一种基于液质联用的益母草颗粒对原发性痛经的治疗机制代谢组学分析方法

文档序号:36733841发布日期:2024-01-16 12:46阅读:来源:国知局

技术特征:

1.基于液质联用的益母草颗粒对原发性痛经的治疗机制代谢组学分析方法,其特征在于,所述方法包括:

2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述步骤s101中,所述液相色谱飞行时间质谱仪检测条件为:挥发气温度:120℃;离子源温度:120℃;毛细管电压:3kv,锥孔电压:30v,离子补偿:80v,电离方式为电喷雾电离,锥孔气流:50l/h,去溶剂气流:800l/h,mse扫描模式,质谱扫描范围为50-1500m/z,以每秒2张谱的速度,分辨率模式,正负离子分别采集,碰撞能量为20-80v;色谱条件:流动相a为0.1%甲酸水溶液,b为乙腈,梯度如下:0-1min:2-5%b,1-3min:5-10%b,3-17min:10-98%b,17-27min:98-99%b,27-27.1min:99-2%b,27.1-30min:2%b;流速:0.4ml/min,柱温40℃,进样量5ul。

3.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述步骤s102中,所述代谢图谱信息的采集过程设定液相色谱飞行时间质谱仪检测条件为:挥发气温度:120℃;离子源温度:120℃;毛细管电压:3kv,锥孔电压:30v,离子补偿:80v,电离方式为电喷雾电离,锥孔气流:50l/h,去溶剂气流:800l/h,mse扫描模式,质谱扫描范围为50-1500m/z,以每秒2张谱的速度,分辨率模式,正负离子分别采集,碰撞能量为20-80v;色谱条件:流动相a为0.1%甲酸水溶液,b为乙腈。梯度如下:0-1min:2-5%b,1-3min:5-10%b,3-17min:10-98%b,17-27min:98-99%b,27-27.1min:99-2%b,27.1-30min:2%b。流速:0.4ml/min,柱温40℃,进样量5ul。

4.根据权利要求1中所述的一种基于液质联用的益母草颗粒对原发性痛经的治疗机制代谢组学分析方法,其特征在于,所述步骤s103中,所述数据预处理的过程为:对采集的代谢图谱信息进行峰提取、峰对齐、峰匹配和峰强度的校正,获得包含化合物保留时间和峰面积信息的csv格式文件。

5.根据权利要求1中所述的一种基于液质联用的益母草颗粒对原发性痛经的治疗机制代谢组学分析方法,其特征在于,所述步骤s104中,所述多变量统计分析的过程:将分组后的数据进行无监督的主成分分析和有监督的偏最小二乘回归分析,对组别进行分类并判别组间差异,选择显著性差异p值小于0.05、vip值大于1,fold change大于100的化合物作为益母草颗粒的入血成分。

6.根据权利要求1中所述的一种基于液质联用的益母草颗粒对原发性痛经的治疗机制代谢组学分析方法,其特征在于,所述步骤s6中,所述代谢图谱信息的采集过程设定液相色谱飞行时间质谱仪检测条件为:挥发气温度:120℃;离子源温度:120℃;毛细管电压:3kv,锥孔电压:30v,离子补偿:80v,电离方式为电喷雾电离,锥孔气流:50l/h,去溶剂气流:800l/h,mse扫描模式,质谱扫描范围为50-1500m/z,以每秒2张谱的速度,分辨率模式,正负离子分别采集,碰撞能量为20-80v;色谱条件:流动相a为0.1%甲酸水溶液,b为乙腈;梯度如下:0-1min:2-5%b,1-3min:5-10%b,3-17min:10-98%b,17-27min:98-99%b,27-27.1min:99-2%b,27.1-30min:2%b。流速:0.4ml/min,柱温40℃,进样量5ul。

7.根据权利要求1中所述的一种基于液质联用的益母草颗粒对原发性痛经的治疗机制代谢组学分析方法,其特征在于,步骤s7中,所述对所述三个实验组的代谢图谱信息进行多变量统计分析筛选有显著性差异的生物标志物群包括:将分组后的数据进行无监督的主成分分析和有监督的偏最小二乘回归分析,选择显著性差异p值小于0.05、vip值大于1,foldchange大于2的代谢物作为益母草颗粒的差异代谢物。


技术总结
本发明提供了一种基于液质联用的益母草颗粒对原发性痛经的治疗机制代谢组学分析方法,基于液相色谱‑飞行时间质谱仪,对益母草颗粒化学成分检测,并对入血化学成分进行鉴定;结合益母草颗粒在体和离体化学成分检测信息,分析活性成分及体内的代谢变化;采用苯甲酸雌二醇和缩宫素联用复制原发性痛经小鼠模型,使用益母草颗粒对模型小鼠干预治疗,采集治疗后小鼠血清样品的代谢图谱信息;对数据进行处理分析,筛选出有显著性差异的生物标志物,分析其参与的代谢通路,探讨益母草颗粒治疗原发性痛经的作用机制。本发明研究中药入血的活性成分,及对内源性小分子的影响及变化规律,为中医证候和中药整体作用机制研究提供了新的研究思路和方法。

技术研发人员:聂丽,黄帅,张军林,尤园,方蔚
受保护的技术使用者:武汉生物工程学院
技术研发日:
技术公布日:2024/1/15
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