一种复方川贝精片的检测方法
【技术领域】
[0001 ] 本发明涉及一种药物的检测方法，特别涉及一种复方j 11贝精片的检测方法。
【背景技术】
[0002]复方川贝精片是《卫生部药品标准》中药成方制剂第十九册收载的品种，标准编号为WS-B-3622-98，处方为麻黄浸膏、五味子(醋炙)、川贝母、远志(去心甘草炙)、陈皮、法半夏、桔梗、甘草浸膏，是纯中药制成的片剂。它具有化痰止咳，宣肺平喘的作用。是临床上用于治疗痰涎阻肺，肺失宣降所致急慢性支气管炎，支气管扩张，咳嗽，痰喘的常用药品。但是原标准中仅对法半夏进行了显微鉴别，对麻黄进行了薄层色谱鉴别，没有对其它几种药材和任何成份进行定性定量的质量控制，既没有质量指标，也没有这些质量指标的鉴别和检测方法。不法厂商在生产药品时不严格按照处方的剂量配料，肆意减少原料，致使药品的疗效明显下降，影响药品的安全有效，严重损害患者的利益。
[0003]制剂中用到麻黄浸膏，是由麻黄提取的成份，是方中的君药，列在第一位，起解表发汗的作用。但是，麻黄植物的地上部份即麻黄与其地下部份即麻黄根的作用完全不同，其药效是相反的。麻黄有发汗作用，而麻黄根有止汗作用。《本草纲目》记载:麻黄发汗之气，驶不能御，而根节止汗，效如影响。《现代中药志》记载:麻黄、麻黄根虽出同株，但因药用部分不同，所含化学成分不同，因而性味、功效、药理、临床运用各异。麻黄根的主要成分为麻黄根素和麻黄新碱A。麻黄新碱A引起收缩压和舒张压上升，脉压增大，而麻黄根素具有降压作用，使脉压降低。麻黄是紧缺和控制药材，药农在采收时往往连根拔起，没有将麻黄植物的地上部份即麻黄与其地下部份即麻黄根完全分开，使制成的药品疗效下降甚至不治病反而致病，所以控制麻黄根，不让其混入麻黄中，对保证复方川贝精片的疗效是十分必要的。
[0004]制剂中的远志，与另外一种中药材白薇形态、性状非常相似，市场常出现易混难辨、误采、误收、误用、混用的情况。但是远志与白薇的成分、功效及应用各不相同。远志含有多种三萜皂甙、远志碱、远志糖醇等。白薇主要含白薇醇、挥发油及强心甙。在功效应用方面，远志主安神益智、祛痰、消肿；白薇主清热凉血、利尿通淋、解毒疗疮，故二者不能混杂使用。特别是白薇中含有强心甙，如果不加以控制，对呼吸系统疾病伴心血管疾病的人很危险。因此，控制白薇，不让其混入远志中，对保证复方川贝精片的安全性是十分必要的。
[0005]在现有复方川贝精片胶囊的检测方法中，均未对麻黄根和白薇进行鉴别。根据复方川贝精片的处方特点，制定切实可行的检测方法，尤其是对处方中是否混入麻黄根和白薇进行鉴别，以保证产品的质量和临床疗效非常迫切。
【发明内容】
[0006]本发明的目的在于克服现有技术中所存在的上述不足，提供一种复方川贝精片的检测方法。该检测方法通过形状、显微观察以及对制剂中的麻黄根素和麻黄新碱A、远志和白薇、甘草主要药材进行薄层色谱定性鉴别，同时对麻黄的特征成分盐酸麻黄碱进行含量测定，有效地控制了复方川贝精片的成分和含量，避免了麻黄根和白薇的混入，使该药品更加安全、有效。
[0007]为了实现上述发明目的，本发明提供了以下技术方案:
[0008]本发明所述复方川贝精片的制备方法为:分别称取麻黄浸膏41g、五味子(醋炙)53g、川贝母25g、远志(去心甘草炙)53g、陈皮94g、法半夏75g、桔梗94g、甘草浸膏15g。将川贝母、法半夏粉碎成细粉，过筛；陈皮提取挥发油至油尽，并滤取药液；五味子、远志、桔梗用65v%乙醇回流提取2次，滤过，合并滤液，回收乙醇；合并以上各药液，浓缩至相对密度为1.40(50°C )的稠膏，加入麻黄浸膏、甘草浸膏和川贝母细粉、法半夏细粉，混匀，干燥，粉碎成细粉，用稀乙醇制成颗粒，干燥，喷加陈皮挥发油，混匀，压制成1000片，包糖衣，得复方川贝精片。
[0009]本发明所述复方川贝精片的检测方法，包括性状、显微观察、薄层色谱定性鉴别、含量测定项目，所述薄层色谱定性鉴别包括对制剂中麻黄根素和麻黄新碱A的鉴别、远志和白薇的鉴别、甘草的鉴别；所述含量测定包括对制剂中盐酸麻黄碱的含量测定；
[0010](I)性状
[0011]本品为糖衣片，除去糖衣后显黄褐色；气香、味苦；
[0012]⑵显微观察
[0013]取本品，置显微镜下观察，草酸钙针晶成束，长32?144 μ m，存在于粘液细胞中或散在；淀粉粒广卵形或贝壳形，直径40?64 μπι，脐点短缝状、人字状或马蹄状，层纹可察见；
[0014](3)薄层色谱定性鉴别
[0015]麻黄根素和麻黄新碱A的薄层色谱定性鉴别:以麻黄根素对照品和麻黄新碱A对照品的混合溶液为对照品溶液；以体积比甲苯:甲醇:氨水=8?12: 3.5?4.5: I的甲苯-甲醇-氨水混合液为展开剂，用薄层色谱法鉴别；
[0016]远志和白薇的薄层色谱定性鉴别:分别以远志对照药材和白薇对照药材为对照品，以体积比乙酸乙酯:甲苯:三氯甲烷=8?12: 6?10: I的乙酸乙酯-甲苯-三氯甲烷混合液为展开剂，用薄层色谱法鉴别；
[0017]甘草的薄层色谱定性鉴别:以甘草对照药材为对照品；以体积比乙酸乙酯:甲酸:冰醋酸:水=14?16: I?3: I: I?3的乙酸乙酯-甲酸-冰醋酸-水混合液为展开剂，用薄层色谱法鉴别；
[0018]⑷含量测定
[0019]盐酸麻黄碱的含量测定:照高效液相色谱法《中国药典》2010年版一部附录VID测定;
[0020]色谱条件与系统适用性试验:以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以体积比乙腈:0.1￥%磷酸溶液=8?10: 85?90的乙腈-0.磷酸溶液混合液为流动相；检测波长为207nm ;理论板数按盐酸麻黄碱峰计算应不低于3000 ;
[0021]对照品溶液的制备:取盐酸麻黄碱对照品8?12mg，精密称定，置100?150ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，精密量取I?3ml，置25?50ml量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，得对照品溶液；
[0022]供试品溶液的制备:取本品，研细，精密称取本品0.4?0.6g，置10ml量瓶中，加甲醇50?70ml，超声处理，加甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，弃去初滤液，精密量取续滤液I?2ml，置10?20ml量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，得供试品溶液；
[0023]测定法:分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各8?12 μ 1，注入液相色谱仪，测定；本品每片含麻黄以盐酸麻黄碱计，不得少于3mg。
[0024]甘草，豆科植物甘草、胀果甘草或光果甘草的干燥根及根茎，为常用大宗药材，药食兼用品种，有“国老”之称，有“十方九草”之美誉，需求量大，资源几乎枯竭，1987年即被国家有关部门规定为国家二类保护野生中药材。近年来，因发现其有美容养颜抗氧化作用，用量更大，所以价格持续上升，导致不法厂家在制备复方川贝精片的过程中会少投料或者不投料，严重影响制剂的质量和临床疗效，因此必须对甘草进行检测。
[0025]麻黄浸膏，是由麻黄提取的成份，是方中的君药，列在第一位，起解表发汗的作用。但是，麻黄植物的地上部份即麻黄与其地下部份即麻黄根的作用完全不同，其药效是相反的。麻黄有发汗作用，而麻黄根有止汗作用。《本草纲目》记载:麻黄发汗之气，驶不能御，而根节止汗，效如影响。《现代中药志》记载:麻黄、麻黄根虽出同株，但因药用部分不同，所含化学成分不同，因而性味、功效、药理、临床运用各异。麻黄根的主要成分为麻黄根素和麻黄新碱A。麻黄新碱A引起收缩压和舒张压上升，脉压增大，而麻黄根素具有降压作用，使脉压降低。麻黄是紧缺和控制药材，药农在采收时往往连根拔起，没有将麻黄和麻黄根完全分开，使制成的药品疗效下降甚至不治病反而致病，因此需要严格控制麻黄根，不让其混入麻黄中。麻黄中基本不含麻黄根素和麻黄新碱A，本发明采用对复方j 11贝精片中的麻黄根素和麻黄新碱A进行薄层色谱鉴别，可以有效的控制麻黄根的混入。
[0026]远志，与白薇形态、性状非常相似，市场常出现易混难辨、误采、误收、误用、混用的情况。但是远志与白薇的成分、功效及应用各不相同。远志含有多种三萜皂甙、远志碱、远志糖醇等。白薇主要含白薇醇、挥发油及强心甙。在功效应用方面，远志主安神益智、祛痰、消肿；白薇主清热凉血、利尿通淋、解毒疗疮，故二者不能混杂使用。特别是白薇中含有强心甙，对呼吸系统疾病伴心血管疾病的人很危险。因此，需要严格控制白薇在复方川贝精片中的混入。本发明所述的检测方法对白薇和远志进行薄层色谱鉴别，一方面保证了制剂中的远志入药，另一方面避免了白薇的混入。
[0027]盐酸麻黄碱是麻黄中的主要有效成份。药理研宄表明，盐酸麻黄碱对神经系统、心血管系统和内脏平滑肌都有较强的作用，是临床治疗支气管哮喘、百日咳及其他过敏性疾痕的重要药品，不少止咳平喘的复方制剂都含有该成份。复方川贝精片属于治疗急慢性支气管炎、支气管扩张、咳嗽、痰喘的制剂，盐酸麻黄碱起到了很大的作用，如果其含量不稳定，则会严重影响到复方川贝精片的临床疗效。
[0028]本发明所述盐酸麻黄碱的含量测定中，采用超声提取，与传统的加热回流提取方式相比，提取效果相当，但是操作更加简单，易于掌握。采用体积比乙腈:0.1￥%磷酸溶液=8?10: 85?90的乙腈-0.lv%磷酸溶液混合液为流动相，在6min内即可出峰，而且分离度好，图谱基线稳定。
[0029]本发明所述检测方法通过对麻黄根素和麻黄新碱A、远志和白薇、甘草进行薄层色谱定性鉴别，对麻黄的特征成分盐酸麻黄碱进行含量测定，对麻黄的特征成分盐酸麻黄碱进行含量测定，有效地控制了复方川贝精片的成分和含量，同时避免了麻黄根和白薇的混入，使该药品更加安全、有效。
[0030]优选地，所述(3)项下麻黄根素和麻黄新碱A的薄层色谱定性鉴别具体步骤为:取本品，研细，加水使溶解，用乙醚振摇提取2?3次，弃去乙醚液，水液水浴蒸干，残渣加乙醇使溶解，滤过，滤液水浴蒸干，残渣加甲醇使溶解，作为供试品溶液；另取麻黄根素对照品和麻黄新碱A对照品，加甲醇制成同时含麻黄根素对照品和麻黄新碱A对照品的混合溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法《中国药典》2010年版一部附录VI B试验，吸取上述供试品溶液和对照品溶液，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积比甲苯:甲醇:氨水=8?12: 3.5?4.5: I的甲苯-甲醇-氨水混合液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，在105°C加热3?6min至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，不得显相同颜色的斑点。
[0031]上述麻黄根素和麻黄新碱A的薄层色谱定性鉴别方法可以有效地对制剂中的麻黄根素和麻黄新碱A定性鉴别，防止麻黄根的混入。采用体积比甲苯:甲醇: