水产品快速检测试剂盒的筛选方法与流程

文档序号:11516452阅读:551来源:国知局

本发明涉及水产领域,尤其涉及一种水产品快速检测试剂盒的筛选方法。



背景技术:

近年来,随着我国水产养殖业的不断发展,养殖密度大幅提高,养殖产量快速增长,但是,由于养殖水体环境恶化,水域富营养化,养殖密度增大等因素,导致水产动物发病率不断增加,为防病、治病、提高成活率,使用药物治疗和预防水产动物疾病已经成为养殖过程中不可避免的重要手段。当水产品药物残留在人体内蓄积到一定浓度时,会导致过敏反应、诱导菌株产生耐药性、引起菌群失调、致畸、致癌、致突变等毒副作用,危害人类身体健康。由于养殖技术水平不足,且养殖户质量安全意识不够,部分养殖户在防治水产动物疾病过程中可能存在以下现象:一是使用禁用药物,如:氯霉素、孔雀石绿、硝基呋喃类等;二是超量使用限用药物和不遵守休药期,如:不按照药物使用说明的剂量和使用方法使用。三是部分运销户为了对运、存器材消毒或防止运销中发病、保持养殖水产品的鲜活度,获取最大的销售利润,也会在运输、暂存、销售环节中使用药物。无论是养殖过程还是运输、销售过程,药物滥用都会造成药物残留,给水产品质量安全造成严重危害。在有关主管部门加强对养殖水产品监测力度的情况下,虽然药物滥用现象有所抑制,但是,水产养殖过程较为复杂,引起药物残留的因素也较多,仅从专业检测检验机构的仪器检测不能完全覆盖水产品生产、运输和销售的各个环节。目前,专业检测检验机构的水产药物残留量检验一般需要1~2周,不适应养殖水产品保持鲜活销售的市场要求。为保障水产品质量安全,适应产地准出、市场准入,建设养殖水产品安全信息追溯系统,近年来,相关科研机构和企业纷纷研发水产品药物残留快速检测产品,能够在最短的时间内(40~120分钟)完成水产药物残留的快速检测。然而,由于生产快速检测试剂盒的准入门槛较低,导致市场上销售的快速检测试剂盒产品质量参差不齐,使使用者无所适从。而且我国水产品快速检测试剂盒目前还没有相关的行业标准,无法对现有商品化的快速检测产品进行评价和选择,规范快速检测产品的使用更是无从谈起。鉴于以上现有的技术缺失,提供一种水产品快速检测试剂盒的筛选方法是本领域亟需解决的问题。



技术实现要素:

针对上述现有技术中的不足,本发明提供一种水产品快速检测试剂盒的筛选方法,实现对现有的水产品快速检测试剂盒进行评价和选择。

为了实现上述目的,本发明提供一种水产品快速检测试剂盒的筛选方法,包括步骤:

s1:根据待筛选的复数个水产品快速检测试剂盒的实验条件对所述水产品快速检测试剂盒进行分类;

s2:测试各所述水产品快速检测试剂盒的多个性能,获得与各性能对应的多组检测结果;

s3:按照一预设评分标准对所述检测结果进行打分,获得各所述水产品快速检测试剂盒的各性能的评分结果,所述评分结果包括一检出限评分、一灵敏度评分、一准确度评分、一特异性评分、一稳定性评分和一操作适用性评分;

s4:根据所述评分结果和一应用场景对所述水产品快速检测试剂盒进行筛选,获得所需的所述水产品快速检测试剂盒。

优选地,所述实验条件包括:检验周期、批量处理能力、操作简易程度和携带方便性。

优选地,所述性能包括灵敏度、实际阳性样品检出率、特异性、准确度和稳定性,所述s2步骤进一步包括:一灵敏度测试步骤、一实际阳性样品检出率测试步骤、一特异性测试步骤、一准确度测试步骤和一稳定性测试步骤。

优选地,所述灵敏度测试步骤中:以当前所述水产品快速检测试剂盒的检出限作为加标浓度,对多个第一阴性样品加标进行一第一定性检测,通过一公式(1)计算获得所述灵敏度:

其中,所述第一实测阳性样品数为所述第一定性检测中检测为阳性的样品数量;所述实际加标样品数等于所述第一阴性样品的总数。

优选地,在所述实际阳性样品检出率测试步骤中:对多个第一阳性样品进行一第二定性检测,通过一公式(2)计算获得所述实际阳性样品检出率:

其中,所述第二实测阳性样品数为所述第二定性检测中检测为阳性的样品数;所述第一阳性样品数为所述第一阳性样品的总数。

优选地,在所述特异性测试步骤中:对多个特异性检测样品进行一第三定性检测,通过一公式(3)计算获得所述特异性:

其中,所述特异性检测样品数为所述特异性检测样品的总数,所述假阳性样品数为所述第三定性检测中检测为阳性的样品数。

优选地,在所述准确度测试步骤中:对多个第二阳性样品和多个第二阴性样品进行一第四定性检测,通过一公式(4)计算获得所述准确度:

其中,所述真阴性数为所述第二阴性样品在所述第四定性检测中检测为阴性的样品数量;所述真阳性数为所述第二阳性样品在所述第四定性检测中检测为阳性的样品数量;所述样品总数等于所述第二阳性样品数量与所述第二阴性样品数量之和。

优选地,在所述稳定性测试步骤中:利用多个批次的当前所述水产品快速检测试剂盒对相同的一样品进行所述灵敏度测试步骤,获得各批次当前所述水产品快速检测试剂盒的灵敏度,并通过公式(5)计算获得所述当前所述水产品快速检测试剂盒的稳定性系数:

其中,fs为稳定性系数,s为不同批次所述水产品快速检测试剂盒的灵敏度的标准差,x为所述灵敏度,n为批次数,为不同批次所述水产品快速检测试剂盒的平均灵敏度。

优选地,所述预设评分标准为:

当所述检出限小于等于一规定限量值时,所述检出限评分为100分;当所述检出限大于两倍的所述规定限量值且小于等于五倍的所述规定限量值时,所述检出限评分为60~80分;当所述检出限大于五倍的所述规定限量值且小于等于十倍的所述规定限量值时,所述检出限评分为30~60分;当所述检出限大于十倍的所述规定限量值时,所述检出限评分为0;

当所述灵敏度大于90%时,所述灵敏度评分为80~100分;当所述灵敏度大于75%且小于等于90%时,所述灵敏度评分为60~80分;当所述灵敏度大于50%且小于等于75%时,所述灵敏度评分为30~60分;当所述灵敏度小于等于50%时,所述灵敏度评分为0;

当所述准确度大于90%时,所述准确度评分为80~100分;当所述准确度大于75%且小于等于90%时,所述准确度评分为60~80分;当所述准确度大于60%且小于等于75%时,所述准确度评分为30~60分;当所述准确度小于等于60%时,所述准确度评分为0;

当所述特异性大于90%时,所述特异性评分为80~100分;当所述特异性大于75%且小于等于95%时,所述特异性评分为60~80分;当所述特异性大于50%且小于等于75%时,所述特异性评分为30~60分;当所述特异性小于等于50%时,所述特异性评分为0;

当所述稳定性大于95%时,所述稳定性评分为80~100分;当所述稳定性大于90%且小于等于95%时,所述稳定性评分为60~80分;当所述稳定性大于85%且小于等于90%时,所述稳定性评分为30~60分;当所述稳定性小于等于85%时,所述稳定性评分为0;

当所述水产品快速检测试剂盒适合现场操作、携带方便且无需辅助设备时,操作适用性评分为80~100分;当所述水产品快速检测试剂盒适合现场操作、携带方便但需要辅助设备时,操作适用性评分为60~80分;当所述水产品快速检测试剂盒适合现场操作、但携带方便且需要辅助设备时,操作适用性评分为30~60分。

优选地,在所述s4步骤中:

当所述应用场景为市场监控时,应选用所述准确度评分高、批量处理强和所述操作适用性评分高的所述水产品快速检测试剂盒;

当所述应用场景为产地现场执法时,应选用所述灵敏度评分高、所述准确度评分高、所述稳定性评分高和所述操作适用性评分高的所述水产品快速检测试剂盒;

当所述应用场景为企业自我监控时,应选用所述准确度评分高、所述操作适用性评分高和检验周期短的所述水产品快速检测试剂盒;

当所述应用场景为养殖企业苗种进货监控时,应选用所述操作适用性评分高、所述准确度评分高、所述检出限评分高和所述灵敏度评分高的所述水产品快速检测试剂盒。

本发明由于采用了以上技术方案,使其具有以下有益效果:

通过本发明的水产品快速检测试剂盒的筛选方法实现了对现有的水产品快速检测试剂盒进行评价和选择。灵敏度测试步骤用于检测灵敏度。实际阳性样品检出率测试步骤用于检测实际阳性样品检出率。特异性测试步骤用于检测特异性。准确度测试步骤用于检测准确度。稳定性测试步骤用于检测稳定性。

附图说明

图1为本发明实施例的水产品快速检测试剂盒的筛选方法的流程图。

具体实施方式

下面根据附图1,给出本发明的较佳实施例,并予以详细描述,使能更好地理解本发明的功能、特点。

请参阅图1,本发明实施例的一种水产品快速检测试剂盒的筛选方法,包括步骤:

s1:根据待筛选的复数个水产品快速检测试剂盒的实验条件对水产品快速检测试剂盒进行分类。

其中,实验条件包括:检验周期、批量处理能力、操作简易程度和携带方便性。

检验周期为完成一个完整检测的周期。批量处理能力,是指能够同时处理多少个样品的能力。

检验周期和批量处理能力可通过水产品快速检测试剂盒的产品标识等直接获得。

操作简易程度通过实际样品检测过程中实际步骤的多少和难易程度来确定。通常操作步骤少于4个认为是简单,4步骤以上认为是复杂的。

携带方便性是指以能独立完成整个检测所需的试剂以及辅助材料所提供的完整的水产品快速检测试剂盒为基础,当水产品快速检测试剂盒的体积不超过40cm×30cm×20cm,且不需要辅助设备,能够独立完成整个检测过程,认为携带方便,否则为携带不便。辅助实验设备是指水产品快速检测试剂盒在检测的过程中需要借助的一些如离心机等辅助实验设备。

s2:测试各水产品快速检测试剂盒的多个性能,获得与各性能对应的多组检测结果。

其中,性能包括灵敏度、实际阳性样品检出率、特异性、准确度和稳定性,s2步骤进一步包括:一灵敏度测试步骤、一实际阳性样品检出率测试步骤、一特异性测试步骤、一准确度测试步骤和一稳定性测试步骤。

灵敏度测试步骤中:以当前水产品快速检测试剂盒的检出限作为加标浓度,对多个第一阴性样品加标进行一第一定性检测,在第一定性检测中以检测结果为阳性即判定为合格,否则为不合格,统计检测结果阳性样品数与实际检出限加标样品数的比值计算灵敏度,通过一公式(1)计算获得灵敏度:

其中,第一实测阳性样品数为第一定性检测中检测为阳性的样品数量;实际加标样品数等于第一阴性样品的总数。

同时,可以水产品质量安全监督管理规定中的药物残留限量值作为参考浓度;检出限达到药物残留限量值即为合格,达不到限量值要求的应根据其所使用的目的确定是否适用。

在实际阳性样品检出率测试步骤中:对多个第一阳性样品进行一第二定性检测,通过一公式(2)计算获得实际阳性样品检出率:

其中,第二实测阳性样品数为第二定性检测中检测为阳性的样品数;第一阳性样品数为第一阳性样品的总数。

在实际阳性样品检出率测试步骤中,与实际阳性样品检出率一致的判定为合格,不一致的判定为不合格。

在特异性测试步骤中:对多个特异性检测样品进行一第三定性检测,通过一公式(3)计算获得特异性:

其中,特异性检测样品数为特异性检测样品的总数,假阳性样品数为第三定性检测中检测为阳性的样品数。

在特异性测试步骤中,以检测结果与实际样品一致的判定为合格,否则为不合格,统计检测结果合格数与特异性检测样品数的比值来评价试剂盒的特异性大小。

在准确度测试步骤中:对多个第二阳性样品和多个第二阴性样品进行一第四定性检测,通过一公式(4)计算获得准确度:

其中,真阴性数为第二阴性样品在第四定性检测中检测为阴性的样品数量;真阳性数为第二阳性样品在第四定性检测中检测为阳性的样品数量;样品总数等于第二阳性样品数量与第二阴性样品数量之和。

在稳定性测试步骤中:利用多个批次的当前水产品快速检测试剂盒对相同的一样品进行灵敏度测试步骤,获得各批次当前水产品快速检测试剂盒的灵敏度,并通过公式(5)计算获得当前水产品快速检测试剂盒的稳定性系数:

其中,fs为稳定性系数,s为不同批次水产品快速检测试剂盒的灵敏度的标准差,x为灵敏度,n为批次数,为不同批次水产品快速检测试剂盒的平均灵敏度。

s3:按照一预设评分标准对检测结果进行打分,获得各水产品快速检测试剂盒的各性能的评分结果,评分结果包括一检出限评分、一灵敏度评分、一准确度评分、一特异性评分、一稳定性评分和一操作适用性评分。

其中,预设评分标准可参见表1,预设评分标准为:

当检出限小于等于一规定限量值时,检出限评分为100分;当检出限大于两倍的规定限量值且小于等于五倍的规定限量值时,检出限评分为60~80分;当检出限大于五倍的规定限量值且小于等于十倍的规定限量值时,检出限评分为30~60分;当检出限大于十倍的规定限量值时,检出限评分为0;

当灵敏度大于90%时,灵敏度评分为80~100分;当灵敏度大于75%且小于等于90%时,灵敏度评分为60~80分;当灵敏度大于50%且小于等于75%时,灵敏度评分为30~60分;当灵敏度小于等于50%时,灵敏度评分为0;

当准确度大于90%时,准确度评分为80~100分;当准确度大于75%且小于等于90%时,准确度评分为60~80分;当准确度大于60%且小于等于75%时,准确度评分为30~60分;当准确度小于等于60%时,准确度评分为0;

当特异性大于90%时,特异性评分为80~100分;当特异性大于75%且小于等于95%时,特异性评分为60~80分;当特异性大于50%且小于等于75%时,特异性评分为30~60分;当特异性小于等于50%时,特异性评分为0;

当稳定性大于95%时,稳定性评分为80~100分;当稳定性大于90%且小于等于95%时,稳定性评分为60~80分;当稳定性大于85%且小于等于90%时,稳定性评分为30~60分;当稳定性小于等于85%时,稳定性评分为0;

操作适用性评分根据水产品快速检测试剂盒的检验周期长短、批量处理能力、操作简易程度以及是否需辅助实验设备等来评价。当水产品快速检测试剂盒适合现场操作、携带方便且无需辅助设备时,操作适用性评分为80~100分;当水产品快速检测试剂盒适合现场操作、携带方便但需要辅助设备时,操作适用性评分为60~80分;当水产品快速检测试剂盒适合现场操作、但携带方便且需要辅助设备时,操作适用性评分为30~60分。

表1.评分标准表

s4:根据评分结果和一应用场景对水产品快速检测试剂盒进行筛选,获得所需的水产品快速检测试剂盒。

其中,在s4步骤中:

当应用场景为市场监控时,用于市场监控的水产品快速检测试剂盒,其目的是掌握市场准入的水产品质量安全情况,防止不合格水产品进入市场的目的,应选用准确度评分高、批量处理强和操作适用性评分高的水产品快速检测试剂盒。若市场设有检测室,也可允许使用一些需要辅助实验设备进行现场检测的水产品快速检测试剂盒产品。

当应用场景为产地现场执法时,用于产地现场执法的水产品快速检测试剂盒,其目的是要准确掌握水产品中药物残留的情况,以便现场执法。应选用灵敏度评分高、准确度评分高、稳定性评分高和操作适用性评分高的水产品快速检测试剂盒。同时试剂盒的检出限必须达到水产品中药物残留监督管理的要求。

当应用场景为企业自我监控时,用于企业自我监控的水产品快速检测试剂盒,其目的是了解水产品中药物使用的残留情况,以便更加合理地使用药物。应选用准确度评分高、操作适用性评分高和检验周期短的水产品快速检测试剂盒。

当应用场景为养殖企业苗种进货监控时,用于养殖企业苗种进货监控的水产品快速检测试剂盒,其目的是了解水产品苗种中药物残留情况,以便更加合理地选择苗种的进货渠道以及了解药物残留对水产品质量安全的影响。应选用操作适用性评分高、准确度评分高、检出限评分高和灵敏度评分高的水产品快速检测试剂盒。

以上结合附图实施例对本发明进行了详细说明,本领域中普通技术人员可根据上述说明对本发明做出种种变化例。因而,实施例中的某些细节不应构成对本发明的限定,本发明将以所附权利要求书界定的范围作为本发明的保护范围。

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