IRF4在制备预测异体造血干细胞移植受者预后试剂盒中的应用

本发明涉及免疫学，尤其涉及同种异体造血干细胞移植供者外周血cd4+t细胞中irf4表达水平在预测受者预后中的应用。

背景技术：

1、造血干细胞移植(hsct，hematopoietic stem cell transplantation)是治疗白血病、骨髓异常综合征等血液疾病的有效甚至唯一手段。目前，我国造血干细胞移植手术中约80％为同种异体单倍型移植且比例逐年增加，但由人类淋巴细胞抗原(hla，humanlymphocyte antigen)障碍导致的急性移植物抗宿主病(agvhd，acute graft-versus-hostdisease)仍是移植术后威胁生命的重要并发症，如何跨越人类淋巴细胞抗原障碍也是临床医生以及科研学者们长期致力克服但仍未解决的重要问题。

2、在agvhd中，由于组织相容性复合体差异，供者移植物中同种异体反应性t细胞将受者组织识别为异己，从而迅速扩增并造成靶器官的损伤。尽管去除供者移植物中的t细胞可以减少agvhd的发生，但这不利于造血功能恢复和免疫系统重建。目前临床常用免疫抑制药物预防和治疗agvhd，然而药物毒副作用、过度抑制导致的肿瘤复发或感染仍是常见的问题。由于hla单倍型相合移植中，几乎所有受者都有不只一个可选择的供者，并且供体选择是否最为合适可显著影响移植受者移植物抗宿主病的发生，因此关键的问题就是寻找最佳的移植供者。

3、目前造血干细胞移植供者的选择仍局限于家庭关系、年龄、性别、人类淋巴细胞抗原差异等变量，现有常用的供者选择标准中，首先且最重要的是hla全相合。其次，在没有hla全相合供者的情况下，选择hla单倍型相合供者：移植前受者体内无供者特异性抗体；abo血型兼容；年轻、男性供者为优选供者；按照家庭关系的供者选择顺序为孩子、弟弟、姐姐、父亲、堂/表哥和堂/表姐、母亲、旁系亲属等。这些原则限制范围较广、涉及因素多，因此存在局限性。

4、尽管近年来临床生物标记物研究有所发展，但目前发现的同种异体造血干细胞移植受者agvhd生物标记物大部分是移植受者外周血的相关指标如：细胞因子(il-2、tnf-α等)和细胞亚群(treg、inkt等)，以上这些指标目前均与供者选择关联性很低。供者方面的生物标记物研究集中于hla基因多态性方面，另外，有极少数报道如ccl5、il-2、ctla-4等可能与agvhd有关。除了上述供者选择原则之外，目前尚无据同种异体造血干细胞移植供者的免疫细胞特异性转录因子的表达水平等选择最佳供者的报道。

5、干扰素调节因子4(interferon regulatory factor 4，irf4)是干扰素调节因子家族中的一员，它对cd4+t细胞的分化发育具有重要的调控作用。目前irf4在人同种异体造血干细胞移植中的作用仍不清楚，也无报道阐明健康供者外周血cd4+t细胞中irf4在临床同种异体造血干细胞移植后agvhd中的作用。

技术实现思路

1、本发明的第一个目的在于，提供irf4在制备预测人同种异体造血干细胞移植受者预后试剂盒中的应用，粒细胞集落刺激因子(g-csf，granulocyte colony-stimulatingfactor)动员后，预后较好的同种异体造血干细胞移植受者对应的供者外周血cd4+t细胞中irf4表达水平显著降低。

2、本发明的第二个目的在于，提供irf4在制备筛选人同种异体造血干细胞移植合适供者的试剂盒中的应用，g-csf动员后健康供者外周血cd4+t细胞中irf4表达水平较低的供者，受者的急性移植物抗宿主病(agvhd，acute graft-versus-host disease)发生率较低。

3、本发明的第三个目的在于，提供一种预测异体造血干细胞移植受者预后的试剂盒。

4、本发明的第四个目的在于，提供一种筛选异体造血干细胞移植最佳供者的试剂盒。

5、为了实现上述第一个目的，本发明提供了irf4在制备预测异体造血干细胞移植受者预后试剂盒中的应用，所述irf4为供者外周血cd4+t细胞中irf4的表达水平。判断预后好坏的标准为同种异体造血干细胞移植术后受者是否发生agvhd，术后受者发生agvhd，则预后差，术后受者不发生agvhd，则预后好。

6、作为一个优选方案，g-csf动员后，当供者外周血cd4+t细胞中irf4平均荧光强度的数值高于0并低于155时，受者发生急性移植物抗宿主病为低危，即发生agvhd的可能比较低；当供者外周血cd4+t细胞中irf4平均荧光强度的数值高于155时，受者发生急性移植物抗宿主病为高危，即有比较高的概率会发生agvhd。

7、为了实现本发明第二个目的，本发明提供了irf4在制备筛选异体造血干细胞移植合适供者的试剂盒中的应用，所述irf4为供者外周血cd4+t细胞中irf4的表达水平。g-csf动员后外周血cd4+t细胞中irf4表达水平较高的供者对应移植受者的急性移植物抗宿主病发生率较高；反之，g-csf动员后外周血cd4+t细胞中irf4表达水平较低的供者对应移植受者的急性移植物抗宿主病发生率低。

8、作为一个优选方案，g-csf动员后，当供者外周血cd4+t细胞中irf4平均荧光强度的数值高于0并低于155时，为合适供者；当供者外周血cd4+t细胞中irf4平均荧光强度的数值高于155，为不合适供者。

9、为了实现本发明第三个目的，本发明提供了一种预测异体造血干细胞移植受者预后的试剂盒，所述试剂盒包含检测供者外周血cd4+t细胞中irf4表达水平的试剂。

10、为了实现本发明第四个目的，本发明提供了一种筛选异体造血干细胞移植供者的试剂盒，所述试剂盒包含检测供者外周血cd4+t细胞中irf4表达水平的试剂。

11、本发明的优点在于，本发明首次发现g-csf动员后，预后较好的同种异体造血干细胞移植受者对应的供者外周血cd4+t细胞中irf4表达水平显著降低，基于该结果，进一步发现g-csf动员后外周血cd4+t细胞中irf4表达水平较高的供者对应移植受者的agvhd发生率较高。因此，健康供者外周血中cd4+t细胞中irf4表达水平可作为生物标记物用于预测受者agvhd发生与否，并可筛选合适的供者从而减少移植物抗宿主病的发生率。

技术特征：

1.irf4在制备预测异体造血干细胞移植受者预后试剂盒中的应用，其特征在于，所述irf4为供者外周血cd4+t细胞中irf4的表达水平。

2.根据权利要求1所述的irf4在制备预测异体造血干细胞移植受者预后试剂盒中的应用，其特征在于，g-csf动员后，当供者外周血cd4+t细胞中irf4平均荧光强度的数值低于155时，受者发生急性移植物抗宿主病为低危；当供者外周血cd4+t细胞中irf4平均荧光强度的数值高于155时，受者发生急性移植物抗宿主病为高危。

3.irf4在制备筛选异体造血干细胞移植合适供者的试剂盒中的应用，其特征在于，所述irf4为供者外周血cd4+t细胞中irf4的表达水平。

4.根据权利要求3所述irf4在制备筛选异体造血干细胞移植合适供者的试剂盒中的应用，其特征在于，g-csf动员后，当供者外周血cd4+t细胞中irf4平均荧光强度的数值低于155时，为合适供者；当供者外周血cd4+t细胞中irf4平均荧光强度的数值高于155，为不合适供者。

5.一种预测异体造血干细胞移植受者预后的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包含检测供者外周血cd4+t细胞中irf4表达水平的试剂。

6.一种筛选异体造血干细胞移植供者的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包含检测供者外周血cd4+t细胞中irf4表达水平的试剂。

技术总结
本发明提供IRF4在制备预测异体造血干细胞移植受者预后试剂盒中的应用，粒细胞集落刺激因子(G‑CSF)动员后，预后较好的同种异体造血干细胞移植受者对应的供者外周血CD4<supgt;+</supgt;T细胞中IRF4表达水平显著降低，并且发现G‑CSF动员后外周血CD4<supgt;+</supgt;T细胞中IRF4表达水平较高的供者对应移植受者的急性移植物抗宿主病(aGVHD)发生率较高。因此IRF4可作为临床生物标记物对同种异体造血干细胞移植受者aGVHD的发生与否进行预测，并可作为优选同种异体供者的指标之一，筛选合适的供者从而减少同种异体造血干细胞移植受者aGVHD的发生率。

技术研发人员：路丽明,黄晓军,王雪,胡炯,丁旭萍,刘丹
受保护的技术使用者：上海交通大学医学院
技术研发日：
技术公布日：2024/1/16