本发明属于细胞工程技术领域,一种超声引导下穿刺细胞快速固定剂组合物及其制备方法。
背景技术:
在穿刺细胞染色检测技术领域中,目前大部分医疗机构使用的是延续几十年的95%乙醇固定方法。按常规需要固定10分钟以上,随着新的临床技术的快速发展,如超声引导下的穿刺细胞学诊断,临床要求在穿刺现场马上可以得到有无穿刺到目的细胞(肿瘤细胞)的信息,以及对细胞的良恶性的准确判断。
因为超声引导下细胞穿刺需要在具有专业设备的超声或临床进行,进行细胞诊断的病理科或检验科,一般需要把穿刺涂片送去检测,这样,病人在有些部位的穿刺中需要在麻醉下等待较长时间,容易发生意外;还有,穿刺细胞不能及时固定、染色,会对准确诊断造成影响。
因此已知的穿刺细胞快速固定剂存在着上述种种不便和问题。
技术实现要素:
本发明的目的是提供一种超声引导下穿刺细胞快速固定剂组合物及其制备方法。
本发明的另一个目的是为了可以在穿刺细胞学诊断上达到快速准确。
为实现上述目的,本发明通过以下技术方案来实现:
一种超声引导下穿刺细胞快速固定剂组合物,包括以下重量百分比的组分:
细胞固定剂60~95%
低渗剂0.1~5%
溶血剂5~35%。
进一步的,一种超声引导下穿刺细胞快速固定剂组合物,包括以下重量百分比的组分:
细胞固定剂70~95%
低渗剂0.2~4%
溶血剂10~25%。
所述的细胞固定剂为乙醇,所述乙醇的浓度为15~98%。
所述的低渗剂为氯化钠和氯化钾的混合物,氯化钠与氯化钾的重量比为1~20:1~20。
所述溶血剂为盐酸和冰醋酸的一种或两种的混合物,所述盐酸含量为36~38%。
所述的氯化钠的纯度为99.5~100%,所述氯化钾的纯度为99.7~100%。
一种制备超声引导下穿刺细胞快速固定剂组合物的方法,包括以下步骤:
(1)在搅拌下将氯化钠、氯化钾粉剂加入到配制好的浓度乙醇中溶解;
(2)在步骤1的溶液中加入盐酸、冰醋酸搅拌混匀。
本发明的有益效果是:
(1)本发明的穿刺细胞快速固定剂的组合物具有可最大限度保持目的细胞形态。
(2)本发明可以在穿刺细胞学诊断上达到快速准确。
(3)本发明可以在固定的同时就消除涂片上的红细胞背景。
具体实施方式
下面结合实施例,对本发明作进一步说明:
实施例1
(1)称取50%乙醇80毫升,38%盐酸20毫升,氯化钠0.3克,氯化钾0.5克;
(2)在搅拌下将氯化钠、氯化钾粉剂加入到配制好的浓度乙醇中溶解;
(3)在步骤2的溶液中加入盐酸搅拌混匀,获得试剂1。
实施例2
(1)称取50%乙醇80毫升,38%盐酸20毫升,氯化钠0.3克,氯化钾0.5克;
(2)在搅拌下将氯化钠、氯化钾粉剂加入到配制好的浓度乙醇中溶解;
(3)在步骤2的溶液中加入盐酸搅拌混匀,获得试剂2。
实施例3
(1)称取50%乙醇80毫升,38%盐酸15毫升,冰醋酸5毫升,氯化钠0.3克,氯化钾0.5克;
(2)在搅拌下将氯化钠、氯化钾粉剂加入到配制好的浓度乙醇中溶解;
(3)在步骤2的溶液中加入盐酸、冰醋酸搅拌混匀,获得试剂3。
实施例4
(1)称取50%乙醇80毫升,冰醋酸20毫升,氯化钠0.3克,氯化钾0.5克;
(2)在搅拌下将氯化钠、氯化钾粉剂加入到配制好的浓度乙醇中溶解;
(3)在步骤2的溶液中加入冰醋酸搅拌混匀,获得试剂4。
实施例5
(1)称取50%乙醇80毫升,38%盐酸5毫升,冰醋酸15毫升,氯化钠0.3克,氯化钾0.5克;
(2)在搅拌下将氯化钠、氯化钾粉剂加入到配制好的浓度乙醇中溶解;
(3)在步骤2的溶液中加入盐酸搅拌混匀,获得试剂5。
将上述获得试剂1~5进行超声引导穿刺细胞固定实验,并以用推片的方法,按目前通用的95%酒精固定染色作为对照组。具体测试结果如下表1所示。
表1
上表中细胞形态中:
0基本不能显示细胞结构;
+细胞无明显收缩;
++细胞有可见收缩;
+++细胞收缩变形。
染色结果中:
+细胞核、浆染色模糊不清;
++细胞核、浆染色可分辨;
+++细胞核、浆染色鲜明,对比清晰。
涂片背景中:
-背景中几乎没有成型红细胞遮盖,可以迅速找到目的细胞,明确诊断。
+背景中少量成型红细胞,目的细胞没有遮盖,可以明确诊断。
++背景中有成型红细胞遮盖,一定程度上遮盖目的细胞,影响诊断。
+++背景中有大量成型红细胞堆集遮盖目的细胞,影响诊断。
有上述实验结果表明,本发明实施例可以明显减少背景中红细胞的存在,且对细胞造成的影响较小,5号试剂中50%乙醇80毫升,38%盐酸5毫升,冰醋酸15毫升,氯化钠0.3克,氯化钾0.5克,效果达到最佳,说明固定剂中同时存在盐酸和冰醋酸且冰醋酸含量大于盐酸时,固定剂达到更好的效果。
以上实施例仅供说明本发明之用,而非对本发明的限制,有关技术领域的技术人员,在不脱离本发明的精神和范围的情况下,还可以作出各种变换或变化。因此,所有等同的技术方案也应该属于本发明的范畴,应由各权利要求限定。