一种购物小票中双酚A的检测方法与流程

本发明属于双酚a检测
技术领域：
，具体涉及一种购物小票中双酚a的检测方法。
背景技术：
：目前市场上的绝大多数购物小票都是热敏纸。热敏纸是一种加工纸，它的制造工序是在原纸上涂布一层“热敏涂料”。热敏涂料含有隐色染料和显色剂，这两种物质在受热情况下会发生显色反应，在纸面上留下文字图案。在众多显色剂中，双酚a是使用最为广泛的，一方面是因为它具有价格优势，另一方面是其显色技术较为成熟。据调查，世界各国市场上流通的热敏纸小票都有不同程度的双酚a检出，检出量在10～20g/kg之间。双酚a(bpa)，又称2,2-二(4-羟基苯基)丙烷，是一种重要的化工原料，被广泛用于生产聚碳酸酯和环氧树脂材料及其制品。然而，双酚a是一种典型的外源性内分泌干扰物，研究表明，长期接触bpa的人群易患肥胖症、糖尿病、性早熟以及内分泌失调等。在食品包装领域，bpa的危害已经引起社会的重视，世界各国对食品包装容器中bpa的含量都作出了限制或禁止，特别是，我国在2011年明令禁止bpa用于婴幼儿奶瓶。但是在热敏纸购物小票上，bpa潜在的健康威胁还没有引起广泛关注，目前尚未见有关限量标准或公告。考虑到消费者会频繁接触购物小票，甚至有的儿童还以它为玩物，这些行为都可能导致bpa经皮肤进入人体，危害人们的健康。因此，有必要建立一种适合购物小票中bpa的检测方法，为以后监督检验提供技术支撑。检测双酚a的方法主要有液相色谱法，液相色谱-质谱/质谱法，酶联免疫法等。这些方法的适用对象为食品、化妆品、食品接触材料，在纸制产品上尚无应用。特别是，热敏纸购物小票中含量较高，存在选用何种提取溶剂以及直接分析提取液会造成仪器信号溢出等问题。因此目前还未有一种购物小票中双酚a的有效检测方法。技术实现要素：本发明的目的在于克服现有技术的不足之处，提供了一种购物小票中双酚a的检测方法。本发明解决其技术问题所采用的技术方案是：一种购物小票中双酚a的检测方法，包括：1)标准品的制备：双酚a标准品用甲醇制备成一系列梯度浓度的双酚a标准工作溶液；2)供试品的制备：将购物小票样品用甲醇超声提取，制备供试品溶液；3)色谱条件：色谱柱：eclipseplusc18；柱温：34～36℃；流动相：体积比6～8:2～4的甲醇-水混合液，等度洗脱；流速：0.8～1.2ml/min；进样体积：9～11μl；检测波长：激发光波长274～276nm，发射光波长304～306nm；4)按上述色谱条件测定双酚a标准工作溶液中的双酚a，以双酚a的质量浓度(x，mg/l)为横坐标，色谱峰面积(y)为纵坐标，绘制标准溶液回归曲线，得到线性方程y＝ax+b，计算出曲线的斜率a和截距b；5)按上述色谱条件测定供试品溶液中的双酚a，将色谱峰面积代入上述线性方程中，计算得到双酚a浓度。一实施例中：所述步骤1)中，标准品的制备方法为：准确称取质量分数大于99％的双酚a标准品50mg至50ml容量瓶中，用色谱级甲醇溶解并定容，配制成双酚a浓度为1g/l的储备液；准确移取储备液1ml，转移至10ml容量瓶中，用色谱级甲醇定容，配制成双酚a浓度为100mg/l的中间液；移取适量的中间液，用色谱级甲醇配制成浓度为0.1、0.2、0.5、1、2、5mg/l的系列双酚a标准工作溶液。一实施例中：所述步骤2)中，供试品的制备方法为：准确称取购物小票样品0.1g，加入10ml甲醇，漩涡混匀，室温下超声提取30min；转移上清液，剩余残渣用10ml甲醇重复超声提取一次；合并两次提取的上清液，加甲醇定容至25ml，得到提取液；移取0.25ml上述提取液于10ml容量瓶中，加甲醇定容至刻度，经孔径为0.45μm的滤膜过滤后，得到所述供试品溶液。一实施例中：所述步骤2)中，供试品溶液中双酚a的浓度为0.1～5.0mg/l。一实施例中：所述步骤1)中，采用的色谱柱的规格为5μm，4.6mm×250mm。一实施例中：所述步骤5)中，供试品溶液平行制备至少两份，进行平行测定，平行测定结果的绝对差值应不大于其算术平均值的10％，方为测试准确。一实施例中：还包括：阴性供试品的制备：将不含双酚a的a4打印纸样品，按照制备供试品的方法用甲醇超声提取，制备阴性供试品溶液；按上述色谱条件测定阴性供试品溶液。一实施例中：阴性供试品溶液平行制备至少两份，进行平行测定，平行测定结果的绝对差值应不大于其算术平均值的10％，方为测试准确。本技术方案与
背景技术：
相比，它具有如下优点：本发明提供了一种利用hplc进行购物小票中双酚a的检测方法，样品前处理简单，不需要固相萃取等步骤，且能够准确测定样品中的高含量双酚a，适于购物小票中双酚a的标准化检测工作。附图说明下面结合附图和实施例对本发明作进一步说明。图1为本发明实施例中得到的双酚a的标准工作曲线。具体实施方式下面通过实施例具体说明本发明的内容：下述实施例采用的高效液相色谱条件：系统：waters2695液相色谱仪；色谱柱：eclipseplusc18(5μm，4.6mm×250mm)；柱温：35℃；流动相：甲醇与水的体积比为7:3的甲醇-水混合液，等度洗脱；流速：1.0ml/min；进样体积：10μl；检测器：waters2475多波长荧光检测器；检测波长：激发光波长275nm，发射光波长305nm；下述实施例中，双酚a标准溶液回归曲线的绘制方法：准确称取质量分数99.5％的双酚a标准品50mg至50ml容量瓶中，用色谱级甲醇溶解并定容，配制成双酚a浓度为1g/l的储备液，置于4℃冰箱中保存；准确移取储备液1ml，转移至10ml容量瓶中，用色谱级甲醇定容，配制成双酚a浓度为100mg/l的中间液；移取适量的中间液，用色谱级甲醇配制成浓度为0.1、0.2、0.5、1、2、5mg/l的系列双酚a标准工作溶液。按上述色谱条件测定，以双酚a的质量浓度(x，mg/l)为横坐标，色谱峰面积(y)为纵坐标，绘制标准溶液回归曲线，得到线性方程y＝9.41×106x-4.46×104，线性相关系数r2＝0.9992；该标准曲线线性良好，可用于提取液中目标物的分析。实施例1取同家超市购物小票6张和a4打印纸一张(作为阴性样品)，用切纸机分别裁剪成约0.5cm×0.5cm小片，准确称取裁剪样0.1g，转移至25ml玻璃比色管中，加入10ml甲醇，漩涡混匀，室温下超声提取30min；将上层清液转移至另一25ml玻璃比色管中，剩余残渣用10ml甲醇重复超声提取一次；合并两次提取的上清液，加甲醇定容至25ml，得到提取液；移取0.25ml上述提取液于10ml棕色容量瓶中，加甲醇定容至刻度，经孔径为0.45μm的滤膜过滤后，得到供试品溶液，供高效液相色谱仪测定。按上述色谱条件测定，代入上述线性方程中，计算得到双酚a浓度。每个样品平行测定两次，阴性供试品中未检出双酚a(检出限0.01g/kg)，阳性供试品结果见表1。分析表1可知，同家超市6个平行样双酚a的平均检出浓度为10.78g/kg，平均相对标准偏差(rsd)为2.14％，表明本方法精密度良好。表1超市购物小票中双酚a含量测定结果(n＝6)进一步考察本方法的加标回收率，准确称取0.1g裁剪样三份，分别加入0.1、0.2、1.0ml的1g/l双酚a标准工作溶液作为加标样，每种加标样平行制备三份。按上述制备供试品的处理方法处理加标样，随后用液相色谱方法分析检测，按上述色谱条件测定，每个样品平行测定两次，计算加标回收率，结果见表2。由表2可知，三种加标水平的回收率88.9～109.0％，rsd在5％以下，这说明本方法准确度与精密度均较为可靠。表2加标回收率测定结果(n＝3)加标浓度(g/kg)测定浓度(g/kg)回收率(％)rsd(％)11.09109.03.4222.01100.53.16108.8988.92.23实施例2取同一商家外卖小票6张和a4打印纸一张(作为阴性样品)，用切纸机分别裁剪成约0.5cm×0.5cm小片，随后处理同实施例1。按上述色谱条件测定，阴性供试品中未检出双酚a(检出限0.01g/kg)，阳性供试品结果见表3。分析表3可知，6个平行样双酚a的平均检出浓度为11.34g/kg，平均相对标准偏差(rsd)为4.18％，精密度良好。表3外卖小票中双酚a含量测定结果(n＝6)样品加标过程及前处理步骤同实施例1，按上述色谱条件测定，每个样品平行测定两次，计算加标回收率，结果见表4。由表4可知，三种加标水平的回收率93.6～111.0％，rsd在5％以下，这说明本方法准确度与精密度均较为可靠。表4加标回收率测定结果(n＝3)加标浓度(g/kg)测定浓度(g/kg)回收率(％)rsd(％)11.02101.03.4622.22111.02.74109.3693.63.21以上所述，仅为本发明较佳实施例而已，故不能依此限定本发明实施的范围，即依本发明专利范围及说明书内容所作的等效变化与修饰，皆应仍属本发明涵盖的范围内。当前第1页12