1.一种遗传编码的荧光指示剂(gefi),包含:
2.根据权利要求1所述的gefi,其中,与所述cpfp结合的所述抑制性分子是纳米抗体。
3.根据权利要求2所述的gefi,其中,所述纳米抗体包括nb39。
4.根据前述权利要求中任一项所述的gefi,其中,所述抑制性分子通过接头与所述cpfp结合。
5.根据权利要求4所述的gefi,其中,所述接头包括lkedi(seq id no:4)。
6.根据前述权利要求中任一项所述的gefi,其中,所述cpfp与蛋白质结合。
7.根据权利要求6所述的gefi,其中,所述cpfp与g蛋白偶联受体(gpcr)结合。
8.根据权利要求7所述的gefi,其中,所述cpfp与所述gpcr的c末端结构域结合。
9.根据权利要求6-8中任一项所述的gefi,其中,所述gpcr是阿片受体。
10.根据权利要求9所述的gefi,其中,所述阿片受体是μ-阿片受体、κ-阿片受体或嵌合阿片受体。
11.根据权利要求10所述的gefi,其中,所述阿片受体是包括seq id no:7、seq id no:11或seq id no:12的氨基酸序列的κ-阿片受体。
12.根据权利要求10所述的gefi,其中,所述阿片受体是包括seq id no:8的氨基酸序列的嵌合阿片受体。
13.根据权利要求6-12中任一项所述的gefi,其中,所述cpfp通过接头与所述蛋白质结合。
14.根据权利要求13所述的gefi,其中,所述接头包括fplkmrmerqgap(seq id no:5)或gap。
15.根据权利要求1-14中任一项所述的gefi,其中,所述gefi包括与seqid no:17具有至少90%序列同一性的氨基酸序列。
16.根据权利要求15所述的gefi,其中,所述gefi包括seq id no:17的氨基酸序列。
17.根据权利要求1-14中任一项所述的gefi,其中,所述gefi包括与seqid no:21具有至少90%序列同一性的氨基酸序列。
18.根据权利要求17所述的gefi,其中,所述gefi包括seq id no:21的氨基酸序列。
19.根据权利要求1-14中任一项所述的gefi,其中,所述gefi包括与seqid no:18具有至少90%序列同一性的氨基酸序列。
20.根据权利要求19所述的gefi,其中,所述gefi包括seq id no:18的氨基酸序列。
21.根据权利要求1-14中任一项所述的gefi,其中,所述gefi包括与seqid no:27具有至少90%序列同一性的氨基酸序列。
22.根据权利要求21所述的gefi,其中,所述gefi包括seq id no:27的氨基酸序列。
23.根据权利要求1-14中任一项所述的gefi,其中,所述gefi包括与seqid no:28具有至少90%序列同一性的氨基酸序列。
24.根据权利要求23所述的gefi,其中,所述gefi包括权利要求31的氨基酸序列。
25.一种构建体,其编码前述权利要求中任一项所述的gefi。
26.一种细胞,其包含前述权利要求中任一项所述的gefi。
27.一种试剂盒,其包含前述权利要求中任一项所述的gefi。
28.根据前述权利要求中任一项所述的gefi、权利要求26所述的细胞或权利要求27所述的试剂盒在检测蛋白酶活性、检测蛋白质-蛋白质相互作用或检测样品中g蛋白偶联受体激动剂的方法中的用途。
29.一种确定剂是否为g蛋白偶联受体(gpcr)激动剂的方法,包括:
30.根据权利要求29所述的方法,其中,所述系统包括细胞。
31.根据权利要求29或30所述的方法,其中,所述抑制性分子是纳米抗体。
32.根据权利要求31所述的方法,其中,所述纳米抗体包括nb39。
33.根据权利要求29-32中任一项所述的方法,其中,所述抑制性分子通过接头与所述cpfp结合。
34.根据权利要求33所述的方法,其中,所述接头包括lkedi(seq id no:4)。
35.根据权利要求29-34中任一项所述的方法,其中,所述gpcr是阿片受体。
36.根据权利要求35所述的方法,其中,所述阿片受体是μ-阿片受体、κ-阿片受体或嵌合阿片受体。
37.根据权利要求36所述的方法,其中,所述阿片受体是包括seq id no:7、seq id no:11或seq id no:12的氨基酸序列的κ-阿片受体。
38.根据权利要求37所述的方法,其中,所述阿片受体是包括seq id no:8的氨基酸序列的嵌合阿片受体。
39.根据权利要求29-38中任一项所述的方法,其中,所述cpfp通过接头与所述gpcr结合。
40.根据权利要求39所述的方法,其中,所述接头包括fplkmrmerqgap(seq id no:5)或gap。
41.根据权利要求29-40中任一项所述的方法,其中,所述gefi包括与seqid no:17具有至少90%序列同一性的氨基酸序列。
42.根据权利要求41所述的方法,其中,所述gefi包括seq id no:17的氨基酸序列。
43.根据权利要求29-40中任一项所述的方法,其中,所述gefi包括与seqid no:21具有至少90%序列同一性的氨基酸序列。
44.根据权利要求43所述的方法,其中,所述gefi包括seq id no:21的氨基酸序列。
45.根据权利要求29-40中任一项所述的方法,其中,所述gefi包括与seqid no:18具有至少90%序列同一性的氨基酸序列。
46.根据权利要求45所述的方法,其中,所述gefi包括seq id no:18的氨基酸序列。
47.根据权利要求29-40中任一项所述的方法,其中,所述gefi包括与seqid no:27具有至少90%序列同一性的氨基酸序列。
48.根据权利要求47所述的方法,其中,所述gefi包括seq id no:27的氨基酸序列。
49.根据权利要求29-40中任一项所述的方法,其中,所述gefi包括与seqid no:28具有至少90%序列同一性的氨基酸序列。
50.根据权利要求49所述的方法,其中,所述gefi包括权利要求31的氨基酸序列。
51.一种评估样品中蛋白质-蛋白质相互作用的方法,包括:
52.根据权利要求51所述的方法,其中,所述样品包括细胞。
53.根据权利要求52所述的方法,其中,所述第一蛋白质与由所述细胞表达的阿片受体结合。
54.根据权利要求53所述的方法,还包括:在检测所述样品中的所述荧光信号之前,将所述样品与阿片受体激动剂接触,其中当所述第一蛋白质和所述第二蛋白质之间已经发生了蛋白质-蛋白质相互作用时,所述阿片受体激动剂诱导所述gefi中的构象变化,使得观察到荧光信号。
55.根据权利要求51-54中任一项所述的方法,其中,所述抑制性分子是纳米抗体。
56.根据权利要求55所述的方法,其中,所述纳米抗体包括nb39。