医院用尿液外泌体单膜富集系统的制作方法

本实用新型涉及医疗器械技术领域，尤其涉及一种医院用尿液外泌体单膜富集系统。

背景技术：

Exosome，中文名外泌体，是一种能被大多数细胞分泌的微小膜泡，具有脂质双层膜结构，直径大约40～100nm。尽管外泌体最初在1983年就被发现，但人们一直认为它只是一种细胞的废弃物。然而最近几年，人们发现这种微小膜泡中含有细胞特异的蛋白、脂质和核酸，能作为信号分子传递给其他细胞从而改变其他细胞的功能。这些发现点燃了人们对细胞分泌膜泡的兴趣。最近的研究发现外泌体在很多生理病理上起着重要的作用，如免疫中抗原呈递、肿瘤的生长与迁移、组织损伤的修复等。不同细胞分泌的外泌体具有不用的组成成分和功能，可作为疾病诊断的生物标志物。外泌体具有脂质双层膜结构，能很好的保护其包被的物质，且能靶向特定细胞或组织，因此是一种很好靶向给药系统。外泌体作为一个新型的研究热点，由于它在体内存在的广泛性和获取的便捷性，已经成为了疾病诊断、治疗的潜在有效方式，在精准医学发展上有着光明的前景。

尿液作为一种无创的检测标本的来源，越来越受到大家的关注。尿液中的外泌体携带有肾脏结构和功能损伤的分子标记物，有助于肾脏疾病的诊断；尿液外泌体蛋白组学的研究有助于相关疾病病理生理机制的研究，有助于寻找潜在的新的疾病治疗靶点。

目前国内外报道分离外泌体的主要方法是超速离心法。

超速离心法需要的超速离心机只有著名大学、部分科研机构、部分发达地区的三甲医院拥有，使得这一方法使用受限；其次，该方法一次处理样本量有限。

综上所述，目前仍缺少一种成本低廉的医院用尿液外泌体富集用于糖尿病肾病早期诊断的装置。

技术实现要素：

针对上述的缺陷，本实用新型的目的在于提供一种医院用尿液外泌体单膜富集系统，成本低廉。

为了实现上述目的，本实用新型提供了一种医院用尿液外泌体单膜富集系统，包括：

低速离心机，将所述尿液进行低速离心处理获得上清液；

滤过膜滤过系统，用于过滤所述上清液中除所述外泌体以外的杂质，富集所述外泌体，与所述低速离心机分体设置。

根据所述的医院用尿液外泌体单膜富集系统，所述滤过膜滤过系统包括：

样品池，其上部为容纳槽，下部为连接于所述容纳槽底部的管状通道，所述容纳槽对应于所述管状通道的位置开设有开口，所述管状通道通过所述开口与所述容纳槽连通；

滤过膜，呈管状，其上端套接于所述管状通道的外壁，下端夹设有膜夹，通过所述膜夹闭合其下端。

根据所述的医院用尿液外泌体单膜富集系统，所述滤过膜为截留分子量为1000KDa的滤过膜，用于截留所述外泌体；

所述滤过膜的长度为30厘米。

根据所述的医院用尿液外泌体单膜富集系统，所述容纳槽的深度大于20厘米。

根据所述的医院用尿液外泌体单膜富集系统，所述滤过膜滤过系统还包括废液收集容器，其具有盛放废液的废液收集腔，进行废液收集时，所述废液收集容器套接于所述样品池的外侧。

根据所述的医院用尿液外泌体单膜富集系统，所述废液收集容器的底部连接有底座。

根据所述的医院用尿液外泌体单膜富集系统，所述废液收集容器呈圆柱体形；

所述废液收集容器的外壁由透明材质制成。

根据所述的医院用尿液外泌体单膜富集系统，所述医院用尿液外泌体单膜富集系统还包括外泌体收集离心管，用于盛放所述富集的外泌体，与所述滤过膜滤过系统分体设置，所述外泌体收集离心管的容量大于等于5毫升。

根据所述的医院用尿液外泌体单膜富集系统，所述医院用尿液外泌体单膜富集系统还包括量筒，与所述滤过膜滤过系统分体设置，所述量筒由透明材质制成，并且所述量筒上设置有刻度线，所述量筒的容量为2000毫升。

根据所述的医院用尿液外泌体单膜富集系统，所述医院用尿液外泌体单膜富集系统还包括样品瓶，与所述滤过膜滤过系统分体设置，用于盛放所述低速离心机产生的所述上清液。

本实用新型的医院用尿液外泌体单膜富集系统，设置为包括低速离心机以及滤过膜滤过系统，低速离心机是一种普通的离心机，不需要额外的商业化仪器设备，节省成本，因此，大部分医院都能完成，将所述尿液进行低速离心处理获得上清液；滤过膜滤过系统用于过滤所述上清液中除所述外泌体外的杂质，与所述低速离心机分体设置。根据所述外泌体的自身物理性质，通过滤过膜滤过系统进行过滤，极大程度保证了富集的所述外泌体的纯度和理化性质。借此，本实用新型的医院用尿液外泌体单膜富集系统成本低廉。

附图说明

图1是本实用新型实施例提供的医院用尿液外泌体单膜富集系统的模块结构示意图；

图2是本实用新型实施例提供的医院用尿液外泌体单膜富集系统的样品池结构示意图；

图3是本实用新型实施例提供的医院用尿液外泌体单膜富集系统的滤过膜滤过系统的使用状态示意图；

图4是本实用新型实施例提供的医院用尿液外泌体单膜富集系统的废液收集容器的结构示意图；

图5是本实用新型实施例提供的医院用尿液外泌体单膜富集系统的外泌体收集离心管的结构示意图；

图6是本实用新型实施例提供的医院用尿液外泌体单膜富集系统的量筒的结构示意图；

图7是本实用新型实施例提供的医院用尿液外泌体单膜富集系统的样品瓶的结构示意图。

具体实施方式

为了使本实用新型的目的、技术方案及优点更加清楚明白，以下结合附图及实施例，对本实用新型进行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本实用新型，并不用于限定本实用新型。

参见图1，在本实用新型的一个实施例中提供了一种医院用尿液外泌体单膜富集系统100，包括：

低速离心机10，将所述尿液进行低速离心处理获得上清液；

滤过膜滤过系统20，用于过滤所述上清液中除所述外泌体以外的杂质，富集所述外泌体，与低速离心机10分体设置。

在该实施例中，该医院用尿液外泌体单膜富集系统100，用于富集所述外泌体，富集的所述外泌体可用于糖尿病肾病早期诊断。该医院用尿液外泌体单膜富集系统100包括低速离心机10和滤过膜滤过系统20，所述尿液外泌体的富集过程中，首先，使用低速离心机10进行低速离心处理以去除所述尿液中的细胞碎片以及细菌等杂质，低速离心机10是一种普通的离心机，低速离心机10将收集到的所述尿液的标本在2000g的离心力，室温下，进行低速离心处理30分钟产生所述上清液，然后将产生的所述上清液进行收集；参见图7，优选的是，产生的所述上清液盛放于样品瓶90，样品瓶90与滤过膜滤过系统20分体设置。其次，根据所述外泌体的自身物理性质，将所述上清液放入滤过膜滤过系统20中进行进一步的过滤，过滤所述上清液中除所述外泌体外的杂质，极大程度保证了富集的外泌体的纯度。由此，该医院用尿液外泌体单膜富集系统100不需要昂贵的实验仪器(如超速离心机)，初步处理仅需普通的低速离心机10，大部分医院都能完成；处理样本量跨度大，从15ml～2000ml，可以满足不同样本量处理的需要；不需要额外的商业化仪器设备，节省成本；采用的是液压透析原理，在该医院用尿液外泌体单膜富集系统100富集尿液外泌体的整个过程中，很好的保持了所述外泌体自身的物理和化学特性。

参见图2～图3，在本实用新型的一个实施例中，滤过膜滤过系统20包括：

样品池30，其上部为容纳槽31，下部为连接于容纳槽31底部的管状通道32，容纳槽31对应于管状通道32的位置开设有开口33，管状通道32通过开口33与容纳槽31连通；

滤过膜40，呈管状，其上端套接于管状通道32的外壁，下端夹设有膜夹50，通过膜夹50闭合其下端。

在该实施例中，所述上清液通过样品池30方便地进入滤过膜40中过滤，所述上清液倒入容纳槽31中，所述上清液通过开口33进入管状通道32，然后自然的进入套接于管状通道32的外壁的滤过膜40中，滤过膜40的下端通过膜夹50夹闭，膜夹50优选为通用型膜夹(Universal Closures)。滤过膜40可以通过封口膜缠绕固定，所述封口膜规格为2cmX6cm，优选使用两片所述封口膜；所述上清液通过滤过膜40过滤除所述外泌体外的杂质。

在本实用新型的一个实施例中，滤过膜40为截留分子量为1000KDa(千道尔顿)的滤过膜，用于截留所述外泌体；

滤过膜40的长度为30厘米。

在该实施例中，根据所述外泌体的自身物理性质，滤过膜40为截留分子量为1000KDa(千道尔顿)的纳米膜，将所述上清液通过截留分子量为1000KDa的滤过膜过滤，所述外泌体能够被截留于滤过膜40内，当过滤至滤过膜40内所剩的液体为5毫升时，该所剩的液体即为富集的外液体，将其收集即完成外液体的富集过程。参见图5，优选的是，该医院用尿液外泌体单膜富集系统100还包括外泌体收集离心管70，用于盛放所述富集的外泌体，与所述滤过膜滤过系统20分体设置，外泌体收集离心管70的容量大于等于5毫升，外泌体收集离心管70优选为无菌去酶的离心管。具体的是，滤过膜40的长度为30厘米，适配于过滤需求。

此外，容纳槽31的深度大于20厘米，以满足每次进行过滤的样本的容量要求。

参见图3～图4，在本实用新型的一个实施例中，滤过膜滤过系统20还包括废液收集容器60，其具有盛放废液的废液收集腔，进行废液收集时，废液收集容器60套接于样品池30的外侧。

在该实施例中，滤过膜40将所述外泌体富集，废液则通过滤过膜40渗出，因此在样品池30的外侧套接废液收集容器60盛放废液，进行废液收集。

参见图3～图4，此外，废液收集容器60的底部连接有底座61，使得废液收集容器60能够稳定放置。

此外，废液收集容器60呈圆柱体形，当然也可以是方体形等其它形状；

废液收集容器60的外壁由透明材质制成，便于观察废液的收集情况，将废液及时清理。

参见图6，在本实用新型的一个实施例中，医院用尿液外泌体单膜富集系统100还包括量筒80，用于量取所述外泌体富集过程中需要使用的预定量的液体，与滤过膜滤过系统20分体设置，量筒80由透明材质制成，并且量筒80上设置有刻度线81，量筒80的容量为2000毫升。

使用本实用新型提供医院用尿液外泌体单膜富集系统100富集尿液外泌体的具体方法如下：

实施例1：

(1)低速离心：取1500～2000ml健康志愿者的24h(小时)尿液标本，进行研究，低速离心机10(AllegraTMX-22Centrifuge,Beckman Coulter),相对离心力(RCF)2000g，于室温下，30分钟，除去细胞碎片、细菌等杂质，收集上清液；

(2)使用截留分子量为1000KDa的滤过膜过滤：收集低速离心处理后的上清液，全部经过设置有截留分子量为1000KDa的滤过膜的滤过膜滤过系统20过滤以除去分子量小于所述外泌体的尿液成分，待液体滤过到滤过膜40底部3～5cm处时，所述液体即为富集的外泌体。

其中滤过膜40透析时采用的滤过膜滤过系统20，使用时用户组装搭配各个组件，具体包括样品池30一个，滤过膜40长度为30cm，通用型膜夹(Universal Closures)一个，封口膜(2cmX6cm)两片。

滤过膜40购自仕必纯(上海)贸易有限公司Spectrum Labs Inc，滤过膜40截留分子量为1000KDa，截留分子量1000KDa以上的外泌体。

综上所述，本实用新型的医院用尿液外泌体单膜富集系统，设置为包括低速离心机以及滤过膜滤过系统，低速离心机是一种普通的离心机，不需要额外的商业化仪器设备，节省成本，因此，大部分医院都能完成，将所述尿液进行低速离心处理获得上清液；滤过膜滤过系统用于过滤所述上清液中除外泌体外的杂质，与所述低速离心机分体设置。根据外泌体的自身物理性质，通过滤过膜滤过系统进行过滤，极大程度保证了富集的所述外泌体的纯度和理化性质。借此，本实用新型的医院用尿液外泌体单膜富集系统成本低廉。

当然，本实用新型还可有其它多种实施例，在不背离本实用新型精神及其实质的情况下，熟悉本领域的技术人员当可根据本实用新型作出各种相应的改变和变形，但这些相应的改变和变形都应属于本实用新型所附的权利要求的保护范围。