本发明涉及测定穿心莲片中脱水穿心莲内酯含量的方法，尤其涉及一种HPLC测定穿心莲片中脱水穿心莲内酯含量的方法。
背景技术：
穿心莲片含穿心莲提取物，具清热解毒、凉血消肿之功效。临床用于邪毒内盛、感冒发热、咽喉肿痛、口舌生疮、顿咳劳嗽、泄泻痢疾、热淋涩痛、痈肿疮疡、毒蛇咬伤等。
技术实现要素：
本发明的目的旨在提供一种HPLC测定穿心莲片中脱水穿心莲内酯含量的方法。
本发明的目的通过以下技术方案来实现：一种HPLC测定穿心莲片中脱水穿心莲内酯含量的方法，包括以下步骤：
(1)制备对照品溶液：取脱水穿心莲内酯对照品与乙醇制成对照品溶液；
(2)制备待测样品溶液：精密取穿心莲片样品加乙醇稀释，制得待测样品溶液；
(3)取对照品溶液高效液相色谱仪测定，建立脱水穿心莲内酯标准曲线；
(4)取待测样品溶液注入高效液相色谱仪测定，获得脱水穿心莲内酯的峰面积，从而根据标准曲线获得脱水穿心莲内酯含量；
所述步骤(3)和(4)的色谱条件：4.6mm×150mm，5μm，Agilent Eclipse XDB-C18色谱柱；流动相：乙醇-水＝65:35；流速：1.0mL.min-1；检测双波长：254nm，进样量：10μL，柱温：室温，分离度：1.6，理论板数按脱水穿心莲内酯计大于2000。
所述步骤(1)中，取脱水穿心莲内酯对照品适量，加乙醇制成含脱水穿心莲内酯16.6μg.mL-1的对照品溶液。
所述步骤(2)中，取穿心莲片样品粉末0.05g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入乙醇25mL，密塞，称定重量，浸泡1小时，超声处理30分钟，放冷，再称定重量，用乙醇补足减失的重量，摇匀，滤过，精密量取续滤液10mL，加在中性氧化铝柱上，用乙醇20mL洗脱，收集洗脱液，置50mL量瓶中，加乙醇至刻度，摇匀，即得待测样品溶液。
与现有技术相比，本发明具有以下有益效果：
与现有技术相比，本发明提供的方法操作简单，高效省时，鉴定结果客观准确。
具体实施方式
实施例1
(1)制备对照品溶液：取脱水穿心莲内酯对照品适量，加乙醇制成含脱水穿心莲内酯16.6μg.mL-1的对照品溶液。
(2)制备待测样品溶液：取穿心莲片样品粉末0.05g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入乙醇25mL，密塞，称定重量，浸泡1小时，超声处理30分钟，放冷，再称定重量，用乙醇补足减失的重量，摇匀，滤过，精密量取续滤液10mL，加在中性氧化铝柱(300目，5g，内径1.5cm)上，用乙醇20mL洗脱，收集洗脱液，置50mL量瓶中，加乙醇至刻度，摇匀，即得待测样品溶液。
(3)分别精密吸取对照品溶液2,4,8,12,16,20μL，注入日本岛津公司LC-2010测定，以进样量(μg)为横坐标(X)，脱水穿心莲内酯峰面积为纵坐标(Y)，计算得出回归方程：Y＝21291399.94X+45524.13(r＝0.9998)。
色谱条件：4.6mm×150mm，5μm，Agilent Eclipse XDB-C18色谱柱；流动相：乙醇-水＝65:35；流速：1.0mL.min-1；检测双波长：254nm，进样量：10μL，柱温：室温，分离度：1.6，理论板数按脱水穿心莲内酯计大于2000。
(4)取待测样品溶液注入日本岛津公司LC-2010进行测定，获得脱水穿心莲内酯峰面积，根据回归方程计算得到脱水穿心莲内酯的含量。取穿心莲片样品3批分别进行测定，脱水穿心莲内酯的平均含量为48.9mg.g-1。
本发明可用其他的不违背本发明的精神或主要特征的具体形式来概述。本发明的上述实施方案都只能认为是对本发明的说明而不是限制，因此凡是依据本发明的实质技术对以上实施例所作的任何细微修改、等同变化与修饰，均属于本发明技术方案的范围内。