本发明属于检测领域，具体为一种快速测定肉类中三聚氰胺的方法。
背景技术：
在2008年9月，多数国内知名品牌奶粉发现被三聚氰胺污染。国家立刻采取相应措施，在2008年10月初出台了原料乳和乳制品中三聚氰胺检测国家标准。对于食品和饲料中三聚氰胺检测研究主要集中于近年，一些不法分子利用现行蛋白含量分析的漏洞，为了提高饲料和食品检出中蛋白质的含量而向其中恶意添三聚氰胺，对社会造成了恶劣的影响。
现有技术中用于测定三聚氰胺的分析方法主要为高效液相色谱法、液相色谱质谱法和液相色谱—串联质谱法，其中以高效液相色谱法的使用最为普遍。然而，上述用于测定三聚氰胺的分析方法存在如下缺点：上述分析检测的过程较为复杂，对实验室条件的要求较高。并且，传统的检测方法多为定量检测，而定量检测不仅耗时长，不利于针对大批量样品进行检测。
技术实现要素：
本发明提供了一种快速测定肉类中三聚氰胺的方法，该方法具有操作简单以及可快速检测的优点。
为实现上述目的，本发明提供如下技术方案:
一种快速测定肉类中三聚氰胺的方法，该方法包括如下步骤：
（1）三聚氰胺的定性检测
（1.1）将待测的肉类样品匀浆，得到浆液；
（1.2）在得到的浆液中加入蛋白沉淀剂和除脂剂，净化反应完成后，经冷冻离心处理，过滤，得到纯化液；
（1.3）在纯化液中加入由磁性复合材料制成的吸附剂，超声处理20~30min，得到固液混合物；
（1.4）采用磁性物质对固液混合物中的固体吸附剂进行分离，得到吸附有吸附质的吸附剂以及余液；
（1.5）采用酸化乙腈洗脱附着有吸附质的吸附剂，得到洗脱液以及固体吸附剂；余液弃去；
（1.6）所述洗脱液经旋蒸至干，得到残渣；固体吸附剂经纯净水清洗回收；
（1.7）取残渣，用富集剂复溶，过滤，得到滤出液；
（1.8）在得到的滤出液中，依次加入甲醛、无机碱，摇匀溶解后在60~80℃的条件下反应60~90min，得到待测试液；
（1.9）在待测试液中加入测试药品，测试药品显象，则表明肉类样品中含有三聚氰胺；否则，表明肉类样品中不含有三聚氰胺。
作为优选，在步骤（1.7）中，富集剂选自乙二醇或吡啶的任意一种。
作为优选，在步骤（1.8）中，无机碱选自氢氧化钾、氢氧化铜以及碳酸钠中的任意一种。
作为优选，在步骤（1.8）中，反应温度为75℃，反应时间为80min。
作为优选，在步骤（1.9）中，无机碱选自氢氧化钾或碳酸钠的任意一种，则：测试药品选用金属钠或金属钾。
作为优选，在步骤（1.9）中，无机碱选自氢氧化铜，则：测试药品选用碘化钾。
作为优选，在步骤（1.2）中，蛋白沉淀剂选自乙腈、丙酮中的任意一种；除脂剂选自正己烷以及c18中的任意一种。
作为优选，在步骤（1.3）中，吸附剂选自壳聚糖和纳米fe3o4的交联产物、cofe2o4-石墨烯纳米复合材料中的任意一种。
作为优选，交联剂选自戊二醛、甲醛、环氧氯丙烷、β-环糊精中的任意一种，或是它们的混合物。
作为优选，在步骤（1.9）之后，还包括步骤（2），所述步骤（2）为：
（2）三聚氰胺的定量检测
（2.1）在得到的残渣中，加入缓冲溶液复溶，加入抗菌剂，并先后加入衍生化试剂与内标溶液，振荡至反应完成，过滤，并定容至1ml，得到可上机分析的待检测物；
其中，抗菌剂选自二氧化钛、二氧化锌或壳聚糖中的至少一种。
作为优选，壳聚糖和纳米fe3o4的交联产物的制备方法包括如下步骤：
s01、将壳聚糖浸没在交联剂中，并不断搅拌，持续60~120min，过滤，得到吸附有交联剂的壳聚糖；
s02、在吸附有交联剂的壳聚糖中加入纳米fe3o4，于60~80℃的温度条件下，不断搅拌30~50min，即得到壳聚糖和纳米fe3o4的交联产物。
作为优选，在步骤（2.1）中，缓冲溶液是0.1mol/l三乙胺-碳酸缓冲溶液。
作为优选，衍生化试剂是10mg/l的2-硝基苯甲醛二甲亚砜溶液。
本发明的有益效果为：
在本发明中，肉类样品经提取剂的提取，以析出其内部含有的三聚氰胺、脂类以及蛋白质等组分。并且提取液经除脂和除蛋白处理，净化后得到纯化液。纯化液为三聚氰胺和提取剂的混合物，其中含有的少量杂质可忽略。纯化液通过吸附剂的吸附，可将三聚氰胺富集。因此，在得到的残渣中有三聚氰胺，也有其他的杂质，为了进一步净化杂质，残渣可采用富集剂复溶，使得三聚氰胺以较高浓度的形式存在。在得到较为纯净的三聚氰胺溶液后，通过反应，且采用测试药品的检测，使其显象。则，技术人员即可根据显象定性得出样本中是否含有三聚氰胺。通过上述方法对样本中的溶液进行定性检测，可加快实验人员对肉类样本质量的筛选，使得检测效率更高。
具体实施方式
实施例1
一种快速测定肉类中三聚氰胺的方法，该方法包括如下步骤：
（1）三聚氰胺的定性检测
（1.1）将待测的肉类样品匀浆，得到浆液。
（1.2）在得到的浆液中加入乙腈和正己烷，净化反应完成后，经冷冻离心处理，过滤，得到纯化液。除去蛋白质和脂肪可进一步对提取液进行净化。
（1.3）在纯化液中加入cofe2o4-石墨烯纳米复合材料，超声处理25min，得到固液混合物。
（1.4）采用磁性物质对cofe2o4-石墨烯纳米复合材料进行分离，得到吸附有吸附质的cofe2o4-石墨烯纳米复合材料以及余液。
（1.5）采用酸化乙腈洗脱附着有吸附质的cofe2o4-石墨烯纳米复合材料，得到洗脱液以及cofe2o4-石墨烯纳米复合材料。余液弃去。
（1.6）所述洗脱液经旋蒸至干，得到残渣；cofe2o4-石墨烯纳米复合材料经纯净水清洗回收。
（1.7）取残渣，用乙二醇复溶，过滤，得到滤出液。此处选用乙二醇的原因在于，三聚氰胺在乙二醇中的溶解度很高，可起到富集的作用。
（1.8）在得到的滤出液中，依次加入甲醛、氢氧化钾，摇匀溶解后在75℃的条件下反应80min，得到待测试液。由于氢氧化钾在乙二醇中也是可以溶解的，故可是整个反应体系呈现碱性，反应原理如下式：
（1.9）在待测试液中加入金属钠，测试药品显象，如果产生气泡则表明肉类样品中含有三聚氰胺；否则，未产生气泡表明肉类样品中不含有三聚氰胺。
实施例2
本实施例在实施例1的基础上做进一步阐述：
当实施例1中得到的结果为：肉类样品中含有三聚氰胺。则需要进行如下步骤：
在实施例1步骤（1.6）中得到的残渣中，加入0.1mol/l三乙胺-碳酸缓冲溶液复溶，加入壳聚糖，并先后加入衍生化试剂与内标溶液，振荡至反应完成，过滤，并定容至1ml，得到可上机分析的待检测物。壳聚糖的作用在于，可起到抑菌的作用，防止样本溶液中的杂质滋生微生物，从而影响检测结果。且壳聚糖较难溶于一般的溶剂，可通过过滤除去，不会影响检测结果。
尽管参照前述实施例对本发明进行了详细的说明，对于本领域的技术人员来说，其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分技术特征进行等同替换,凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。