本发明属于涉及组织学、细胞学、病理学和临床病例检测学,尤其涉及细胞核染色的苏木精染色液改良技术。
背景技术:
苏木精是一种组织学细胞核染色的常用染色剂,经过特定染色程序之后,能够使细胞核染成蓝色。人们多习惯于使用harris氏苏木精染色液,该染色液的优点是染色清晰、色彩美观,但其具有很多缺点,包括媒染剂析出结晶多、液面出现亮膜,易污染切片,氧化程度也不易控制,尤其是配方中含有剧毒品氧化汞。因此需要一种染色迅速,色彩清洗,且更安全环保的染色液试剂。
技术实现要素:
本发明针对现有技术的不足,提供一种改良型苏木精染色液试剂、制备方法和染色方法,染色迅速且十分清晰,色彩与目前通用的harris氏染色液相同,并具有安全可靠等优点,具有强的推广使用价值。
为实现以上的技术目的,本发明将采取以下的技术方案:一种改良型苏木精染色液试剂,每150ml的蒸馏水中包括以下组份:
作为优选,每150ml的蒸馏水中包括以下组份:
本发明还提供了一种上述改良型苏木精染色液试剂的制备方法,包括以下步骤:
(1)将1g的苏木素溶于无水乙醇中形成苏木素的乙醇溶液,备用;
(2)将5g的硫酸铝铵和5g的硫酸铬钾溶于蒸馏水中,搅拌溶解,并与步骤(1)得到的苏木素的乙醇溶液进行混合;
(3)在混合液中继续加入碘酸钠,并搅拌氧化3~5min,接着在氧化后的混合液中继续依次加入5ml的冰醋酸和25ml的甘油,并搅拌均匀,静置3h以上,完成。
本发明还提供了一种改良型苏木精染色液试剂的染色方法,包括以下步骤:
首先,将待检测样本的石蜡切片经过脱蜡,并复水至70%酒精;然后将复水后的样本经过上述苏木精染色液试剂进行染色4~6min,接着再用70%的酒精清洗掉余液;接着用自来水冲洗蓝化20~40min,蓝化后的切片再经过1%的盐酸分色,接着用伊红复染液染色数秒,并进行脱水,最后利用中性树脂胶封片
根据以上的技术方案,相对于现有技术,本发明具有以下的优点:减少淬火变形量,降低后续校形和精加工的成本;有效控制变形散差,提升装配精度及服役寿命;改善生产现场的操作环境,减少对环境的污染和危害。
具体实施方式
下面结合具体实施例,进一步阐明本发明,应理解这些实施例仅用于说明本发明而不用于限制本发明的范围,在阅读了本发明之后,本领域技术人员对本发明的各种等价形式的修改均落于
本技术:
所附权利要求所限定的范围。
本发明实施例中的改良型苏木精染色液试剂,配置所需试剂如下:
将1.0g苏木素溶于25ml无水乙醇中,另将5g硫酸铝铵和5g硫酸铬钾溶于150ml蒸馏水中。再将两溶液混合,加入碘酸钠后搅拌3-5min。将氧化后的混合试剂依次加入5ml冰醋酸,25ml甘油,搅拌均匀。静置2-3h后,即可使用。
在常规h&e染色中,常规法制作的石蜡切片,常规法脱蜡并复水至70%酒精后,用特制苏木精染色液染色4~6min,再用70%酒精洗去余液,自来水冲洗蓝化20~40min,蓝化的切片,经1%盐酸酒精分分色后,用伊红复染液染色数秒,常规常规法脱水后,中性树脂胶封片。
本发明的创新点在于:调整了苏木素与金属盐媒染剂(硫酸铝铵和硫酸铬钾)之间的配比,使用碘酸钠代替氧化汞作为氧化剂,加热条件下对苏木素进行氧化,使其成为能够对组织着色的苏木精,氧化后加入的乙酸和甘油作为促染剂和稳定增稠剂,能降低染色液结晶成膜,并污染切片的可能。本发明着色迅速,常温下镜需染色4~6min,而harris则需要15min以上。本发明配置简单方便,无需煮沸和过滤,用碘酸钠代替氧化汞,更安全,避免废弃液对环境的污染。而且harris配方中,210ml溶液用0.9g苏木精,煮沸和过滤后,净剩约为180ml。而特制苏木精染液中,210ml用苏木精1.0g,染液不受损失。特制苏木精染液配好后即可使用,近期内液面不形成亮膜,也不出现结晶;远期即使出现上述现象也很轻微,不易污染切片。。