心力衰竭中的基于NTproBNP和cTnT的疗法指导的制作方法
【专利说明】心力衰竭中的基于NTproBNP和cTnT的疗法指导
[0001]本发明涉及用于指导患有心力衰竭的个体中的心力衰竭治疗的方法。该方法基于来自所述个体的样品中的BNP型肽和心肌肌钙蛋白量的测定。本发明进一步设想的是适合进行本发明的试剂盒和装置。本发明还涉及如本文公开的用于指导患有心力衰竭的个体中的心力衰竭治疗的系统，并且涉及执行本文公开的方法中使用的试剂和试剂盒。
[0002]现代医学的目的是提供个性化或个体化治疗方案。那些是考虑到患者的个体需要或风险的治疗方案。个性化或个体化治疗方案甚至应考虑到其中决定潜在治疗方案所需的测量。
[0003]心力衰竭(HF)是重大和日益严重的公共卫生问题。据估计美国大约5百万患者患有HF，每年超过500 000患者首次诊断有HF，并且在美国每年超过250.000患者死于作为首要原因的HF。心力衰竭(HF)是发展中国家的发病率和死亡率的主因之一。由于人口老龄化和患有心血管疾病的患者的更长寿命，HF的发生率和患病率是日益增加的。
[0004]心力衰竭是可以产生于任何结构或功能心脏病症的复杂临床综合征，其损害心室充满或射出血液且确保机体的供血/供氧代谢需要的能力。在此类情况下，机体尝试通过旨在维持所需供应的心肌结构变化(例如肥大，最终导致纤维化、细胞凋亡、坏死)和神经介质刺激(交感神经系统和肾素血管紧张素醛固酮系统的活化)来补偿供应的缺乏。HF分类成不同程度的严重性。
[0005]一种分类是所谓的NYHA (纽约心脏协会(New York Heart Associat1n))分类。心力衰竭患者分类为NYHA 1、I1、III和IV类，或者美国心脏病学会和美国心脏协会(American College of Card1logy and the American Heart Associat1n) (ACC/AHA)阶段A、B、C和D。NYHA I类的患者没有心血管疾病的明显症状，但已具有功能损害的客观证据。NYHA II类的患者具有体力活动的轻微限制。NYHA III类的患者显示体力活动的显著限制。NYHA IV类的患者无法无不适地进行任何体力活动。他们在休息时显示心功能不全的症状。
[0006]该功能分类由美国心脏病学会和美国心脏协会的更近期分类补充(参见Am.Coll.Card1l.2001 ;38 ;2101_2113，2005 年更新，参见 J.Am.Coll.Card1l.2005 ；46;el-e82)。限定了 4个阶段A、B、C和D。患有心力衰竭阶段B、C或D的患者已经经历心脏的结构和功能变化。他不能完全恢复其健康，并且需要治疗处理。
[0007]W02008/015254公开了鉴定对心力衰竭疗法敏感的患者的基于⑶F-15检测的方法，所述疗法优选使用如醛固酮措抗剂包括螺内醋(Spironolacton)的药剂的基于药剂的疗法。另外，可以检测心肌肌钙蛋白或NT-proBNP。
[0008]W02010/0070411公开了监控患有心力衰竭的表面上稳定的个体，基于⑶F-15、NT-proANP、NT-proBNP和心肌肌妈蛋白检测的方法。此外，它公开了诊断和/或决定哪种疗法/药物治疗应用于表面上稳定的个体的方法，所述个体患有心力衰竭且经历其生理状态中的变化。
[0009]W02012/025355公开了用于接受醛固酮拮抗剂如螺内酯施用的心力衰竭患者中的疗法监控和疗法适应，基于肌钙蛋白和⑶F-15检测的方法。该文件进一步公开了肌钙蛋白T、NT-proBNP和⑶F15检测允许心力衰竭患者中的疗法监控或适应。
[0010]Kubo等人2011 (Circulation J，75，919-926)公开了基于患有肥厚性心肌病的患者中的临床恶化的风险预测，基于BNP和肌钙蛋白的检测。许多评价的患者患有心力衰竭。推测两种标记物的组合测量可以用于监控患有肥厚性心肌病的患者。
[0011]Fonarow等人2OO8 (Am J Cardiol，101，23I-237)公开了患有心力衰竭的患者中基于BNP和肌钙蛋白检测的死亡率风险预测。
[0012]Mentz等人2011 (Circ J，75 (9) :2031-7)公开了用于心力衰竭患者中的疗法指导和监控的基于NTproBNP检测的方法，其中所述疗法选自用利尿剂、ACE抑制剂、β阻断剂、螺内酯、硝酸盐或地高辛的治疗。
[0013]B5hm 等人 2011 (Clin Res Cardiol，100:973-981)综述了用于心力衰竭患者中的疗法指导和监控的基于NTproBNP检测的方法。它还提及组合BNP与肌钙蛋白用于指导心力衰竭疗法的可能性。
[0014]尽管可用的治疗选项可以降低患有HF的患者中的发病率和死亡率，但接受这些治疗的符合条件患者的相对数目仍是不能令人满意的低（O’Donoghue M. & BraunwaldE. , Nat. Rev. Cardiol. 2010 ；7: 13_20)。此外，在符合治疗条件的患者中，疗法已主要通过HF对最大药物耐受性的体征和症状(例如通过NYHA阶段、ACC/ AM阶段或充血分数）进行指导和调整。利钠肽标记物例如B型利钠肽（BNP)或其氨基末端片段N末端BNP原(NT-proBNP)的测量已作为用于患有HF的患者的诊断和风险分层的重要工具出现。另外，存在NT-proB NP可用于指导心力衰竭中的医学疗法的新出现证据（Januzzi，Journal ofCardiac Failure, 2011 ；17: 622-625)，而指导疗法包括NT-proBNP的连续测量，以鉴定且监控可以获益于疗法加强的处于增加风险中的患者，并且监控疗法加强对ΝΤ-ρι·οΒΝΡ水平的作用。
[0015]然而，NT-proBNP指导的HF疗法不鉴定处于HF代偿失调和不利事件的风险中的所有患者。相反，一些患者仍处于风险中，尽管他们显示就其NTproBNP水平而言对疗法的有利应答。
[0016]本发明潜在的技术问题可以视为提供允许更可靠地指导心力衰竭疗法的手段和方法。
[0017]技术问题通过权利要求和本文下文中表征的实施方案加以解决。
[0018]有利地，在研宄的背景下显示NTproBNP与心肌肌钙蛋白的组合可以可靠地用于监控目的和用作除目前护理标准外的疗法的指导，以调整且滴定HF患者中的疗法。具体地，对ΝΤ-ρι·οΒΝΡ或BNP连同目前的护理标准添加肌钙蛋白测量允许进一步的风险分层和监控HF患者，所述HF患者可能需要更加强的疗法和更密切的观察。
[0019]相应地，本发明涉及用于指导患有心力衰竭的个体中的心力衰竭治疗的方法，所述方法包括下述步骤：
a)测定来自个体的样品中的BNP型肽和心肌肌钙蛋白的量，和
b)比较BNP型肽的量与BNP型肽的参考量，并且比较心肌肌钙蛋白的量与心肌肌钙蛋白的参考量，由此指导心力衰竭治疗。
[0020]优选地，心力衰竭治疗通过进行进一步的步骤c)加以指导，所述步骤c)基于步骤b)中进行的比较结果，指导心力衰竭治疗。
[0021]另外，本发明涉及用于鉴定对于心力衰竭治疗的加强符合条件的个体的方法，所述方法包括下述步骤:
a)测定来自患有心力衰竭的个体的样品中的BNP型肽和心肌肌钙蛋白的量，和
b)比较BNP型肽的量与BNP型肽的参考量，并且比较心肌肌钙蛋白的量与心肌肌钙蛋白的参考量，和
c)任选鉴定对于心力衰竭治疗的加强符合条件的患者。
[0022]该方法可以另外包括步骤d)推荐心力衰竭治疗的加强。
[0023]在上述方法的一个实施方案中，来自个体的样品中BNP型肽和心肌肌钙蛋白的量的测定可以通过下述进行:al)使样品与i)特异性结合BNP型肽的试剂接触，从而形成试剂和BNP型肽之间的复合物，并且使样品与ii)特异性结合心肌肌钙蛋白的试剂接触，从而形成试剂和心肌肌钙蛋白之间的复合物，和a2)检测形成的复合物的量，从而检测生物标记物的量。
[0024]本发明的上述方法优选是先体外后体内或体外方法。此外，它可以包括除上文明确提及那些外的步骤。例如，进一步的步骤可以涉及样品预处理或通过方法获得的结果评估。该方法可以手动进行或通过自动化进行辅助。优选地，步骤(a)和/或步骤(b)可以整个或部分通过自动化进行辅助，例如通过合适的机器人和传感设备用于步骤(a)中的测定或计算机实现的比较和/或基于步骤(b)中的所述比较的评价。
[0025]相应地，本发明还优选涉及用于指导患有心力衰竭的个体中的心力衰竭治疗的系统，其包括
a)配置为在体外使来自个体的部分样品与配体接触的分析仪单元，所述配体包含对于BNP型肽和心肌肌钙蛋白的特异性结合亲和力，
b)配置为检测来自与配体接触的来自个体的部分样品的信号的分析仪单元，
c)具有处理器且与所述分析单元可操作地通讯的计算装置，和
d)包括可由处理器执行的多个指令的非瞬时机器可读介质，当执行时，所述指令计算标记物的量，并且比较标记的量与参考量，从而指导心力衰竭疗法。
[0026]如本文使用的，短语“指导心力衰竭治疗”优选意指评价患有心力衰竭的个体的心力衰竭治疗是否必须加强(且优选地，以及监控)。相应地，通过进行本发明的方法，可以鉴定对于心力衰竭治疗的加强符合条件的个体。因此，可以鉴定需要或不需要心力衰竭治疗的加强的个体。
[0027]相应地，本发明还设想了鉴定对于心力衰竭治疗的加强符合条件的个体的方法。优选地，对于心力衰竭治疗的加强符合条件的个体将获益于所述加强。特别地，如果特别在18个月或3年的窗口期内，个体的死亡率风险和/或个体的住院治疗风险通过加强得到降低，则所述个体获益于所述加强。不需要所述疗法加强的个体优选不获益于加强。在这种情况下，例如由所述加强引起的不良副作用可以超出加强的利益。
[0028]如本文下文更详细地描述的，对于心力衰竭治疗的加强符合条件的个体还应以短间隔进行监控，而对于心力衰竭治疗的加强不符合条件(即不需要心力衰竭治疗的加强)的个体应以长间隔进行监控。因此，除心力衰竭治疗是否应加强的决定之外，可以评价个体是应以短间隔还是应以长间隔进行监控。
[0029]如本领域技术人员应当理解的，通过本发明的方法作出的评价通常不预期对于待诊断的个体是100%正确的。然而，该术语要求评价对于统计上显著部分的个体(例如群组研宄中的群组(cohort))是正确的。部分是否是统计上显著的可以通过本领域技术人员使用多种众所周知的统计评估工具无需再费皱褶而进行测定，所述统计评估工具例如置信区间测定、P值测定、斯氏t检验、曼怀二氏检验等。细节在Dowdy和Wearden，Statisticsfor Research，John Wiley & Sons, New York 1983 中找到。优选置信区间是至少 90%、至少 95%、至少 97%、至少 98% 或至少 99 %。p 值优选是 0.1、0.05、0.01、0.005 或 0.0001。
[0030]如本文在上述方法的上下文中使用的，术语“个体”指动物，优选哺乳动物，并且更优选人。在本发明的上下文中设想个体患有心力衰竭(HF)，特别是慢性心力衰竭。
[0031]如本文使用的，术语“心力衰竭”指受损的心脏收缩功能和/或舒张功能，伴随如本领域技术人员已知的心力衰竭的明显体征。优选地，本文提及的心力衰竭也是慢性心力衰竭。根据本发明的心力衰竭包括明显和/或晚期心力衰竭。在明显心力衰竭中，个体显示如本领域技术人员已知的心力衰竭症状。
[0032]HF可以分类成不同程度的严重性。
[0033]根据NYHA (纽约心脏协会)分类，心力衰竭患者分类为属于NYHA 1、I1、III和IV类。患有心力衰竭的患者已经经历其心包膜、心肌、冠状动脉循环或心脏瓣膜的结构和功能变化。他不能完全恢复其健康，并且需要治疗处理。NYHA I类的患者没有心血管疾病的明显症状，但已具有功能损害的客观证据。NYHA II类的患者具有体力活动的轻微限制。NYHAIII类的患者显示体力活动的显著限制。NYHA IV类的患者无法无不适地进行任何体力活动。他们在休息时显示心功能不全的症状。
[0034]该功能分类由美国心脏病学会和美国心脏协会的更近期分类补充(参见Am.Coll.Card1l.2001 ;38 ;2101_2113，2005 年更新，参见 J.Am.Coll.Card1l.2005 ；46;el-e82)。限定了 4个阶段A、B、C和D。阶段A和B不是HF，但视为帮助在早期发展真正的“HF”前鉴定患者。阶段A和B患者最佳定义为具有HF发展的风险因素的患者。例如，仍未证实左心室(LV)功能受损、肥大或室几何变形(geometric chamber distort1n)的患有冠状动脉疾病、高血压或糖尿病的患者将视为阶段A，而无症状但证实LV肥大和/或LV功能受损的患者将指定为阶段B。阶段C随后指示具有与潜在结构性心脏病相关的目前或过去HF症状的患者(大多数患有HF的患者)，并且阶段D指示患有真正的难治性HF的患者。
[0035]如本文使用的，术语“心力衰竭”特别指上文提及的ACC/AHA分类的阶段C和D。在这些阶段中，个体显示心力衰竭的典型症状。相应地，患有心力衰竭的个体患有根据ACC/AHA分类的心力衰竭阶段B、C或D。另外优选地，个体可以分类为属于NYHA I1、III或IV类。
[0036]优选地，心力衰竭是由于收缩功能受损。相应地，特别设想个体患有收缩期心力衰竭。优选地，个体具有小于50%、更优选小于45%且最优选小于40%的左心室射血分数(LVEF)0
[0037]进一步设想个体在获得待测试样品之前没有经历心力衰竭体征和/或症状的恶化。优选地，个体在获得样品前三个月时期内没有经历心力衰竭体征和/或症状的恶化。优选地，个体在获得样品前六个月时期内没有经历心力衰竭症状的恶化。更优选