离子液体萃取–紫外可见分光光度法测定盐酸美西律的方法与流程

本发明涉及测定盐酸美西律的方法，具体涉及一种离子液体萃取–紫外可见分光光度法测定盐酸美西律的方法。

背景技术：

离子液体与传统的有机溶剂和电解质相比，具有无恶臭、无混杂、无污染、无毒性等一系列优点。目前离子液体除广泛应用于电化学、催化、合成等领域外，在分离科学和色谱分析方面也有较多的文献报道[1-5]，而离子液体与紫外吸收光谱联用测定药物的文献却没有报道过。

盐酸美西律(Mexiletine Hydrochloride，MXT)化学名称1-(2，6-甲基苯氧基)-2-丙胺盐酸盐，是一种抗心律失常药，临床上主要用于治疗急、慢性室性心律失常。目前测定这种药物的方法有荧光光谱法[6]、气相色谱法[7]、高效液相色谱法[8-11]和毛细管电泳法[12-13]。Ahdel[14]等和Aydogmus[15]等分别采用乙酰丙酮醛分光光度法和溴百里酚蓝分光光度法实现了MXT的紫外光谱测定，然而上述两种方法的灵敏度均偏低，因此建立了一种测定MXT的高灵敏度的分光光度法，研究和探索测定盐酸美西律片的新方法，在生命科学、药物分析检测中具有重要的现实意义。

技术实现要素：

针对上述问题，本发明提供了一种离子液体萃取–紫外可见分光光度法测定盐酸美西律的方法，可直接用[BPy]PF6离子液体作为萃取剂对盐酸美西律片的盐酸美西律进行萃取，萃取率高达100％，并且盐酸美西律的反萃取率高达91.04％。

为解决上述技术问题，本发明所采用的技术方案是：一种离子液体萃取或反萃取盐酸美西律的方法，包括以下步骤：取一定量的六氟磷酸-N-丁基吡啶[BPy]PF₆的离子液体与盐酸美西律溶液及醋酸-醋酸钠的缓冲溶液混合后稀释成10ml，在超级恒温槽(65℃)中充分搅拌与静置，冷却，待自动分为固态有机相、液态水相后，提取一定体积的水相后，通过分光光度法测定锌离子的含量；取萃取过程中得到的固态有相与缓冲溶液取步骤(1)中的固态有机相与缓冲溶液混合后稀释成10ml，在超级恒温槽(65℃)中恒温10min并充分振荡和溶解，静置，冷却，分层，取水相后，通过分光光度法测定盐酸美西律的含量。

进一步的，本发明离子液体萃取或反萃取盐酸美西律的方法，所述的盐酸美西律的吸收波长为219nm。

进一步的，本发明离子液体萃取或反萃取盐酸美西律的方法，所述步骤(1)(2)中的离子液体为六氟磷酸-N-丁基吡啶[BPy]PF₆离子液体。

进一步的，所述的盐酸美西律的pH值为4.52。

进一步的，所述的盐酸美西律的用量为19.68μg/mL。

进一步的，所述的醋酸-醋酸钠缓冲溶液的pH值为4.23。

进一步的，所述的[BPy]PF₆离子液体的用量为0.3g。

进一步的，所述六氟磷酸-N-丁基吡啶[BPy]PF6离子液体的制备方法为如下步骤：

(a)、将吡啶、溴代正丁烷和10mL环己烷加入到反应装置中，于65℃水浴加热下搅拌10h，分层，取下层液体置于蒸发仪中90℃蒸发2h，洗涤，干燥，即得淡黄色固体--中间产物；

(b)、取步骤(a)中的中间产物、六氟磷酸钾和50mL丙酮加入到反应装置中，于30℃水浴加热下搅拌24h，抽滤，分层，取下层滤液置于蒸发仪中50℃蒸发，冷却，洗涤，抽滤，干燥，即得白色粉末状的离子液体[BPy]PF₆。

进一步的，所述的离子液体萃取–紫外可见分光光度法测定盐酸美西律的方法，包括如下步骤：

(1)盐酸美西律样品液的制配：称取0.1g的盐酸美西律片粉碎研细，移置于烧杯中，加蒸馏水充分搅拌、溶解，后移入250mL容量瓶中定容，即得盐酸美西律样品液；

(2)测定盐酸美西律片含量：称取步骤(1)配置好的1ml盐酸美西律样品液，加3ml pH＝4.23醋酸-醋酸钠缓冲溶液于比色管中，用蒸馏水稀释至10mL作为水相，后加入0.3g的离子液体[BPy]PF₆作为有机相，混合均匀，最后在65℃水浴加热下进行萃取，测得所得溶液在219nm的吸光度；通过作出的标准工作曲线，横坐标是盐酸美西律的浓度，根据吸光度值来确定盐酸美西律的浓度。

由上述对本发明结构的描述可知，和现有技术相比，本发明具有如下优点：

1、[BPy]PF₆离子液体单独萃取盐酸美西律的萃取率高达100％，与传统的离子液体相比，[BPy]PF₆并不需要加入萃取剂便可达到相当高的萃取率，所以可直接用离子液体作为萃取剂进行萃取。

2、[BPy]PF₆离子液体具有较强的酸适应性，对盐酸美西律的萃取率在酸性环境中依然保持着很高的萃取率，因此该离子液体在工业化应用中具有开发利用的价值。

3、通过反萃取实验，可以得出盐酸美西律的反萃取率Fmax＝91.04％。

4、通过用紫外分光光度法进行相关参数的测定，测得盐酸美西律片中盐酸美西律含量为11.9ug/g，与文献相对误差为10.5％。

5、在不同用量的[BPy]PF₆离子液体对盐酸美西律萃取率的影响实验中发现，即使微量的[BPy]PF₆，也具备很高的萃取率(m＝0.3g和m＝0.4g时萃取率为100％)，使得该离子液体在工业化应用中具备很好的发展前景。

附图说明

构成本申请的一部分的附图用来提供对本发明的进一步理解，本发明的示意性实施例及其说明用于解释本发明，并不构成对本发明的不当限定。在附图中：

图1是盐酸美西律的最大吸收波长曲线图；

图2是盐酸美西律的工作曲线图；

图3是盐酸美西律最佳pH的曲线图；

图4是盐酸美西律用量的曲线图；

图5是不同pH值的缓冲溶液对萃取率的影响结果图；

图6是[BPy]PF₆离子液体用量对萃取率的影响结果图；

图7是不同pH值的缓冲溶液对反萃取率的影响结果图；

图8是[BPy]PF₆离子液体的红外光谱图。

具体实施方式

为了使本发明的目的、技术方案及优点更加清楚明白，以下结合附图及实施例，对本发明进行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本发明，并不用于限定本发明。

实施例1：离子液体萃取–紫外可见分光光度法测定盐酸美西律的方法

1、仪器、试剂

(1)仪器：pHS-3C数字酸度计(上海理达仪器厂)、U8-1800PC型紫外可见分光光度计(上海美谱达仪器有限公司)、SHB-Ⅲ循环式多用真空泵(郑州长城科工贸有限公司)、YY501-2型超级恒温槽(宁波市州科信电机厂)、BS224S电子天平(北京塞多利斯仪器系统有限公司)、DZF-6050型真空干燥箱(上海博讯实业有限公司医疗设备厂)、HH-2数显恒温水浴锅(国华电器有限公司)、R205型旋转蒸发器(上海申生科技有限公司)、JJ-1型精密增力电动搅拌器(常州国华电器有限公司)、AVATAR360FI-IR傅立叶红外光谱仪(美国)、DRT-TW型调温电热套(郑州长城科工贸有限公司)。

(2)试剂：吡啶(AR)、溴代正丁烷(CP)、乙酸乙酯(AR)、环己烷(AR)、六氟磷酸钾(AR)、丙酮(AR)、取0.0246g盐酸美西律片(石药集团，377140301)于烧杯中溶解，完全溶解后定容至250mL容量瓶中，摇匀后转移至棕色瓶中备用；、pH＝3.6、3.8、4.0、4.2、4.4、4.5、4.6、4.8、4.9、5.0、5.5、5.8、的醋酸-醋酸钠缓冲溶液；、在实验过程中的用水是蒸馏水。

2、试验方法和结果

试验方法：离子液体萃取和测定盐酸美西律的方法

(1)盐酸美西律样品液的制配：称取0.1g的盐酸美西律片粉碎研细，移置于烧杯中，加蒸馏水充分搅拌、溶解，后移入250mL容量瓶中定容，即得盐酸美西律样品液；

(2)测定盐酸美西律片含量：取1ml配置好的盐酸美西律样品液，加3ml pH＝4.23醋酸-醋酸钠缓冲溶液于比色管中，用蒸馏水稀释至10mL作为水相，后加入0.3g的离子液体[BPy]PF₆作为有机相，混合均匀，最后在65℃水浴加热下进行萃取，将萃取后的溶液利用紫外可见分光光度计进行吸光度或吸收曲线的测定。

以此方法为基础，确定盐酸美西律的最大吸收波长、最佳pH值、最适溶度的确定，并研究不同pH值的缓冲溶液、[BPy]PF₆离子液体用量等因素对萃取率、反萃取律的影响，以得出最优条件。

结果与讨论：

(1)盐酸美西律最大吸收波长的确定

在25ml容量瓶中依次加入4ml的盐酸美西律标准液(98.4μg/mL)，3mLpH＝4.51的醋酸—醋酸钠缓冲溶液，定容，静置10min,以空白试剂(不加盐酸美西律标准液)为参比液测不同波长下吸光度，结果如图1所述，结果显示，在本实验中，盐酸美西律在219nm处吸光度是最大的，因此，接下来的所有紫外-可见分光光度测定中均选择在219nm测定溶液的吸光度(Abs)。

分别移取1mL、2mL、3mL、4mL、5mL、6mL、7mL的盐酸美西律标准液(98.4μg/mL)，醋酸—醋酸钠缓冲溶液，定容于25mL的容量瓶中，静置10min，以空白试剂(不加盐酸美西律标准液)为参比液测219nm下测的吸光度。结果如图2所述，结果显示，在本实验中，吸光度与浓度成正比关系，以浓度为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制出标准曲线并可计算出回归方程为：Y＝0.0219×X+0.0873R＝0.99242，根据该回归方程及取样量，即可计算出盐酸美西律溶液中的盐酸美西律的含量。

(2)盐酸美西律最佳pH的确定

在25ml容量瓶中依次加入4ml盐酸美西律标准液(98.4μg/mL)，再加3mL不同pH值的的醋酸—醋酸钠缓冲溶液，定容，静置10min,以空白试剂(不加盐酸美西律标准液)在波长入＝219nm下测吸光度，结果如图3所述，结果显示，在本实验中，在酸性条件下，当pH＝4.52，盐酸美西律的吸光度最大。

(3)盐酸美西律用量的确定

在25ml容量瓶中加入,3mL pH＝4.52醋酸—醋酸钠缓冲溶液，不同体积的盐酸美西律标准液(98.4μg/mL)，定容，静置10min，以空白试剂(不加盐酸美西律标准液)为参比液测219nm下的测吸光度，结果如图4所述，结果显示，在本实验中，当盐酸美西律的溶度在19.68ug/mL时，盐酸美西律的吸光度最大：

(4)不同pH值的缓冲溶液对萃取率的影响

取2.5mL盐酸美西律标准液溶液(98.4μg/mL)和3mL不同pH的缓冲溶液于比色试管中，用蒸馏水稀释至10mL作为水相；[BPy]PF₆离子液体作为有机相；将以上混合在比色试管中，在65℃超级恒温槽中恒温10分钟并充分振荡后进行萃取，探讨水相pH值对萃取的影响，结果如5所述，结果显示，在本实验中，在一定的条件随着pH值的增大，萃取率越来越大，当水相pH＝4.23时，盐酸美西律的最大萃取率＝100％.而之后随着pH的增大，萃取率都保持不变。因此，选择缓冲溶液pH＝4.23作为最佳优化条件。

(5)[BPy]PF₆离子液体用量对萃取率的影响

取盐酸美西律标准溶液(98.4μg/mL)和3.00mL pH＝4.23的缓冲溶液于比色管中，用蒸馏水稀释至10mL作为水相；加入不同质量的[BPy]PF₆离子液体作为有机相；在65℃超级恒温槽中恒温10分钟并充分振荡后进行萃取，探讨[BPy]PF6离子液体用量对萃取的影响，结果如6所述，结果显示，在本实验中，在一定的条件随着[BPy]PF₆离子液体用量的增大，萃取率越来越大，当[BPy]PF₆离子液体的用量为0.3g时，盐酸美西律的最大萃取率＝100％，而之后随着[BPy]PF₆离子液体用量的增大，萃取率都保持不变。因此，选择[BPy]PF₆离子液体的用量值为0.3g作为最佳优化条件。

(5)不同pH值的缓冲溶液对反萃取率的影响

将萃取后比色管中的水相倾出，与固态的有机相分离，在比色管中加入不同PH值得缓冲溶液用蒸馏水稀释至10mL振荡，在65℃超级恒温槽中恒温10分钟并充分振荡，并使其充分溶解，静置，移取一定体积的水相测吸光度，探讨不同pH值的缓冲溶液对反萃取的影响，结果如7所述，结果显示，反萃时，萃取率能达到最大，为91.04％。

通过上述内容得出离子液体萃取-紫外可见分光光度法测定盐酸美西律的最佳方法为：(1)盐酸美西律样品液的制配：称取0.1g的盐酸美西律片粉碎研细，移置于烧杯中，加蒸馏水充分搅拌、溶解，后移入250mL容量瓶中定容，即得盐酸美西律样品液；(2)测定盐酸美西律片含量：取1ml配置好的盐酸美西律样品液，加3ml pH＝4.23醋酸-醋酸钠缓冲溶液于比色管中，用蒸馏水稀释至10mL作为水相，后加入0.3g的离子液体[BPy]PF₆作为有机相，混合均匀，最后在65℃水浴加热下进行萃取，将萃取后的溶液利用紫外可见分光光度计进行吸光度-浓度的测定。通过作出的标准工作曲线，横坐标是盐酸美西律的浓度，纵坐标是吸光度值，根据吸光度来确定盐酸美西律的浓度。在本实验中，平行测定三次，所测的结果如下：

经计算，得盐酸美西律片中盐酸美西律含量的质量分数约为29.8％，相对误差值为10.5％。

实施例2：六氟磷酸-N-丁基吡啶[BPy]PF₆离子液体的制备和特性表征

1、六氟磷酸-N-丁基吡啶[BPy]PF₆离子液体的合成路线

(1)

(2)

2、离子液体的具体合成步骤为如下：

(1)用电子天平准确称取40.0012g的吡啶和71.0008g的溴代正丁烷加入250mL的三颈烧瓶中，并再加入10mL环己烷，65℃水浴加热下机械搅拌10h，得到下层为黄色液体，上层为乳白色液体，倾去上层，将下层液体在旋转蒸发仪中90℃蒸发2h，得到淡黄色固体，用乙酸乙酯(50mL×3)洗涤，放到真空干燥箱中60℃下干燥24h，得到98.7898g淡黄色固体--中间产物，产率96.632％。

(2)用电子天平准确称取42.0002g的上述产物和46.0012g的六氟磷酸钾于圆底烧瓶，再加入50mL丙酮，在水浴恒温30℃加热下搅拌24h，抽滤，上层为白色固体，取下层滤液在50℃下旋转蒸发，冷却后得到白色固体粉末，用蒸馏水(50mL×3)洗涤，抽率，放到真空干燥箱中50℃下干燥24h后得到51.2328g的白色粉末状离子液体[BPy]PF6,产率94.3736％。

3、六氟磷酸-N-丁基吡啶[BPy]PF₆离子液体的特性表征

将所合成的最终产物[BPy]PF6离子液体进行红外谱图表征，具体表征结果见图8。3432.30cm-1的吸收峰说明是样品吸收少量水分带来的—O—H伸缩振动；3145.17cm-1和3105.32cm-1是由于环上的C—H伸缩振动引起的；2971.24cm-1是—CH3的C—H不对称伸缩峰；2881.94cm-1是—CH3的C—H对称伸缩峰；1637.61cm-1是C＝N的伸缩振动峰，1488.88cm-1是吡啶环中的C＝N伸缩振动峰，1505.13cm-1和1470.58cm-1说明该化合物含有吡啶环；1456.63cm-1是—CH3的弯曲不对称振动峰(中)；1173.00cm-1是环上C—H的面内弯曲振动峰；783.42cm-1是由吡啶环上的C＝C弯曲振动峰引起的；685.98cm-1是环上C—H的面外弯曲(变形)振动峰。通过查阅文献可知，834.47cm-1、557.60cm-1这两个吸收峰是PF6-所特有的。结果如8所述，结果显示，所合成的最终产物是[BPy]PF6离子液体。

以上所述仅为本发明的较佳实施例而已，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内所作的任何修改、等同替换和改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。