一种阿昔洛韦软膏的晶型定量方法与流程

本发明属于药物领域，具体的，本发明涉及一种阿昔洛韦软膏的晶型定量方法。

背景技术：

1、药物分子在不同结晶条件下，以不同的排列堆积方式形成的不同晶态物质，这种现象称为多晶型，同一种药物具有不同晶型，在稳定性、溶解度以及药效理化性质上可能具有显著的区别。因此，药物晶型的定性或定量分析在药物的研发过程中非常重要。

2、对于固体制剂而言，已经具有大量的晶型的定量分析方法，比如粉末x射线衍射法、红外光谱法、拉曼光谱法、近红外光谱法以及固态核磁法。cn115598160a、cn111487266a与cn108956661a等专利报道均是对固体粉末采用粉末x-射线衍射法进行晶型定量。cn103743717a中采用拉曼光谱对炸药cl-20进行晶型定量分析，但其仍然是针对的是固体粉末。但是混悬型半固体制剂具有一定的流动性，无法采用pxrd、dsc等常用的固态定量分析方法进行定量分析。特别对于软膏类型的半固体制剂，相对于混悬液而言，由于粘度较大，固体分散程度高，无法通过直接离心富集药物活性组分采用类似固态表征的手段进行晶型定量，同时，即使通过富集的前处理获取的固体，存在前处理导致转晶现象的发生，无法反映其真实情况。

3、阿昔洛韦是一种具有抗病毒活性的鸟嘌呤衍生物，常用于治疗疱疹。目前已有6种晶型报道，其中上市药物中主晶型为2/3的水合物，2/3水合物失去结晶水容易形成晶型ii。同时阿昔洛韦2/3水合物的溶出速率快于无水晶型的阿昔洛韦。依据fda种关于阿昔洛韦乳膏的指导原则，需对阿昔洛韦晶型进行定量研究。

4、拉曼光谱法是一种分子振动光谱，对于同一种化合物的不同晶型，由于其分子堆积方式的不同导致分子对称振动不同，因此，不同晶型具有不同特征的拉曼图谱，但是由于具有相同的化学结构，其拉曼图谱图谱差异较小。在半固体制剂中，除了药物活性成分具有拉曼特征峰，其辅料也会产生相应的干扰，这将导致拉曼峰型复杂且峰型重叠和谱图分析较为困难。

5、拉曼光谱仪依据不同的应用场景设计不同的光谱仪如：便携式拉曼光谱仪、共焦显微拉曼光谱仪和光纤拉曼光谱仪。共焦显微拉曼光谱仪借助显微镜系统，仪器既能显示材料很小区域的形貌(对透明材料也能观察到内部结构)，又能收集到该区域的拉曼光谱散射光。同时由于激光斑点很小，便于研究很小的试样区域，但是不容易得到一个大范围内的平均光谱信号。

技术实现思路

1、本专利基于混悬型半固体软膏中晶型难以直接采用固态分析的方法进行晶型定量。同时，在半固体制剂中存在辅料对药物活性组分的图谱的信号干扰，拉曼图谱峰型复杂且重叠等问题，拉曼成像数据维度高且复杂，不同晶型拉曼信号差异微弱，共焦显微拉曼光谱仪激光点光斑很小，不容易得到大范围的平均光谱信号。本发明提出基于拉曼成像的一种阿昔洛韦软膏的晶型定量方法。该方法具有以下有益的效果：解决了对混悬型半固体制剂中晶型难以定量的难题，杂质晶型的定量限可低至0.25％，模型线性相关系数可达0.97，同时可以获取杂质晶型分布区域，为晶型质量控制提高有效支持。

2、本发明提出了一种阿昔洛韦软膏的晶型定量方法，其特征在于，包括以下步骤：

3、s1、通过配制不同比例的晶型ii、2/3水合物的混粉，按特定的阿昔洛韦的质量占比制备阿昔洛韦软膏，确认混合均匀，获得建模样品；

4、s2、将建模样品，涂抹至载玻片上，置于共焦显微拉曼光谱仪，进行拉曼成像，采集3～6个区域；

5、s3、对于每一组拉曼成像数据，进行均值处理，获取具有代表性的特征曲线；

6、s4、对特征图谱采用一阶导数处理，获取数据；

7、s5、特征波段的选择，采用手动波段选择对特征波段进行筛选；

8、s6、采用偏最小二乘法建立模型，对拉曼光谱矩阵x(x＝tp+e)和浓度矩阵y(y＝uq+f),对得分矩阵t、u做线性回归，即u＝tb，建立模型为ypredict＝xbq，对输入输出变量同时压缩，使其相互正交，再用选定的主成分建立模型，消除了其他浓度不相关信息的干扰，同时，采用留一法交叉验证；

9、s7、采用验证集对模型进行校准验证，并对预测所得结果计算回收率；

10、s8、将待测阿昔洛韦软膏样品按照步骤s2、s3、s4、s5进行处理，获得拉曼光谱，通过s7建立的模型计算出待测阿昔洛韦软膏样品中的晶型含量。

11、优选，所述的按特定的阿昔洛韦的质量占比制备阿昔洛韦软膏是按阿昔洛韦的质量占比为5％制备阿昔洛韦软膏。

12、优选，所述的将建模样品，涂抹至载玻片上，厚度为2mm。

13、优选，所述的进行拉曼成像是测试条件为：785nm光源或532nm光源，优选785nm光源，测试区域面积为0.05～50mm2，优选2～4mm2。激光强度10～100％，曝光时间0.1～5s。

14、进一步优选，所述的进行拉曼成像是测试条件为：检测波长785nm，检测中心为1300cm-1，激光强度100％，曝光时间0.1s，累计次数1次。扫描面积为2mm2(2mm x 1mm)

15、优选，所述的特征波段是1200～1618cm-1。

16、本发明至少具有以下有益效果：

17、本发明公开一种阿昔洛韦软膏中杂质晶型定量的方法，在当前暂未有报道采用共焦显微拉曼光谱仪对半固体制剂(如软膏)的中杂质晶型定量的报道。采用共焦显微拉曼光谱仪不仅可以对杂质晶型分布情况直观显示。由于拉曼信号的强弱容易受到激光光源寿命、环境温湿度、样品厚度等客观因素的影响。本发明的晶型定量方法，通过区域的信号采集，采集足够具有代表意义的信号，并通过均值法处理方法，将高光谱降维为低维数据，并通过一阶导等前处理方法，波段选择。降低其他非晶型含量因素的干扰，可以有效预测软膏中杂质晶型含量，模型的相关系数r2≥0.97，模型定量可低至达0.25％，预测结果回收率在95％～105％区间，相关系数好。另一方面，用激光显微共焦拉曼光谱仪定量测试软膏，无需对样品前处理，直接无损测试，避免了由于前处理导致转晶的风险，上样简单，同时也可以通过采取乳膏制备过程样品，实现乳膏工艺过程的晶型变化监控。

技术特征：

1.一种阿昔洛韦软膏的晶型定量方法，其特征在于，包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的按特定的阿昔洛韦的质量占比制备阿昔洛韦软膏是按阿昔洛韦的质量占比为5％制备阿昔洛韦软膏。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的将建模样品，涂抹至载玻片上，厚度为2mm。

4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的进行拉曼成像是测试条件为：785nm光源或532nm光源，测试区域面积为0.05～50mm2。

5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，所述的光源是785nm光源，测试区域面积为2～4mm2，激光强度10～100％，曝光时间0.1～5s。

6.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，所述的进行拉曼成像是测试条件为：检测波长785nm，检测中心为1300cm-1，激光强度100％，曝光时间0.1s，累计次数1次，扫描面积为2mm2。

7.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的特征波段是1200～1618cm-1。

技术总结
本发明公开了一种阿昔洛韦软膏的晶型定量方法。本发明的晶型定量方法，通过区域的信号采集，采集足够具有代表意义的信号，并通过均值法处理方法，将高光谱降维为低维数据，并通过一阶导等前处理方法，波段选择。降低其他非晶型含量因素的干扰，可以有效预测软膏中杂质晶型含量，模型的相关系数R<supgt;2</supgt;≥0.97，模型定量可低至达0.25％，预测结果回收率在95％～105％区间，相关系数好。另一方面，用激光显微共焦拉曼光谱仪定量测试软膏，无需对样品前处理，直接无损测试，避免了由于前处理导致转晶的风险，上样简单，同时也可以通过采取乳膏制备过程样品，实现乳膏工艺过程的晶型变化监控。

技术研发人员：田芳,杨海武,赵昱喆
受保护的技术使用者：深圳市新阳唯康科技有限公司
技术研发日：
技术公布日：2024/1/15