用于在受试者中鉴别心力衰竭和肺部疾病的装置和方法与流程

文档序号:16048358发布日期:2018-11-24 11:03阅读:323来源:国知局
心力衰竭是现代医学中的一个严重问题。心脏功能受损可能导致危及生命的病症并导致患有心力衰竭的患者的不适。心力衰竭可以分别影响右心室或左心室,并且强度可以不同。分类体系最初由纽约心脏协会(newyorkheartassociation,nyha)开发。根据该分类体系,轻度心力衰竭病例被归类为i级病例。这些患者仅在极端运动时出现症状。中度病例在运动较少的情况下表现出更明显的症状(ii级和iii级),而iv级则在休息时就已表现出症状(纽约心脏协会,心脏和血管疾病,名词汇编和诊断标准(diseasesoftheheartandbloodvessels.nomenclatureandcriteriafordiagnosis),第6版,boston:little,brownandco,1964;114)。过去几年内,西方发达国家人口中心力衰竭的患病率稳步上升。此种上升的一个原因可以从平均寿命预期增加和由现代医学引起的心肌梗死后的存活率提高中看出。现今,心力衰竭的诊断主要依赖于临床症状,成像样式和生物标志物,脑钠肽(brainnatriureticpeptide,bnp)和氨基末端脑钠肽前体(amino-terminalpro-brainnatriureticpeptide,nt-probnp)。最近,已经报道了用于诊断心力衰竭和/或用于监测心力衰竭进展或消退的代谢物生物标志物(分别参见wo2011/092285和wo2013/014286)。心力衰竭的典型症状是呼吸短促(呼吸困难)。呼吸短促的诊断主要使用心电图和胸片进行。然而,呼吸短促可能具有各种非心脏原因,诸如肺部疾病。鉴于症状的潜在心脏原因,鉴别心力衰竭和肺部疾病是非常可取的。正确鉴别呼吸短促的原因使得可以开始合适的治疗措施。长期以来需要允许鉴别心力衰竭和肺部疾病的装置和方法。这些装置和方法应允许可靠的有效鉴别。因此,必须将本发明涉及的技术问题视为提供用于满足前述需要的装置和方法。所述技术问题通过权利要求和下文中表征的实施方案来解决。因此,本发明涉及一种用于在受试者中鉴别心力衰竭和肺部疾病的方法,包括以下步骤:a)在受试者的样品中测定特别是至少三种生物标志物的量;和b)比较i)如在步骤a)中测定的量与参考量或者ii)基于所述至少三种生物标志物的量的得分与参考得分,由此在受试者中鉴别心力衰竭和肺部疾病。本发明涉及一种用于在受试者中鉴别心力衰竭和肺部疾病的方法,包括以下步骤:a)在受试者的样品中测定选自表1的第1列中所示的生物标志物中的至少一种生物标志物的量;和b)比较如在步骤a)中测定的量与参考量,由此在受试者中鉴别心力衰竭和肺部疾病。本发明所述的方法包括基本上由前述步骤组成的方法或包括另外的步骤的方法。例如,所述方法可以包括测定如下文中所述的另外的标志物(诸如蛋白标志物)的量。然而,应当理解的是在优选实施方案中,所述方法是在体外或离体进行的方法,即不在人体或动物体上实施的方法。优选地,所述方法可以通过自动化辅助。如本文中所使用的短语“鉴别心力衰竭和肺部疾病”优选意指区别患有肺部疾病的受试者和患有心力衰竭的受试者。该表述优选包括区别性诊断肺部疾病和心力衰竭,甚至更优选以射血分数降低来区别性诊断肺部疾病和心力衰竭。术语“鉴别心力衰竭和肺部疾病”特别意指作为呼吸短促的原因(对于术语“呼吸短促”的解释参见下文),区分肺部疾病与心力衰竭。因此,应评估受试者的呼吸短促是由肺部疾病引起还是由心力衰竭引起。如本领域技术人员将理解的,这种评估虽然是优选的,但是通常不是对100%的研究受试者都是正确的。然而,该术语要求可以正确地评估统计学上显著的部分的受试者,并因此进行鉴别。本领域技术人员可以使用各种公知的统计评价工具在毫不费力的情况下确定一个部分是否是统计学上显著的,例如,确定置信区间、p值确定、斯氏t检验、mann-whitney检验等。细节见于dowdy和wearden,statisticsforresearch,johnwiley&sons,newyork1983。优选的置信区间为至少50%、至少60%、至少70%、至少80%、至少90%或至少95%。p值优选为0.2以下、0.1以下或0.05以下。优选地,鉴别是基于在本发明的方法中测定的生物标志物,即基于如本发明的方法的步骤a)中具体提及的至少三种生物标志物,并且如果进行测定,则基于nt-probnp或bnp。在一个实施方案中,本文中提及的鉴别可以包括另外的步骤,诸如鉴别的验证。因此,本文中提及的鉴别优选应促使鉴别心力衰竭和肺部疾病。如本文中所使用的术语“受试者”涉及动物,并且优选涉及哺乳动物。更优选地,受试者是灵长类动物,并且最优选是人。受试者可以是雌性受试者,或者特别是雄性受试者。优选地,待测试的受试者被怀疑患有心力衰竭或肺部疾病。怀疑患有心力衰竭或肺部疾病的受试者优选患有呼吸短促(本文中也称为呼吸困难)。在优选的实施方案中,呼吸短促是慢性呼吸短促。在另一个优选的实施方案中,呼吸短促是急性呼吸短促。因此,考虑待测试的受试者患有呼吸短促。因此,本发明涉及一种用于在患有呼吸短促的受试者中鉴别心力衰竭和肺部疾病的方法。特别地,作为呼吸短促的原因,鉴别心力衰竭和肺部疾病。术语“呼吸短促”是本领域中公知的。如本文中所使用的,该术语优选是指呼吸受损。优选地,呼吸受损导致呼吸量升高和/或呼吸频率升高。这是呼吸不适的主观体验,其包括在强度上变化的定性不同的感觉。不同的感觉包括例如胸闷和空气饥。在氧饱和度水平低于至少95%的正常氧饱和度水平时,可以发生呼吸短促。呼吸短促可以导致过度换气。如上所述,呼吸短促涵盖急性呼吸短促和慢性呼吸短促。急性呼吸急促优选是非永久性发生的呼吸短促,而慢性呼吸短促优选是持续发生的呼吸短促。急性呼吸短促通常会逐渐恶化。优选地,急性呼吸短促从急性发作起持续不超过一周,而慢性呼吸困难的特征在于持续超过一周的时间,特别是超过一个月。优选地,受试者是成人。更优选地,受试者的年龄大于40岁,并且最优选年龄大于50岁。另外,可以设想受试者的年龄大于54岁,但是年龄小于61岁。在一个实施方案中,受试者的年龄大于54岁,特别是年龄大于60岁,或者甚至年龄大于70岁。在另一个实施方案中,受试者的体重指数(bmi)大于26.8kg/m2,特别是大于28.0kg/m2,或者甚至大于30.0kg/m2。然而,优选地,受试者除前述疾病和病症以外似乎是健康的。同样优选地,受试者在取样之前的最后4个月内不应患有中风(卒中)、心肌梗死,或者不应患有急性或慢性炎性疾病和恶性肿瘤。此外,在取样之前的最后4周内,受试者优选处于稳定药物治疗中。在优选的实施方案中,待测试的受试者不患有肾功能受损。然而,还考虑受试者患有肾功能受损。可以评估肾功能,例如通过测定肾小球滤过率(gfr)。优选地,如果gfr低于60ml/min/1.73m2,或特别是低于50ml/min/1.73m2,则受试者患有肾功能受损。优选地,如果gfr高于60ml/min/1.73m2,或特别是高于70ml/min/1.73m2,则受试者不患有肾功能受损。更优选地,没有患有肾病受损的受试者不患有慢性肾病第3至5期(对于分类,参见例如国家肾脏基金会,2002年,k/doqi慢性肾病临床实践指南:评估、分类和分层(nationalkidneyfoundation,2002.k/doqiclinicalpracticeguidelinesforchronickidneydisease:evaluation,classification,andstratification),am.j.kidneydis.39,s1–266,其通过引用整体结合于此)。gfr可以通过血液和尿液中物质的比较测量来精确计算,或者仅使用血液测试结果通过公式估算(egfr)。通常这些估算用于临床实践中,特别是在难以获得可靠尿液收集的老年人和患病患者中。这些测试对于评估肾脏的排泄功能是重要的,例如在慢性肾功能不全的分级中是重要的。通过大型临床研究,egfr与gfr相关(国家肾脏基金会(2002年2月).“k/doqi慢性肾病临床实践指南:评估、分类和分层”,americanjournalofkidneydiseases39(2suppl1):s1–266.doi:10.1016/s0272-6386(02)70081-4.pmid11904577)。对于临床评估,egfr和gfr的量表可以互换使用。术语“肺部疾病”是技术人员所公知的。如本文中所使用的,该术语是指任何类型的肺病。特别地,该术语是指引起呼吸短促的任何类型的肺病。这种疾病是本领域中公知的。优选地,术语肺部疾病包括copd(慢性阻塞性肺病)、肺纤维化、哮喘、气胸、肺部感染、急性呼吸窘迫综合征、肺水肿、肺损伤或出血、呼吸衰竭和肺栓塞。特别地,该术语包括copd、哮喘和肺纤维化。术语“心力衰竭”是本领域中公知的。如本文中所使用的,其涉及心脏功能受损。它是一种进行性疾病,其中心脏不能以足以满足组织代谢需要的速率泵送含氧血液。优选地,如本文所使用的术语心力衰竭涉及充血性心力衰竭(chf)。心力衰竭是许多心血管疾病的最后常见阶段,并且被定义为临床综合症,其中最后阶段的患者显示由心脏结构或功能的异常导致的心力不耐受和/或体液潴留的典型体征和症状。如上所述,心力衰竭的典型症状是呼吸短促。心脏功能受损可以是收缩功能障碍,导致来自心脏的血液的射血分数显著降低,并且因此血流量减少。具体地,收缩性心力衰竭的特征在于显著降低的左心室射血分数(lvef),优选地,射血分数小于50%(射血分数降低的心力衰竭,hfref)。备选地,受损可以是舒张功能障碍,即心室不能适当地舒张。后者通常伴有较硬的心室壁。舒张功能障碍导致心室充盈不充分,并且因此通常导致血流的后果。因此,舒张功能障碍也导致舒张末期压力升高,并且最终结果与收缩功能障碍(左心衰竭中的肺水肿,右心衰竭中的外周水肿)的情况相当。因此,心力衰竭可以影响右心(肺循环)、左心(体循环)或两者。用于测量心脏功能受损并因此测量心力衰竭的技术是本领域中公知的,并且包括超声心动图、电生理学、血管造影术。应当理解,心脏功能受损可以永久地发生或仅在某些压力或运动条件下发生。取决于症状的强度,心力衰竭可以如本文中其它地方所述进行分类。心力衰竭的典型症状包括呼吸困难、胸痛、头晕、意识模糊、肺部和/或外周水肿。应当理解,症状的发生及其严重程度可以取决于心力衰竭的严重程度以及心力衰竭的特征和原因(收缩性或舒张性或限制性(即右心或左心位置的心力衰竭))。心力衰竭的其它症状是本领域中公知的,并且在医学的标准教科书中描述,例如stedman或brunnwald。基于左心室射血分数(lvef)的测量,描述了具有不同病理生理学的两个心力衰竭子集,所述左心室射血分数是每次心跳推出的左心室血液总量的百分比:左心室射血分数降低的心力衰竭(hfref)和左心室射血分数保持的心力衰竭(hfpef)。优选地,术语心力衰竭包括hfpef和hfref两者。在本发明的一个优选实施方案中,心力衰竭是hfref。hfref,也称为收缩性心力衰竭,其特征在于心肌收缩减少和左心室排空。表述“左心室射血分数降低”优选涉及低于50%的左心室射血分数(lvef)。虽然hfref的原因很多,但是最常见的是与冠状动脉疾病和陈旧性(prior)心肌梗死引起的缺血性心肌病有关。当冠状动脉狭窄或阻塞限制血流和氧气供应到心脏组织、破坏或削弱心肌(功能性心肌损失)时,发生缺血性心肌病(icmp)。此外,hfref可以具有非缺血性原因。hfref最常见的非缺血性原因之一是扩张性心肌病(dcmp,也称为扩张型心肌病)。dcmp是这样的一种病症,其中心脏的泵血能力降低,因为心脏的主要泵室左心室扩大、扩张和削弱。dcmp的原因可以从心肌感染(心肌炎)、高血压、心脏瓣膜疾病和酒精滥用到家族性(遗传)形式变化。优选地,术语nicmp(非缺血性心肌病)和dcmp在本文中可互换使用。因此,患有hfref的受试者可能患有扩张性心肌病(dcmp,通常也称为扩张型心肌病)或缺血性心肌病(icmp)。因此,术语hfref优选还涵盖icmp和dcmp。患有icmp的受试者优选具有降低的lvef和超过50%的冠状动脉狭窄。患有dcmp的受试者优选具有降低的lvef和低于50%的冠状动脉狭窄。特别地,患有dcmp的受试者优选具有降低的lvef、小于50%的冠状动脉狭窄和>55mm的左心室壁厚度。此外,患有dcmp的受试者可以具有降低的lvef、小于50%的冠状动脉狭窄和大于55mm的左心室舒张末期直径。心力衰竭的症状是本领域中公知的并且如上所述。无症状性心力衰竭优选是nyhai级的心力衰竭。患有nyhai级的心力衰竭的受试者没有身体活动的限制,并且普通的身体活动不会引起过度的呼吸困难、疲劳或心悸。症状性心力衰竭优选是nyhaii、iii和/或vi级的心力衰竭,特别是nyhaii级和/或iii级的心力衰竭。患有nyhaii级或iii级的心力衰竭的受试者具有轻微(nyhaii级)或明显(nyhaiii级)的身体活动限制,在休息时感觉舒适但普通(nyhaii级)或低于普通(nyhaiii级)的身体活动导致过度的呼吸短促、疲劳或心悸。通过执行本发明方法的步骤,还可以评估受试者中的呼吸短促是否由其它原因引起的心力衰竭引起。在这种情况下,其它原因包括肺部疾病、肥胖、高体重、受试者的未训练或训练不良的身体状况、诸如焦虑状态的心理状况。基于在患有呼吸短促的受试者的样品中测定本文中提及的生物标志物的量,可以评估受试者是否患有心力衰竭。如果受试者患有心力衰竭,则心力衰竭很可能是呼吸短促的原因。如果受试者没有患心力衰竭,则呼吸短促很可能具有除心力衰竭以外的原因(诸如肺部疾病)。本发明的方法设想了测定实施例部分中表1的第1列中所示的至少一种生物标志物。特别地,本发明设想了测定至少三种生物标志物的量,即至少三种生物标志物的组合的量。本文中其它地方描述了优选的组合。如本文中所使用的术语“生物标志物”是指用作本说明书中提及的疾病或影响的指示物的分子种类。所述分子种类可以是受试者样品中发现的代谢物本身。此外,在某些情况中,生物标志物也可以是来源于所述代谢物的分子种类。在这种情况下,实际的代谢物将在样品中或在测定过程期间被化学修饰,作为该修饰的结果,化学上不同的分子种类,即分析物,将是被测定的分子种类。应当理解,在这种情况下,分析物代表实际代谢物,并且具有相同的作为相应医学病症的指示物的潜能。在本发明的一个实施方案中,如本文中其它地方所公开的,将因此测定三酰甘油酯。在本发明的一个实施方案中,如本文中其它地方所公开的,将因此测定磷脂酰胆碱。在本发明的一个实施方案中,如本文中其它地方所公开的,将因此测定神经酰胺。在本发明的一个实施方案中,如本文中其它地方所公开的,将因此测定鞘磷脂。在本发明的一个实施方案中,如本文中其它地方所公开的,将因此测定胆固醇酯。优选地,根据本发明测定的至少三种生物标志物是代谢物生物标志物(除作为肽/蛋白质标志物的另外的标志物bnp和nt-probnp以外,参见下文)。术语“代谢物”是本领域中公知的。优选地,本发明的代谢物是小分子化合物。在本发明的方法中,应该测定表1的第1列中所示的至少一种生物标志物的量。特别地,至少应该测定至少三种生物标志物的量(即,至少三种代谢物生物标志物的量)。如本文中所使用的术语“至少三种生物标志物”意指三种或多于三种。因此,可以测定三种、四种、五种、六种、七种、八种、九种、十种或甚至更多种生物标志物的量(并且与参考进行比较)。优选地,测定三种至十种生物标志物(特别是代谢物生物标志物)的量(并且与参考进行比较)。优选地,待测定的生物标志物是脂类生物标志物(是脂类代谢物生物标志物)。因此,生物标志物优选是代谢物生物标志物(即,脂类生物标志物)。更优选地,待测定的生物标志物选自由以下组成的组:至少一种鞘磷脂生物标志物、至少一种三酰甘油酯生物标志物、至少一种胆固醇酯生物标志物、至少一种磷脂酰胆碱生物标志物和/或至少一种神经酰胺生物标志物。因此,本发明的方法设想了测定一种或多种鞘磷脂生物标志物、一种或多种三酰甘油酯生物标志物、一种或多种胆固醇酯生物标志物、一种或多种磷脂酰胆碱生物标志物和/或一种或多种神经酰胺生物标志物。此外,可以测定谷氨酸的量。在一个实施方案中,可以测定以下的量:i)至少一种鞘磷脂生物标志物、ii)至少一种三酰甘油酯生物标志物、和iii)至少一种胆固醇酯生物标志物或至少一种磷脂酰胆碱生物标志物。待测定的至少三种生物标志物优选属于以上提及的不同化合物类别中的至少三种。例如,至少三种生物标志物中的一种是三酰甘油酯生物标志物,一种是鞘磷脂生物标志物,并且一种是胆固醇酯生物标志物。然而,还可以设想至少三种生物标志物属于单一的化合物类别,或者属于两种化合物类别。另外,可以测定选自表1的第1列中所示的生物标志物的至少一种生物标志物的量,并且与参考量比较用于鉴别心力衰竭和肺部疾病。例如,可以测定sm23或oss2的量。另外,可以测定这两个标志物的量,即sm23和oss2的量。实施例部分的表1的第1列中公开了根据本发明测定的优选生物标志物。因此,至少一种三酰甘油酯生物标志物优选选自由oss2、sop2、spp1、ssp2、sss、ppo1和ppp组成的组,更优选选自由oss2、sop2、spp1、ssp2、ppo1和ppp组成的组,甚至更优选选自由oss2、sop2、spp1、ssp2和ppo1组成的组,特别是oss2和sop2,并且最优选oss2。优选地,测定一种、两种或三种或者更多种三酰甘油酯生物标志物。至少一种鞘磷脂生物标志物优选选自由以下组成的组:sm10、sm18、sm2、sm21、sm23、sm24、sm28、sm29、sm3、sm5、sm8和sm9(特别是选自sm10、sm18、sm21、sm23、sm24和sm28)。更优选地,至少一种鞘磷脂生物标志物选自由以下组成的组:sm23、sm24和sm18。甚至更优选地,至少一种鞘磷脂生物标志物是sm18或sm24,并且最优选sm23。优选地,测定一种、两种、三种、四种或者更多种鞘磷脂生物标志物。至少一种神经酰胺生物标志物优选选自由以下组成的组:cer(d16:1/24:0)、cer(d17:1/24:0)、cer(d18:1/23:0)、cer(d18:1/24:1)和cer(d18:2/24:0)。优选地,测定一种或两种或者更多种神经酰胺生物标志物的量。更优选地,至少一种神经酰胺生物标志物选自由以下组成的组:cer(d16:1/24:0)和cer(d18:1/24:1)。甚至更优选地,至少一种神经酰胺生物标志物是cer(d16:1/24:0)。至少一种磷脂酰胆碱生物标志物优选是pc4或pc8。优选地,测定一种磷脂酰胆碱生物标志物的量,特别是pc4的量。然而,还可以设想测定这两种生物标志物pc4和pc8。至少一种胆固醇酯生物标志物优选是胆固醇酯c18:0或胆固醇酯c18:2。优选地,测定一种胆固醇酯生物标志物的量,特别是胆固醇酯c18:2的量。然而,还可以设想测定这两种胆固醇酯c18:0和胆固醇酯c18:2。优选地,胆固醇酯生物标志物不是胆固醇酯c18:1。因此,本发明方法的步骤a)中提及的生物标志物优选选自由以下组成的生物标志物的组:oss2、sop2、spp1、ssp2、sss、ppo1、ppp、sm10、sm18、sm2、sm21、sm23、sm24、sm28、sm29、sm3、sm5、sm8、sm9、cer(d16:1/24:0)、cer(d17:1/24:0)、cer(d18:1/23:0)、cer(d18:1/24:1)、cer(d18:2/24:0)、pc4、pc8、胆固醇酯c18:0、胆固醇酯c18:2和谷氨酸。前述生物标志物是代谢物生物标志物。如果测定至少一种生物标志物的量,则生物标志物优选选自sm23、pc4、oss2和胆固醇酯c18:2。特别地,测定sm23或oss2的量(并且与参考进行比较)。另外,可以设想测定sm23和oss2的量。生物标志物定义根据本发明,应该测定至少一种代谢物生物标志物的量,特别是至少三种代谢物生物标志物的量,所述生物标志物选自由以下组成的组:oss2、sop2、spp1、ssp2、sss、ppo1、ppp、sm10、sm18、sm2、sm21、sm23、sm24、sm28、sm29、sm3、sm5、sm8、sm9、cer(d16:1/24:0)、cer(d17:1/24:0)、cer(d18:1/23:0)、cer(d18:1/24:1)、cer(d18:2/24:0)、pc4、pc8、胆固醇酯c18:0、胆固醇酯c18:2和谷氨酸。实施例部分的表1中提供了这些生物标志物的优选定义。因此,生物标志物优选定义如下:三酰甘油酯(tag)生物标志物生物标志物oss2、sop2、spp1、ssp2、sss、ppo1和ppp是三酰甘油酯(tag:三酰甘油酯)。·oss2是tag(c18:1,c18:0,c18:0)·ppo1是tag(c16:0,c16:0,c18:1)·ppp是tag(c16:0,c16:0,c16:0)·sop2是tag(c18:0,c18:1,c16:0)·spp1是tag(c18:0,c16:0,c16:0)·ssp2是tag(c18:0,c18:0,c16:0)·sss是tag(c18:0,c18:0,c18:0)三酰甘油酯tag(cx1:y1,cx2:y2,cx3:y3)优选表示为意指三酰甘油酯包含三个脂肪酸酯残基,其中一个脂肪酸酯残基是cx1:y1,其表示该残基包含x1个碳原子和y1个双键,其中一个脂肪酸酯残基是cx2:y2,其表示该残基包含x2个碳原子和y2个双键,并且其中一个脂肪酸酯是cx3:y3,其表示该残基包含x3个碳原子和y3个双键。优选地,这些脂肪酸酯残基中的任一个可以与甘油的任何之前的羟基相连。例如,sop2包含三个脂肪酸酯残基,其中一个脂肪酸酯残基是c18:0,其表示该残基包含18个碳原子和0个双键,其中一个脂肪酸酯残基是c18:1,其表示该残基包含18个碳原子和1个双键,并且其中一个脂肪酸酯残基是c16:0,其表示该残基包含16个碳原子和0个双键。优选地,这些脂肪酸酯残基中的任一个可以与甘油的任何之前的羟基相连。神经酰胺(cer)生物标志物生物标志物cer(d16:1/24:0)、cer(d17:1/24:0)、cer(d18:1/23:0)、cer(d18:1/24:1)和cer(d18:2/24:0)是神经酰胺。神经酰胺cer(dx1:y1/x2:y2)优选表示为意指神经酰胺包含:“鞘氨醇-主链”dx1:y1,其中x1表示碳原子的数量并且y1表示双键的数量,以及“脂肪酸酰胺”残基x2:y2,其中x2表示碳原子的数量并且y2表示其双键的数量。优选地,“d”表示主链包含两个羟基。·cer(d16:1/24:0)是神经酰胺(d16:1/24:0)·cer(d17:1/24:0)是神经酰胺(d17:1/24:0)·cer(d18:1/23:0)是神经酰胺(d18:1/23:0)·cer(d18:1/24:1)是神经酰胺(d18:1/24:1)·cer(d18:2/24:0)是神经酰胺(d18:2/24:0)例如,神经酰胺cer(d16:1/24:0)优选表示为意指神经酰胺包含“鞘氨醇-主链”d16:1,其包含16个碳原子和1个双键,并且“脂肪酸酰胺”残基24:0包含24个碳原子和0个双键。鞘磷脂(sm)生物标志物sm是鞘磷脂的缩写。如下所述,通过测定样品中单一鞘磷脂种类的量,或者通过测定具有相同或基本上相同的分子量的两个(或甚至三个)鞘磷脂种类的总量,可以测量鞘磷脂生物标志物sm10、sm18、sm2、sm21、sm23、sm24、sm5和sm9的量(参见实施例部分中的表1)。例如,对于sm10,可以测定鞘磷脂(d18:1/18:0)的量,或者鞘磷脂(d18:1/18:0)和鞘磷脂(d16:1/20:0)的总量。是否测量单一种类的量或两个(或三个)种类的量可以取决于用于测定的测定法。例如,如果测定步骤(步骤a)的测定法允许测定单一种类,则测定单一种类的量。如果测定步骤的测定法仅允许测定两个(或三个)种类的总量(而不是用于测定单一种类),换言之所述测定法不能区分测定两个(或三个)种类中每一个的量,则可以测定两个(或三个)种类的总量。例如,如果测定生物标志物的量包括质谱,则测定生物标志物的量是优选基于质谱中两个(或三个)种类的单峰,因为这些种类的峰重叠了。本领域技术人员将其考虑在内。如下文所述(或在表1中),测定单一种类和测定两个(或三个)种类应该允许可靠的鉴别。此外,测定具有相同分子量的两个(或三个)种类的总量是较不复杂的(与测定单一种类相比)。这同样适用于pc8的测定(参见下文)。在实施例部分的表1中,列出了sm10、sm18、sm2、sm21、sm23、sm24、sm5和sm9的优选的鞘磷脂种类(在该表中种类被称为“分析物”)。对于sm10、sm2、sm24、sm5和sm9,列出了两个分析物(分析物1和分析物2)。所述生物标志物优选是指分析物2(例如,对于sm2:sm(d16:1/16:0)),更优选分析物1(例如,对于sm2:sm(d18:1/14:0)),并且最优选分析物1和2(对于sm2:鞘磷脂(d18:1/14:0)和鞘磷脂(d16:1/16:0))。因此,对于表1中列出的两个种类的生物标志物是分析物1、分析物2或者分析物1和分析物2的组合。因此,优选通过测定分析物2的量,或者更优选通过测定分析物1的量,并且最优选通过测定分析物1和分析物2的组合量(由此的总量),来测定所述生物标志物的量。因此,所述生物标志物的量是分析物1或2的量,或者分析物1和2的量的总和。这同样适用于pc8。对于生物标志物sm18、sm21和sm23,列出了三个分析物(分析物1、2和3)。所述生物标志物优选是指分析物3,更优选分析物2,甚至更优选分析物1,并且最优选分析物1、2和3。因此,对于表1中列出的三个种类的生物标志物是分析物1、分析物2或分析物3或者分析物1、分析物2和分析物3的组合。如果对于生物标志物列出两个分析物(分析物1和分析物2),则可以设想生物标志物是分析物1。备选地,生物标志物可以是分析物2。如果对于生物标志物列出三个分析物(分析物1、分析物2和分析物3),则可以设想生物标志物是分析物1。备选地,生物标志物可以是分析物2。同样,生物标志物可以是分析物3。备选地,生物标志物可以是分析物1和分析物2的组合。备选地,生物标志物可以是分析物1和分析物3的组合。备选地,生物标志物可以是分析物2和分析物3的组合。备选地,生物标志物可以是分析物1、分析物2和分析物3的组合。因此,优选通过测定分析物3的量,或者更优选通过测定分析物2的量,甚至更优选通过测定分析物1的量,并且最优选通过测定分析物1、分析物2和分析物3的组合量(由此的总量),来测定所述生物标志物的量。因此,所述生物标志物的量是分析物1、2或3的量,或者分析物1、2和3的量的总和。以下特别适用:生物标志物sm10优选是指鞘磷脂(d18:1/18:0),或者更优选鞘磷脂(d18:1/18:0)和鞘磷脂(d16:1/20:0)。因此,生物标志物sm10是鞘磷脂(d18:1/18:0),或者鞘磷脂(d18:1/18:0)和鞘磷脂(d16:1/20:0)的组合。因此,优选通过测定鞘磷脂(d18:1/18:0)的量或通过测定鞘磷脂(d18:1/18:0)和鞘磷脂(d16:1/20:0)的组合量(由此的总量)来测定sm10的量。因此,sm10的量是鞘磷脂(d18:1/18:0)的量,或者鞘磷脂(d18:1/18:0)和鞘磷脂(d16:1/20:0)的量的总和。生物标志物sm18优选是指鞘磷脂(d18:1/21:0),或者更优选鞘磷脂(d18:1/21:0)、鞘磷脂(d16:1/23:0)和鞘磷脂(d17:1/22:0)。因此,生物标志物sm18是鞘磷脂(d18:1/21:0),或者鞘磷脂(d18:1/21:0)、鞘磷脂(d16:1/23:0)和鞘磷脂(d17:1/22:0)的组合。因此,优选通过测定鞘磷脂(d18:1/21:0)的量或通过测定鞘磷脂(d18:1/21:0)、鞘磷脂(d16:1/23:0)和鞘磷脂(d17:1/22:0)的组合量(由此的总量)来测定sm18的量。因此,sm18的量是鞘磷脂(d18:1/21:0)的量,或者鞘磷脂(d18:1/21:0)、鞘磷脂(d16:1/23:0)和鞘磷脂(d17:1/22:0)的量的总和。生物标志物sm2优选是指鞘磷脂(d18:1/14:0),或者更优选鞘磷脂(d18:1/14:0)和鞘磷脂(d16:1/16:0)。因此,生物标志物sm2是鞘磷脂(d18:1/14:0),或者鞘磷脂(d18:1/14:0)和鞘磷脂(d16:1/16:0)的组合。因此,优选通过测定鞘磷脂(d18:1/14:0)的量或通过测定鞘磷脂(d18:1/14:0)和鞘磷脂(d16:1/16:0)的组合量(由此的总量)来测定sm2的量。因此,sm2的量是鞘磷脂(d18:1/14:0)的量,或者鞘磷脂(d18:1/14:0)和鞘磷脂(d16:1/16:0)的量的总和。生物标志物sm21优选是指鞘磷脂(d17:1/23:0),或者更优选鞘磷脂(d17:1/23:0)、鞘磷脂(d18:1/22:0)和鞘磷脂(d16:1/24:0)。因此,生物标志物sm21是鞘磷脂(d17:1/23:0),或者鞘磷脂(d17:1/23:0)、鞘磷脂(d18:1/22:0)和鞘磷脂(d16:1/24:0)的组合。因此,优选通过测定鞘磷脂(d17:1/23:0)的量或通过测定鞘磷脂(d17:1/23:0)、鞘磷脂(d18:1/22:0)和鞘磷脂(d16:1/24:0)的组合量(由此的总量)来测定sm21的量。因此,sm21的量是鞘磷脂(d17:1/23:0)的量,或者鞘磷脂(d17:1/23:0)、鞘磷脂(d18:1/22:0)和鞘磷脂(d16:1/24:0)的量的总和。生物标志物sm23优选是指鞘磷脂(d18:1/23:1),或者更优选鞘磷脂(d18:1/23:1)、鞘磷脂(d18:2/23:0)和鞘磷脂(d17:1/24:1)。因此,生物标志物sm23是鞘磷脂(d18:1/23:1),或者鞘磷脂(d18:1/23:1)、鞘磷脂(d18:2/23:0)和鞘磷脂(d17:1/24:1)的组合。另外,在另一个实施方案中,可以设想sm23是鞘磷脂(d17:1/24:1)。因此,优选通过测定鞘磷脂(d18:1/23:1)的量或通过测定鞘磷脂(d18:1/23:1)、鞘磷脂(d18:2/23:0)和鞘磷脂(d17:1/24:1)的组合量(由此的总量)来测定sm23的量。因此,sm23的量是鞘磷脂(d18:1/23:1)的量,或者鞘磷脂(d18:1/23:1)、鞘磷脂(d18:2/23:0)和鞘磷脂(d17:1/24:1)的量的总和。另外,在另一个实施方案中,可以设想通过测定鞘磷脂(d17:1/24:1)的量来测定sm23的量。在一个实施方案中,生物标志物sm23优选是指鞘磷脂(d18:2/23:0)。因此,在所述实施方案中,优选通过测定鞘磷脂(d18:2/c23:0)的量来测定生物标志物sm23。生物标志物sm24优选是指鞘磷脂(d18:1/23:0),或者更优选鞘磷脂(d18:1/23:0)和鞘磷脂(d17:1/24:0)。因此,生物标志物sm24是鞘磷脂(d18:1/23:0),或者鞘磷脂(d18:1/23:0)和鞘磷脂(d17:1/24:0)的组合。因此,优选通过测定鞘磷脂(d18:1/23:0)的量或通过测定鞘磷脂(d18:1/23:0)和鞘磷脂(d17:1/24:0)的组合量(由此的总量)来测定sm24的量。因此,sm24的量是鞘磷脂(d18:1/23:0)的量,或者鞘磷脂(d18:1/23:0)和鞘磷脂(d17:1/24:0)的量的总和。优选地,生物标志物sm28是鞘磷脂(d18:1/24:0)。优选地,生物标志物sm29是鞘磷脂(d18:2/17:0)。优选地,生物标志物sm3是鞘磷脂(d17:1/16:0)。生物标志物sm5优选是指鞘磷脂(d18:1/16:0),或者更优选鞘磷脂(d18:1/16:0)和鞘磷脂(d16:1/18:0)。因此,生物标志物sm5是鞘磷脂(d18:1/16:0),或者鞘磷脂(d18:1/16:0)和鞘磷脂(d16:1/18:0)的组合。因此,优选通过测定鞘磷脂(d18:1/16:0)的量或通过测定鞘磷脂(d18:1/16:0)和鞘磷脂(d16:1/18:0)的组合量(由此的总量)来测定sm5的量。因此,sm5的量是鞘磷脂(d18:1/16:0)的量,或者鞘磷脂(d18:1/16:0)和鞘磷脂(d16:1/18:0)的量的总和。优选地,生物标志物sm8是鞘磷脂(d18:2/18:1)。生物标志物sm9优选是指鞘磷脂(d18:1/18:1),或者更优选鞘磷脂(d18:1/18:1)和鞘磷脂(d18:2/18:0)。因此,生物标志物sm9是鞘磷脂(d18:1/18:1),或者鞘磷脂(d18:1/18:1)和鞘磷脂(d18:2/18:0)的组合。因此,优选通过测定鞘磷脂(d18:1/18:1)的量或通过测定鞘磷脂(d18:1/18:1)和鞘磷脂(d18:2/18:0)的组合量(由此的总量)来测定sm9的量。因此,sm9的量是鞘磷脂(d18:1/18:1)的量,或者鞘磷脂(d18:1/18:1)和鞘磷脂(d18:2/18:0)的量的总和。如上所述,本发明基于至少三种生物标志物的量。在这种情况下,需要注意的是sm10、sm18、sm2、sm21、sm23、sm24、sm5和sm9以及pc8被认为是单一生物标志物,无论这些生物标志物的测定是否基于单一、两个(或三个)种类的测定。因此,需要测定至少两种另外的生物标志物。鞘磷脂sm(dx1:y1/x2:y2)优选表示为意指鞘磷脂包含:“鞘氨醇-主链”dx1:y1,其中x1表示碳原子的数量并且y1表示双键的数量,以及“脂肪酸酰胺”残基x2:y2,其中x2表示碳原子的数量和y2表示其双键的数量。鞘磷脂(d18:2/18:0)优选表示为意指鞘磷脂包含:“鞘氨醇-主链”d18:2,其包含18个碳原子和2个双键,以及“脂肪酸酰胺”残基18:0,其包含18个碳原子和0个双键。胆固醇酯(ce)生物标志物ce是胆固醇酯的缩写。根据本发明,考虑测定两个不同的胆固醇酯,即胆固醇酯c18:0和/或胆固醇酯c18:2。生物标志物是本领域中公知的。胆固醇酯(cx1:y1)优选表示为意指胆固醇酯包含脂肪酸酯残基,其中所述脂肪酸酯残基是cx1:y1,其表示该残基包含x1个碳原子和y1个双键。例如,胆固醇酯c18:0表示为意指胆固醇酯c18:0包含脂肪酸酯残基,其中所述脂肪酸酯残基是c18:0,其表示该残基包含18个碳原子和0个双键。磷脂酰胆碱(pc)生物标志物pc是磷脂酰胆碱的缩写。磷脂酰胆碱pc(cx1:y1cx2:y2)优选表示为意指磷脂酰胆碱包含两个脂肪酸酯残基,其中一个脂肪酸酯残基是cx1:y1,其表示该残基包含x1个碳原子和y1个双键,其中一个脂肪酸酯残基是cx2:y2,其表示该残基包含x2个碳原子和y2个双键。例如,磷脂酰胆碱(c16:0c18:2)优选表示为意指磷脂酰胆碱包含两个脂肪酸酯残基,其中一个脂肪酸酯残基是c16:0,其表示该残基包含16个碳原子和0个双键,其中一个脂肪酸酯残基是c18:2,其表示该残基包含18个碳原子和2个双键。生物标志物pc4是磷脂酰胆碱(c16:0c18:2)。生物标志物pc8优选是指磷脂酰胆碱(c18:0c18:2),或者更优选磷脂酰胆碱(c18:0c18:2)和磷脂酰胆碱(c18:1c18:1)。因此,生物标志物pc8是磷脂酰胆碱(c18:0c18:2),或者磷脂酰胆碱(c18:0c18:2)和磷脂酰胆碱(c18:1c18:1)的组合。因此,优选通过测定磷脂酰胆碱(c18:0c18:2)的量或通过测定磷脂酰胆碱(c18:0c18:2)和磷脂酰胆碱(c18:1c18:1)的组合量(由此的总量)来测定pc8的量。因此,pc8的量是磷脂酰胆碱(c18:0c18:2)的量,或者磷脂酰胆碱(c18:0c18:2)和磷脂酰胆碱(c18:1c18:1)的量的总和。优选的生物标志物组合如上所述,本发明的用于在受试者中鉴别心力衰竭和肺部疾病的方法包括测定至少一种代谢物生物标志物(选自表1的第1列中所示的生物标志物)的量。特别地,在受试者的样品中测定至少三种生物标志物的量。因此,考虑测定至少三种生物标志物的组合的量。在下文中描述根据本发明测定的至少三种生物标志物的优选组合。用于在受试者中鉴别心力衰竭和肺部疾病的至少三种生物标志物优选是:i.至少一种三酰甘油酯、至少一种胆固醇酯和至少一种磷脂酰胆碱;ii.至少一种三酰甘油酯、至少一种磷脂酰胆碱和至少一种鞘磷脂;iii.至少一种三酰甘油酯、至少一种胆固醇酯和至少一种鞘磷脂;iv.至少一种磷脂酰胆碱、至少一种胆固醇酯和至少一种鞘磷脂;v.胆固醇酯c18:2、sss和cer(d17:1/24:0);vi.至少两种鞘磷脂,其选自由以下组成的组:sm2、sm3、sm5、sm18、sm23、sm24和sm28,以及至少一种三酰甘油酯,其选自由以下组成的组:sop2、spp1或ppo1或选自由以下组成的组:sop2、spp1或ppp;vii.至少两种三酰甘油酯,其选自由以下组成的组:oss2、sop2、spp1和ssp2,以及至少一种鞘磷脂,其选自由以下组成的组:sm23和sm24;viii.sm18、sm24和sm28;ix.表2的组1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、118、119、120、121、122、123、124、125、126、127、128、129、130、131、132、133、134、135、136、137、138、139、140、141、142、143、144、145、146、147、148、149、150、151、152、153、154、155、156、157、158、159、160、161、162、163、164、165、166、167、168、169、170、171、172、173、174、175、176、177、178、179、180、181、182、183、184、185、186、187、188、189、190、191、192、193、194、195、196、197、198或199的生物标志物,或者x.表2a的组200、201、202、203、204、205或206的生物标志物。在下文中描述优选的待测定的胆固醇酯、三酰甘油酯、磷脂酰胆碱和鞘磷脂生物标志物和另外优选的至少三种生物标志物的组合(特别是i.、ii.、iii.和iv.项)。优选地,i.、ii.和iii.中的至少一种三酰甘油酯生物标志物选自由以下组成的组:sop2、oss2、spp1、ssp2、ppo1和ppp,i.、iii.和iv.中的至少一种胆固醇酯生物标志物选自由以下组成的组:胆固醇酯c18:2和胆固醇酯c18:0,i.、ii.,和iv.中的至少一种磷脂酰胆碱生物标志物选自由以下组成的组:pc4和pc8,并且ii.、iii.和iv.中的至少一种鞘磷脂生物标志物选自由以下组成的组:sm18、sm24、sm23、sm21、sm28、sm5、sm3、sm29和sm8。备选地,i.、ii.和iii.中的至少一种三酰甘油酯生物标志物选自由以下组成的组:sop2、oss2、spp1、ssp2、ppo1和spp1。在优选的实施方案中,测定如上所述的i.、ii.、iii.、vi、vii.、ix.或x.项(特别是i.、ii.、iii.、vi、vii.或ix.项)的生物标志物的量。特别地,i.、ii.和iii.中的至少一种三酰甘油酯生物标志物选自由以下组成的组:sop2、oss2、ssp2、ppo1和ppp,和/或(特别是和)i.和iii.中的至少一种胆固醇酯生物标志物是胆固醇酯c18:2,和/或(特别是和)i.和ii.中的至少一种磷脂酰胆碱生物标志物是pc4,和/或(特别是和)ii.和iii.中的至少一种鞘磷脂生物标志物选自由以下组成的组:sm18、sm24、sm23、sm28、sm5,和sm3。优选地,测定至少包含这些生物标志物的表2的任何组的生物标志物的量。更优选地,测定至少表2中组1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55或56的生物标志物的量。术语“至少…的量”优选意指原则上能够测定另外的生物标志物。在一个实施方案中,该术语意指“…的量”。优选地,将本文中公开的方法的步骤a)中提及的至少三种生物标志物的量用于步骤b)中的比较。在甚至进一步优选的实施方案中,测定至少i.、ii.、iii.、vi.、ix.或x.(特别是i.、ii.、iii.、vi.或ix.项)的生物标志物的量,其中i.、ii.和iii.中的至少一种三酰甘油酯生物标志物是sop2和/或oss2,和/或(特别是和)i.和iii.中的至少一种胆固醇酯生物标志物是胆固醇酯c18:2,和/或(特别是和)i.和ii.中的至少一种磷脂酰胆碱生物标志物是pc4,和/或(特别是和)ii.和iii.中的至少一种鞘磷脂生物标志物选自由以下组成的组:sm18、sm24、sm23,和sm3。优选地,测定至少包含这些生物标志物的表2的任何组的生物标志物的量。特别地,测定至少表2中的组1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17或18的生物标志物的量。在甚至进一步优选的实施方案中,测定至少i.、ii.、iii.、vi.、ix.或x.(特别是i.、ii.、iii、vi,或ix.)的生物标志物的量,其中i.、ii.和iii.中的至少一种三酰甘油酯生物标志物是sop2和/或oss2,和/或(特别是和)i.和iii.中的至少一种胆固醇酯生物标志物是胆固醇酯c18:2,和/或(特别是和)i.和ii.中的至少一种磷脂酰胆碱生物标志物是pc4,和/或(特别是和)ii.和iii.中的至少一种鞘磷脂生物标志物是sm23。优选地,测定至少包含这些生物标志物的表2的任何组的生物标志物的量。特别地,测定至少表2中的组1、2、3或4的生物标志物的量。优选地,测定至少oss2、pc4和sm23的量(组1),特别是与测定nt-probnp或bnp的量相组合(参见本文中的其它地方)。备选地,可以测定组3、13和60的生物标志物。同样优选地,测定至少oss2、胆固醇酯c18:2和sm23的量(组2)。备选地,可以测定组20、21、22、23、32或60的生物标志物。在甚至进一步优选的实施方案中,测定至少iii.的生物标志物的量,其中至少一种三酰甘油酯生物标志物是sop2和/或oss2,和/或(特别是和)至少一种胆固醇酯生物标志物是胆固醇酯c18:2,和/或(特别是和)至少一种鞘磷脂生物标志物是sm23。特别地,测定至少sop2、oss2、pc4、胆固醇酯c18:2、sm18、sm28、sm24、ssp2和sm23的量(组3)。如上段所示,特别是可以设想测定组3所包括的生物标志物的量(或者测定至少它们的量),并且由此测定sop2、oss2、pc4、胆固醇酯c18:2、sm18、sm28、sm24、ssp2和sm23的量。同样优选地,在本发明方法的步骤a)中测定组3的生物标志物的至少三种生物标志物、至少四种生物标志物、更优选至少五种或六种生物标志物、甚至更优选至少七种生物标志物和最优选至少八种生物标志物的量(或者至少它们的量)。如果测定组3的生物标志物(或如上段所述的生物标志物)的量,则所述方法优选不包括进一步测定nt-probnp和/或bnp的量。特别地,所述方法可以不包括进一步测定bnp和/或nt-probnp的量以及bnp和/或nt-probnp的量与参考的比较。因此,根据本发明方法的鉴别不基于nt-probnp的测定。因此,所述方法是不基于bnp和不基于nt-probnp的方法。例如,这同样也可以适用于组1和2。备选地,所述方法可以包括进一步测定nt-probnp和/或bnp的量。特别地,所述方法可以包括进一步测定bnp或nt-probnp的量以及将bnp或nt-probnp的量和参考比较。如果测定组3的生物标志物(组3的至少三种、四种、五种、六种、七种或八种生物标志物)的量,则优选不进行混杂因素的校正。备选地,可以进行混杂因素的校正。例如,这同样可以适用于组1和2。在优选的实施方案中,测定至少i.、ii.、iii.或vii.中所示的生物标志物的量,其中i.、ii.和iii.中的至少一种三酰甘油酯生物标志物选自由以下组成的组:sop2、oss2,和ssp2,和/或(特别是和)i.和iii.中的至少一种胆固醇酯生物标志物是胆固醇酯c18:2,和/或(特别是和)i.和ii.中的至少一种磷脂酰胆碱生物标志物是pc4,和/或(特别是和)ii.和iii.中的至少一种鞘磷脂生物标志物选自由以下组成的组:sm24、sm23、sm28和sm3。优选地,测定至少包含这些生物标志物的表2的任何组的生物标志物的量。更优选地,测定至少表2中的组19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35或36的生物标志物的量。在甚至进一步优选的实施方案中,测定至少ii.或iii.中所示的生物标志物的量,其中ii.和iii.中的至少一种三酰甘油酯生物标志物是sop2和/或oss2,和/或(特别是和)iii.中的至少一种胆固醇酯生物标志物是胆固醇酯c18:2,和/或(特别是和)ii.中的至少一种磷脂酰胆碱生物标志物是pc4,和/或(特别是和)ii.和iii.中的至少一种鞘磷脂生物标志物是sm23和/或sm24。优选地,测定至少包含这些生物标志物的表2的任何组的生物标志物的量。更优选地,测定至少表2中的组31、32、33、34、35或36的生物标志物的量。在优选的实施方案中,测定至少ii.、iii.或vi.所示的生物标志物的量,其中ii.和iii.中的至少一种三酰甘油酯生物标志物是sop2和/或oss2,和/或(特别是和)iii.中的至少一种胆固醇酯生物标志物是胆固醇酯c18:2,和/或(特别是和)ii.中的至少一种磷脂酰胆碱生物标志物是pc4,和/或(特别是和)ii.中的至少一种鞘磷脂生物标志物选自由以下组成的组:sm18、sm24和sm23。优选地,测定至少包含这些生物标志物的表2的任何组的生物标志物的量。更优选地,测定至少表2中的组37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55或56的生物标志物的量。在进一步优选的实施方案中,测定至少iii.中所示的生物标志物的量,其中至少一种三酰甘油酯生物标志物是sop2,和/或(特别是和)至少一种胆固醇酯生物标志物是胆固醇酯c18:2,和/或(特别是和)至少一种鞘磷脂生物标志物是sm18和/或sm23。优选地,测定至少包含这些生物标志物的表2的任何组的生物标志物的量。更优选地,测定至少表2中的组51、52、53、54、55或56的生物标志物的量。在优选的实施方案中,测定ii.、iii.、vi.、vii.、ix.或x.(特别是ii.、iii.、vi.、vii.或ix.)的生物标志物的量,其中ii.和iii.中的至少一种三酰甘油酯生物标志物选自由以下组成的组:sop2、oss2和ppo1,和/或(特别是和)iii.中的至少一种胆固醇酯生物标志物是胆固醇酯c18:2,和/或(特别是和)ii.中的至少一种磷脂酰胆碱生物标志物是pc4,和/或(特别是和)ii.和iii.中的至少一种鞘磷脂生物标志物选自由以下组成的组:sm24和sm23。优选地,测定至少包含这些生物标志物的表2的任何组的生物标志物的量。更优选地,测定至少表2中的组7、8、9、10、11、12、19、20、21、22、23、24、37、38、39、40、41或42的生物标志物的量。在进一步优选的实施方案中,其中测试至少iii.或vi的生物标志物的量,其中iii.中的至少一种三酰甘油酯生物标志物是sop2,和/或(特别是和)iii.中的至少一种胆固醇酯生物标志物是胆固醇酯c18:2,和/或(特别是和)iii.中的至少一种鞘磷脂生物标志物选自由以下组成的组:sm24和sm23。优选地,测定至少包含这些生物标志物的表2的任何组的生物标志物的量。更优选地,测定至少表2中的组7、8、9、10、11或12的生物标志物的量。在优选的实施方案中,测定至少iii.或vii.的生物标志物的量,其中iii.中的至少一种三酰甘油酯生物标志物选自由以下组成的组:sop2和oss2,和/或(特别是和)iii.中的至少一种胆固醇酯生物标志物是胆固醇酯c18:2,和/或(特别是和)iii.中的至少一种鞘磷脂生物标志物是sm23。优选地,测定至少包含这些生物标志物的表2的任何组的生物标志物的量。更优选地,测定至少表2中的组19、20、21、22、23或24的生物标志物的量。在优选的实施方案中,测定至少iii.或vi.的生物标志物的量,并且其中iii.中的至少一种三酰甘油酯生物标志物是sop2,和/或(特别是和)iii.中的至少一种胆固醇酯生物标志物是胆固醇酯c18:2,和/或(特别是和)iii.中的至少一种鞘磷脂生物标志物选自由以下组成的组:sm24和sm23。优选地,测定至少包含这些生物标志物的表2的任何组的生物标志物的量。更优选地,测定至少表2中的组37、38、39、40、41或42的生物标志物的量。在一个实施方案中,测定至少如上所述的ii.、vi.或vii.的生物标志物的量,并且其中ii.中的至少一种三酰甘油酯生物标志物选自由以下组成的组:sop2、ssp2、spp1和ppo1,和/或(特别是和)ii.中的至少一种磷脂酰胆碱生物标志物选自由以下组成的组:pc4和pc8,和/或(特别是和)ii.中的至少一种鞘磷脂生物标志物选自由以下组成的组:sm18、sm24、sm23、sm28、sm5和sm3。优选地,测定至少包含这些生物标志物的表2的任何组的生物标志物的量。更优选地,测定至少表2中的组79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101或102的生物标志物的量。甚至更优选地,测定至少ii.的生物标志物的量,并且其中至少一种三酰甘油酯生物标志物选自由以下组成的组:ssp2、spp1和ppo1,和/或(特别是和)至少一种磷脂酰胆碱生物标志物是pc4,和/或(特别是和)至少一种鞘磷脂生物标志物选自由以下组成的组:sm24、sm5和sm3。最优选地,测定至少ii.的生物标志物的量,并且其中至少一种三酰甘油酯生物标志物是ssp2,和/或(特别是和)至少一种磷脂酰胆碱生物标志物是pc4,和/或(特别是和)至少一种鞘磷脂生物标志物选自由以下组成的组:sm24和sm5。优选地,测定至少表2中的组95、97、99或101的生物标志物的量。在一个实施方案中,除至少一种生物标志物(选自表1的第1列中所示的生物标志物)的量以外,特别是除以上所述的至少三种生物标志物的所得组合的量以外,还测定nt-probnp或bnp的量。在另一个实施方案中,除至少一种生物标志物的量或如上所述的至少三种生物标志物的所得组合的量以外,不测定nt-probnp或bnp的量(参见本文中其它地方)。如上所述,可以设想测定组1至206中任一组的生物标志物的量。组1至199的生物标志物显示于表2(第2列)中。组200至206的生物标志物显示于表2a(第2列)中。优选的组是组1、组2、组3、组4和组200。在优选的实施方案中,在本发明方法的步骤a)中测定组1或2生物标志物的量。在另一个优选的实施方案中,测定组200的生物标志物。例如,如果测定组1的生物标志物的量,则测定sm23、oss2和pc4的量。如本文中其它地方所述,sm23可以是i)鞘磷脂(d18:1/23:1),ii)鞘磷脂(d18:2/23:0),iii)鞘磷脂(d17:1/24:1),或iv)鞘磷脂(d18:1/23:1)、鞘磷脂(d18:2/23:0)和鞘磷脂(d17:1/24:1)的组合。在一个实施方案中,sm23是鞘磷脂(d17:1/24:1)。在另一个实施方案中,sm23是鞘磷脂(d18:1/23:1)。如果测定组1的生物标志物,则可以特别地设想测定:·oss2的量,鞘磷脂(d18:1/23:1)的量和pc4的量,·oss2的量,鞘磷脂(d17:1/24:1)的量和pc4的量,或者·oss2的量,鞘磷脂(d18:1/23:1)、鞘磷脂(d18:2/23:0)和鞘磷脂(d17:1/24:1)的组合量,和pc4的量。例如,如果测定组2或4的生物标志物的量,则测定sm23、oss2和胆固醇酯c18:2的量。如本文中其它地方所述,sm23可以是i)鞘磷脂(d18:1/23:1),ii)鞘磷脂(d18:2/23:0),iii)鞘磷脂(d17:1/24:1),或iv)鞘磷脂(d18:1/23:1)、鞘磷脂(d18:2/23:0)和鞘磷脂(d17:1/24:1)的组合。特别地,sm23是鞘磷脂(d17:1/24:1)或鞘磷脂(d18:1/23:1)。如果测定组2或4的生物标志物,则可以特别地设想测定:·oss2的量,鞘磷脂(d18:1/23:1)的量和胆固醇酯c18:2的量,·oss2的量,鞘磷脂(d17:1/24:1)的量和胆固醇酯c18:2的量,或者·oss2的量,鞘磷脂(d18:1/23:1)、鞘磷脂(d18:2/23:0)、鞘磷脂(d17:1/24:1)的组合量和胆固醇酯c18:2的量。例如,如果测定组200的生物标志物的量,则测定胆固醇酯c18:2、sm23、oss2和pc4的量。如本文中其它地方所述,sm23可以是i)鞘磷脂(d18:1/23:1),ii)鞘磷脂(d18:2/23:0),iii)鞘磷脂(d17:1/24:1),或iv)鞘磷脂(d18:1/23:1)、鞘磷脂(d18:2/23:0)和鞘磷脂(d17:1/24:1)的组合。在一个实施方案中,sm23是鞘磷脂(d17:1/24:1)。在另一个实施方案中,sm23是鞘磷脂(d18:1/23:1)。如果测定组200的生物标志物,则可以特别地设想测定:·胆固醇酯c18:2的量,oss2的量,鞘磷脂(d18:1/23:1)的量和pc4的量,·胆固醇酯c18:2的量,oss2的量,鞘磷脂(d17:1/24:1)的量和pc4的量,或者·胆固醇酯c18:2的量,oss2的量,鞘磷脂(d18:1/23:1)、鞘磷脂(d18:2/23:0)和鞘磷脂(d17:1/24:1)的组合量和pc4的量。除组1以外,组200还包括胆固醇酯c18:2。除组2和4以外,组200还包括pc4。如本文中其它地方所述,除选自表1的第1列中所示的生物标志物的至少一种生物标志物的量以外或除前述组(1至206)的生物标志物的量以外,还可以设想测定nt-probnp或bnp的量。例如,除组1的至少三种生物标志物的量以外,还测定nt-probnp或bnp。此外,在一个实施方案中,可以设想不进行混杂因素的校正(例如,对于组1)。用于鉴别心力衰竭和肺部疾病的至少三种生物标志物的进一步优选的组合公开如下:此外,至少三种生物标志物优选为如下。特别是可以设想在步骤a中测定以下的量:i.选自由以下组成的组至少一种鞘磷脂(sm)生物标志物:sm18、sm21、sm23、sm24、sm28、sm3、sm5、sm2、sm9和sm10,特别是选自由以下组成的组的至少一种鞘磷脂(sm)生物标志物:sm18、sm21、sm23、sm24、sm28、sm3和sm5,ii.选自由以下组成的组的至少一种三酰甘油酯生物标志物:oss2、ppo1、sop2、ssp2和spp1,特别是选自由以下组成的组的至少一种三酰甘油酯生物标志物:oss2、ppo1、sop2和ssp2,和iii.选自由以下组成的组的至少一种另外的生物标志物:cer(d16:1/24:0)、cer(d18:1/24:1)、胆固醇酯c18:2、pc4、pc8、cer(d18:2/24:0)、cer(d17:1/24:0)和谷氨酸1,特别是选自由以下组成的组的至少一种另外的生物标志物:cer(d16:1/24:0)、cer(d18:1/24:1)、胆固醇酯c18:2和pc4。因此,测定i.的至少一种生物标志物、ii.的至少一种生物标志物和iii.的至少一种生物标志物。这同样适用于以下组合。在优选的实施方案中,测定至少以下的量:i.选自由以下组成的组的至少一种鞘磷脂生物标志物:sm28、sm23、sm21和sm5,ii.sop2和/或oss2,和iii.胆固醇酯c18:2和/或pc4。在进一步优选的实施方案中,测定至少以下的量:i.选自由以下组成的组的至少一种鞘磷脂生物标志物:sm28、sm21和sm5,特别是sm28,或者选自由以下组成的组的至少一种鞘磷脂生物标志物:sm18、sm21和sm5,特别是sm18,和ii.sop2,和iii.pc4。在进一步优选的实施方案中,其中测定至少以下的量:i.选自由以下组成的组的至少一种鞘磷脂生物标志物:sm18、sm2、sm23、sm24、sm28、sm3和sm5,ii.选自由以下组成的组的至少一种三酰甘油酯生物标志物:oss2、ppo1、sop2、ssp2和spp1,和iii.选自由以下组成的组的至少一种另外的生物标志物:cer(d16:1/24:0)、胆固醇酯c18:2、pc4和谷氨酸1。在进一步优选的实施方案中,测定至少以下的量:i.选自由以下组成的组的至少一种鞘磷脂生物标志物:sm23、sm2和sm24,ii.选自由以下组成的组的至少一种三酰甘油酯生物标志物:sop2、oss2和ppo1,和iii.胆固醇酯c18:2和/或pc4,特别是胆固醇酯c18:2。特别地,测定至少sm23和/或sm2的量,特别是sm23的量、sop2的量和pc4的量。在本发明的优选实施方案中,测定至少以下的量:i.选自由以下组成的组的至少一种鞘磷脂生物标志物:sm10、sm18、sm21、sm23、sm24、sm28、sm3和sm9,ii.选自由以下组成的组的至少一种三酰甘油酯生物标志物:oss2、ppo1、sop2、ssp2和spp1,和iii.选自由以下组成的组的至少一种另外的生物标志物:cer(d16:1/24:0)、cer(d18:1/24:1)、cer(d17:1/24:0)、cer(d18:2/24:0)、胆固醇酯c18:2、pc4和pc8。在进一步优选的实施方案中,i.至少一种鞘磷脂生物标志物选自由以下组成的组:sm18、sm3、sm24和sm23,特别是sm18,ii.sop2和/或oss2,特别是sop2,和iii.胆固醇酯c18:2和/或pc4,特别是pc4。特别地,测定至少sm18和/或sm24、sop2和pc4的量。在优选的实施方案中,其中测定至少以下的量:i.选自由以下组成的组的至少一种鞘磷脂生物标志物:sm23、sm18、sm24、sm28、sm2和sm3,特别是选自由以下组成的组的至少一种鞘磷脂生物标志物:sm23、sm18、sm24和sm28,ii.oss2和/或sop2,特别是oss2,iii.胆固醇酯c18:2和/或pc4。特别地,测定至少sm23、oss2和胆固醇酯c18:2的量。在进一步优选的实施方案中,测定至少以下的量:i.选自由以下组成的组的至少一种鞘磷脂生物标志物:sm23、sm18、sm2、sm24和sm28,ii.sop2,和iii.胆固醇酯c18:2。特别地,测定至少生物标志物sm23、sop2和胆固醇酯c18:2的量。在优选的实施方案中,其中测定至少以下的量:i.选自由以下组成的组的至少一种鞘磷脂生物标志物:sm18、sm23、sm3或选自由以下组成的组的至少一种鞘磷脂生物标志物:sm28、sm23和sm3,ii.oss2,和iii.胆固醇酯c18:2和/或pc4。特别地,测定至少sm18和/或sm28的量、oss2的量和胆固醇酯c18:2的量。前述组合优选用于诊断心力衰竭,特别是hfref。在一个实施方案中,心力衰竭是症状性心力衰竭,特别是症状性hfref。因此,待测试的受试者优选显示出心力衰竭的症状。在本发明的优选实施方案中,测定至少以下的量:i.选自由以下组成的组的至少一种鞘磷脂生物标志物:sm23、sm24,sm28和sm3,特别是选自由以下组成的组的至少一种鞘磷脂生物标志物:sm23、sm24和sm28,ii.sop2和/或oss2,和iii.胆固醇酯c18:2和/或pc4。特别地,测定至少sm23的量、sop2的量和胆固醇酯c18:2的量。在本发明的进一步优选的实施方案中,测定至少以下的量:i.sm23,ii.oss2和/或sop2,和iii.胆固醇酯c18:2。特别地,测定至少sm23、oss2和胆固醇酯c18:2的量。在本发明的优选实施方案中,测定至少以下的量:i.sm28和/或sm3,ii.sop2和/或oss2,和iii.pc4。特别地,测定至少sm28、sop2和pc4的量。在另一个优选的实施方案中,其中测定至少以下的量:i.选自由以下组成的组的至少一种鞘磷脂生物标志物:sm23、sm24、sm28和sm18,特别是选自由以下组成的组的至少一种鞘磷脂生物标志物:sm23、sm24和sm28,ii.sop2,和iii.胆固醇酯c18:2。特别地,测定至少sm23、sop2和胆固醇酯c18:2的量。在进一步优选的实施方案中,测定至少sm18、sop2和胆固醇酯c18:2的量。还可以设想至少三种生物标志物是:i.选自由以下组成的组的至少一种鞘磷脂生物标志物:sm23、sm2和sm24,ii.选自由以下组成的组的至少一种三酰甘油酯生物标志物:sop2、oss2和ppo1,和iii.选自胆固醇酯c18:2、pc4和sm5的至少一种另外的生物标志物。因此,受试者优选不显示出心力衰竭的症状。还可以设想至少三种生物标志物是选自由以下组成的组的标志物:sm24、sm5、sm23、sop2和ppo1。优选地,测定sm24、sm5和sop2的量,或者sm23、sm5和ppo1的量。在一个实施方案中,除如上所述的至少三种生物标志物的所得组合的量以外,还测定nt-probnp或bnp的量。在另一个实施方案中,除如上所述的至少三种生物标志物的所得组合的量以外,不测定nt-probnp或bnp的量(参见本文中其它地方)。用于诊断心力衰竭和/或其亚形式的至少三种生物标志物的另外的优选组合在优选的实施方案中,至少三种生物标志物是:i.选自由以下组成的组的至少一种鞘磷脂(sm)生物标志物:sm18、sm23、sm24、sm3、sm5、sm2和sm28,并且特别是选自由以下组成的组的至少一种鞘磷脂(sm)生物标志物:sm18、sm23、sm24、sm3和sm5,ii.选自由以下组成的组的至少一种三酰甘油酯生物标志物:oss2、sop2、ssp2和ppo1,特别是选自由以下组成的组的至少一种三酰甘油酯生物标志物:oss2和sop2,和iii.选自由以下组成的组的至少一种另外的生物标志物:胆固醇酯c18:2和pc4。因此,测定i.的至少一种生物标志物、ii.的至少一种生物标志物和iii.的至少一种生物标志物。这同样适用于以下组合。在优选的实施方案中,测定至少以下的量:i.选自由以下组成的组的至少一种鞘磷脂生物标志物:sm18、sm23、sm24、sm3和sm5,ii.选自由以下组成的至少一种三酰甘油酯生物标志物:oss2和sop2,和iii.选自由以下组成的组的至少一种另外的生物标志物:胆固醇酯c18:2和pc4。特别地,测定至少以下的量:i.选自由以下组成的组的至少一种鞘磷脂生物标志物:sm18、sm3和sm5,特别是sm18,和ii.选自由以下组成的组的至少一种三酰甘油酯生物标志物:oss2和sop2,特别是sop2,和iii.选自由以下组成的组的至少一种另外的生物标志物:胆固醇酯c18:2和pc4,特别是pc4。在优选的实施方案中,测定至少以下的量:i.选自由以下组成的组的至少一种鞘磷脂生物标志物:sm18、sm2、sm23、sm24、sm28和sm5,ii.选自由以下组成的组的至少一种三酰甘油酯生物标志物:oss2、ppo1、sop2和ssp2,和iii.选自由以下组成的组的至少一种另外的生物标志物:胆固醇酯c18:2和pc4。在更优选的实施方案中,测定至少以下的量:i.选自由以下组成的组的至少一种鞘磷脂生物标志物:sm23、sm24、sm18和sm2,特别是sm23,ii.选自由以下组成的组的至少一种三酰甘油酯生物标志物:sop2、oss2和ppo1,特别是sop2,和iii.选自由以下组成的组的至少一种另外的生物标志物:胆固醇酯c18:2和pc4,特别是胆固醇酯c18:2。在甚至更优选的实施方案中,测定至少以下的量:i.选自由以下组成的组的至少一种鞘磷脂生物标志物:sm23、sm18和sm2,特别是sm23,ii.sop2,和iii.胆固醇酯c18:2和/或pc4,特别是胆固醇酯c18:2。在优选的实施方案中,i.选自由以下组成的组的至少一种鞘磷脂生物标志物:sm18、sm23、sm24、sm28和sm3,ii.选自由以下组成的至少一种三酰甘油酯生物标志物:oss2和sop2,和iii.选自由以下组成的组的至少一种另外的生物标志物:胆固醇酯c18:2和pc4。优选地,测定至少以下的量:i.sm18,ii.sop2,和iii.胆固醇酯c18:2。特别地,测定至少sm18和/或sm24(特别是sm18)的量、sop2的量和pc4的量。在进一步优选的实施方案中,测定至少以下的量:i.选自由以下组成的组的至少一种鞘磷脂生物标志物:sm23、sm18、sm3、sm24、sm28,特别是选自由以下组成的组的至少一种鞘磷脂生物标志物:sm23和sm18,ii.选自由以下组成的组的至少一种三酰甘油酯生物标志物:oss2、sop2和ppo1,特别是oss2,和iii.选自由以下组成的组的至少一种另外的生物标志物:胆固醇酯c18:2和pc4。特别地,测定至少sm23、oss2和胆固醇酯c18:2的量。在进一步优选的实施方案中,测定至少以下的量:i.选自由以下组成的组的至少一种鞘磷脂生物标志物:sm23和sm24,特别是sm23,ii.选自由以下组成的组的至少一种三酰甘油酯生物标志物:sop2和oss2,特别是sop2,和iii.选自由以下组成的组的至少一种另外的生物标志物:胆固醇酯c18:2和pc4,特别是胆固醇酯c18:2。特别地,测定至少sm23、sop2和胆固醇酯c18:2的量。在进一步优选的实施方案中,测定至少以下的量:i.选自由以下组成的组的至少一种鞘磷脂生物标志物:sm18、sm23、sm3、sm28和sm24,特别是选自由以下组成的组的至少一种鞘磷脂生物标志物:sm18、sm23和sm3,ii.选自由以下组成的组的至少一种三酰甘油酯生物标志物:sop2和oss2,和iii.选自由以下组成的组的至少一种另外的生物标志物:胆固醇酯c18:2和pc4。特别地,测定至少sm18的量、oss2的量和胆固醇酯c18:2的量。在进一步优选的实施方案中,测定至少以下的量:i.选自由以下组成的组的至少一种鞘磷脂生物标志物:sm23、sm24、sm3和sm28,特别是选自由以下组成的组的至少一种鞘磷脂生物标志物:sm23和sm24,ii.选自由以下组成的组的至少一种三酰甘油酯生物标志物:sop2和oss2,和iii.选自由以下组成的组的至少一种另外的生物标志物:胆固醇酯c18:2和pc4。特别地,测定至少sm23的量、sop2的量和胆固醇酯c18:2的量。在进一步优选的实施方案中,其中测定至少以下的量:i.选自由以下组成的组的至少一种鞘磷脂生物标志物:sm23和sm24,ii.选自由以下组成的组的至少一种三酰甘油酯生物标志物:sop2和oss2,和iii.胆固醇酯c18:2。特别地,测定至少sm23、oss2和胆固醇酯c18:2的量。在进一步优选的实施方案中,测定至少以下的量:i.选自由以下组成的组的至少一种鞘磷脂生物标志物:sm3、sm24和sm28,ii.选自由以下组成的组的至少一种三酰甘油酯生物标志物:sop2和oss2,和iii.选自由以下组成的组的至少一种另外的生物标志物:胆固醇酯c18:2和pc4。特别地,测定至少sm3、oss2和pc4的量。在进一步优选的实施方案中,测定至少以下的量:i.选自由以下组成的组的至少一种鞘磷脂生物标志物:sm18、sm23和sm24,特别是选自由以下组成的组的至少一种鞘磷脂生物标志物:sm18和sm23,ii.选自由以下组成的组的至少一种三酰甘油酯生物标志物:sop2和ppo1,特别是sop2,和iii.选自由以下组成的组的至少一种另外的生物标志物:胆固醇酯c18:2和pc4,特别是胆固醇酯c18:2。特别地,测定至少sm18、sop2和胆固醇酯c18:2的量。在进一步优选的实施方案中,测定至少以下的量:i.选自由以下组成的组的至少一种鞘磷脂生物标志物:sm24和sm23,ii.选自由以下组成的组的至少一种三酰甘油酯生物标志物:sop2和ppo1,和iii.选自由以下组成的组的至少一种另外的生物标志物:胆固醇酯c18:2和pc4,特别是胆固醇酯c18:2。特别地,测定至少sm24、sop2和胆固醇酯c18:2的量。在甚至进一步优选的实施方案中,测定至少sm18、sop2和胆固醇酯c18:2的量。此外,对于诊断无症状性心力衰竭,可以设想测定以下的量:i.选自由以下组成的组的至少一种鞘磷脂生物标志物:sm23、sm24、sm18和sm2,特别是sm23,ii.选自由以下组成的组的至少一种三酰甘油酯生物标志物:sop2、oss2和ppo1,特别是sop2,和iii.选自由以下组成的组的至少一种另外的生物标志物:胆固醇酯c18:2、pc4、sm5和ssp2,特别是胆固醇酯c18:2。另外,可以设想测定以下的量:i.选自由以下组成的组的至少一种鞘磷脂生物标志物:sm23、sm18和sm2,特别是sm23,ii.sop2,和iii.选自由以下组成的组的至少一种另外的生物标志物:sm5、胆固醇酯c18:2、pc4,特别是sm5。另外,可以设想测定以下的量:i.选自由以下组成的组的至少一种鞘磷脂生物标志物:sm23和sm24,ii.选自由以下组成的组的至少一种三酰甘油酯生物标志物:sop2和oss2,特别是sop2,和iii.选自由以下组成的组的至少一种另外的生物标志物:胆固醇酯c18:2和sm28,特别是胆固醇酯c18:2。另外,可以设想测定以下的量:i.选自由以下组成的组的至少一种鞘磷脂生物标志物:sm23和sm24,特别是sm23,ii.选自由以下组成的组的至少一种三酰甘油酯生物标志物:sop2和oss2,特别是oss2,和iii.胆固醇酯c18:2和ssp2,特别是胆固醇酯c18:2。另外,可以设想测定以下的量:i.选自由以下组成的组的至少一种鞘磷脂生物标志物:sm24和sm23,特别是sm24,ii.选自由以下组成的组的至少一种三酰甘油酯生物标志物:sop2和ppo1,特别是sop2,和iii.选自由以下组成的组的至少一种另外的生物标志物:sm5、胆固醇酯c18:2和pc4,特别是胆固醇酯c18:2,特别是sm5,或特别是pc4。在一个实施方案中,除如上所述的至少三种生物标志物的所得组合的量以外,还测定nt-probnp或bnp的量。在另一个实施方案中,除如上所述的至少三种生物标志物的所得组合的量以外,不测定nt-probnp或bnp的量(参见本文中其它地方)。如果待测定的一种或多种生物标志物是三酰甘油酯,则可以设想该生物标志物的量的测定不涵盖该标志物的衍生化。因此,可以设想该生物标志物的测定不基于测定来源于所述三酰甘油酯的一种或多种脂肪酸残基。因此,测量整个三酰甘油酯的量。尽管,可以进行衍生化。如本文中所使用的术语“样品”是指来自体液(优选血液、血浆、血清、唾液或尿液)的样品,或来源于(例如通过活组织检查)细胞、组织或器官的样品,特别是来自心脏的样品。更优选地,样品是血液、血浆或血清样品,最优选是血浆样品。生物样品可以来源于本文其它地方指定的受试者。用于获得前述不同类型生物样品的技术是本领域中公知的。例如,血液样品可以通过采血获得,而组织或器官样品例如通过活组织检查获得。在本发明的优选实施方案中,样品是空腹(fasting)样品,特别是空腹血液、血清或血浆样品。因此,样品应从空腹受试者获得。特别地,空腹受试者是在获得待测试的样品之前禁用食物和饮料(除水以外)的受试者。优选地,在获得待测试的样品之前,空腹受试者禁用食物和饮料(除水以外)达至少八小时。更优选地,样品从整夜禁食后的受试者获得。前述样品优选在它们用于本发明的方法之前被预处理。如在下文更详细地描述的,所述预处理可以包括释放或分离化合物或除去过量的材料或废物所需要的处理。合适的技术包括离心、萃取、分馏、超滤、蛋白质沉淀随后过滤和纯化和/或化合物富集。此外,进行其它预处理从而提供适合化合物分析的形式或浓度的化合物。例如,如果在本发明的方法中使用气相色谱联合质谱,则将需要在所述气相色谱之前使化合物衍生化。合适的和必要的预处理取决于用于实施本发明方法的装置,并且是本领域技术人员所公知的。如前文所述的经预处理的样品也包括在根据本发明所使用的术语“样品”中。如下文中更详细地描述的,本文中提及的生物标志物的量的测定优选包括分离步骤,即其中分离样品所包含的化合物的步骤。优选地,通过色谱特别是通过液相色谱(lc)或高效液相(hplc)进行化合物的分离。优选地,样品的预处理应允许样品所包含的化合物(特别是如上提及的代谢物生物标志物)的后续分离。可以在萃取步骤中萃取目标分子,特别是如上提及的生物标志物,所述萃取步骤包括将样品与合适的萃取溶剂混合。萃取溶剂应能够使样品中的蛋白质沉淀,由此促进蛋白质污染物的去除(优选是基于离心的去除),否则其将干扰如上提及的生物标志物的后续分析。优选地,待测定的代谢物生物标志物,特别是如上提及的所有脂类生物标志物,可溶于萃取溶剂。更优选地,萃取溶剂是单相溶剂。甚至更优选地,萃取溶剂是包含第一溶剂和第二溶剂的混合物,所述第一溶剂选自由以下组成的组:二氯甲烷(dcm)、氯仿、叔丁基甲醚(tbme或mtbe,也称为2-甲氧基-2-甲基丙烷)、乙酸乙酯和异辛烷,所述第二溶剂选自由以下组成的组:甲醇、乙醇、异丙醇和二甲亚砜(dmso)。在一个实施方案中,萃取溶剂包含甲醇和dcm,特别是比率为约2:1至约3:2,优选比率为约2:1或约3:2(优选v/v)。如本文中所使用的术语“约”是指其后表示的准确值或与所述准确值相差+/-20%、+/-10%、+/-5%、+/-2%或+/-1%的值。优选地,样品的预处理包括使用合适的萃取溶剂的萃取步骤。该萃取步骤另外导致样品所包含的蛋白质的沉淀。随后,样品所包含的蛋白质通过离心去除。如下文所述,本发明的方法还可以包括测定利钠肽(优选nt-probnp或bnp)的量。利钠肽是蛋白质标志物,其优选通过使用特异性结合bnp或nt-probnp的抗体(或备选地通过本领域已知的其它方法)来测定。因此,上两段中所述的预处理不适用于测定蛋白质标志物,特别是bnp和nt-probnp。优选地,预处理仅适用于测定代谢物生物标志物的量,即鞘磷脂、三酰甘油酯、胆固醇酯、磷脂酰胆碱、神经酰胺和/或谷氨酸的量。如本文中所使用的术语“测定…的量”(特别是代谢物生物标志物的量)是指测定样品中待通过本发明的方法测定的生物标志物的至少一个特性特征。根据本发明的特性特征是表征生物标志物的物理和/或化学性质(包括生物化学性质)的特征。这样的性质包括,例如,分子量、粘度、密度、电荷、自旋、光学活性、颜色、荧光、化学发光、元素组成、化学结构、与其它化合物反应的能力、在生物读出系统中引发应答的能力(例如,诱导报告基因)等。所述性质的值可以作为特性特征,并且能够通过本领域中公知的技术进行测定。此外,特性特征可以是通过标准操作(例如,数学计算,诸如乘法、除法或对数微积分)而来源于标志物的物理和/或化学性质的值的任何特征。最优选地,至少一个特性特征允许所述至少一种生物标志物及其量的测定和/或化学鉴别。因而,特征值优选还包括涉及生物标志物的丰度的信息,所述特征值来源于该生物标志物。例如,生物标志物的特征值可以是质谱中的峰。这样的峰含有生物标志物的特征信息,即m/z信息,以及与所述生物标志物在样品中的丰度(即其量)相关的强度值。如之前所讨论的,可以优选地根据本发明定量或半定量地测定样品所包含的每个生物标志物。对于定量测定,基于上文提及的对于特性特征所测定的值,测定生物标志物的绝对量或精确量,或者测定生物标志物的相对量。在不能或不应测定生物标志物的准确量的情况下,可以测定相对量。在所述情况下,可以测定生物标志物存在的量相对于包含第二量的所述生物标志物的第二样品是扩大了还是减少了。在优选的实施方案中,包含所述生物标志物的所述第二样品应为如本文中其它地方指定的计算的参考。因此,定量分析生物标志物还包括有时被称为生物标志物的半定量分析的那些。因此,测定本文中提及的生物标志物的量优选通过化合物分离步骤和后续质谱步骤进行。因此,如本发明方法中所使用的测定优选包括在分析步骤前使用化合物分离步骤。优选地,所述化合物分离步骤产生了样本所包含的代谢物(特别是关于本发明方法所阐述的至少一种或至少三种生物标志物)的时间分辨的分离。因此,根据本发明优选使用的合适的分离技术包括所有色谱分离技术,诸如液相色谱法(lc)、高效液相色谱法(hplc)、气相色谱法(gc)、薄层色谱法、尺寸排阻或亲和色谱法。这些技术是本领域中公知的,并且可以由本领域技术人员在毫不费力的情况下地应用。最优选地,lc和/或hplc是由本发明的方法设想的色谱技术。用于这种生物标志物测定的合适的设备是本领域中公知的。优选地,使用质谱,特别是气相色谱质谱法(gc-ms)、液相色谱质谱法(lc-ms)、直接输注质谱法或傅里叶变换离子回旋共振质谱法(ft-icr-ms)、毛细管电泳质谱法(ce-ms)、高效液相色谱法联合质谱法(hplc-ms)、四极质谱法、任何的连续偶联的质谱法如ms-ms或ms-ms-ms、电感耦合等离子体质谱法(icp-ms)、热解质谱法(py-ms)、离子迁移率质谱法或飞行时间质谱法(tof)。如下详细描述的,更优选使用lc-ms,特别是lc-ms/ms,并且最优选hplc-ms,特别是hplc-ms/ms。因此,优选通过hplc-ms,特别是hplc-ms/ms(高效液相色谱串联质谱法),进行至少一种生物标志物或至少三种生物标志物的量的测定。上述技术公开于例如nissen1995,journalofchromatographya,703:37-57、us4,540,884或us5,397,894中,其公开内容通过引用结合于此。作为替代或者除质谱技术以外,以下技术可以用于化合物测定:核磁共振(nmr)、磁共振成像(mri)、傅里叶变换红外分析(ft-ir)、紫外(uv)光谱法、折射指数(ri)、荧光检测、放射化学检测、电化学检测、光散射(ls)、色散拉曼光谱或火焰离子化检测(fid)。这些技术是本领域技术人员公知的,并且可以毫不费力的情况下应用。本发明的方法应优选通过自动化辅助。例如,样品加工或预处理可以由机器人自动完成。数据处理和比较优选由合适的计算机程序和数据库来辅助。前文所述的自动化允许以高通量方法使用本发明的方法。如上所述,所述至少一种生物标志物(特别是至少三种生物标志物)的量的测定可以优选地包括质谱(ms)。因此,在分离步骤(例如通过lc或hplc)之后进行质谱步骤。本文中所使用的质谱涵盖允许测定对应于根据本发明的待测化合物(即生物标志物)的分子量(即质量)或质量变量的所有技术。优选地,本文中所使用的质谱涉及gc-ms、lc-ms、直接输注质谱、ft-icr-ms、ce-ms、hplc-ms、四极质谱法、任何的连续偶联的质谱如ms-ms或ms-ms-ms、icp-ms、py-ms、tof或使用前述技术的任何组合方法。如何应用这些技术是本领域技术人员公知的。此外,合适的设备是市售的。更优选地,如本文中所使用的质谱涉及lc-ms和/或gc-ms,即涉及与先前的液相色谱分离步骤可操作地连接的质谱。优选地,质谱是串联质谱(也称为ms/ms)。串联质谱,也称为ms/ms,涉及两个以上质谱步骤,在这些阶段之间发生片段化。在串联质谱中,两个质谱串联地通过碰撞室连接。质谱与色谱设备偶联。已经由色谱分离的样品在第一质谱中分选并称重,然后在碰撞室中由惰性气体片段化,并且一片或多片在第二质谱中分选并称重。在第二质谱中分段并称重片段。通过ms/ms鉴别是更精确的。在一个实施方案中,如本文中所使用的质谱涵盖四极ms。最优选地,所述四极ms如下进行:a)在质谱仪的第一分析四极中选择通过电离产生的离子的质量/电荷商(m/z),b)通过在另外的后续四极(其中充满碰撞气体并用作碰撞室)中施加加速电压使步骤a)中选择的离子片段化,c)在另外的后续四极中选择通过步骤b)中的片段化方法产生的离子的质量/电荷商(m/z),由此进行该方法的步骤a)至c)至少一次。更优选地,所述质谱是液相色谱(lc)ms,如高效液相色谱(hplc)ms,特别是hplc-ms/ms。如本文中所使用的液相色谱是指允许在液体或超临界相中分离化合物(即代谢物)的所有技术。液相色谱的特征在于移动相中的化合物流经固定相。当化合物以不同速率流经固定相时,其在时间上分离,因为每个单独的化合物具有其特定的保留时间(即化合物流经系统所需要的时间)。如本文中所使用的液相色谱还包括hplc。用于液相色谱的设备是市售的,例如,来自agilenttechnologies,usa。例如,可以使用具有例如c8、c18或c30固定相的市售反相分离柱来进行hplc。本领域技术人员能够选择合适的溶剂用于hplc或如本文中所述的任何其它色谱方法。从色谱装置出来的洗脱物应包含上述提及的生物标志物。本领域技术人员可以确定用于液相色谱洗脱的合适的溶剂。在一个实施方案中,用于hplc分离中的梯度洗脱的溶剂由极性溶剂和脂溶剂组成。优选地,极性溶剂是水和具有酸调节剂的水混溶性溶剂的混合物。合适的完全与水混溶的有机溶剂的实例包括c1-c3-烷醇、四氢呋喃、二噁烷、c3-c4-酮如丙酮和乙腈及其混合物,其中甲醇是特别优选的。另外,脂溶剂是如上提及的溶剂与疏水溶剂的混合物,所述疏水溶剂来自由以下组成的组:二氯甲烷(dcm)、氯仿、叔丁基甲醚(tbme或mtbe)、乙酸乙酯和异辛烷。酸性调节剂的实例是甲酸或乙酸。实施例部分中公开了优选的用于梯度洗脱的溶剂。也可以根据本发明应用的气相色谱的操作在原则上与液相色谱相当。然而,化合物(即代谢物)不是在通过固定相的液体流动相中,而是该化合物存在于气体容积中。化合物通过柱,所述柱可以含有作为固定相的固体支持材料或者其壁可以用作固定相或涂覆有固定相。再次,每个化合物具有通过柱所需要的特定时间。此外,在气相色谱的情况下,优选可以设想在气相色谱之前将化合物衍生化。合适的用于衍生化的技术是本领域中公知的。优选地,根据本发明的衍生化涉及优选地,极性化合物的甲氧基化和三甲基硅烷基化,以及优选地,非极性(即亲脂性)化合物的转甲基化、甲氧基化和三甲基硅烷基化。对于质谱,样品中的分析物被电离以产生带电分子或分子片段。此后,测量电离的分析物(特别是电离的生物标志物)的质荷比。因此,质谱步骤优选包括电离步骤,其中待测定的生物标志物被电离。当然,样品/洗脱物中存在的其它化合物也被电离。生物标志物的电离可以通过任何认为合适的方法进行,特别是通过电子碰撞电离、快原子轰击、电喷雾电离(esi)、大气压化学电离(apci)、基质辅助激光解吸电离(maldi)。优选地,电离步骤通过大气压化学电离(apci)进行。更优选地,电离步骤(对于质谱)通过电喷雾电离(esi)进行。因此,质谱优选是esi-ms(或者如果进行串联ms,则是:esi-ms/ms)。电喷雾是软电离方法,其导致在不破坏任何化学键的情况下形成离子。电喷雾电离(esi)是用于质谱的技术,从而使用电喷雾来生成离子,其中将高电压施加于样品以产生气溶胶。它特别适用于由大分子产生离子,因为它克服了这些分子在电离时碎裂的倾向。优选地,电喷雾电离是正离子模式电喷雾电离。因此,电离优选为质子化(或具有带正电荷的离子(诸如nh4+、na+或k+,特别是nh4+)的加合物形成)。基于合适的阳离子,优选地,将质子(h+)添加至待测定的生物标志物(并且当然添加至样品中的任何化合物,即来自色谱柱的洗脱物中的任何化合物)。因此,测定至少一种生物标志物的量,特别是至少三种生物标志物的量,可以测定质子化的生物标志物的量。本领域技术人员知悉在质谱步骤开始时进行电离步骤。如果进行串联ms,则在第一质谱步骤中进行电离,特别是电喷雾电离。生物标志物的电离可以优选地通过将来自色谱柱(特别是来自lc或hplc柱)的洗脱液直接供给至电喷雾而进行。备选地,可以收集级分并将其在经典的纳升电喷雾(nanoelectrospray)-质谱装置中进行后续分析。如上所述,在分离步骤,特别是色谱步骤之后进行质谱步骤。在一个实施方案中,从色谱柱(例如,lc或hplc柱)出来的洗脱物可以在将其进行质谱步骤前进行预处理。优选地,将铵缓冲剂(最优选甲酸铵或乙酸铵)添加至洗脱物,以增强用于一些脂类(诸如神经酰胺和tag)的电喷雾方法中的电离效率。优选地,将甲酸铵缓冲剂溶于与梯度hplc溶剂混溶的溶剂(最优选甲醇)。在本发明的优选实施方案中,在单次测量中一起测定至少三种生物标志物。特别地,可以设想在单次lc-ms(或lc-ms/ms)、hplc-ms(hplc-ms/ms)测量(即运行)中一起测定这些量。在一个实施方案中,测定至少三种生物标志物的量包括如实施例部分中所描述的步骤。例如,可以如实施例3中所描述的测定至少三种生物标志物。特别地,可以如实施例部分(优选实施例3)中所描述的测定组1、2或200的生物标志物。例如,可以分析血液、血清或血浆(特别是血浆样品)。样品可以是新鲜样品或冷冻样品。如果是冷冻的,则样品可以在合适的温度解冻合适的时间。然后,将样品的等分试样(例如,样品的等分试样可以具有10μl的体积)转移至微量离心管并且与合适的萃取溶剂(例如,约1:150v/v,于甲醇/二氯甲烷(2:1v/v)中)混合。可以添加内标。例如,在将测定组1的至少三种生物标志物的量的情况下,可以将溶于甲醇/二氯甲烷(2:1v/v)的磷脂酰胆碱(c19:0c19:0)用作内标;例如,10μl的相应的甲醇/二氯甲烷(2:1v/v)中的0.05毫摩尔溶液。此后进行萃取(例如,使用涡旋进行5分钟)。萃取后,可以将样品离心(例如,于约20.000g)。上清液的等分试样(例如,200μl)可以用于标志物的定量。上清液可以储存于-20℃(优选地,多达三个月)。另外,可以将至少一种内标化合物添加到样品。如本文中所使用的,术语“内标化合物”是指添加到样品并被测定的化合物(即,测定内标化合物的量)。在萃取待测试的样品之前、期间或之后,可以添加至少一种内标化合物。在一个实施方案中,在将样品的等分试样与萃取溶剂混合之后添加至少一种内标化合物。优选地,因此,内标化合物溶于萃取溶剂。在一个实施方案中,萃取溶剂是如本文中其它地方所描述的萃取溶剂(诸如甲醇/二氯甲烷(2:1v/v))。优选地,至少一种内标化合物是脂类代谢物生物标志物。更优选地,内标化合物是基本上不存在或不存在于待测试的样品中的化合物(特别是脂类)。因此,化合物优选不是天然存在于待测试的样品中。优选地,内标与相应的本发明脂类生物标志物非常相似。在一个实施方案中,至少一种标准化合物选自由以下组成的组:溶血磷脂酰胆碱c17:0、神经酰胺d18:1/17:0、磷脂酰胆碱c19:0c19:0、胆甾醇十七烷酸酯(cec17:0)和甘油三(十七烷酸酯)(mmm)。特别地,内标化合物是磷脂酰胆碱c19:0c19:0。内标化合物可以溶于合适的溶剂(包含内标化合物和合适的溶剂的溶液在本文中也称为“内标溶液”)。优选地,溶剂包括或者是非极性液体溶剂,如甲基氯、二氯甲烷、氯仿、1,2-二氯乙烷。优选地,使用如本文中其它地方所描述的萃取溶剂。甚至更优选地,溶剂是包含二氯甲烷(dcm)和甲醇的混合物。在一个实施方案中,萃取溶剂包含甲醇和dcm,特别是以约2:1的比率(优选体积比体积)。优选地,在用如本文中其它地方所描述的萃取溶剂进行萃取并通过离心从样品去除蛋白质后,将内标溶液添加到待测试的样品。因此,内标溶液应添加到预处理的样品中。如果磷脂酰胆碱c19:0c19:0用作内标化合物,则内标化合物在待添加到(预处理的)样品中的内标溶液中的浓度优选在1至200μg/ml的范围内,更优选35至50μg/ml,最优选40至45μg/ml。至于制备后的样品(即,如用于实际测量),在样品制备后,内标化合物的浓度优选在0.01-1.3μg/ml的范围内,更优选0.23至0.33μg/ml,最优选0.26至0.30μg/ml。在一个实施方案中,待使用的内标溶液的体积具有与预处理前的样品相同的体积。例如,使用10μl的血浆和内标溶液。测定内标的量应优选允许至少一种生物标志物的量的归一化,特别是本文中提及的至少三种生物标志物的量的归一化。优选地,将至少一种生物标志物的测定的峰面积,特别是至少三种生物标志物的测定的峰面积,除以至少一种内标化合物的峰面积。特别地,可以计算测试样品(来自待测试的受试者的样品,也可以是校准样品)的校正因子。关于设备的变动、固有系统错误等,可以使用该校正因子以校正一种或多种生物标志物的峰面积。对于测定为峰面积的每个生物标志物,可以测定生物标志物峰面积与内标峰面积的面积比。优选地,至少一种标准化合物的测定不干扰至少一种生物标志物或至少三种生物标志物的量的测定。如本文中所使用的术语“量”优选涵盖本文中提及的生物标志物的绝对量、所述生物标志物的相对量或相对浓度以及与其相关或可以来源于其的任何值或参数。这样的值或参数包括来自从所述生物标志物获得的具体物理或化学性质的强度信号值。特别地,所涵盖的应是由本说明书中其它地方所指定的间接测量获得的值或参数。应当理解,与前述量或参数有关的值也可以由标准数学运算获得。在一个实施方案中,术语“量”是指绝对量。另外,考虑仅测定本文中提及的至少三种生物标志物的量,即,不测定另外的生物标志物(除利钠肽如nt-probnp以外)。例如,如果测定组1的生物标志物,则仅测定oss2、pc4和sm23的量(并且考虑到鉴别心力衰竭和肺部疾病,任选地测定利钠肽)。因此,待测定的脂类生物标志物的组由oss2、pc4和sm23组成。如果测定组2的生物标志物,则待测定的脂类生物标志物由oss2;sm23;cec18:2组成。如果测定组200的生物标志物,则待测定的脂类生物标志物的组由oss2;sm23;cec18:2;pc4组成。在本发明的优选实施方案中,根据本发明的方法还包括测定来自受试者的样品中利钠肽的量,诸如bnp(脑钠肽,也称为b型利钠肽)的量,或者特别是nt-probnp(激素原利钠肽的n-末端)的量,然后将由此测定的bnp或nt-probnp的量与参考进行比较。在优选的实施方案中,特别是在步骤a)中,根据本发明的方法还包括测定来自受试者的样品中bnp(脑钠肽,也称为b型利钠肽)的量,或者特别是nt-probnp(激素原利钠肽的n-末端)的量。然后,将由此测定的bnp或nt-probnp的量与用于bnp或nt-probnp的参考进行比较(在步骤b中)。因此,可以同时测定至少一种或至少三种生物标志物以及bnp或nt-probnp(但是优选通过不同的测定法)。在本发明的另一个优选实施方案中,在另外的步骤c)中测定样品中的nt-probnp或bnp的量,并且在另外的步骤d)中与用于nt-probnp或bnp的参考进行比较。基于步骤b)和d),进行心力衰竭与肺部疾病的鉴别。因此,在至少一种或至少三种生物标志物的量的测定与bnp或nt-probnp的量的测定之间可以存在时间间隔(诸如一天或一周)。备选地,nt-probnp或bnp的量可以来源于待测试的受试者的医疗记录。因此,本发明的方法可以包括提供和/或提取关于nt-probnp或bnp的量的信息(即,该标志物的值)的步骤。nt-probnp和bnp是蛋白质标志物。标志物nt-probnp和bnp是本领域中公知的。bnp是32个氨基酸的多肽,其响应于心脏肌细胞(心肌细胞)的过度拉伸而由心室分泌。nt-probnp是76个氨基酸的n-末端失活蛋白质,其从probnp切割以释放脑钠肽。bnp是活性激素并且具有比相应的失活对应物nt-probnp更短的半衰期。已经详细描述了人bnp和nt-probnp的结构,参见例如wo02/089657、wo02/083913。应当理解,如果测定蛋白质标志物bnp或nt-probnp,则除根据本发明的方法在本文中提及的至少三种(代谢物)生物标志物以外还测定蛋白质标志物。bnp/nt-probnp的量的测定可以不同于在本发明方法的情况下提及的至少一种或至少三种生物标志物的量的测定(因为至少一种生物标志物的量或至少三种生物标志物的量优选通过涉及色谱和质谱的方法来测定,参见本文中其它地方)。优选地,在血液、血清或血浆样品中测定nt-probnp或bnp的量。优选地,通过使用特异性结合nt-probnp或bnp的至少一个抗体来测定所述量。所述至少一个抗体与待测定的标志物(nt-probnp或bnp)形成复合物。其后,测量形成的复合物的量。复合物包含标志物和抗体(其可以被标记以允许检测复合物)。应当理解,其中测定nt-probnp或bnp的样品需要或可以需要预处理,其不同于其中测定本文中提及的其它生物标志物的样品的预处理。例如,不沉淀其中测定该标志物的样品所包含的蛋白质。本领域技术人员将其考虑在内。然而,优选地,在来源于同一样品的等分试样中测量至少一种生物标志物或至少三种生物标志物的量以及bnp或nt-probnp的量。备选地,可以在来源于来自受试者的单独样品的等分试样中测量至少一种生物标志物或至少三种生物标志物的量以及bnp或nt-probnp的量。另外测定利钠肽如nt-probnp或bnp允许更可靠的鉴别。代替nt-probnp或bnp,或者除nt-probnp或bnp以外,本发明还设想了测定anp(心房利钠肽)或nt-proanp(激素原脑钠肽的n-末端)的量。备选地,可以测定c-型利钠肽或利钠肽前体c的量。因此,除至少一种或至少三种(代谢物)生物标志物以外,可以测定利钠肽如nt-probnp、bnp、anp或nt-proanp。在一个实施方案中,本发明的方法还可以包括进行混杂因素的校正。优选地,在与参考进行比较之前,对于年龄、bmi、性别或存在的其它疾病(例如,存在或不存在糖尿病)来调节根据本发明在受试者的样品中测定的值或比率。备选地,参考可以来源于同样对于年龄、bmi、性别进行调节的值或比率。这样的调节可以通过从受试者组衍生出参考和相关值或比率来进行,所述受试者组中的各个受试者在这些参数方面与待研究的受试者基本上相同。备选地,可以通过统计计算进行调节。因此,可以进行混杂因素的校正。优选的混杂因素是年龄、bmi(体重指数)和性别。在另一个实施方案中,不进行混杂因素的校正。与诊断方法相关的术语“参考”是本领域中公知的。根据本发明的参考应当允许鉴别心力衰竭和肺部疾病。合适的参考可以在毫不费力的情况下由技术人员确定。待应用的参考可以是本发明的方法中待测定的至少一种或至少三种生物标志物中的每一种(以及bnp或nt-probnp,如果测定的话)的各自的参考。因此,将本发明方法的步骤a)中提及的至少一种或至少三种生物标志物中每一种的量(以及bnp或nt-probnp的量,如果测定的话)与用于至少一种或至少三种生物标志物中每一种(以及bnp或nt-probnp,如果测定的话)的参考进行比较。例如,如果在步骤a)中测定三种生物标志物,则步骤b)中应用三种参考(用于第一标志物的参考、用于第二标志物的参考和用于第三标志物的参考)。如果在步骤a)中测定bnp或nt-probnp的量,则可以使用另外的用于bnp或nt-probnp的参考。基于至少一种或至少三种生物标志物的量(以及如果测定bnp或nt-probnp,则可以是bnp或nt-probnp的量)与参考的比较,可以实现心力衰竭与肺部疾病的鉴别。术语“参考”是指允许鉴别心力衰竭和肺部疾病(即,存在或不存在本文中提及的心力衰竭、疾病状态或影响)的特性特征的值。优选地,参考是关于本发明所提及的至少一种生物标志物或至少三种生物标志物的阈值,其中在待研究的样品中发现的高于(或低于(取决于标志物))阈值的值指示心力衰竭,而那些低于(或高于(取决于标志物))阈值的值指示肺部疾病。诊断算法,即用于鉴别的算法,可以取决于参考。如果参考量是例如来源于已知患有心力衰竭的受试者或受试者组,则存在心力衰竭优选由测试样品中与参考基本上相同的量表示。如果参考量是例如来源于患有肺部疾病但是不患有心力衰竭的受试者或其组,则存在心力衰竭优选由测试样品中的至少三种生物标志物不同于一种或多种参考(例如,与参考相比,增加(“上调”)或降低(“下调”))的量表示。根据本发明的前述方法,参考(或多种参考)优选是从来自已知患有心力衰竭的受试者或受试者组的样品获得的参考(或多种参考)。在这种情况下,测试样品中发现的基本上相同的至少一种生物标志物的值或至少三种生物标志物中每一种的值指示存在心力衰竭。此外,参考还优选可以来自已知患有肺部疾病的受试者或受试者组。在这种情况下,测试样品中发现的不同于参考的至少一种生物标志物的值或至少三种生物标志物中每一种的值指示不存在肺部疾病。备选地,测试样品中发现的与参考基本上相同的至少一种生物标志物的值或至少三种生物标志物中每一种的值指示存在肺部疾病。作必要修改后,同样适用于包含待研究的受试者的个体群体中生物标志物的相对值或绝对值的计算的参考,最优选平均值或中位值。可以如本文其它地方所指定的来测定所述个体群体的生物标志物的绝对值或相对值。如何计算合适的参考值(优选平均值或中位值)是本领域中公知的。前面提及的受试者的群体应包含多个受试者,优选至少5、10、50、100、1,000或10,000个受试者。应当理解,通过本发明方法评估的受试者和所述的多个受试者中的受试者为相同物种。如果特性特征的值和在定量测定情况下的强度值是基本上相同的,则测试样品的生物标志物的值和参考值是基本上相同的。基本上相同意指两个值之间的差异优选是不显著的,并且其特征应在于强度值至少在参考值的第1和第99百分位数之间、第5和第95百分位数之间、第10和第90百分位数之间、第20和第80百分位数之间、第30和第70百分位数之间、第40和第60百分位数之间的区间内,优选地,参考值的第50、第60、第70、第80、第90或第95百分位数。用于测定两个量或值是否基本上相同的统计检测是本领域中公知的,并且也在本文中其它地方描述。另一方面,观察到的两个值的差异应为统计学上显著的。优选地,在参考值的第45和第55百分位数之间、第40和第60百分位数之间、第30和第70百分位数之间、第20和第80百分位数之间、第10和第90百分位数之间、第5和第95百分位数之间、第1和第99百分位数之间的区间之外,相对值或绝对值的差异是显著的。在优选的实施方案中,特性特征的值也可以是计算结果,诸如分类算法如本文其它地方所述的“弹性网络(elasticnet)”的得分。优选地,参考(即,生物标志物的至少一个特性特征(例如,量)的值或多个值或者其比率将存储在合适的数据存储介质(诸如数据库)中,并且因此也可用于将来的评估。术语“比较”优选是指确定生物标志物的测定值或得分(参见下文)是否与参考基本上相同或与其不同。优选地,如果观察到的差异是统计学上显著的(其可以通过本说明书中其它地方提及的统计技术确定),则认为生物标志物的值与参考不同。如果差异是统计学上不显著的,则生物标志物的值与参考是基本上相同的。基于以上提及的比较,可以评估受试者是否患有心力衰竭(特别是,患有射血分数降低的心力衰竭或另一种亚形式的心力衰竭)或肺部疾病。对于本说明书中提及的具体生物标志物,优选的相对量或比率的变化值(即,表示为平均值的比率的变化)或变化方向的种类(即,导致更高或更低的相对量或比率和/或绝对量或比率的“上调”或“下调”或者增加或降低)在实施例部分中的表1中显示。平均值的比率表示增加或降低的程度,例如值为2表示与参考相比,该量是生物标志物的量的两倍。此外,是否存在“上调”或“下调”是明显的。在“上调”的情况下,平均值的比率应超过1.0,而在“下调”的情况下其将低于1.0。因此,调整的方向也可以来源于表格。应当理解,也可以使用中位值来代替平均值。例如,对于组1的生物标志物,当样品中oss2的量大于参考并且样品中sm23的量小于参考并且样品中pc4的量小于参考时,在受试者中优选诊断为心力衰竭。如其可以来源于实施例部分中表1中最后一列,与肺部疾病患者中的量相比,心力衰竭患者中各个生物标志物的量可以是未改变的。尽管如此,本文中提及的标志物组合的量的组合测定、基于这些量的得分的后续计算和与参考得分的比较使得可以进行本发明的方法。对于参考得分,参见本文中其它地方。如果测定nt-probnp或bnp的量,则该标志物的量增加应指示存在心力衰竭,而降低的或基本上相同的量应指示不存在心力衰竭(并且因此指示存在肺部疾病)。在一个实施方案中,nt-probnp的参考量是约125pg/ml,优选在血清或血浆样品中,特别是对于人受试者。然而,可以使用另外的参考(例如,由于该水平可以取决于年龄)。短语“存在心力衰竭”或“指示心力衰竭”也意指已经由心力衰竭引起的呼吸短促。短语“存在肺部疾病”或“指示肺部疾病”也意指已经由肺部疾病引起的呼吸短促。应当理解,诊断算法(即,用于鉴别的算法)可以取决于待应用的参考或多个参考。然而,这是技术人员所考虑的,所述技术人员能够基于本文中提供的鉴别确定合适的参考值和/或诊断算法。例如,参考可以来源于已知患有心力衰竭的受试者或受试者组。在这种情况下,如下是适用的:关于三酰甘油酯生物标志物,在来自受试者的样品中相比于参考是基本上相同的或是增加的三酰甘油酯的量(或多种三酰甘油酯的量)指示存在心力衰竭。关于能够测定的其余生物标志物,在来自受试者的样品中相比于参考是降低的或是基本上相同的其余生物标志物的量(或多种其余生物标志物的量)指示存在心力衰竭。优选地,比较通过自动化辅助。例如,可以使用包含用于比较两个不同数据集(例如,包含一个或多个特性特征的值的数据集)的算法的合适的计算机程序。这样的计算机程序和算法是本领域中公知的。尽管如上所述,比较也可以手动进行。在本发明的步骤b)的情况下,本发明方法的步骤a)中提及的生物标志物的组的量应该与一个参考或多个参考进行比较。由此,可以鉴别肺部疾病与心力衰竭(特别是作为呼吸短促的原因)。在一个实施方案中,应用用于各自测定的生物标志物的参考,即用于步骤a)中提及的生物标志物中每一个的参考。然而,可以设想基于本发明方法的步骤a)中提及的至少三种生物标志物的量来计算得分(特别是单个得分),即单个得分,并且比较该得分与参考得分。优选地,得分是基于来自测试受试者的样品中至少三种生物标志物的量,并且如果测定nt-probnp或bnp,则基于来自测试受试者的样品中至少三种生物标志物的量以及nt-probnp或bnp的量。例如,如果测定组1的生物标志物的量,则计算的得分是基于来自测试受试者的样品中sm23、oss2和pc4的量。如果另外测定nt-probnp,则得分是基于测试受试者的sm23、oss2、pc4和nt-probnp的量。计算的得分结合至少三种生物标志物的量的信息。此外,在得分中,优选根据其对鉴别的确定的贡献加权标志物。基于在本发明的方法中应用的生物标志物的组合,各个物标志物的权重可以是不同的。得分可以被视为用于在受试者中鉴别心力衰竭和肺部疾病的分类参数。特别地,其使得人们能够提供基于单个得分的鉴别。参考得分优选是这样的值(特别是截止值),其允许在待测试的受试者中鉴别心力衰竭和肺部疾病。优选地,参考是单个值。因此,人们不必解释关于单个标志物的量的全部信息。有利地,使用如本文所述的得分系统,可以使用生物标志物的不同量纲或单位的值,因为该值将在数学上转化成得分。因此,例如,绝对浓度的值可以与峰面积比组合在得分中。可以基于所需的灵敏度或所需的特异性来选择待应用的参考得分。如何选择合适的参考得分是本领域中公知的。例如,实施例部分的实施例6中测定了六个不同的截止值(参考得分)。因此,在本发明的优选实施方案中,如本发明方法的步骤b)中所述的生物标志物的量与参考的比较包括:基于步骤a)中提及的生物标志物的测定量计算得分的步骤b1),和比较由此计算的得分与参考得分的步骤b2)。更优选地,逻辑回归方法用于计算得分,并且最优选地,所述逻辑回归方法包括弹性网络正则化。备选地,至少三种生物标志物中每一种的量与参考进行比较,其中该比较的结果用于得分(特别是单个得分)的计算,并且其中所述得分与参考得分进行比较。因此,本发明特别地涉及一种用于在受试者中鉴别心力衰竭和肺部疾病的方法,包括以下步骤:a)在本文中提及的受试者的样品中测定如上提及的至少三种生物标志物的量;和b1)基于步骤a)中提及的至少三种生物标志物的测定量计算得分,和b2)比较由此计算的得分与参考得分,由此在受试者中鉴别心力衰竭和肺部疾病。如本文中其它地方所述,前述方法还可以包括步骤a)中测定bnp或nt-probnp的量。bnp或nt-probnp的量可以贡献于步骤b)中计算的得分。因此,所述方法包括以下步骤:a)在本文中提及的受试者的样品中测定如上提及的至少三种生物标志物的量以及bnp或nt-probnp的量;和b1)基于步骤a)中提及的至少三种生物标志物的测定量以及bnp或nt-probnp的量计算得分,和b2)比较由此计算的得分与参考得分,由此在受试者中鉴别心力衰竭和肺部疾病。如本文中其它地方所述,nt-probnp或bnp的量也可以来源于待测试的受试者的医疗记录。在这种情况下,不需要在步骤a)中测定该标志物的量。备选地,bnp或nt-probnp的量可以不贡献于步骤b1)中计算的得分。因此,所述方法包括以下步骤:a)在本文中提及的受试者的样品中测定如上提及的至少三种生物标志物的量以及bnp或nt-probnp的量;和b1)基于所述至少三种生物标志物的测定量计算得分,和b2)比较由此计算的得分与参考得分,并且比较bnp或nt-probnp的量与参考,由此在受试者中鉴别心力衰竭和肺部疾病。如本文中其它地方所述,nt-probnp或bnp的量也可以来源于待测试的受试者的医疗记录。在这种情况下,不需要在步骤a)中测定该标志物的量。优选地,参考得分应允许鉴别受试者是否患有心力衰竭或肺部疾病。优选地,通过评估测试受试者的得分是否高于或低于参考得分来进行鉴别。在一个实施方案中,高于参考得分的得分指示心力衰竭,而低于参考得分的得分指示肺部疾病。因此,在一个实施方案中,没有必要提供精确的参考得分。有关参考得分可以通过将灵敏度和特异性与任何得分的灵敏度/特异性相关(优选使用roc曲线分析)而获得。得到高灵敏度的参考得分导致较低的特异性,并且反之亦然。因此,参考得分可以取决于所需的灵敏度和/或特异性。优选地,参考得分是基于与得分相同的标志物(例如,至少三种生物标志物和nt-probnp)。参考得分可以是“截止”值,其允许在受试者中鉴别心力衰竭的存在或不存在。根据本发明,参考得分优选是从来自已知患有心力衰竭的受试者或受试者组的样品获得的参考得分。在这样的情况下,测试样品中基本上相同的得分指示存在疾病,即存在心力衰竭。此外,参考得分还优选可以来自已知患有肺部疾病的受试者或受试者组。在这样的情况下,测试样品中相对于参考得分是不同的(特别是降低的)得分指示存在肺部疾病。备选地,测试样品中与所述参考得分基本上相同的得分指示存在肺部疾病。优选地,基于合适的得分算法计算得分。所述得分算法优选地应该允许基于待测定的生物标志物的量来鉴别受试者是否患有本文中提及的疾病。优选地,通过比较在来自如本文中提及的患有心力衰竭的患者的样品中与在来自患有肺部疾病的患者的样品中关于步骤a)中提及的各个生物标志物的量的信息,预先确定所述得分算法。因此,步骤b)还可以包括确定或执行得分算法的步骤b0)。优选地,在步骤b1)和b2)之前进行该步骤。在一个实施方案中,计算参考得分以便相比于参考得分,测试受试者的得分的值增加指示存在心力衰竭,和/或相比于参考得分,测试受试者的得分的值降低指示存在肺部疾病。特别地,得分可以是截止值。在本发明(例如,方法、设备、用途等)的优选实施方案中,参考得分是单个截止值。优选地,所述值允许将测试受试者分配至患有心力衰竭的受试者组或者患有肺部疾病的受试者组。优选地,受试者的低于参考得分的得分指示在所述受试者中存在肺部疾病,而受试者的大于参考得分的得分指示在所述受试者中存在心力衰竭。在本发明(例如,方法、设备、用途等)的另一个优选实施方案中,参考得分是参考得分范围。在这种情况下,参考得分范围指示心力衰竭,参考得分范围指示存在肺部疾病,或者可以应用两个参考得分范围(即,指示存在心力衰竭的参考得分范围和指示存在肺部疾病的参考得分范围)。技术人员能够在毫不费力的情况下使用本发明方法的步骤a)中提及的至少三种生物标志物(和任选地bnp或nt-probnp)确定合适的得分算法。例如,得分算法可以是数学函数,该数学函数使用关于一群患有心力衰竭的受试者和一群患有肺部疾病的受试者中至少三种生物标志物的量(和任选地bnp或nt-probnp的量)的信息。确定得分算法的方法是本领域中公知的,并且包括微阵列的显著性分析(significanceanalysisofmicroarrays)、树收获(treeharvesting)、cart、mars、自组织映射(selforganizingmap)、频繁项集(frequentitemset)、贝叶斯网络(bayesiannetwork)、微阵列的预测分析(predictionanalysisofmicroarray,pam)、smo、简单逻辑回归、逻辑回归、多层感知器(multilayerperceptron)、贝叶斯网络(bayesnet)、朴素贝叶斯(bayes)、朴素贝叶斯简单(bayessimple)、朴素贝叶斯升级(bayesup)、ib1、lbk、kstar、lwl、adaboost、classviaregression、decorate、多类分类器(multiclassclassifier)、随机委员会(randomcommittee)、j48、lmt、nbtree、part、随机森林(randomforest)、次序分类器(ordinalclassifier)、稀疏线性规划(sparselinearprogramming,splp)、稀疏逻辑回归(sparselogisticregression,splr)、弹性网络、支持向量机(supportvectormachine)、剩余误差平方和的预测(predictionofresidualerrorsumofsquares,press)、惩罚逻辑回归(penalizedlogisticregression)、交互信息(mutualinformation)。优选地,在进行或不进行如本文中其它地方所述的混杂因素的校正的情况下确定得分算法。另外,技术人员能够在毫不费力的情况下使用至少一种(代谢物)生物标志物以及bnp或nt-probnp来确定合适的得分算法。在一个实施方案中,使用具有至少三种生物标志物和任选具有bnp或nt-probnp的弹性网络确定得分算法(也参见实施例部分)。典型地,可以将分类算法用于得分,诸如实施弹性网络方法的那些(zou2005,journaloftheroyalstatisticalsociety,seriesb:301-320,friedman2010,j.stat.sotw.33)。因此,优选地,受试者的得分可以是使用逻辑回归模型计算的,所述逻辑回归模型例如通过使用弹性网络算法(诸如在rpackageglmnet中实施的)而拟合。更特别地,得分可以通过下式计算:或通过其数学上等价的表达式计算,其中特征为:其中xi是对数变换的测量值,例如峰面积比和/或浓度值,并且mi,si是特征特异性比例因子并且wi是模型的系数[w0,截距;,第一特征(例如,nt-probnp或本文中提及的脂类生物标志物中的任一个的系数);w2...wn,另外的特征的系数;,组中的特征的数量]。大于参考得分的得分指示患有心力衰竭的受试者,而低于(或等于)参考得分的得分指示患有肺部疾病的受试者。例如能够确定参考得分以使约登指数(youdenindex)最大化从而用于检测心力衰竭。另外的计算得分和参考得分的优选方法描述于实施例部分。此外,实施例4和5公开了组1的优选参考得分。例如,与nt-probnp组合的组1的参考得分可以是0.738。以上提及的至少三种生物标志物的量应该允许鉴别心力衰竭和肺部疾病。因此,样品中如上指定的至少三种生物标志物能够在原则上用于鉴别心力衰竭和肺部疾病。这特别有助于有效的鉴别,以及改善患者(特别是患有呼吸短促的患者)的临床前和临床管理。除了下文中另外指定的以外,上面进行的术语的定义和解释经必要修改后适用于本发明的以下实施方案(例如,试剂盒、设备、用途、另外的方法等)。通过实施本发明的方法,可以鉴定需要心力衰竭的疗法或需要肺部疾病的疗法的受试者。因此,本发明涉及一种用于鉴定受试者是否需要心力衰竭的疗法或肺部疾病的疗法的方法。因此,本发明优选地涉及一种用于鉴定患有呼吸短促的受试者是否需要心力衰竭的疗法或肺部疾病的疗法的方法。如本文中使用的短语“需要心力衰竭的疗法”或“需要肺部疾病的疗法”意指受试者中的疾病处于这样的状态,其中治疗干预是必需或有利的,以减轻或治疗心力衰竭或肺部疾病或其相关症状。因此,本发明相关研究发现不仅允许在受试者中鉴别心力衰竭和肺部疾病,而且允许鉴定应该由心力衰竭疗法或肺部疾病疗法治疗的受试者。一旦已经鉴定了受试者,则所述方法还可以包括推荐疗法的步骤。根据本发明使用的心力衰竭的疗法优选地涉及这样的疗法,所述疗法包括施用至少一种药物或由其组成,所述至少一种药物选自由以下组成的组:ace抑制剂(acei),β阻断剂、at1抑制剂、醛甾酮拮抗剂、肾素拮抗剂、利尿药、钙敏化剂、洋地黄糖苷(digitalisglykoside)、抗血小板剂、维生素k拮抗剂、蛋白质s100家族的多肽(如de000003922873a1、de000019815128a1或de000019915485a1中所公开的,它们通过引用结合于此)、利钠肽如bnp(奈西立肽(nesiritide)(人重组脑钠肽-bnp))或anp。通常,患者优选地用欧洲心脏病学会的指南所推荐的药物(参考文献:europeanheartjournal(2012),33:1787-1847)进行治疗。在另一个实施方案中,患有心力衰竭的患者如2013年accf/aha指南(参见circulation.2013;128:e240-e327)所推荐的进行治疗。此外,患有心力衰竭的受试者可以用血管紧张素受体阻断剂(arb)、伊伐布雷定(ivabradine)、地高辛和其它洋地黄糖苷、肼屈嗪(hydralazine)和二硝酸异山梨醇酯(血管扩张剂)和ω-3多不饱和脂肪酸进行治疗。在本发明方法的优选实施方案中,通过质谱技术(优选gc-ms和/或lc-ms)、nmr或上文中提及的其它技术来实现至少一种生物标志物或至少三种生物标志物的测定。在这样的情况下,优选地,待分析的样品是预处理的。所述预处理优选包括从样品材料(例如,可以从全血获得血浆或血清)获得至少一种生物标志物,优选至少三种生物标志物,或者甚至可以从样品材料特别地萃取至少一种生物标志物,优选至少三种生物标志物。此外,对于gc-ms,优选地需要另外的样品预处理,诸如至少一种生物标志物的衍生化。另外,预处理还优选包括稀释样品材料以及调节或归一化其中包含的组分的浓度。为此,优选地,可以将归一化标准品以预定量添加到样品,使得进行至少一种生物标志物的量与参考的比较和/或待分析的样品之间的比较。优选地,归一化标准品是如本文中其它地方所限定的内标化合物。例如,可以添加用于每个种类的生物标志物的一个标准品从而允许归一化,例如用于三酰甘油酯的一个标准品、用于鞘磷脂的一个标准品等。在另一个优选的实施方案中,在观察到检测器响应相同的基础上,通过添加与目标代谢物具有不同链长的市售鞘磷脂标准品来实现sm生物标志物的定量。在另外的优选实施方案中,脱脂血浆(市售)中制备校准液以与真实血浆尽可能接近地模拟基质。因此,本发明还涉及在实施本发明时包含至少一种或至少三种生物标志物作为对照的组合物或试剂盒的用途。另外,本发明涉及在实施本发明的方法时使用校准液,所述校准液包含所述组合物,所述组合物包含所述至少一种生物标志物或所述至少三种生物标志物。校准液应该允许用于测定至少一种生物标志物或至少三种生物标志物的量的设备的校准。优选地,校准液用作储备溶液,其用于制备如下文限定的一个校准样品/多个校准样品。优选地,将所述至少一种生物标志物或所述至少三种生物标志物溶于合适的溶剂以一起形成校准液。因此,校准液优选包含合适的溶剂和包含所述至少三种生物标志物的所述组合物。优选地,溶剂包括或者是非极性液体溶剂,如甲基氯、二氯甲烷、氯仿、1,2-二氯乙烷。优选地,使用如本文中其它地方所描述的萃取溶剂。甚至更优选地,溶剂是包含二氯甲烷(dcm)和甲醇的混合物。在一个实施方案中,萃取溶剂包含甲醇和dcm,特别是以约2:1的比率(优选体积比体积)。此外,本发明涉及校准样品的用途,所述校准样品包含本发明的组合物(即,包含关于本发明方法所阐述的至少三种生物标志物)和脱脂血清或血浆。优选地,校准样品还包含合适的溶剂,特别是如本文中其它地方所限定的萃取溶剂。所述组合物、校准液或所述校准样品可以在实施本发明时用作一个或多个对照,特别是用于控制和/或校准用于测定所述至少三种生物标志物的量的一个或多个设备。在优选的实施方案中,脱脂血清或血浆是去纤维蛋白的。在一个实施方案中,所述脱脂样品是脱脂血清。在另一个实施方案中,所述脱脂样品是脱脂血浆。优选地,所述组合物、校准液或校准样品以预定量或比率包含至少三种生物标志物。术语“脱脂”(时常也称为“去脂”)是本领域中公知的。优选地,该术语意指天然存在于所述样品(例如,血清、血浆)中的脂类(诸如甘油三酸脂、胆固醇、磷脂和未酯化的脂肪酸)已经从所述样品中去除(参见例如,cham等人,jlipidres.1976mar;17(2):176-81。在不使用蛋白质沉淀的情况下用于血浆或血清的去脂作用的溶剂体系(asolventsystemfordelipidationofplasmaorserumwithoutproteinprecipitation))。在将所述样品去脂后,将本文中提及的至少三种生物标志物添加(特别是人工添加)到所述脱脂血清或血浆。因此,优选地,将至少三种生物标志物掺加(spiked)到所述脱脂样品。优选地,将至少三种生物标志物以预定量添加到脱脂血清或血浆。优选地,所述预定量应该允许校准和/或对照。备选地,所述预定量应该代表参考。为了将至少一种生物标志物或至少三种生物标志物添加到脱脂血清或血浆,将至少一种或三种生物标志物溶于合适的溶剂(其特别是如本文中其它地方所限定的萃取溶剂)。然后添加所得溶液,即与脱脂血清或血浆组合。优选地,脱脂血清或血浆与溶剂的比率是约1:10至1:1000,更优选约1:100至1:500,或者更优选约1:100至1:200,并且最优选约1:150。对于校准,校准液的等分试样可以与脱脂血清或血浆混合,由此产生校准样品或一系列校准样品。因此,优选地,可以从储备溶液制备另外的校准样品,所述储备溶液是具有最高浓度的生物标志物的校准液。在添加内标的情况下,优选地,将相同量的内标提供到校准样品系列的每个成员中(参加下文)。在本发明的优选实施方案中,组合物、校准液、校准样品或试剂盒包含用于鉴别的脂类生物标志物(即,相同的脂类生物标志物的组合,例如组1、2或200的生物标志物)。然而,可以设想用其它生物标志物替代脂类生物标志物,所述其它生物标志物优选属于相同的化合物种类。因此,可以用不同的三酰甘油酯替代三酰甘油酯生物标志物,可以用不同的胆固醇酯替代胆固醇酯生物标志物,可以用不同的磷脂酰胆碱替代磷脂酰胆碱生物标志物,可以用不同的鞘磷脂替代鞘磷脂生物标志物,可以用不同的神经酰胺替代神经酰胺生物标志物。例如,如果本发明的方法包括测定sm23,则脱脂样品可以包含sm27来代替。sm27优选是指鞘磷脂(d18:1/24:1)或鞘磷脂(d18:2/24:0),或其组合。在优选的实施方案中,sm27是鞘磷脂(d18:1/24:1)。优选的三酰甘油酯、胆固醇酯、磷脂酰胆碱、神经酰胺和鞘磷脂是如本文中其它地方所描述的。如本文中所限定的组合物、校准液、校准样品或试剂盒因此优选包含:i.至少一种三酰甘油酯、至少一种胆固醇酯和至少一种磷脂酰胆碱;ii.至少一种三酰甘油酯、至少一种磷脂酰胆碱和至少一种鞘磷脂;iii.至少一种三酰甘油酯、至少一种胆固醇酯和至少一种鞘磷脂;或iv.至少一种磷脂酰胆碱、至少一种胆固醇酯和至少一种鞘磷脂;在另一个优选实施方案中,组合物、校准液、校准样品或试剂盒可以包含至少一种三酰甘油酯、至少一种胆固醇酯、至少一种鞘磷脂和至少一种磷脂酰胆碱。在特别优选的实施方案中,组合物、校准液、校准样品或试剂盒包含oss2、pc4和sm23。在另一个特别优选的实施方案中,组合物、校准液或校准样品包含oss2、pc4和sm27。在优选的实施方案中,特别是对于组1,pc4:sm27的比率(基于摩尔浓度)在50:1至2,5:1的范围内,在更优选的实施方案中,所述比率在25:1至5:1的范围内。在另一个优选的实施方案中,特别是对于组1,sm27:oss2的比率(基于摩尔浓度)在30:1至1.5:1的范围内,在更优选的实施方案中,所述比率在15:1至2:1的范围内。特别地,pc4:sm27:oss2的比率(基于摩尔浓度)是约100:7.9:1.1。在sm23(而不是sm27)是组合物、校准液、校准样品或试剂盒的一部分的情况下,与如上提及的相同的比率也适用。在另一个特别优选的实施方案中,组合物、校准液、校准样品或试剂盒包含oss2、ce18:2和sm23。在另一个特别优选的实施方案中,组合物、校准液或校准样品包含oss2、ce18:2和sm27。在优选的实施方案中,特别是对于组2,ce18:2:sm27的比率(基于摩尔浓度)在500:1至2:1的范围内,在更优选的实施方案中,所述比率在100:1至10:1的范围内。在另一个优选的实施方案中,特别是对于组2,sm27:oss2的比率(基于摩尔浓度)在30:1至1.5:1的范围内,在更优选的实施方案中,所述比率在15:1至2:1的范围内。特别地,ce8:2:sm27:oss2的比率(基于摩尔浓度)是约100:2.7:0.39。在sm23(而不是sm27)是组合物、校准液、校准样品或试剂盒的一部分的情况下,适用与如上提及的相同的比率。在另一个特别优选的实施方案中,组合物、校准液、校准样品或试剂盒包含oss2、pc4、sm23和ce18:2。在另一个特别优选的实施方案中,组合物、校准液或校准样品包含oss2、pc4、ce18:2和sm27。在优选的实施方案中,特别是对于组200,pc4:sm27的比率(基于摩尔浓度)在50:1至2.5:1的范围内,在更优选的实施方案中,所述比率在25:1至5:1的范围内。在另一个优选的实施方案中,特别是对于组200,sm27:oss2的比率(基于摩尔浓度)在30:1至1.5:1的范围内,在更优选的实施方案中,所述比率在15:1至2:1的范围内。在另一个优选的实施方案中,ce18:2:sm27的比率(基于摩尔浓度)在500:1至2:1的范围内,在更优选的实施方案中,所述比率在100:1至10:1的范围内。特别地,ce18:2:pc4:sm27:oss2的比率(基于摩尔浓度)是约100:34.2:2.7:0.4。在sm23(而不是sm27)是组合物、校准液、校准样品或试剂盒的一部分的情况下,应用与如上提及的相同的比率。另外,本发明涉及一系列本发明的校准液和/或校准样品和/或组合物。优选地,所述一系列校准液/校准样品包括至少三个、更优选至少四个并且最优选至少五个不同的校准液和/或校准样品和/或组合物。所述校准液和/或校准液和/或组合物的不同之处应该在于所述溶液/样品/组合物所包含的脂类生物标志物的预定量。因此,本发明设想了本发明的校准液和/或校准样品的稀释系列物。在一个实施方案中,一系列校准液和/或校准样品所包含的生物标志物的量呈线性关系,以便最高浓度的那个可以用作储备溶液。下文中显示了存在于一种或多种校准液中的生物标志物pc4、ce18:2、sm27和oss2的优选量。实施例部分的表13。表5和5a列出了用于校准的储备溶液。对于组200、组2和组1,表5中显示了生物标志物的优选比率(特别是参见std1列)。优选地,校准液包含oss2、pc4和/或sm27。优选地,浓度如下:pc4:从约6至约193nmol/mloss2:从约0.07至约2.2nmol/ml,和/或sm27:从约0.5至约15,2nmol/ml如果校准液包含ce18:2,则浓度优选从约18至约570nmol/ml。在一个实施方案中,如果测定组1的生物标志物,则使用包含pc4、oss2和sm27的校准液或校准样品。在另一个实施方案中,如果测定组1的生物标志物,则使用包含pc4、oss2和sm23的校准液或校准样品。在一个实施方案中,如果测定组2的生物标志物,则使用包含oss2、ce18:2和sm27的校准液或校准样品或试剂盒。在另一个实施方案中,如果测定组2的生物标志物,则使用包含oss2、ce18:2和sm23的校准液或校准样品或试剂盒。在一个实施方案中,如果测定组200的生物标志物,则使用包含pc4、oss2、ce18:2和sm27的校准液或校准样品或试剂盒。在另一个实施方案中,如果测定组200的生物标志物,则使用包含pc4、oss2、ce18:2和sm23的校准液或校准样品或试剂盒。然而,也可以设想如果测定组1或组2的生物标志物,则可以使用该校准液或校准样品或试剂盒。另外的优选校准液描述于实施例部分中,参见例如实施例3。如上所述,组合物、校准液、校准样品或试剂盒应该包含至少三种生物标志物。应当理解,同一校准液或校准样品不必需包含至少三种生物标志物。所以,可以制备多个校准液或校准样品。相反地,它们可以包含在单独的校准液或校准样品中。因此,如果应该测定三个生物标志物(标志物a、标志物b和标志物c),则各个生物标志物可以包含在一个校准液/样品中(具有标志物a、b和c)、两个校准液/样品中(一个具有a和b,一个具有c;或者一个具有a和c,并且一个具有b;一个具有a和c,并且一个具有b),或者三个校准液/样品中。因此,本发明涉及一种试剂盒,其包含:i)单个校准液,所述单个校准液包含关于本发明方法所阐述的至少三种生物标志物,或ii)多个校准液,所述多个校准液包含关于本发明方法所阐述的至少三种生物标志物,其中优选地,在所述多个校准液中,每个校准液包含所述至少三种生物标志物中的至少一种。更优选地,所述多个校准液中的校准液不包含相同的生物标志物。在优选的实施方案中,所述至少三种生物标志物是组1、2或200的生物标志物,其中sm23已经被sm27替代。例如,对于组1,试剂盒包含生物标志物oss2、pc4和sm23,或者oss2、pc4和sm27。上文描述了一些组的生物标志物的优选浓度或比率。另外,试剂盒可以包含本发明的内标溶液。优选地,内标溶液包含磷脂酰胆碱c19:0c19:0。在本发明的组合物、校准液、校准样品或试剂盒的优选实施方案中,本发明的组合物、校准液、校准样品或试剂盒还包含一种或多种内标化合物。优选地,组合物、校准液、校准样品或试剂盒还包含磷脂酰胆碱c19:0c19:0。在本发明的一个实施方案中,对于组1、2和/或200,具有最高浓度的相应生物标志物的校准样品以0.05:1至2:1的比率包含oss2和磷脂酰胆碱c19:0c19:0(基于摩尔浓度),在优选的实施方案中,所述比率在0.1:1至0.5比1的范围内。特别地,对于组1,pc4:sm27:oss2:磷脂酰胆碱c19:0c19:0的比率(基于摩尔浓度)是约100:7.9:1.1:5.2。如果使用sm23来代替sm27,也适用相同的比率。本发明也涉及如上文所描述的内标溶液。优选地,内标溶液包含至少一种内标化合物。在一个实施方案中,内标化合物是磷脂酰胆碱c19:0c19:0。优选地,将至少一种内标化合物溶于合适的溶剂以一起形成内标溶液。因此,内标溶液优选包含合适的溶剂和包含所述至少三种生物标志物的所述组合物。优选地,溶剂包括或者是非极性液体溶剂,如甲基氯、二氯甲烷、氯仿、1,2-二氯乙烷。优选地,使用如本文中其它地方所描述的萃取溶剂。甚至更优选地,溶剂时包含二氯甲烷(dcm)和甲醇的混合物。在一个实施方案中,萃取溶剂包含甲醇和dcm,特别是以约2:1的比率(优选体积比体积)。此外,在优选的实施方案中,本发明的方法还包括根据步骤b)中确定的鉴别结果建议和/或管理受试者的步骤。在一个方面,这样的建议可以是生活方式的适应、营养学等,目的在于改善生活环境、施用如本文中其它地方详细阐述的治疗措施和/或定期疾病监测。在前述方法的另一个优选实施方案中,通过如本文中其它地方所述的评估单元实施步骤b)。另外,在一个方面,本发明还涉及一种治疗心力衰竭的方法,所述方法包括用于在受试者中鉴别心力衰竭和肺部疾病的方法中的步骤a)和b),和在受试者具有心力衰竭疗法或肺部疾病疗法的情况下治疗受试者的另外的步骤c)。除了下文中另外指定的以外,上面进行的术语的定义和解释经必要修正后应用于本发明的以下实施方案。用于测定至少一种或至少三种生物标志物的前述方法可以在设备中实施。如本文中所使用的设备应该至少包括前述装置。此外,所述设备优选还包括用于比较和评估至少一种或至少三种生物标志物的所检测的特性特性以及优选测定的信号强度的装置。优选地,所述设备的装置可操作地彼此连接。如何以操作方式连接所述装置将取决于包含在设备中的装置类型。例如,当应用用于自动地定性或定量测定生物标志物的装置时,通过所述自动操作装置获得的数据可以通过例如计算机程序处理,以便便于评估。优选地,在这样的情况下,这种装置包含在单个设备中。因此,所述设备可以包括用于生物标志物的分析单元和用于处理所得数据进行评估的计算机单元。优选的设备是可以在没有专门临床医生的具体知识时应用的那些,例如,仅仅需要装载样品的电子设备。备选地,用于测定至少一种生物标志物的方法可以在一个系统中实施,该系统包含优选为可操作地彼此连接的几个设备。特别地,装置必须以允许实施如上文详细所述的本发明方法的方式连接。因此,如本文中所使用的,可操作地连接优选意指功能上地连接。取决于用于本发明系统的装置,可以通过允许数据在所述装置之间传输的方式连接各装置与其它装置而将所述装置功能上地连接。优选的系统包括用于测定生物标志物的装置。如本文中所使用的用于测定生物标志物的装置涵盖用于分离生物标志物的装置,诸如色谱设备,以及用于代谢物测定的装置,诸如质谱设备。合适的设备已经在上面详细描述。在本发明的系统中使用的用于化合物分离的优选装置包括色谱设备,更优选用于液相色谱、hplc和/或气相色谱的设备。用于化合物测定的优选设备包括质谱设备,更优选gc-ms、lc-ms、直接输注质谱、ft-icr-ms、ce-ms、hplc-ms、四极质谱、连续偶联质谱(包括ms-ms或ms-ms-ms)、icp-ms、py-ms或tof。优选地,分离和测定装置彼此连接。最优选地,lc-ms(特别是hplc-ms)和/或gc-ms用于本发明的系统中,如在说明书其它地方详细描述的。应当进一步包括用于比较和/或分析从测定至少一种生物标志物或至少三种生物标志物(以及任选地nt-probnp或bnp)的装置获得的结果的装置。用于比较和/或分析结果的装置可以包括至少一个数据库和用于比较结果的实施计算机程序。前述系统和设备的优选实施方案也在下面详细描述。因此,本发明涉及诊断设备,其包含:a)包含至少一个检测器的分析单元,所述至少一个检测器用于由所述至少一个检测器检测的在本文中关于本发明所提及的至少一种生物标志物(特别是至少三种生物标志物),并且所述分析单元可操作地连接至;b)包含计算机和数据库的评估单元,所述计算机包含有形嵌入的计算机程序代码用于进行至少一种生物标志物的测定量(特别是至少三种生物标志物的测定量)与一个或多个参考量的比较,所述数据库包含用于所述生物标志物的所述一个或多个参考量,由此鉴别心力衰竭和肺部疾病。备选地,b)中的评估单元包含计算机,所述计算机包含有形嵌入的计算机程序代码用于计算基于至少三种生物标志物的测定量的得分并且用于进行计算得分与参考得分的比较,其中所述评估单元还包括包含所述参考得分的数据库,由此鉴别心力衰竭和肺部疾病。在本文中其它地方确定术语“得分”和“参考得分”。在一个实施方案中,设备还包含至少一个另外的分析单元,所述分析单元包含用于nt-probnp和/或bnp的至少一个检测器,其中所述另外的分析单元适用于测定由所述至少一个检测器检测的bnp和/或nt-probnp的量。因此,本发明涉及诊断设备,其包含:a)包含至少一个检测器的分析单元,所述至少一个检测器用于在本文中关于本发明所提及的至少一种生物标志物(特别是至少三种生物标志物),其中所述分析单元适用于测定由所述至少一个检测器检测的所述一种或多种生物标志物的量,以及任选地至少一个另外的分析单元,所述另外的分析单元包含用于nt-probnp和/或bnp的至少一个检测器,其中所述另外的分析单元适用于测定由用于nt-probnp和/或bnp的至少一个检测器检测的bnp和/或nt-probnp的量,并且可操作地连接至;b)包含计算机和数据库的评估单元,所述计算机包含有形嵌入的计算机程序代码用于进行至少一种或至少三种生物标志物的测定量以及任选地bnp或nt-probnp的测定量与参考量的比较,所述数据库包含用于所述生物标志物的所述参考量,由此鉴别心力衰竭和肺部疾病。备选地,b)中的评估单元包含计算机,所述计算机包含有形嵌入的计算机程序代码用于计算基于至少三种生物标志物以及bnp和/或nt-probnp的测定量的得分并且用于进行计算得分与参考得分的比较,其中所述评估单元还包括包含所述参考得分的数据库,由此鉴别心力衰竭和肺部疾病。优选地,所述设备适合于实施本发明的方法。优选地,计算机程序代码能够执行如本文中其它地方详细指定的本发明方法的步骤。因此,所述设备能够用于基于受试者的样品,如本文中所指定的在受试者中鉴别心力衰竭和肺部疾病。在优选的实施方案中,设备包含另外的数据库以及另外的有形(tangibly)嵌入的计算机程序代码,所述数据库包含指示表1中相应生物标志物的调整类型和/或调整值倍数,所述有形嵌入的计算机程序代码用于进行测定的调整类型和/或调整值倍数与数据库所包含的那些之间的比较。在另一个优选实施方案中,设备包含另外的数据库以及另外的有形嵌入的计算机程序代码,所述数据库包含指示基于至少三种生物标志物的量计算的得分的调整类型和/或调整值倍数,所述有形嵌入的计算机程序代码用于进行用于得分的测定的调整类型和/或调整值倍数与数据库所包含的那些之间的比较。一般而言,本发明构思了在本文中关于在受试者中鉴别心力衰竭和肺部疾病的方法所提及的受试者样品中的至少三种生物标志物以及任选地bnp或nt-probnp用于在受试者中鉴别心力衰竭和肺部疾病的用途或用于制备用于在受试者中鉴别心力衰竭和肺部疾病的药物和/或诊断组合物的用途。优选的生物标志物组合在本文中其它地方描述。一般而言,本发明构思了受试者样品中的选自表1的第1列所示的生物标志物的至少一种生物标志物以及任选地bnp或nt-probnp用于在受试者中鉴别心力衰竭和肺部疾病的用途或用于制备用于在受试者中鉴别心力衰竭和肺部疾病的药物和/或诊断组合物的用途。本发明也涉及一种用于实施本发明方法的试剂盒,所述试剂盒包含检测剂,所述检测剂用于关于在受试者中鉴别心力衰竭和肺部疾病的方法所阐述的至少三种生物标志物中的每一种生物标志物。在一个实施方案中,试剂盒还可以包含用于利钠肽如nt-probnp或bnp的检测剂。如本文中所使用的术语“试剂盒”是指前述组分的集合,优选地,分开地或在单个容器内提供。检测剂可以以“随时可用的”液体形式或以干燥形式提供于本发明的试剂盒中。试剂盒还可以包括对照、缓冲剂和/或试剂。试剂盒还包含用于实施本发明方法的说明书,以及关于参考值的信息。这些说明书可以是手册的形式,或者可以是可电子访问的信息。后面的信息可以提供于数据存储介质或设备如光学存储介质(例如,光盘)上,或者直接地在计算机或数据处理设备上。合适的用于生物标志物的检测剂已经本文中其它地方详细描述。例如,检测剂可以是能够特异性结合生物标志物的抗体或适体或其它分子。优选地,本发明的试剂盒可以用于实施本发明的方法,即用于如本文中其它地方详细指明的在受试者中鉴别力衰竭与肺部疾病。上文中给出的定义和解释也适用于以下方法和用途。此外,本发明涉及一种用于在受试者中鉴别心力衰竭和肺部疾病的方法,包括以下步骤:a)在受试者的样品中测定至少一种生物标志物的量,所述至少一种生物标志物选自由以下组成的组:磷脂酰胆碱(c18:1c18.1)、sm(d18:1/18:1)、sm(d18:2/17:0)、oss2、ppo1、ppp、sop2、spp1、ssp2和sss;和b)比较如在步骤a)中测定的所述生物标志物的量与参考,由此在受试者中鉴别心力衰竭和肺部疾病。此外,本发明涉及受试者样品中的至少一种生物标志物用于鉴别心力衰竭和肺部疾病的用途,所述至少一种生物标志物选自由以下组成的组:磷脂酰胆碱(c18:1c18.1)、sm(d18:1/18:1)、sm(d18:2/17:0)、oss2、ppo1、ppp、sop2、spp1、ssp2和sss。本发明的实施方案/项目组1的项目在优选的实施方案中,测定组1中的生物标志物的量。待诊断的心力衰竭可以分为nyhai级或ii级。优选地,进行测定用于诊断hfref,特别是诊断左心室射血分数低于50%但是大于35%的hfref。另外,可以设想受试者不显示出心力衰竭的症状。另外,除至少三种生物标志物以外,可以设想测定nt-probnp的量。优选地,不进行混杂因素(特别是年龄、bmi和性别)的校正。对于组1,以下项目是优选的。优选地,说明书中以上给出的定义和解释经必要修改后适用于本发明的以下优选项目。1.一种用于在受试者中鉴别心力衰竭和肺部疾病的方法,所述方法包括以下步骤:a.在受试者的样品中测定sm23、oss2和pc4的量,和b.比较在步骤a.中测定的量与参考,由此在受试者中鉴别心力衰竭和肺部疾病。2.项目1所述的方法,其中所述受试者被怀疑患有心力衰竭或肺部疾病。3.项目1和2所述的方法,其中所述受试者患有呼吸短促。4.项目1至3中任一项所述的方法,其中所述受试者是人受试者。5.项目1至4中任一项所述的方法,其中所述样品是血液、血清或血浆。6.项目1至5中任一项所述的方法,其中所述方法不包括测定nt-probnp或bnp。7.项目1至6中任一项所述的方法,还包括测定在样品/来自所述受试者的样品中nt-probnp或bnp的量,并且比较nt-probnp或bnp的量与参考。8.项目1至7中任一项所述的方法,还包括进行混杂因素的校正。9.项目8的方法,其中所述混杂因素是年龄、bmi和/或性别,特别是年龄、bmi和性别。10.项目1至9所述的方法,其中不进行混杂因素的校正。11.项目10所述的方法,其中不进行混杂因素(confounder)年龄、bmi和性别的校正。12.项目1至11中任一项所述的方法,其中在步骤b)中基于所述至少三种生物标志物的测定量来计算得分,其中所述参考是参考得分,并且其中比较所述得分与所述参考得分。13.项目1至12中任一项所述的方法,其中所述参考或所述参考得分来自已知患有肺部疾病的受试者或受试者组。14.项目12的方法,其中测试样品中与所述参考或参考得分相比基本上相同的至少三种生物标志物中每一种的值或者得分指示存在肺部疾病。15.项目1至12中任一项所述的方法,其中所述参考或所述参考得分来自已知患有心力衰竭的受试者或受试者组。16.项目15任一项的方法,其中测试样品中发现的与所述参考或参考得分相比基本上相同的所述至少三种生物标志物中每一种的值或者得分指示存在心力衰竭。17.项目1至16中任一项所述的方法,其中通过质谱(ms)测定所述至少三种生物标志物的量。18.项目17所述的方法,其中所述质谱是lc-ms,特别是lc-ms/ms或hplc-ms,特别是hplc-ms/ms。19.项目17和18所述的方法,其中所述质谱包括电离步骤,其中所述至少三种生物标志物被电离。20.项目19所述的方法,其中通过电喷雾电离,特别是通过正离子模式电喷雾电离,进行电离步骤。21.项目1至20所述的方法,其中oss2是tag(c18:1,c18:0,c18:0)。22.项目1至21所述的方法,其中磷脂酰胆碱(c16:0c18:2)。23.项目1至22中任一项所述的方法,其中sm23是鞘磷脂(d18:1/23:1),ii)鞘磷脂(d18:2/23:0),iii)鞘磷脂(d17:1/24:1),或iv)鞘磷脂(d18:1/23:1)、鞘磷脂(d18:2/23:0)和鞘磷脂(d17:1/24:1)的组合。24.项目23中任一项所述的方法,其中sm23的量通过以下测定:i)测定鞘磷脂(d18:1/23:1)的量,鞘磷脂(d17:1/24:1)的量,或特别是鞘磷脂(d18:1/23:1)、鞘磷脂(d18:2/23:0)和鞘磷脂(d17:1/24:1)的组合量。25.项目1至24中任一项所述的方法,其中通过测定鞘磷脂(d18:1/23:1)、鞘磷脂(d18:2/23:0)和鞘磷脂(d17:1/24:1)的组合量来测定sm23的量。26.一种用于实施根据项目1至25中任一项所述的方法的诊断设备,所述设备包含:a)分析单元,所述分析单元包含用于生物标志物sm23、oss2和pc4的至少一个检测器,其中所述分析单元适用于测定由所述至少一个检测器检测的所述生物标志物的量,并且可操作地连接至;b)包含计算机和数据库的评估单元,所述计算机包含有形嵌入的计算机程序代码用于进行所述生物标志物的测定量与参考量的比较,所述数据库包含用于所述生物标志物的所述参考量,由此鉴别肺部疾病与心力衰竭。27.受试者的样品中的sm23、oss2和pc4用于在受试者中鉴别心力衰竭和肺部疾病的用途或用于制备用于在受试者中鉴别心力衰竭和肺部疾病的药物和/或诊断组合物的用途。附图显示了:图1:使用组1+nt-probnp相比于单独的nt-probnp,对于单个患者水平计算的来自测试集的131名hfref患者(十字)和34名肺部疾病患者(圆圈)的预测概率。以下实施例对本发明进行了说明。然而,它们不应被视为限制本发明的范围。实施例1:用于鉴别心力衰竭和肺部疾病的生物标志物和生物标志物组表1显示了用于鉴别心力衰竭和肺部疾病的生物标志物。表2和2a显示了用于鉴别心力衰竭和肺部疾病的生物标志物组,其代表来自表1的生物标志物的组合。表1还列出了当比较心力衰竭患者与健康对照时生物标志物的变化方向。使用anova模型log10(生物标志物)~组+中心+(性别+年龄+bmi)2,通过anova计算每个生物标志物的变化方向,其中‘生物标志物’是生物标志物的峰面积除以相应内标的峰面积(参见实施例3),组是特定样品所属的研究组(心力衰竭患者或健康对照),中心是采集样品的临床中心(柏林、基尔或海德堡),性别、年龄和bmi分别是从其采集样品的受试者的性别、年龄和bmi。对于来自表1的生物标志物,使用anova模型log10(生物标志物)~组+中心+(性别+年龄+bmi)2,通过anova计算hfref患者中相对于患有肺部疾病的受试者的变化方向,其中‘生物标志物’是以μg/dl给出的生物标志物的绝对浓度(参见如下实施例3),‘组’是特定样品所属的研究组(hfref患者或肺部疾病患者),‘中心’是采集样品的临床中心(柏林、基尔或海德堡),性别、年龄和bmi分别是从其采集样品的受试者的性别、年龄和bmi。表2和表2a显示了用于鉴别hf与肺部疾病的生物标志物组,其代表来自表1的生物标志物的具体组合。表1的最后一列显示了与肺部疾病患者相比,心力衰竭患者中各个生物标志物的量的比较。表2:用于鉴别心力衰竭和肺部疾病的生物标志物组,其代表来自表1的生物标志物的具体组合表2a:另外的用于鉴别心力衰竭和肺部疾病的生物标志物组,其代表来自表1的生物标志物的具体组合组号组的组成(生物标志物)生物标示物编号200oss2;sm23;cec18:2;pc44201cec18:2;sm18;sss3202cec18:2;pc8;sm18;sm2;sm24;sss6203cec18:2;sm18;sm21;sm24;sss5204sm24;cec18:2;sm23205sm2;sss;cec18:23206sm24;sss;cec18:23实施例2:研究设计-选择标准和所得患者队列(cohorts)心力衰竭患者的一般选择标准:一般纳入标准是:书面知情同意,年龄为35–75岁,bmi为20–35kg/m2,在纳入前体重(±2.0kg)和用药(关于心脏、血压、糖尿病、脂类、精神药理学和甲状腺的用药)是稳定的达至少4周。一般排除标准是:nyha功能iv级,成像(超声心动图或mri)>6个月(在特殊情况下<12个月),取样时贫血(hb<10g/dl),7天内icd电击,妊娠,最近4个月内卒中或心肌梗死,最近一个月内手术或药理学疗法的任何改变,已知的慢性或急性炎性疾病(例如,乙肝或丙肝、hiv等,由体检或病史指示),肾功能下降,不受控的糖尿病(hba1c>8%),自身免疫病(例如,1型糖尿病),最近5年内的恶性肿瘤(皮肤基底细胞瘤除外),和相关的器官功能异常(hf除外)。心力衰竭患者的具体选择标准:缺血性心肌病(icmp)定义为射血分数(ef)≤50%(来源于超声心动图或mri)的左心室(lv)功能下降,以及在血管造影上确认的冠状动脉疾病(cad;至少一个冠状动脉的腔内阻塞>50%)病史,得到局部或全部室壁运动异常的成像证据。在不具有冠状动脉造影的极少数情况下(n=3),通过心脏磁共振成像(cmri)和/或ct-血管造影的缺血性成因的备选成像证据被接受作为纳入标准。扩张性心肌病(dcmp)定义为超声心动图或mri上lvef≤50%的lv功能下降。排除标准是:在血管造影上确认的冠状动脉疾病(cad;至少一个冠状动脉的腔内阻塞>50%),得到局部室壁运动异常的成像证据。在具有冠状动脉造影(n=5)或缺少冠状动脉造影(n=9)的cad证据的极少数情况下,当存在无法由cad或缺血性成因解释的心肌活检和/或成像证据时,患者被分类为dcmp。肥厚性心肌病(hcmp)定义为向心性心脏肥大(超声心动图:心中隔>12mm,并且心肌后壁>11mm)并且具有舒张性心力衰竭(未损伤或轻度损伤的泵血功能,lvef≥50%),不具有>18mm的心中隔厚度。健康对照组的选择标准:正常对照患者的排除标准是:年龄<35岁或年龄>75岁,任何慢性疾病或急性病,任何定期药物摄入,主动吸烟,慢性药物或酒精滥用(根据病史或临床证据)。所有对照进行正常体检,正常的静息12导联心电图,在系列测量中不具有高血压值。超声心动图或心脏mri(cmri)显示不存在lv肥大(正常:中隔壁厚度<11mm,后壁厚度<11mm)、lv扩张(正常:≤55mm)、lv收缩功能障碍(正常:lvef≥55%)、瓣膜性心脏病或者负荷超声心动图或cmri上负荷诱导的lv室壁运动异常或灌注缺陷。肺部疾病患者的选择标准:纳入标准是:由肺部成因(包括慢性阻塞性肺病(copd)、肺纤维化或哮喘)造成的呼吸困难(fev1/fvc<0.70;fev1≥30%)。患者也需要进行超声心动图检查以确认lvef≥55%。排除标准是:copdgoldiv期(fev1/fvc<0.70;fev1<30%)或慢性呼吸衰竭、囊性纤维化、急性加重期和肺性高血压。心力衰竭患者队列:来源于上述标准的心力衰竭患者队列包括823名受试者,包括190名男性和女性dcmp患者、181名男性和女性icmp患者和208名男性和女性hcmp患者以及244名健康对照。从该心力衰竭患者队列,534名随机选择的受试者(分层为亚组)取作用于统计分析的训练集,并且其余289名受试者取作测试集。在训练集的534名随机选择的受试者中,123人是dcmp患者、117人是icmp患者、134人是hcmp患者,并且160人是健康对照。在测试集的289名受试者中,67人是dcmp患者、64人是icmp患者、74人是hcmp患者,并且84人是健康对照。肺部疾病患者队列:相应的肺部疾病队列包括34名患者。实施例3:分析方案来自心力衰竭患者的样品进行半定量分析,即,生物标志物的量作为每个生物标志物的峰面积除以同一样品中相应内标的峰面积而获得。pc5-40用作sm23、cec18:2和oss2的内标,而pc5-70用作pc4的内标。pc5-40和pc5-70两者是指相同的化学物质(磷脂酰胆碱[pc]c19:0/c19:0),但是差别在于用于数据获取的mrm设置(表4)。来自心力衰竭患者的样品的分析包括以下步骤:‘样品萃取和hplc-ms/ms系统’、‘液相色谱’和‘使用多反应监测(mrm)的质谱’,这些步骤在下文中描述。来自肺部疾病患者的样品进行定量分析,即,生物标志物的量作为绝对浓度获得并且以单位μg/dl报告。使用校准样品实现绝对定量,所述校准样品含有已知量的sm27(鞘磷脂d18:1/24:1,对于sm23的定量,购自avantipolarlipids,ca,u.s.a.)、pc4、cec18:2和oss2。通过将来自肺部疾病患者的每个样品中每个生物标志物的峰面积比上相应内标的峰面积的比率与校准样品中每个生物标记物的峰面积比上相应内标的峰面积的比率进行比较,计算绝对浓度。pc5-40用作sm23、cec18:2和oss2的内标,而pc5-70用作pc4的内标。pc5-40和pc5-70两者是指相同的化学物质(磷脂酰胆碱[pc]c19:0/c19:0),但是差别在于用于数据获取的mrm设置(表4)。来自肺部疾病患者的样品的分析包括以下步骤:‘样品萃取和hplc-ms/ms系统’、‘校准样品的制备’、‘液相色谱’和‘使用多反应监测(mrm)的质谱’,这些步骤在下文中描述。样品萃取和hplc-ms/ms系统:在2ml安全扣微量离心管(eppendorf,德国)中,将10μl血浆与含有甲醇/二氯甲烷(比率为2:1,v/v)的1500μl萃取溶剂和10μl内标混合物进行混合。内标溶液含有萃取溶剂中的41.28μg/ml磷脂酰胆碱(pc)c19:0/c19:0(avantipolarlipids,ca,u.s.a.)。超纯水(milli-qwatersystem,millipore)和分析纯化学品用于萃取、稀释或作为lc溶剂。由市售人血浆(recipechemicals+instrumentsgmbh)制备质量控制和参考样品。脱脂血浆(血浆,人,去纤维蛋白的,脱脂的,2x活性炭处理的,高度纯化的;usbio)用于制备校准品和空白。在20℃彻底混合5分钟后,通过离心10分钟去除沉淀的蛋白质。将液体上清液的等分试样转移至适当的玻璃瓶中并储存于-20℃直至通过lc-ms/ms进行分析。将多达5μl的粗萃取物注入由以下组成的hplc-ms/ms系统:agilent1100lc系统(agilenttechnologies,waldbronn,germany),偶联至absciextmapi4000三重四级质谱(absciex,toronto,加拿大;该方法旨在与例如absciextm3200md台式lc-ms/ms系统兼容)。校准样品的制备:为了产生用于sm23、pc4、cec18:2和oss2的绝对定量的校准曲线,在meoh/ch2cl2(2/1,v/v)中制备包含已知量的sm27(对于sm23的定量)、pc4、cec18:2和oss2的7个校准液(std1、std2、std3、std4、std5、std6、std7)(表5)。表5a中给出了校准样品/校准液中化合物(相对于cec18:2)的浓度比,用于校准样品制备。从这些校准液的每一个中,将50μl添加到10μl脱脂血浆(市售)和750μlmeoh/ch2cl2(2/1)的混合物中。如上所述,添加10μl内标,并且添加另外的700μlmeoh/ch2cl2(2/1),从而最终校准样品体积为1520μl。然后,以与用于生物标志物测定的实际血浆样品相同的方式处理所得的7个校准样品。液相色谱:在具有c18固定相的市售反相分离柱(expressc18柱(5cm×2.1mm,2.7μm,phenomenex,德国)上,在55℃进行hplc分析,使用溶剂a(甲醇、水、甲酸,400:400:1,w/w/w)相对于溶剂b(叔丁基甲醚、2-叔丁基甲醚、甲醇、甲酸,400:200:100:1,w/w/w)的梯度。在甘油三酸脂的洗脱时间期间,柱后添加溶剂c(甲醇、水中的0.1m甲酸铵溶液,20:3,w/w)。表3中给出了梯度的细节。表3:分析方案中使用的液相色谱梯度使用多反应监测(mrm)的质谱:源参数为:雾化器气体,50;加热器气体,60;气帘气,25;cad气体,4;离子喷雾电压,5500v;温度,400℃;质量范围之间的间隔,5ms;分辨率q1和q3,单位。表4列出了每个代谢物生物标志物中含有的mrm参数、保留时间和分子种类。不同的mrm设置用于来自心力衰竭患者的样品和来自肺部疾病患者的样品(表4中表示为星号)。表4:用于分析方案中的lc-ms/ms分析的保留时间和mrm设置每个代谢物生物标志物的mrm设置(q1,第一质量跃迁;q3,第二质量跃迁;dp,去簇电压;ep,入口电压;ce,碰撞能量;cxp,碰撞室出口电压)和保留时间(rt)。*<用于心力衰竭样品的设置>/<用于肺部疾病样品的设置>表5:meoh/ch2cl2(2/1)中的校准液,用于校准样品制备表5a:校准样品/校准液中化合物的浓度比,用于校准样品制备,例如用于测定pc4、ce18∶2、sm23和oss2实施例4:统计学对于来自测试集的67名dcmp患者和64名icmp患者(一起被称为来自测试集的hfref患者)以及对于34名肺部疾病患者,使用组1+nt-probnp,通过以下描述的步骤计算预测概率。可以在另外纳入nt-probnp或不另外纳入nt-probnp的情况下,使用表2和2a中列出的任一组进行等效计算。预测概率的计算:每个样品的预测概率计算为其中特征为xi是在考虑表6和6a列出的单位的情况下对数变换的分析结果,mi和si是特征特异性比例因子,并且wi是模型的系数(表6和6a;w0,截距;w1,nt-probnp的系数;w2...wn,代谢物特征的系数;n,组加上nt-probnp中特征总数)。特征特异性比例因子mi和si:选择用于来自心力衰竭患者和健康对照的样品的特征特异性比例因子mi和si(表6),以便所有823名患者的对数变换的和按比例的峰面积比的平均值为零,并且标准差为一。利用另外的步骤从来自心力衰竭患者和健康对照的样品中确定用于肺部疾病患者的样品的特征特异性比例因子mi和si(表6a),所述另外的步骤涉及由市售人血浆组成的超级池(ultrapool)样品,其混合均匀并分成足够数量的等分试样。在每一天的分析中,来自心力衰竭患者和健康对照的样品包括超级池样品的等分试样。用这种方式,获得了超级池样品的等分试样中每个生物标志物的峰面积比。另外,使用含有已知量的sm27(对于sm23的定量)、pc4和oss2的校准样品,以与对于来自肺部疾病患者的样品所述相同的方式获得另外的超级池样品的等分试样中每个生物标志物的绝对浓度。通过将来自心力衰竭患者或健康对照的每个样品中sm23、pc4和oss2的峰面积比除以在同一天分析中测量的超级池样品的等分试样中相应峰面积比的中位值,然后分别乘以超级池样品中sm23、pc4和oss2的已知浓度,计算来自心力衰竭患者和健康对照的样品中sm23、pc4和oss2的绝对浓度。然后,选择用于来自肺部疾病患者的样品的特征特异性比例因子mi和si,以便所有823名心力衰竭患者和健康对照的对数变换的和按比例的绝对浓度的平均值为零,并且标准差为一。系数wi:如上所述,534名随机选择的心力衰竭患者和健康对照(分层为亚组)取作用于统计分析的训练集,并且其余289名心力衰竭患者和健康对照取作测试集。使用在r包glmnet(rpackageglmnet)中实施的弹性网络算法(zou,h.和hastie,t.,2003:regressionshrinkageandselectionviatheelasticnet,withapplicationstomicroarrays.journaloftheroyalstatisticalsociety:seriesb,67,301-320;friedman,j.,hastie,t.和tibshirani,r,2010:regularizationpathsforgeneralizedlinearmodelsviacoordinatedescent.j.stat.softw.33),在534名来自训练集的心力衰竭患者和健康对照上拟合系数wi。等权重地给出l1和l2补偿(penalties)。截止值:使用组1+nt-probnp,对于相应的样品,将大于0.738的截止值的预测概率取作阳性诊断,并且将小于或等于该截止值的预测概率取作阴性诊断。选择截止值为0.738,从而获得与单独使用nt-probnp时相同的用于在训练集的534名心力衰竭患者和健康对照中检测心力衰竭的灵敏度。将截止值125pg/ml单独用于nt-probnp。曲线下面积(auc):计算曲线下面积(auc)作为组1+nt-probnp以及单独的nt-probnp的诊断性能的量度。由接受者操作特征(roc)曲线确定auc,所述曲线比较了来自测试集的131名hfref患者与34名肺部疾病患者。在双正态模型的基础上计算近似roc曲线以比较曲线下面积(zhoux-h,mcclishdk,obuchowskina.statisticalmethodsindiagnosticmedicine:johnwiley&sons;2009)。为了实现双正态性,使用对数函数转换预测概率并且将nt-probnp值进行对数变换。表6:对于来自心力衰竭患者和健康对照的样品(半定量输入数据),用于使用组1+nt-probnp计算预测概率的比例因子mi和si以及系数wi。n.a.,不适用表6a:对于来自患有肺部疾病的患者的样品(定量输入数据),用于使用组1+nt-probnp计算预测概率的比例因子mi和si以及系数wi。n.a.,不适用实施例5:使用组1+nt-pro-bnp鉴别hfref患者与肺部疾病患者为了评估组1+nt-probnp对于鉴别hfref患者与肺部疾病患者的性能,选择来自测试集的hfref患者的131个样品和肺部疾病患者的34个样品(肺部成因的呼吸困难,并且不存在基于实施例2所述标准的收缩性和舒张性lv功能障碍)用于比较。相比于单独的nt-probnp,通过使用截止值为0.738的组1+nt-probnp,正确诊断在肺部疾病患者中不存在心力衰竭的特异性从73.5%增加至88.2%,这是由于34名肺部疾病患者中有5名具有改进的分类(作为hf阴性)。表7和图1显示了相应的患者分类。对于组1+nt-probnp,roc曲线的auc为0.887,并且对于单独的nt-probn,其为0.873。表7:nt-probnp或者组1加nt-probnp用于鉴别心力衰竭和肺部疾病的心力衰竭分类(术语“阳性”和“阴性”是指所有病例中的hf诊断)实施例6:使用组1-206+nt-pro-bnp鉴别hfref患者与肺部疾病患者为了评估组1-206+nt-probnp对于鉴别hfref患者与肺部疾病患者的性能,hfref患者的367个样品和来自健康对照的239个样品(排除呼吸困难)用作训练集。然后,将具有所得相关权重和比例因子的组1-206应用于肺部疾患者的34个样品的分类(肺部成因的呼吸困难,并且不存在基于实施例2所述标准的收缩性和舒张性lv功能障碍)。结果显示于表8中。基于以下考量,对于每个组计算用于分离hfref和健康对照组的六个不同截止值(参见表8):·youden:基于约登指数的截止值·optim.groupsep.:用于最优组分离的截止值·sensitivityfix0.85:选择截止值使得组达到85%的灵敏度·sensitivitynt0.8:选择截止值使得组达到与nt-probnp截止值为125pg/ml时的nt-probnp相同的灵敏度(即80%)·specificityfix0.9:选择截止值使得组达到90%的特异性·specificitynt0.85:选择截止值使得组达到与nt-probnp截止值为125pg/ml时的nt-probnp相同的特异性(即90%)当使用测试的至少一个截止值以将呼吸困难患者分类时,所有组都达到高于67%的特异性。表现最好的组达到高于90%的特异性。对于表13的任何提及应当被认为是不存在的。当前第1页12
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