一种莫西沙星盐酸盐与莫西沙星酒石酸盐的分离方法与流程

本发明涉及一种药品的分离方法，特别是涉及一种莫西沙星盐酸盐与莫西沙星酒石酸盐的分离方法。
背景技术：
：莫西沙星为最新第四代喹诺酮类代表药物，其分子式c21h24fn3o4，分子量401.44，结构式如下：莫西沙星盐酸盐是1999年由德国拜耳公司研制的超广谱喹诺酮类抗感染药物，该产品首先在德国上市，1999年12月10日通过fda审批，商品名avelox，目前已在世界许多国家和地区用于临床。2003年4月，爱尔康公司开发的莫西沙星滴眼剂也获fda批准上市。莫西沙星酒石酸盐为合成步骤的中间体，其与酒石酸在成品中均可能残留，为合成过程中主要的工艺杂质，对药品的安全性有较大影响，须在生产过程中加以控制。因此对莫西沙星盐酸盐与莫西沙星酒石酸盐进行分离和测定，对药物的质量控制具有重要意义。技术实现要素：本发提供了一种莫西沙星盐酸盐与莫西沙星酒石酸盐的分离方法，在样品溶解后，酒石酸盐离解为酒石酸和莫西沙星，再采用高效液相色谱法，通过离子交换色谱，使酒石酸与其他组分得以分离，可被检测。该色谱方法，具有良好的专属性、线性、精密度及系统耐用性，可以很好的将莫西沙星盐酸盐及其酒石酸盐进行分离。具体而言，本发明采取的技术方案如下：一种莫西沙星盐酸盐与莫西沙星酒石酸盐的分离方法，其特征在于该方法为高效液相色谱法，包含以下步骤：1)样品配制：供试品溶液：取莫西沙星盐酸盐适量，精密称定，加流动相溶解并稀释制成每1ml中含7～20mg的溶液，作为供试品溶液。对照品溶液：称取酒石酸对照品适量，精密称定，用流动相溶解并稀释制成每1ml含酒石酸2～6μg的溶液，作为对照品溶液。2)色谱条件：固定相：阳离子交换色谱柱，以磺酸或苯磺酸衍生化的键合硅胶为填充剂；流动相：水相和有机相的混合液，其中水相为含酸水溶液，所述酸选自醋酸、磷酸或三氟乙酸，浓度为0.01ml/l～2ml/l，有机相为甲醇或乙腈；流速：0.2-1.0ml/min；柱温：20-40℃；检测波长：205-220nm。3)测定：取所述供试品溶液50μl，注入液相色谱仪。进一步地，所述水相中酸为三氟乙酸；所述水相中酸的浓度为0.05ml/l～2ml/l％。进一步地，所述水相与有机相体积比为30～70:70～30，优选为40-60:60～40，进一步优选为50:50。进一步地，所述的柱温为20～30℃，所述流速为0.4ml/min，所述检测波长为214nm。对于上述色谱方法，发明人进行了方法学验证，结果如下：1)专属性依上述方法分离莫西沙星盐酸盐及莫西沙星酒石酸盐，莫西沙星盐酸盐不干扰酒石酸测定。2)线性与范围以酒石酸的峰面积为纵坐标，浓度为横坐标，求得线性回归方程，结果见下表。表1酒石酸线性关系数据3)检测限与定量限采用信噪比法来确定检测限与定量限。逐级稀释目标物质溶液，至信噪比(s/n)约为3:1，即为该条件下检测限，至信噪比(s/n)约为10:1，即为该条件下定量限，结果见下表。表2酒石酸的检测限及定量限检测限与限度浓度比值定量限与限度浓度比值0.0607μg/ml2％0.1215μg/ml4％由上表可知，检测限与定量限远小于限度浓度，均满足检测要求。4)精密度取限度浓度对照品溶液(3μg/ml)，连续进样6针，记录酒石酸峰面积，并计算rsd，结果见下表。表3进样精密度试验结果限度浓度的对照品溶液连续进样6次，酒石酸的峰面积rsd小于1％，进样精密度良好。5)准确度分别按限度浓度的50％、100％、150％配制成回收率试验溶液，依法测定酒石酸含量，并计算其回收率，测定结果见下表。表4准确度试验结果(以酒石酸计)注：“n.a”表示未检出根据结果可知，不同浓度下酒石酸的平均回收率均在90.0％～108.0％之间，回收率的rsd小于10％，准确度良好。6)系统耐用性实验适当改变流速(±0.05ml/min)、柱温(±2℃)、流动相比例(±5％)，测定莫西沙星盐酸盐和酒石酸混合溶液，均对酒石酸测定无影响。综上所述，上述色谱方法，具有良好的专属性、线性、检测限、精密度、准确性及系统耐用性，可以检测出莫西沙星盐酸盐中可能含有的酒石酸杂质，具有一定的实用性。附图说明图1：实施例1所述分离方法的对照品高效液相色谱图图2：实施例1所述分离方法的供试品高效液相色谱图图3：实施例1所述分离方法的供试品加标高效液相色谱图具体实施例通过下面的实施例可以对本发明进行进一步的描述，本发明对试验中所使用到的材料以及试验方法进行一般性和/或具体的描述。以下实施例进一步说明本发明，而不是限制本发明。实施例11)样品配制：供试品溶液：取莫西沙星盐酸盐适量，精密称定，加流动相溶解并稀释制成每1ml中含10mg的溶液，作为供试品溶液。对照品溶液：称取酒石酸对照品适量，精密称定，用流动相溶解并稀释制成每1ml含酒石酸3μg的溶液，作为对照品溶液。供试品加标溶液：取莫西沙星盐酸盐适量，精密称定，加流动相溶解，再加入适量莫西沙星酒石酸盐，稀释制成每1ml中约含莫西沙星盐酸盐15mg和莫西沙星酒石酸盐7μg的溶液，作为供试品加标溶液。2)色谱条件：色谱柱：以苯磺酸衍生化的键合硅胶为填充剂的phenomenecluna-scx100(250×4.6mm，5μm)阳离子交换色谱柱流动相：甲醇-0.1ml/l三氟乙酸水溶液(50：50)流速：0.4ml/min；柱温：25℃；检测波长：214nm；3)测定：取供试品溶液10μl，注入液相色谱仪，其检测结果如下表：样品对照品溶液供试品溶液供试品加标溶液酒石酸保留时间7.2min—7.3min测定结果—未检出0.05％其中对照品图谱见图1，供试品图谱见图2，供试品加标图谱见图3。实施例21)供试品溶液：取莫西沙星盐酸盐适量，精密称定，加流动相溶解并稀释制成每1ml中含15mg的溶液，作为供试品溶液。对照品溶液：称取酒石酸对照品适量，精密称定，用流动相溶解并稀释制成每1ml含酒石酸4μg的溶液，作为对照品溶液。供试品加标溶液：取莫西沙星盐酸盐适量，精密称定，加流动相溶解，再加入适量莫西沙星酒石酸盐，稀释制成每1ml中约含莫西沙星盐酸盐15mg和莫西沙星酒石酸盐7μg的溶液，作为供试品加标溶液。2)色谱条件：色谱柱：以苯磺酸衍生化的键合硅胶为填充剂的phenomenecluna-scx100(250×4.6mm，5μm)阳离子交换色谱柱流动相：乙腈-0.05ml/l三氟乙酸水溶液(40：60)流速：0.3ml/min；柱温：20℃；检测波长：210nm；3)测定：取供试品溶液10μl，注入液相色谱仪，其检测结果如下表：样品对照品溶液供试品溶液供试品加标溶液酒石酸保留时间8.1min—8.1min测定结果—未检出0.05％实施例31)供试品溶液：取莫西沙星盐酸盐适量，精密称定，加流动相溶解并稀释制成每1ml中含20mg的溶液，作为供试品溶液。对照品溶液：称取酒石酸对照品适量，精密称定，用流动相溶解并稀释制成每1ml含酒石酸6μg的溶液，作为对照品溶液。供试品加标溶液：取莫西沙星盐酸盐适量，精密称定，加流动相溶解，再加入适量莫西沙星酒石酸盐，稀释制成每1ml中约含莫西沙星盐酸盐15mg和莫西沙星酒石酸盐7μg的溶液，作为供试品加标溶液。2)色谱条件：色谱柱：以苯磺酸衍生化的键合硅胶为填充剂的phenomenecluna-scx100(250×4.6mm，5μm)阳离子交换色谱柱流动相：甲醇-2ml/l三氟乙酸水溶液(60：40)流速：0.5ml/min；柱温：20℃；检测波长：215nm；3)测定：取供试品溶液10μl，注入液相色谱仪，其检测结果如下表：样品对照品溶液供试品溶液供试品加标溶液酒石酸保留时间6.7min—6.7min测定结果—未检出0.04％当前第1页12