一种炔诺酮片剂或炔雌醇片剂的含量测定的分析方法与流程

本发明具体涉及一种外标一点法采用超高效液相分析方法，特别是快速准确测定炔诺酮片剂或炔雌醇片剂的含量测定的分析方法。
背景技术：
：炔诺酮片或炔雌醇片是一种女性口服避孕药。因其剂量低的特点，在产品检测过程中就需要采用灵敏度高且分析准确的方法进行含量测定的分析。传统含量检测方法参照美国药典，使用内标法及高效液相色谱法进行测试。因内标溶液需要移取至每个对照品及供试品溶液中，而且供试品溶液还需要二次稀释，这就直接导致人员操作误差的高风险。另使用高效液相色谱法进行分析，每个溶液的进样时间需在55分钟以上，则传统方法的缺点是风险大，耗时久。综合考虑企业生产批量大批次多，需检测供试品数量巨大，则间接导致企业工作效率低下。技术实现要素：本发明的目的是为了克服以上的不足，提供一种灵敏度高、分析速度快、操作简便、成本低的炔诺酮片剂或炔雌醇片剂的含量测定的分析方法。本发明的目的通过以下技术方案来实现：一种炔诺酮片剂或炔雌醇片剂的含量测定的分析方法，包括以下步骤：a、对照品溶液的配制（平行配制两份）炔雌醇储备液：精密称取约11毫克炔雌醇标准品至25毫升的容量瓶中，用乙腈溶解并定容至25毫升刻度线，摇匀，移取5.0毫升上述溶液至25毫升的容量瓶中，用乙腈定容至25毫升刻度线，摇匀；炔诺酮储备液：精密称取约12毫克炔诺酮标准品至10毫升的容量瓶中，用乙腈溶解并定容至10毫升刻度线，摇匀；对照品溶液的配制：精密移取3.0毫升的炔诺酮储备液及2.0毫升的炔雌醇储备液至50毫升的容量瓶中，加入25毫升的乙腈，然后用去离子水定容并摇匀，经0.22微米滤膜过滤并弃去3毫升后取澄清溶液至供试品瓶；b、供试品溶液的配制：取炔诺酮/炔雌醇片剂10片并转移至一100毫升的容量瓶中，加入20毫升去离子水使供试品（炔诺酮/炔雌醇片剂），超声至完全崩解，加入60毫升的乙腈，超声两分钟，然后用去离子水定容并摇匀，经0.22微米滤膜过滤并弃去3毫升后取澄清溶液至供试品瓶；c、使用超高效液相液相色谱法测定炔诺酮/炔雌醇片剂的含量：流动相体积比为：甲醇：乙腈：水=10:30:60；色谱条件为：色谱柱：高效液相色谱柱，碳十八,内径2.1毫米，柱长50mm,粒径1.7微米；柱温：35℃；流速:0.4毫升/分钟；检测波长:紫外吸收200nm，进样体积：3微升，运行时间:5分钟；含量计算：供试品中炔诺酮或炔雌醇的含量=，其中，cs代表对照品溶液浓度，以毫克/毫升为单位；lc代表供试品剂量，以毫克为单位；ru代表供试品色谱图中各组分面积；rs代表对照品色谱图中各组分面积。本发明与现有技术相比具有以下优点：1、本发明采用外标一点法，避免了内标法造成的操作误差，配制过程简化，能够提高分析的效率及准确率。2、本发明取消了供试品溶液配制过程中的二次稀释，简化了实验过程，从而提高了工作效率。3、本发明采用超高效液相（uplc）法取代高效液相色谱（hplc）法，提高了分析的速度、灵敏度，节约了流动相的使用，从而提高了方法的专属性及准确性，同时也节约了分析成本。4、本发明中将所有溶液经0.22微米滤膜过滤后再经超高效液相进行进样分析，因超高效液相使用的色谱柱粒径小及仪器压力高等因素，从而该法有效延长了仪器的使用寿命及降低故障率。附图说明：图1为溶剂空白溶液色谱图；图2为对照品色谱图；图3为实施例1供试品色谱图；图4为实施例2供试品色谱图；具体实施方式：为使本发明实施例的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例是本发明一模块实施例，而不是全部的实施例。在本发明的一种实施方式中描述的元素和特征可以与一个或更多个其它实施方式中示出的元素和特征相结合。应当注意，为了清楚的目的，说明中省略了与本发明无关的、本领域普通技术人员已知的部件和处理的表示和描述。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有付出创造性劳动的前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。一种炔诺酮或炔雌醇片剂的含量测定的分析方法，利用外标一点法，通过超高液相色谱法快速准确分析炔诺酮/炔雌醇片剂的含量，该方法有操作简便，分析速度快，使用试剂少成本低，结果准确等优势，从而极大地提高企业工作效率。实施例1：炔诺酮/炔雌醇片剂（规格:0.5/0.035mg，批号：19031001）的含量测定：(1)、仪器与条件超高效液相色谱仪：沃特世超高效液相色谱仪，紫外检测器及empower数据采集分析系统；色谱柱：沃特世高效液相色谱柱，碳十八,内径2.1毫米，柱长50mm,粒径1.7微米。(2)、实验步骤对照品溶液的配制（平行配制两份）炔雌醇储备液：精密称取约11毫克炔雌醇标准品至25毫升的容量瓶中，用乙腈溶解并定容至25毫升刻度线，摇匀。移取5.0毫升上述溶液至25毫升的容量瓶中，用乙腈定容至25毫升刻度线，摇匀。炔诺酮储备液：精密称取约12毫克炔诺酮标准品至10毫升的容量瓶中，用乙腈溶解并定容至10毫升刻度线，摇匀。对照品溶液的配制：精密移取3.0毫升的炔诺酮储备液及2.0毫升的炔雌醇储备液至50毫升的容量瓶中，加入25毫升的乙腈，然后用去离子水定容并摇匀。经0.22微米滤膜过滤并弃去3毫升后取澄清溶液至供试品瓶。供试品溶液的配制（平行配制两份）：取本品10片并转移至一100毫升的容量瓶中，加入20毫升去离子水使供试品，超声至完全崩解，加入60毫升的乙腈，超声两分钟，然后用去离子水定容并摇匀。经0.22微米滤膜过滤并弃去3毫升后取澄清溶液至供试品瓶。色谱条件包括：流动相：甲醇：乙腈：水=10:30:60；色谱柱：watersacquityuplcbehc18,2.1×50mm,1.7μm；流速：0.4ml/min；进样体积：3μl；柱温：35°c；运行时间：5min，检测波长:uv200nm。方法学考察进样重现性：取对照品溶液1连续进6针，计算炔诺酮及炔雌醇面积的%rsd，炔诺酮和炔雌醇均为0.2，小于2.0，说明方法的精密度良好。专属性：本方法中供试品中炔诺酮保留时间为2.4分钟，炔雌醇的保留时间为2.7分钟，与对照品的保留时间一致；回收率：对照品2中炔诺酮的回收率为100.4%，炔雌醇的回收率为100.0%，说明该方法准确度高；测定结果规格批号炔诺酮%含量炔雌醇%含量0.5/0.035mg19031001100.798.3实施例2：炔诺酮/炔雌醇片剂（规格：1/0.035mg，批号：19033044）的含量测定：(1)、仪器与条件超高效液相色谱仪：沃特世超高效液相色谱仪，紫外检测器及empower数据采集分析系统；色谱柱：沃特世高效液相色谱柱，碳十八,内径2.1毫米，柱长50mm,粒径1.7微米。(2)、实验步骤对照品溶液的配制（平行配制两份）炔雌醇储备液：精密称取约11毫克炔雌醇标准品至25毫升的容量瓶中，用乙腈溶解并定容至刻度线，摇匀。移取5.0毫升上述溶液至25毫升的容量瓶中，用乙腈定容至刻度线，摇匀。炔诺酮储备液：精密称取约12毫克炔诺酮标准品至10毫升的容量瓶中，用乙腈溶解并定容至刻度线，摇匀。对照品溶液的配制：精密移取3.0毫升的炔诺酮储备液及2.0毫升的炔雌醇储备液至50毫升的容量瓶中，加入25毫升的乙腈，然后用去离子水定容并摇匀。经0.22微米滤膜过滤并弃去3毫升后取澄清溶液至供试品瓶。供试品溶液的配制（平行配制两份）：取本品10片并转移至一100毫升的容量瓶中，加入20毫升去离子水使供试品，超声至完全崩解，加入60毫升的乙腈，超声两分钟，然后用去离子水定容并摇匀。经0.22微米滤膜过滤并弃去3毫升后取澄清溶液至供试品瓶。色谱条件包括：流动相：甲醇：乙腈：水=10:30:60；色谱柱：watersacquityuplcbehc18,2.1×50mm,1.7μm；流速：0.4ml/min；进样体积：3μl；柱温：35°c；运行时间：5min，检测波长:uv200nm。方法学考察进样重现性：取对照品溶液1连续进6针，计算炔诺酮及炔雌醇面积的%rsd，炔诺酮和炔雌醇均为0.2，小于2.0，说明方法的精密度良好。专属性：本方法中供试品中炔诺酮保留时间为2.4分钟，炔雌醇的保留时间为2.7分钟，与对照品的保留时间一致；回收率：对照品2中炔诺酮的回收率为100.4%，炔雌醇的回收率为100.0%，说明该方法准确度高；测定结果规格批号炔诺酮%含量炔雌醇%含量1/0.035mg19033044101.098.3本发明外标一点法用超高效液相色谱进行分析，能够准确快速测定炔诺酮/炔雌醇片剂的含量，满足了企业追求高效率低成本的目标。超高效液相色谱（uplc）相对于传统的高效液相色谱（hplc）的速度、灵敏度及分离度分别是hplc的9倍、3倍及1.7倍，它缩短了分析时间，同时减少溶剂用量降低了分析成本。本发明则可以提供一种灵敏度高、分析速度快、操作简便、成本低的优化方法，从而达到节约企业成本、提高工作效率。最后应说明的是：虽然以上已经详细说明了本发明及其优点，但是应当理解在不超出由所附的权利要求所限定的本发明的精神和范围的情况下可以进行各种改变、替代和变换。而且，本发明的范围不仅限于说明书所描述的过程、设备、手段、方法和步骤的具体实施例。本领域内的普通技术人员从本发明的公开内容将容易理解，根据本发明可以使用执行与在此所述的相应实施例基本相同的功能或者获得与其基本相同的结果的、现有和将来要被开发的过程、设备、手段、方法或者步骤。因此，所附的权利要求旨在在它们的范围内包括这样的过程、设备、手段、方法或者步骤。当前第1页12