本发明属于生物,涉及用于鉴别痛风湿证与非湿证的生物标志物及其在制备用于鉴别痛风湿证与非湿证的产品中的应用。
背景技术:
1、痛风是一种因嘌呤代谢异常或尿酸排泄障碍导致尿酸单钠晶体在关节及非关节结构中沉积引起的间歇性发作的慢性代谢性疾病,临床以严重疼痛的急性炎性关节炎、下肢关节活动受限为主要表现。
2、湿证是由湿邪引起、导致体内水液运化失常,形成湿浊内停引发一系列症状的常见证候,具有重浊、黏滞、趋下特性,对机体的代谢功能和稳态产生重大影响。痛风湿证患者相较于非湿证患者更容易出现关节酸楚疼痛、伸屈不利、反复发作、缠绵难愈,以及肥胖、乏力、身重肢沉、舌淡胖苔白腻的表现。临床实践证明,相较于非湿证患者,痛风湿证患者更适合使用祛湿化浊法,常用的方剂有四妙散、参苓白术散、五苓散、萆薢分清饮等,常用中药有土茯苓、粉萆薢、薏苡仁、泽泻等,现代药理学证实该祛湿类中药具有利尿、降低血尿酸的作用。
3、临床治疗过程中,鉴别痛风患者证属湿证还是非湿证有助于临床上中医处方或中成药的选用。寻找能够鉴别痛风患者属于湿证患者还是非湿证湿证患者的生物标志物,对于痛风患者的对症治疗、提高治疗效果等具有重要的意义。
技术实现思路
1、本发明的目的在于提供一种可用于鉴别痛风湿证与非湿证(即诊断或辅助诊断痛风患者属于湿证患者还是非湿证患者)的生物标志物。
2、根据本发明的一个方面,提供了选自l-丝氨酸(l-serine)、l-组氨酸(l-histidine)、l-鹅肌肽(anserine)、十一酸(undecanoic acid)中的至少一种的生物标志物在制备用于鉴别痛风湿证与非湿证的产品中的应用。
3、本发明中,l-丝氨酸、l-组氨酸、l-鹅肌肽、十一酸这4种代谢产物,可以单独用作诊断或辅助诊断痛风患者属于湿证患者还是非湿证患者的生物标志物,也可以两种或者多种一起联合用作诊断或辅助诊断痛风患者属于湿证患者还是非湿证患者的生物标志物,应用于制备能够鉴别痛风湿证与非湿证的产品。
4、本发明中,用于鉴别痛风湿证与非湿证的产品包括但不限于用于鉴别或辅助诊断受检者为痛风湿证患者还是痛风非湿证患者的试剂、试剂盒、芯片或仪器。
5、根据本发明的另一个方面,提供了检测生物标志物在样品中含量的产品在制备用于鉴别痛风湿证与非湿证的产品中的应用,其中,生物标志物选自l-丝氨酸、l-组氨酸、l-鹅肌肽、十一酸中的至少一种。
6、在一些实施方式中,样品为外周血血浆。
7、本发明中,检测生物标志物在外周血血浆中含量的产品可以为采用本领域中任意已知的可以检测上述生物标志物在样品中含量的技术检测外周血血浆中上述生物标志物含量的产品。
8、在一些实施方式中,检测生物标志物在外周血血浆中含量的产品可以为适用于通过下述至少一种方法检测外周血血浆中生物标志物含量的试剂、试剂盒、芯片和/或仪器:液相色谱、超高效液相色谱、超高效液相色谱-串联质谱、离子交换色谱、气相色谱、毛细管电泳、比色法、太赫兹光谱。
9、在一些实施方式中,检测生物标志物在样品中含量的产品可以为适用于通过超高效液相色谱-串联质谱检测外周血血浆中生物标志物含量的试剂、试剂盒、芯片和/或仪器。
10、在一些实施方式中,检测生物标志物在样品中含量的产品为适用于通过超高效液相色谱-串联质谱检测外周血血浆中生物标志物含量的试剂盒。
11、在一些实施方式中,试剂盒可以包括提取、分离外周血血浆中生物标志物的试剂和定量检测外周血血浆中生物标志物含量的试剂。
12、在一些实施方式中,提取、分离外周血血浆中生物标志物的试剂包括但不限于样本释放剂、衍生化试剂、样本稀释剂等。
13、在一些实施方式中,定量检测外周血血浆中生物标志物含量的试剂可以包括生物标志物的标准样品、色谱流动相。
14、在一些实施方式中,色谱流动相包括流动相a和流动相b,其中,流动相a为0.1%甲酸水,流动相b为异丙醇-乙腈(30:70,v/v)。
15、本发明通过研究发现:包括l-丝氨酸、l-组氨酸、l-鹅肌肽、十一酸在内的多种代谢物在痛风湿证患者和痛风非湿证患者外周血血浆中的含量存在显著差异,其中,与痛风非湿证患者相比,十一酸在痛风湿证患者外周血血浆中的含量显著上调,l-丝氨酸、l-组氨酸、l-鹅肌肽在痛风湿证患者外周血血浆中的含量显著下降。roc曲线分析的结果显示,用于鉴别痛风湿证患者和痛风非湿证患者时,l-丝氨酸的auc为0.858,l-组氨酸的auc为0.871,l-鹅肌肽的auc为0.880,十一酸的auc为0.903,表明l-丝氨酸、l-组氨酸、l-鹅肌肽、十一酸作为鉴别痛风湿证患者和痛风非湿证患者的特异性生物标志物,诊断准确性较高,尤其是十一酸。
16、本发明为鉴别痛风湿证患者和痛风非湿证患者提供了多种生物标志物,这些生物标志物应用于临床诊断或辅助诊断痛风湿证患者和痛风非湿证患者时具有采样方便、检测快速高效、诊断准确性高等优点。
1.生物标志物在制备用于鉴别痛风湿证与非湿证的产品中的应用,其特征在于,所述生物标志物选自l-丝氨酸、l-组氨酸、l-鹅肌肽、十一酸中的至少一种。
2.检测生物标志物在样品中含量的产品在制备用于鉴别痛风湿证与非湿证的产品中的应用,其特征在于,所述生物标志物选自l-丝氨酸、l-组氨酸、l-鹅肌肽、十一酸中的至少一种。
3.根据权利要求2所述的应用,其特征在于,所述样品为外周血血浆。
4.根据权利要求3所述的应用,其特征在于,所述检测生物标志物在外周血血浆中含量的产品为适用于通过下述至少一种方法检测外周血血浆中生物标志物含量的试剂、试剂盒、芯片和/或仪器:液相色谱、超高效液相色谱、超高效液相色谱-串联质谱、离子交换色谱、气相色谱、毛细管电泳、比色法、太赫兹光谱。
5.根据权利要求4所述的应用,其特征在于,所述检测生物标志物在外周血血浆中含量的产品为适用于通过超高效液相色谱-串联质谱检测外周血血浆中生物标志物含量的试剂、试剂盒、芯片和/或仪器。
6.根据权利要求5所述的应用,其特征在于,所述检测生物标志物在外周血血浆中含量的产品为适用于通过超高效液相色谱-串联质谱检测外周血血浆中生物标志物含量的试剂盒。
7.根据权利要求6所述的应用,其特征在于,所述试剂盒包括提取、分离外周血血浆中生物标志物的试剂和定量检测外周血血浆中生物标志物含量的试剂。