判定等级。即检测结果农残、镉都达到一级的判为一级；如果其中一项为二级则判为二级；依次类推。四、作用及意义1、提出稻米质量安全等级概念，为以后制修订农业行业标准提供科学依据。2、有利于指导我国稻米产品的生产、消费。生产者可按质量等级定价，消费者可选择购买，能真正体现优质优价。3、优质环境才能生产优质大米，有了质量分级，优质环境价值得以体现，有利于保护生态环境和农业的可持续发展。虽然本发明已以实施例公开如上，但其并非用以限定本发明的保护范围，任何熟悉该项技术的技术人员，在不脱离本发明的构思和范围内所作的更动与润饰，均应属于本发明的保护范围。当前第1页1 2 3