技术特征：
1.基于mef效应二次放大ins（胰岛素）信号的适体传感器的制备方法，其特征在于，步骤如下：（1）将超纯水加入ins核酸适体激活，配制成一定浓度的ins核酸适体溶液；（2）将步骤（1）的ins核酸适体溶液与aunps混合，加入pbs缓冲液，振荡培养2h，再加入二水柠檬酸三钠溶液，振荡培养2h，离心去除一半上清液，得溶液ⅰ；（3）向溶液ⅰ中加入cy3
‑
dna溶液，定容后，恒温培养12h，即得适体传感器工作溶液。2. 根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于：所述步骤（1）中，ins核酸适体的序列为5
’‑
sh
‑
a
n ggt ggt ggg ggg ggt tgg tag ggt gtc ttc
‑3’
，其中n=12
‑
30，n为自然数。3. 根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于：所述步骤（1）中，ins核酸适体的序列为5
’‑
sh
‑
a
21 ggt ggt ggg ggg ggt tgg tag ggt gtc ttc
‑3’
。4. 根据权利要求2或3所述的制备方法，其特征在于：所述步骤（1）中ins核酸适体溶液的浓度为5 μmol/l。5. 根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于：所述步骤（2）中ins核酸适体溶液、aunps、pbs缓冲液和二水柠檬酸三钠溶液的体积比为90:45:45:4，其中aunps的浓度为1 nmol/l，pbs缓冲液的浓度为10 mmol/l，二水柠檬酸三钠溶液的浓度为500 mmol/l。6. 根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于：所述步骤（3）中定容采用的pbs缓冲液的浓度为10 mm，定容的最后体积为600 μl。7. 根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于：所述步骤（3）中cy3
‑
dna溶液与ins核酸适体溶液的体积比为1:1，cy3
‑
dna的序列为5
’‑ꢀ
gaa gac acc cta cca acc ccc ccc acc acc
‑3’
，cy3
‑
dna溶液的浓度为5 μmol/l。8.权利要求1
‑
7任一项方法所制备的适体传感器，其特征在于：所述适体传感器通过双链dna提供的刚性结构实现荧光增强，并利用核酸适体与靶目标的特异性结合，实现了荧光信号的二次放大，并对血清中的ins实现了较低浓度检测。9. 权利要求1
‑
7任一项方法所制备的适体传感器在高灵敏检测ins中的应用，其特征在于，步骤为：向适体传感器工作溶液中加入待测物溶液，用10 mm pbs缓冲液将溶液的总体积定容至600 μl，利用荧光分光光度计对ins与适体传感器形成的纳米偶连体进行荧光检测，记录520nm波长处的荧光强度，代入线性方程计算待测物溶液中ins的浓度。10.根据权利要求9所述的应用，其特征在于，所述线性方程为：y=5.4x+643.17，相关系数为0.94。
技术总结
本发明属于传感器领域，涉及胰岛素的检测，特别是指基于MEF效应二次放大INS信号的适体传感器及其制备方法和应用。基于MEF效应，构建了用于检测INS的AuNPs@PloyAn
技术研发人员：姜利英 任林娇 秦自瑞 张培 刘春秀 齐汝宾 徐鹏 陈青华 陈凤华 闫艳霞
受保护的技术使用者：郑州轻工业大学
技术研发日：2021.06.07
技术公布日：2021/9/3