泽泻丹皮白芍制剂的质量检测方法与流程

本发明涉及中药质量检测，特别是涉及泽泻丹皮白芍制剂的质量检测方法。

背景技术：

近年来，随着国家经济的发展及生活水平的提高，现代人的生活节奏越来越快，压力也越来越大，如小孩学业紧张、年轻人生活不规律，上班族工作压力大等亚健康状态都容易造成免疫力下降，且随着我国老年人比例逐年增加的，身体机能下降、免疫力低下的老年人越来越多，在此形势下，用食品防治疾病已逐步成为现代人的健身手段。

泽泻丹皮白芍胶囊是具有增强免疫力功能的保健食品，有助于解决现代人亚健康及身体机能下降等问题，而目前的泽泻丹皮白芍胶囊执行的质量标准较难准确、全面的对泽泻丹皮白芍胶囊的质量进行监控。

技术实现要素：

基于此，有必要提供一种泽泻丹皮白芍制剂的质量检测方法，该质量检测方法能够准确、全面的对泽泻丹皮白芍制剂的质量进行监控，且操作简便、灵敏度高、稳定性好，能够有效控制泽泻丹皮白芍制剂生产过程中的产品质量，保证产品疗效。

一种泽泻丹皮白芍制剂的质量检测方法，该泽泻丹皮白芍制剂主要由如下重量份的原料制备而成：枸杞子提取物19-21份、白芍提取物19-21份、牡丹皮提取物14-16份、泽泻提取物10-12份；

所述质量检测方法包括：采用薄层色谱法对所述枸杞子提取物、白芍提取物和牡丹皮提取物、泽泻提取物中的一种或多种进行检测。

在其中一个实施例中，对所述枸杞子提取物进行检测的方法包括如下步骤：

取所述枸杞子提取物，加水提取，所得提取液以乙酸乙酯萃取，得供试品溶液；

取枸杞子对照药材，加水提取，所得提取液以乙酸乙酯萃取，得对照药材溶液；

分别吸取所述对照药材溶液和供试品溶液，点于同一硅胶薄层板上，以体积比为14-16：7-9：1-2的甲苯、乙酸乙酯和甲酸的混合液为展开剂展开，展开后取出、晾干，于紫外灯条件下检视即可。

在其中一个实施例中，所述供试品溶液或对照药材溶液制备过程中，所述加水提取的方法为：每克所述枸杞子提取物加水100ml或枸杞子对照药材加水70ml，加热至沸腾提取15-25min，冷却后滤过，得提取液。

在其中一个实施例中，所述紫外灯的波长为365nm。

在其中一个实施例中，对所述白芍提取物进行检测的方法包括如下步骤：

取所述白芍提取物，加乙醇提取，所得提取液蒸干后，残渣以乙醇溶解，得供试品溶液；

取芍药苷对照品，加乙醇溶解，得对照药材溶液；

分别吸取所述对照药材溶液和供试品溶液，点于同一硅胶薄层板上，以体积比为39-41:4-6:9-11:0.1-0.5的三氯甲烷、乙酸乙酯、甲醇和甲酸的混合液为展开剂展开，展开后取出、晾干，以显色剂显色至斑点清晰，检视即可。

在其中一个实施例中，所述供试品溶液制备过程中，所述加乙醇提取的方法为：每克所述白芍提取物加乙醇40ml，超声处理15-25min，滤过，得提取液。

在其中一个实施例中，所述显色剂为质量浓度为4-6％的香草醛硫酸溶液；所述显色的方法为加热。

在其中一个实施例中，对所述牡丹皮提取物进行检测的方法包括如下步骤：

取所述牡丹皮提取物，加乙醇提取，所得提取液蒸干后，残渣以乙醇溶解，得供试品溶液；

取芍药苷对照品，加乙醇溶解，得对照药材溶液；

分别吸取所述对照药材溶液和供试品溶液，点于同一硅胶薄层板上，以体积比为39-41:4-6:9-11:0.1-0.5的三氯甲烷、乙酸乙酯、甲醇和甲酸的混合液为展开剂展开，展开后取出、晾干，以显色剂显色至斑点清晰，检视即可。

在其中一个实施例中，所述供试品溶液制备过程中，所述加乙醇提取的方法为：每克所述牡丹皮提取物加乙醇20ml，超声处理25-35min，滤过，得所述提取液。

在其中一个实施例中，所述显色剂为质量浓度为4-6％的香草醛硫酸溶液；所述显色的方法为加热。

在其中一个实施例中，对所述泽泻提取物进行检测的方法包括如下步骤：

取所述泽泻提取物，加甲醇提取，所得提取液蒸干后，残渣以甲醇溶解，得供试品溶液；

取23-乙酰泽泻醇b，加甲醇溶解，得对照药材溶液；

分别吸取所述对照药材溶液和供试品溶液，点于同一硅胶薄层板上，以体积比为3-5:1-3：0.5-1.5的环己烷、乙酸乙酯和丙酮的混合液为展开剂展开，展开后取出、晾干，以显色剂显色至斑点清晰，检视即可。

在其中一个实施例中，所述供试品溶液制备过程中，所述加甲醇提取的方法为：每克所述泽泻提取物加甲醇20ml，超声处理25-35min，滤过，得提取液。

在其中一个实施例中，所述显色剂为质量浓度为0.4-0.6％的香草醛溶液，溶剂为体积比为3-5:1的硫酸和乙醇的混合液；所述显色的方法为于100-110℃加热。

在其中一个实施例中，所述质量检测方法：还包括采用薄层色谱法对所述泽泻丹皮白芍制剂进行检测：

取所述泽泻丹皮白芍制剂，加甲醇提取，所得提取液蒸干后，残渣以甲醇溶解，得供试品溶液；

取23-乙酰泽泻醇b，加甲醇溶解，得对照药材溶液；

分别吸取所述对照药材溶液和供试品溶液，点于同一硅胶薄层板上，以体积比为3-5:1-3：0.5-1.5的环己烷、乙酸乙酯和丙酮的混合液为展开剂展开，展开后取出、晾干，以显色剂显色至斑点清晰，检视即可。

在其中一个实施例中，所述供试品溶液制备过程中，所述加甲醇提取的方法为：每克所述泽泻丹皮白芍制剂加甲醇8ml，超声处理25-35min，滤过，得提取液。

在其中一个实施例中，所述显色剂为质量浓度为0.4-0.6％的香草醛溶液，溶剂为体积比为3-5:1的硫酸和乙醇混合液；所述显色的方法为于100-110℃加热。

与现有技术相比，本发明具有以下有益效果：

本发明所述泽泻丹皮白芍制剂的质量检测方法，通过合理控制检测条件，有效地对处方中的枸杞子提取物、白芍提取物和牡丹皮提取物、泽泻提取物中的一种或多种进行了薄层鉴别，可在现行标准的基础上，进一步对制备泽泻丹皮白芍制剂的原料进行鉴别，提高、完善了泽泻丹皮白芍制剂的质量标准，且该方法操作简便、灵敏度高、稳定性好，能够有效控制泽泻丹皮白芍制剂生产过程中的产品质量，保证产品疗效。

进一步地，该质量检测方法还通过大量的实验确定以23-乙酰泽泻醇b作为对照药材配合一定的展开剂体系对泽泻丹皮白芍制剂产品进行检测，结合上述原料的鉴别，能够综合完善泽泻丹皮白芍制剂的生产质量标准，保证泽泻丹皮白芍制剂的质量和疗效。

附图说明

图1为本发明一实施例泽泻丹皮白芍胶囊中的白芍提取物的薄层色谱鉴别图(其中，1：阴性对照；2：芍药苷对照品溶液；3：白芍提取物①；4：白芍提取物②；5：白芍提取物③)；

图2为图1所述泽泻丹皮白芍胶囊中的枸杞子提取物的薄层色谱鉴别图(其中，1：阴性对照；2：枸杞子对照药材溶液；3：枸杞子提取物①；4：枸杞子提取物②；5：枸杞子提取物③)；

图3为图1所述泽泻丹皮白芍胶囊中的牡丹皮提取物的薄层色谱鉴别图(其中，1：阴性对照；2：芍药苷对照品溶液；3：牡丹皮提取物①；4：牡丹皮提取物②；5：牡丹皮提取物③)；

图4为图1所述泽泻丹皮白芍胶囊中的泽泻提取物的薄层色谱鉴别图(1：阴性对照；2：23-乙酰泽泻醇b对照品溶液；3：泽泻提取物①；4：泽泻提取物②；5：泽泻提取物③)；

图5为图1所述泽泻丹皮白芍胶囊的薄层色谱鉴别图(1：阴性对照；2：23-乙酰泽泻醇b对照品溶液；3：泽泻丹皮白芍胶囊内容物①；4：泽泻丹皮白芍胶囊内容物②；5：泽泻丹皮白芍胶囊内容物③)。

具体实施方式

以下结合具体实施例对本发明的泽泻丹皮白芍制剂的质量检测方法作进一步详细的说明。

本发明实施例采用的药品与试剂：

枸杞子提取物：广东心宝药业科技有限公司，批号：z170901、z170902、z170903；

枸杞子对照药材：中国食品药品检定研究院，批号：121072-201410；

白芍提取物：广东心宝药业科技有限公司，批号：z170901、z170902、z170903；

芍药苷对照品：中国食品药品检定研究院，批号：110736-201539；

牡丹皮提取物：广东心宝药业科技有限公司，批号：z170901、z170902、z170903；

泽泻提取物：广东心宝药业科技有限公司，批号：z170901、z170902、z170903；

23-乙酰泽泻醇b：中国食品药品检定研究院，批号：111846-201504；

泽泻丹皮白芍胶囊：广东心宝药业科技有限公司，批号：z20171001、z20171002、z20171003。

实施例1

本实施例一种泽泻丹皮白芍胶囊的质量检测方法，该泽泻丹皮白芍胶囊的内容物由下列原料按照如下重量份制成：枸杞子提取物20份、白芍提取物20份、牡丹皮提取物15份、泽泻提取物11份、滑石粉2份、淀粉2份。

质量检测方法针对内容物中预计采用的枸杞子提取物、白芍提取物、牡丹皮提取物和泽泻提取物进行检测，步骤如下：

(1)白芍提取物检测：取本品0.5g，加乙醇20ml，超声处理20分钟，滤过蒸干，残渣加乙醇1ml使溶解，作为供试品溶液。另取芍药苷对照品，加乙醇制成每lml含lmg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(通则0502)试验，吸取上述两种溶液各5ul，分别点于同一硅胶g薄层板上，以三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-甲酸(体积比40：5：10：0.2)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5％香草醛硫酸溶液，加热至斑点显色清晰。如图1所示，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。

(2)枸杞子提取物检测：取本品0.5g，加水50ml，加热煮沸20分钟，放冷，滤过，滤液用乙酸乙酯20ml振摇提取，分取乙酸乙酯液，浓缩至lml，作为供试品溶液。另取枸杞子对照药材0.5g，加水35ml，加热煮沸15分钟，放冷，滤过，滤液用乙酸乙酯15ml振摇提取，分取乙酸乙酯液，浓缩至lml，作为对照药材溶液。照薄层色谱法(通则0502)试验，吸取上述两种溶液各10ul，分别点于同一硅胶g薄层板上，使成条状，以甲苯-乙酸乙酯-甲酸(体积比15：8：1.5)为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视。如图2所示，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。

(3)牡丹皮提取物检测：取本品粉末lg，加乙醇20ml，超声处理30分钟，滤过蒸干，残渣加乙醇2ml使溶解，作为供试品溶液。另取芍药苷对照品，加乙醇制成每lml含lmg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(通则0502)试验，吸取上述两种溶液各5ul，分别点于同一硅胶g薄层板上，以三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-甲酸(体积比40：5：10：0.2)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5％香草醛硫酸溶液，加热至斑点显色清晰。如图3所示，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。

(4)泽泻提取物检测：取本品粉末1g，加甲醇20ml，超声处理30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇2ml使溶解，作为供试品溶液。另取23-乙酰泽泻醇b对照品，加甲醇制成每lml含2mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(通则0502)试验l吸取上述两种溶液各4ul，分别点于同一硅胶gf254薄层板上，以环己烷-乙酸乙酯-丙酮(体积比4：2：1)为展开剂展开，取出晾干，喷0.5％香草醛硫酸-乙醇(体积比4：1)混合液，在105℃加热至斑点显色清晰。如图4所示，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。

采用实施例1的质量检测方法分别对三批(z170901、z170902、z170903)泽泻丹皮白芍胶囊的原料进行检测，薄层色谱鉴别图如图1-4所示，rf值如下所示：

图1中白芍提取物的rf值：①号:0.4、②号:0.4、③号:0.4；

图2中枸杞子提取物的rf值：①号:0.5、②号:0.5、③号:0.5；

图3中牡丹皮提取物的rf值：①号:0.4、②号:0.4、③号:0.4；

图4中泽泻提取物的rf值：①号:0.6、②号:0.6、③号:0.6。

由此可知，各检测点之间分离效果好，rf值合适，且重复性好，能够有效的从原料控制泽泻丹皮白芍制剂的产品质量，保证产品疗效。

实施例2

本实施例一种泽泻丹皮白芍胶囊的质量检测方法，该泽泻丹皮白芍胶囊(与实施例1同一批号)的内容物由下列原料按照如下重量份制成：枸杞子提取物20份、白芍提取物20份、牡丹皮提取物15份、泽泻提取物11份、滑石粉2份、淀粉2份。

质量检测方法针对内容物进行检测，步骤如下：

取内容物粉末5g，加甲醇40ml，超声处理30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇2ml使溶解，作为供试品溶液。另取23-乙酰泽泻醇b对照品，加甲醇制成每lm，含2mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(通则0502)试验，吸取上述两种溶液各4ul，分别点于同一硅胶gf254薄层板上，以环己烷-乙酸乙酯-丙酮(体积比4：2：1)为展开剂，展开，取出，晾干，喷0.5％香草醛硫酸-乙醇(体积比4：1)溶液，在105℃加热至斑点显色清晰。如图5所示，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。

采用实施例的质量检测方法分别对三批(z20171001、z20171002、z20171003)泽泻丹皮白芍胶囊的内容物进行检测，薄层色谱鉴别图如图5所示，rf值如下所示：

图5中泽泻丹皮白芍胶囊内容物的rf值：①号:0.5、②号:0.6、③号:0.6。

由此可见，各检测点之间分离效果好，rf值合适，且重复性好，能够有效从成品控制泽泻丹皮白芍制剂的质量，综合实施例1中的原料检测结果，能够有效保证产品疗效。

以上所述实施例的各技术特征可以进行任意的组合，为使描述简洁，未对上述实施例中的各个技术特征所有可能的组合都进行描述，然而，只要这些技术特征的组合不存在矛盾，都应当认为是本说明书记载的范围。

以上所述实施例仅表达了本发明的几种实施方式，其描述较为具体和详细，但并不能因此而理解为对发明专利范围的限制。应当指出的是，对于本领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明构思的前提下，还可以做出若干变形和改进，这些都属于本发明的保护范围。因此，本发明专利的保护范围应以所附权利要求为准。