基于数字微镜器件实现多路频分复用荧光显微探测方法与流程

文档序号:12451102阅读:来源:国知局

技术特征:

1.一种基于数字微镜器件实现多路频分复用荧光显微探测方法,其特征在于,具体包括如下步骤:

1)搭建实现多路频分复用荧光显微探测光路:激光光源发出一束激光经第一准直扩束器组准直为平行光,平行光以与数字微镜器件垂轴方向成24°角入射到数字微镜器件上,经过数字微镜器件反射的反射光垂直入射到第二准直扩束器组上,被第二准直扩束器组收缩后的光信号全部进入二向色镜组中,二向色镜组透射光通过显微物镜汇聚到含荧光的细胞样品中成像,成像后的光信息通过显微物镜返回,再经过二向色镜组反射进入分光棱镜,由分光棱镜分成两路,一路由光电倍增管接收,一路由成像透镜汇聚由CCD接收,得到样品成像;

2)将数字微镜器件的开关微镜片划分为多个通道,给每个通道加载不同帧频的通道信号来控制各通道的开关频率,在数字微镜器件面上根据时间段形成不同开关状态的图,若数字微镜器件上通道对应的微镜片处于“开”状态,则此区域的入射光被反射出去,进入第二准直扩束器组收集的信号中,如数字微镜器件上通道对应的微镜片处于“关”状态,则此区域的入射光不被反射出去,也无光信号被第二准直扩束器组收集,实现了多通道的频分复用;

3)光电倍增管接收探测后的荧光信号进行A/D转换,然后输入电脑进行采集和信号处理,进行傅里叶变换、滤波和解调后得到荧光信号强度随时间变化关系,最终得到细胞样品荧光信息。

2.根据权利要求1所述基于数字微镜器件实现多路频分复用荧光显微探测方法,其特征在于,所述步骤2)的多个通道为n个通道,则在数字微镜器件上划分n块区域,若光电倍增管接收n路荧光信号的强度分别为I1(t),I2(t),...,In(t),对应各个区域加载的调制信号的频率分别为均不相同的f1(t),f2(t),...,fn(t),则最后收集到的细胞样品荧光信息是各路经过调制后的光强度的叠加,计算公式如下:

I(t)=I1(t)cos[2π×f1(t)t]+I2(t)cos[2π×f2(t)t]+...+In(t)cos[2π×fn(t)t]。

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